紫外課件分光光度法的拓展

紫外-可見分光光度法的擴展ExtensionofUV/VisSpectrophotometry紫外-可見分光光度法的擴展1紫外-可見分光光度法Ⅰ定性分析紫外-可見分光光度法2(一)定性鑒別1

對比吸收光譜特征數(shù)據(jù)

如max及(E)2

對比吸收度(或吸收系數(shù))的比值如A1/A2(或E1/E2)3

對比吸收光譜的一致性(二)純度檢查1

雜質(zhì)檢查

如乙醇或環(huán)己烷中少量苯2

雜質(zhì)限量檢查

如腎上腺素中腎上腺酮等Ⅰ定性分析(一)定性鑒別Ⅰ定性分析3maxE安宮黃體酮240±1nm408炔諾酮240±1nm571VB12E(361nm)E(278nm)=1.70-1.88E(361nm)E(550nm)=3.15-3.451cm1%1cm1%1cm1%1cm1%1cm1%Ⅰ定性分析maxE安宮黃體酮240±1nm4A否定性鑒別?。。、穸ㄐ苑治鯝否定性鑒別！?。、穸ㄐ苑治?紅外光譜法是肯定性鑒別方法，那么，作為否定性鑒別方法的紫外光譜法，是否在定性分析中用處不大呢？No!!!Ⅰ定性分析紅外光譜法是肯定性鑒別方法，那么，作為否定性6Wavenumber(cm-1)TransmittanceAbsorbanceWavelength(nm)UV/VisIRⅠ定性分析Wavenumber(cm-1)Transmittance7A糯米、梗米、油、水、糖、豆沙……糯米、梗米、油、水、醬油、蛋黃……糯米、梗米、油、水、醬油、肉……Ⅰ定性分析AⅠ定性分析8+0-+0-+0-+0-+0-+0-0()1()2()5()4()3()正交多項式基本圖形Ⅰ定性分析++++++0()1()2()5()4(9..................................................................................................................10圖、安鈉咖注射液（含苯甲酸鈉和咖啡因二個組分）通過變換得到的褶合光譜群Convolution

spectraofcaffeine,thesefigureshows164convolutioncurvesof2-30points圖、安鈉咖Convolutionspectraofca11紫外課件分光光度法的拓展12紫外課件分光光度法的拓展13200220240260280300051015202530-0.45-0.4-0.35-0.3-0.25-0.2-0.15-0.1-0.0500.05wavelengthQ1ofcaffeineNjQij數(shù)學(xué)顯微鏡20022024026028030005101520253014褶合光譜法定性分析功能(一)定性鑒別(二)純度（雜質(zhì)限量）檢查(三)穩(wěn)定性試驗Ⅰ定性分析褶合光譜法定性分析功能Ⅰ定性分析15丙酸倍氯米松-倍他米松紫外光譜圖AmaxAminAmaxAminⅠ定性分析丙酸倍氯米松-倍他米松紫外光譜圖AmaxⅠ定性分析16紫外課件分光光度法的拓展17丙酸倍氯米松-倍他米松褶合光譜差譜圖

(差譜比率55.70%)Qλj=1j=2j=3n=2-30n=3-30n=4-30Ⅰ定性分析丙酸倍氯米松-倍他米松褶合光譜差譜圖Qλj=118倍他米松-地塞米松結(jié)構(gòu)圖RⅠ定性分析倍他米松-地塞米松結(jié)構(gòu)圖RⅠ定性分析19倍他米松-地塞米松紫外光譜圖Ⅰ定性分析AmaxAminAmaxAmin倍他米松-地塞米松紫外光譜圖Ⅰ定性分析Amax20倍他米松-地塞米松褶合光譜差譜圖(差譜比率13.36%)Qλj=1j=2j=3n=2-30n=3-30n=4-30Ⅰ定性分析倍他米松-地塞米松褶合光譜差譜圖Qλj=121紫外-可見分光光度法Ⅱ定量分析紫外-可見分光光度法22測定樣品AXcX(三)含量測定（定量靈敏度10-610-7g/ml）1

單組分定量(1)吸收系數(shù)法(絕對法)

c=A/El(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)溶液c1,c2,c3,c4,c5測定吸收度值A(chǔ)1,A2,A3,A4,A5(3)對照法同條件配制c標(biāo),c樣

同條件測定A標(biāo),A樣

c樣=c標(biāo)A樣/A標(biāo)Ⅱ定量分析測定樣品AX232多組分定量兩組分光譜互不重疊21abA尋找1,2互不干擾，作單組分處理Ⅱ定量分析2多組分定量21abA尋找1,2互不干擾，作單組24兩組分光譜部分重疊abA12尋找1,2，一處不干擾，另一處用A=A1+A2加和處理Ⅱ定量分析兩組分光譜部分重疊abA12尋找1,2，一處不干擾，25兩組分光譜完全重疊Aba21(1)解線性方程組法A1a+b=A1a+A1b=E1aCa+E1bCbA2a+b=A2a+A2b=E2aCa+E2bCbⅡ定量分析兩組分光譜完全重疊Aba21(1)解線性方程組法A1a+26(2)雙波長分光光度法a.等吸收雙波長消去法12AabAa+b=A2a+b-A1a+b=A2a+A2b-A1a-A1b=A2b-A1b=(E2b-E1b)CbAⅡ定量分析(2)雙波長分光光度法12AabAa+b=A2a+b27Ax+y=kA2x+y-A1x+y=k(A2x+A2y)-A1x-A1y=kA2x-A1x=(kE2x-E1x)Cx.b.系數(shù)倍率法12xyA2kA2A1AⅡ定量分析Ax+y=b.系數(shù)倍率法12xyA2kA2A128導(dǎo)數(shù)光譜法：可以給出更多信息，提高分辨能力，能鑒別分子結(jié)構(gòu)細(xì)微差別。特點：p157

零階光譜A=ECl一階導(dǎo)數(shù)光譜dAd=dEdCld2Ad2=d2Ed2Cl二階導(dǎo)數(shù)光譜…...Ⅱ定量分析導(dǎo)數(shù)光譜法：可以給出更多信息，提高分辨能力，能鑒別分子結(jié)構(gòu)細(xì)29導(dǎo)數(shù)光譜法定量分析示意圖200250300Ⅱ定量分析導(dǎo)數(shù)光譜法定量分析示意圖200250300Ⅱ定量分析30褶合光譜法定量分析功能(一)單組分定量分析(二)雙組分定量分析(三)多組分定量分析Ⅱ定量分析褶合光譜法定量分析功能Ⅱ定量分析31苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-1

苯酚(1)，間苯二酚(2)，混合物(3)在苯酚的過零點(271.90nm)計算間苯二酚含量312Ⅱ定量分析苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-1312Ⅱ定量分析32312苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-2

苯酚(1)，間苯二酚(2)，混合物(3)在間苯二酚的過零點(280.64nm)計算苯酚含量Ⅱ定量分析312苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-2Ⅱ定量分析33其它化學(xué)計量學(xué)方法多元線性回歸法（MLR）Kalman濾波法偏最小二乘法（PLS）主成分回歸法（PCR）……Ⅱ定量分析其它化學(xué)計量學(xué)方法Ⅱ定量分析34紫外-可見分光光度法Ⅲ在藥學(xué)各學(xué)科中的應(yīng)用紫外-可見分光光度法35(一)無機化學(xué)(二)有機化學(xué)/藥物化學(xué)(三)天然藥物化學(xué)/生藥學(xué)(四)藥理學(xué)/生化藥學(xué)(五)藥劑學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(一)無機化學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用36(一)無機化學(xué)1、（混合）金屬離子

Na+/Mg2+、Ag+/Cu2+、Fe2+/Fe3+、

Cr3+/Cr6+、Ca2+、Hg2+

etc.2、其它無機離子

HCl/HAc、KIO3/I2、NO2-

etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(一)無機化學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用37Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用常用顯色劑：偶氮胂類、偶氮氯膦類、卟啉類、鉻天青S、羅丹明B、四苯基硼酸萘胺、偶氮吡啶間苯二酚、四環(huán)素、苯甲酰茚滿、氧氟沙星、8-羥基喹啉、二甲酚橙等Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用常用顯色劑：38圖KMnO4試劑空白(1)與NaNO2作用(2)的Vis光譜525nmⅢ藥學(xué)應(yīng)用圖KMnO4試劑空白(1)與NaNO2作用(2)的Vis光39(二)有機化學(xué)/藥物化學(xué)1、結(jié)構(gòu)解析2、中間體/產(chǎn)物的純度檢查3、中間體/產(chǎn)物的穩(wěn)定性試驗4、其它

反應(yīng)是否發(fā)生及機理研究etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(二)有機化學(xué)/藥物化學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用40圖偶氮染料Azo7在堿性DMF溶液中光照前后的UV/Vis光譜圖聚苯胺(PANI)摻雜樟腦磺酸(CSA)前后的UV/Vis光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖偶氮染料Azo7在堿性DMF溶液中光照前后的UV/Vis41圖卟啉化合物TAPP與cfDNA作用后的Vis光譜(Soret帶)圖白蛋白與苯甲酸鈉(0.0-0.50mmol/L)作用后的UV光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖卟啉化合物TAPP與cfDNA作用后的Vis光譜(Sor42(三)天然藥物化學(xué)/生藥學(xué)1、總生物堿、總黃酮、總皂苷等的定量分析2、藥材鑒別

紫外光譜/紫外譜線組法3、其它Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(三)天然藥物化學(xué)/生藥學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用43圖枳芩合劑(1)、黃芩苷對照品(2)和陰性對照液(3)的UV光譜278nm△A242nmⅢ藥學(xué)應(yīng)用圖枳芩合劑(1)、黃芩苷對照品(2)和陰性對照液(3)的U44圖復(fù)方銀黃口服液陽性(a)與空白(b)的UV光譜圖馬錢子粉中士的寧(a)與空白(b)的UV光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖復(fù)方銀黃口服液陽性(a)與空白(b)的UV光譜圖馬錢子45酸性染料比色法：在一定pH介質(zhì)中，生物堿類(B)與氫離子(H+)成陽離子(BH+)，一些酸性染料（如溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠、溴酚藍(lán)、甲基橙等）在此條件下可解離成陰離子(In-)，與上述陽離子(BH+)定量地結(jié)合成有色的絡(luò)合物(BH+In-)，從而被某些有機溶劑定量地提取，選擇一定的波長測定吸收度值，即得生物堿含量。Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用酸性染料比色法：在一定pH介質(zhì)中，生物堿類(B)與氫離子(H46半夏、山藥的乙醇提取液的UV光譜圖(1.半夏2.水半夏3.掌葉半夏4.天南星5.山藥6.騰沖山藥7.木薯根)紅曲的甲醇提取液UV/Vis光譜圖(1.橙色紅曲2.變紅紅曲3.發(fā)白紅曲4.巴克紅曲5.紅色紅曲6.紫紅紅曲7.煙色紅曲8.土曲霉)紫外光譜法Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用半夏、山藥的乙醇提取液的UV光譜圖(1.半夏2.水半夏347懷牛膝和紅牛膝的4溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值比較紫花地榆和白花地榆的4溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值比較紫外譜線組法Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用懷牛膝和紅牛膝的4溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值比較紫花地榆和48(四)藥理學(xué)/生化藥學(xué)1、酶活力（效價）測定

木瓜蛋白酶、谷胱甘肽過氧化

物酶、脂肪酶、堿性磷酸酶、

對氧磷酶、酯酶etc.2、其它

DNA純度檢查、生物體液藥物

含量

etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(四)藥理學(xué)/生化藥學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用49酶活力是酶催化生化反應(yīng)能力的表征，一般以在規(guī)定條件下，每ml酶溶液，每分鐘促進或抑制某生化反應(yīng)達某程度(如50%)時的酶量定義為1個酶活力單位。酶活力=K●

△A其中，K為常數(shù)，△A為酶（或底物、產(chǎn)物）作用前后的吸收度差值。Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用酶活力是酶催化生化反應(yīng)能力的表征，一般以在規(guī)定條件下，每ml50圖MMO還原酶隨NADH(底物)加入量增加(1→4)的UV/Vis光譜變化460nmⅢ藥學(xué)應(yīng)用圖MMO還原酶隨NADH(底物)加入量增加(1→4)的UV51圖過氧化物酶氧化鄰苯二胺(底物)的UV/Vis光譜變化(掃描間隔0.3min)220nm422nmⅢ藥學(xué)應(yīng)用圖過氧化物酶氧化鄰苯二胺(底物)的UV/Vis光譜變化(掃52圖魚精DNA(1)、苯酚(2)、N-乙酰-L-色氨酰胺(3)、N-乙酰-L-酪氨酰胺(4)、N-乙酰L-苯丙氨酸乙酯(5)、內(nèi)毒素(6)的UV光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖魚精DNA(1)、苯酚(2)、N-乙酰-L-色氨酰胺(53(五)藥劑學(xué)1、均勻度測定2、溶出度測定3、制劑、配伍穩(wěn)定性4、其它

體外吸附試驗

etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(五)藥劑學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用54表頭孢吡肟和甲硝唑混合液的含量、pH值變化(n=3,25±1℃)圖頭孢吡肟、甲硝唑的UV光譜雙波長等吸收點法系數(shù)倍率法頭孢吡肟甲硝唑√/√╳?Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用表頭孢吡肟和甲硝唑混合液的含量、pH值變化(n=3,25±55紫外-可見分光光度法Ⅳ設(shè)計性實驗紫外-可見分光光度法56

Ⅳ設(shè)計性實驗?zāi)康慕虇T：提高學(xué)員學(xué)習(xí)興趣，提升教學(xué)質(zhì)量發(fā)現(xiàn)適合“第二課堂”的苗子實驗教學(xué)新模式的改革與探索學(xué)員：見識“驗證性”實驗以外的實驗?zāi)Ｊ藉憻挸醪降目蒲兴季S鍛煉綜合能力與動手能力Ⅳ設(shè)計性實驗?zāi)康慕虇T：提高學(xué)員學(xué)習(xí)興趣，提升教57

Ⅳ設(shè)計性實驗內(nèi)容利用已學(xué)習(xí)的紫外光譜定量分析方法（解線性方程組法、等吸收雙波長消去法、系數(shù)倍率法、導(dǎo)數(shù)光譜法、褶合光譜法等），自行設(shè)計實驗方案并分析下列雙組分體系：

乙酰水楊酸(阿司匹林)+水楊酸Ⅳ設(shè)計性實驗內(nèi)容利用已學(xué)習(xí)的紫外光譜定量分析方58

Ⅳ設(shè)計性實驗圖水楊酸(1)、乙酰水楊酸(2)和乙酰水楊酸+水楊酸(3)的UV光譜A220250300nm132Ⅳ設(shè)計性實驗圖水楊酸(1)、乙酰水楊酸(2)59

Ⅳ設(shè)計性實驗查閱文獻或圖書資料紫外光譜實驗網(wǎng)絡(luò)教學(xué)設(shè)計實驗方案(多組多個)列出所需試劑等材料師生討論確定實驗方案準(zhǔn)備實驗用試劑討論并修正實驗方案按最后方案開展實驗討論(預(yù))實驗的問題原因及解決辦法、各方案的優(yōu)缺點熟悉紫外光譜儀按實驗方案開展預(yù)實驗設(shè)計階段實驗階段總結(jié)階段設(shè)計性實驗匯報Ⅳ設(shè)計性實驗查閱文獻或圖書資料紫外光譜實驗網(wǎng)絡(luò)60

Ⅳ設(shè)計性實驗Ⅳ設(shè)計性實驗61

Ⅳ設(shè)計性實驗實施報名方式：自愿報名，擇優(yōu)遴選時

間：遴選(→2003.5.09)

設(shè)計(→2003.5.26)

實驗(→2003.6.16)總結(jié)(→2003.6.24)聯(lián)

系

人：70389-3(汪),-5(陸)Ⅳ設(shè)計性實驗實施報名方式：自愿報名，擇優(yōu)遴選62ThanksThanks63紫外-可見分光光度法的擴展ExtensionofUV/VisSpectrophotometry紫外-可見分光光度法的擴展64紫外-可見分光光度法Ⅰ定性分析紫外-可見分光光度法65(一)定性鑒別1

對比吸收光譜特征數(shù)據(jù)

如max及(E)2

對比吸收度(或吸收系數(shù))的比值如A1/A2(或E1/E2)3

對比吸收光譜的一致性(二)純度檢查1

雜質(zhì)檢查

如乙醇或環(huán)己烷中少量苯2

雜質(zhì)限量檢查

如腎上腺素中腎上腺酮等Ⅰ定性分析(一)定性鑒別Ⅰ定性分析66maxE安宮黃體酮240±1nm408炔諾酮240±1nm571VB12E(361nm)E(278nm)=1.70-1.88E(361nm)E(550nm)=3.15-3.451cm1%1cm1%1cm1%1cm1%1cm1%Ⅰ定性分析maxE安宮黃體酮240±1nm67A否定性鑒別！?。、穸ㄐ苑治鯝否定性鑒別?。。、穸ㄐ苑治?8紅外光譜法是肯定性鑒別方法，那么，作為否定性鑒別方法的紫外光譜法，是否在定性分析中用處不大呢？No!!!Ⅰ定性分析紅外光譜法是肯定性鑒別方法，那么，作為否定性69Wavenumber(cm-1)TransmittanceAbsorbanceWavelength(nm)UV/VisIRⅠ定性分析Wavenumber(cm-1)Transmittance70A糯米、梗米、油、水、糖、豆沙……糯米、梗米、油、水、醬油、蛋黃……糯米、梗米、油、水、醬油、肉……Ⅰ定性分析AⅠ定性分析71+0-+0-+0-+0-+0-+0-0()1()2()5()4()3()正交多項式基本圖形Ⅰ定性分析++++++0()1()2()5()4(72..................................................................................................................73圖、安鈉咖注射液（含苯甲酸鈉和咖啡因二個組分）通過變換得到的褶合光譜群Convolution

spectraofcaffeine,thesefigureshows164convolutioncurvesof2-30points圖、安鈉咖Convolutionspectraofca74紫外課件分光光度法的拓展75紫外課件分光光度法的拓展76200220240260280300051015202530-0.45-0.4-0.35-0.3-0.25-0.2-0.15-0.1-0.0500.05wavelengthQ1ofcaffeineNjQij數(shù)學(xué)顯微鏡20022024026028030005101520253077褶合光譜法定性分析功能(一)定性鑒別(二)純度（雜質(zhì)限量）檢查(三)穩(wěn)定性試驗Ⅰ定性分析褶合光譜法定性分析功能Ⅰ定性分析78丙酸倍氯米松-倍他米松紫外光譜圖AmaxAminAmaxAminⅠ定性分析丙酸倍氯米松-倍他米松紫外光譜圖AmaxⅠ定性分析79紫外課件分光光度法的拓展80丙酸倍氯米松-倍他米松褶合光譜差譜圖

(差譜比率55.70%)Qλj=1j=2j=3n=2-30n=3-30n=4-30Ⅰ定性分析丙酸倍氯米松-倍他米松褶合光譜差譜圖Qλj=181倍他米松-地塞米松結(jié)構(gòu)圖RⅠ定性分析倍他米松-地塞米松結(jié)構(gòu)圖RⅠ定性分析82倍他米松-地塞米松紫外光譜圖Ⅰ定性分析AmaxAminAmaxAmin倍他米松-地塞米松紫外光譜圖Ⅰ定性分析Amax83倍他米松-地塞米松褶合光譜差譜圖(差譜比率13.36%)Qλj=1j=2j=3n=2-30n=3-30n=4-30Ⅰ定性分析倍他米松-地塞米松褶合光譜差譜圖Qλj=184紫外-可見分光光度法Ⅱ定量分析紫外-可見分光光度法85測定樣品AXcX(三)含量測定（定量靈敏度10-610-7g/ml）1

單組分定量(1)吸收系數(shù)法(絕對法)

c=A/El(2)標(biāo)準(zhǔn)曲線法標(biāo)準(zhǔn)溶液c1,c2,c3,c4,c5測定吸收度值A(chǔ)1,A2,A3,A4,A5(3)對照法同條件配制c標(biāo),c樣

同條件測定A標(biāo),A樣

c樣=c標(biāo)A樣/A標(biāo)Ⅱ定量分析測定樣品AX862多組分定量兩組分光譜互不重疊21abA尋找1,2互不干擾，作單組分處理Ⅱ定量分析2多組分定量21abA尋找1,2互不干擾，作單組87兩組分光譜部分重疊abA12尋找1,2，一處不干擾，另一處用A=A1+A2加和處理Ⅱ定量分析兩組分光譜部分重疊abA12尋找1,2，一處不干擾，88兩組分光譜完全重疊Aba21(1)解線性方程組法A1a+b=A1a+A1b=E1aCa+E1bCbA2a+b=A2a+A2b=E2aCa+E2bCbⅡ定量分析兩組分光譜完全重疊Aba21(1)解線性方程組法A1a+89(2)雙波長分光光度法a.等吸收雙波長消去法12AabAa+b=A2a+b-A1a+b=A2a+A2b-A1a-A1b=A2b-A1b=(E2b-E1b)CbAⅡ定量分析(2)雙波長分光光度法12AabAa+b=A2a+b90Ax+y=kA2x+y-A1x+y=k(A2x+A2y)-A1x-A1y=kA2x-A1x=(kE2x-E1x)Cx.b.系數(shù)倍率法12xyA2kA2A1AⅡ定量分析Ax+y=b.系數(shù)倍率法12xyA2kA2A191導(dǎo)數(shù)光譜法：可以給出更多信息，提高分辨能力，能鑒別分子結(jié)構(gòu)細(xì)微差別。特點：p157

零階光譜A=ECl一階導(dǎo)數(shù)光譜dAd=dEdCld2Ad2=d2Ed2Cl二階導(dǎo)數(shù)光譜…...Ⅱ定量分析導(dǎo)數(shù)光譜法：可以給出更多信息，提高分辨能力，能鑒別分子結(jié)構(gòu)細(xì)92導(dǎo)數(shù)光譜法定量分析示意圖200250300Ⅱ定量分析導(dǎo)數(shù)光譜法定量分析示意圖200250300Ⅱ定量分析93褶合光譜法定量分析功能(一)單組分定量分析(二)雙組分定量分析(三)多組分定量分析Ⅱ定量分析褶合光譜法定量分析功能Ⅱ定量分析94苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-1

苯酚(1)，間苯二酚(2)，混合物(3)在苯酚的過零點(271.90nm)計算間苯二酚含量312Ⅱ定量分析苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-1312Ⅱ定量分析95312苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-2

苯酚(1)，間苯二酚(2)，混合物(3)在間苯二酚的過零點(280.64nm)計算苯酚含量Ⅱ定量分析312苯酚-間苯二酚雙組分體系的褶合光譜圖-2Ⅱ定量分析96其它化學(xué)計量學(xué)方法多元線性回歸法（MLR）Kalman濾波法偏最小二乘法（PLS）主成分回歸法（PCR）……Ⅱ定量分析其它化學(xué)計量學(xué)方法Ⅱ定量分析97紫外-可見分光光度法Ⅲ在藥學(xué)各學(xué)科中的應(yīng)用紫外-可見分光光度法98(一)無機化學(xué)(二)有機化學(xué)/藥物化學(xué)(三)天然藥物化學(xué)/生藥學(xué)(四)藥理學(xué)/生化藥學(xué)(五)藥劑學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(一)無機化學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用99(一)無機化學(xué)1、（混合）金屬離子

Na+/Mg2+、Ag+/Cu2+、Fe2+/Fe3+、

Cr3+/Cr6+、Ca2+、Hg2+

etc.2、其它無機離子

HCl/HAc、KIO3/I2、NO2-

etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(一)無機化學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用100Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用常用顯色劑：偶氮胂類、偶氮氯膦類、卟啉類、鉻天青S、羅丹明B、四苯基硼酸萘胺、偶氮吡啶間苯二酚、四環(huán)素、苯甲酰茚滿、氧氟沙星、8-羥基喹啉、二甲酚橙等Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用常用顯色劑：101圖KMnO4試劑空白(1)與NaNO2作用(2)的Vis光譜525nmⅢ藥學(xué)應(yīng)用圖KMnO4試劑空白(1)與NaNO2作用(2)的Vis光102(二)有機化學(xué)/藥物化學(xué)1、結(jié)構(gòu)解析2、中間體/產(chǎn)物的純度檢查3、中間體/產(chǎn)物的穩(wěn)定性試驗4、其它

反應(yīng)是否發(fā)生及機理研究etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(二)有機化學(xué)/藥物化學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用103圖偶氮染料Azo7在堿性DMF溶液中光照前后的UV/Vis光譜圖聚苯胺(PANI)摻雜樟腦磺酸(CSA)前后的UV/Vis光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖偶氮染料Azo7在堿性DMF溶液中光照前后的UV/Vis104圖卟啉化合物TAPP與cfDNA作用后的Vis光譜(Soret帶)圖白蛋白與苯甲酸鈉(0.0-0.50mmol/L)作用后的UV光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖卟啉化合物TAPP與cfDNA作用后的Vis光譜(Sor105(三)天然藥物化學(xué)/生藥學(xué)1、總生物堿、總黃酮、總皂苷等的定量分析2、藥材鑒別

紫外光譜/紫外譜線組法3、其它Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(三)天然藥物化學(xué)/生藥學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用106圖枳芩合劑(1)、黃芩苷對照品(2)和陰性對照液(3)的UV光譜278nm△A242nmⅢ藥學(xué)應(yīng)用圖枳芩合劑(1)、黃芩苷對照品(2)和陰性對照液(3)的U107圖復(fù)方銀黃口服液陽性(a)與空白(b)的UV光譜圖馬錢子粉中士的寧(a)與空白(b)的UV光譜Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用圖復(fù)方銀黃口服液陽性(a)與空白(b)的UV光譜圖馬錢子108酸性染料比色法：在一定pH介質(zhì)中，生物堿類(B)與氫離子(H+)成陽離子(BH+)，一些酸性染料（如溴麝香草酚藍(lán)、溴甲酚綠、溴酚藍(lán)、甲基橙等）在此條件下可解離成陰離子(In-)，與上述陽離子(BH+)定量地結(jié)合成有色的絡(luò)合物(BH+In-)，從而被某些有機溶劑定量地提取，選擇一定的波長測定吸收度值，即得生物堿含量。Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用酸性染料比色法：在一定pH介質(zhì)中，生物堿類(B)與氫離子(H109半夏、山藥的乙醇提取液的UV光譜圖(1.半夏2.水半夏3.掌葉半夏4.天南星5.山藥6.騰沖山藥7.木薯根)紅曲的甲醇提取液UV/Vis光譜圖(1.橙色紅曲2.變紅紅曲3.發(fā)白紅曲4.巴克紅曲5.紅色紅曲6.紫紅紅曲7.煙色紅曲8.土曲霉)紫外光譜法Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用半夏、山藥的乙醇提取液的UV光譜圖(1.半夏2.水半夏3110懷牛膝和紅牛膝的4溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值比較紫花地榆和白花地榆的4溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值比較紫外譜線組法Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用懷牛膝和紅牛膝的4溶劑浸液紫外譜線組圖譜峰位值比較紫花地榆和111(四)藥理學(xué)/生化藥學(xué)1、酶活力（效價）測定

木瓜蛋白酶、谷胱甘肽過氧化

物酶、脂肪酶、堿性磷酸酶、

對氧磷酶、酯酶etc.2、其它

DNA純度檢查、生物體液藥物

含量

etc.Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用(四)藥理學(xué)/生化藥學(xué)Ⅲ藥學(xué)應(yīng)用112酶活力是酶催化生化反應(yīng)能力的表征，一般以在規(guī)定條件下，每ml酶溶液，每分鐘促進或抑制某生化反應(yīng)達某程度(如50%)時的酶量定義為1個酶活力單位。酶活力=K●

△A其中，K為常數(shù)，△A為酶（或底物、產(chǎn)物）作用前后的吸收度差值。