弧菌科及檢驗(yàn)課件

弧菌科常規(guī)檢驗(yàn)弧菌科常規(guī)檢驗(yàn)1弧菌科種類弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬發(fā)光菌屬等弧菌科種類弧菌屬弧菌科共同特征革蘭陰性菌需氧兼性厭氧營養(yǎng)要求不高氧化酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣弧菌科共同特征革蘭陰性菌弧菌科三個(gè)菌屬的鑒別試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬甘露醇+/-+-鳥氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生長+--嗜鹽性+/---弧菌科三個(gè)菌屬的鑒別試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬甘露醇+/霍亂弧菌是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株霍亂弧菌是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體形態(tài)染色革蘭陰性弧形或逗點(diǎn)狀單鞭毛，運(yùn)動(dòng)呈“穿梭樣”或“流星樣”無芽孢，無莢膜在新鮮糞便中成“魚群樣”排列形態(tài)染色革蘭陰性霍亂弧菌革蘭染色鞭毛染色霍亂弧菌革蘭染色鞭毛染色培養(yǎng)特性兼性厭氧營養(yǎng)要求不高耐堿不耐酸，常用pH8.4～9.2堿性培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中形成菌膜菌落圓形、較大、扁平培養(yǎng)特性兼性厭氧霍亂弧菌常用培養(yǎng)基堿性蛋白胨水堿性瓊脂平板慶大霉素瓊脂平板（含亞碲酸鉀）硫代硫酸鈉-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）亞碲酸鉀瓊脂平板霍亂弧菌常用培養(yǎng)基堿性蛋白胨水生化反應(yīng)試驗(yàn)名稱結(jié)果試驗(yàn)名稱結(jié)果氧化酶+吲哚+硝酸鹽還原+葡萄糖+賴氨酸+蔗糖+鳥氨酸+甘露醇+精氨酸雙水解-0％、1％NaCl+V-Pd7％、10％NaCl-明膠液化+生化反應(yīng)試驗(yàn)名稱結(jié)果試驗(yàn)名稱結(jié)果氧化酶+吲哚+硝酸鹽還原+葡抗原結(jié)構(gòu)和分型O抗原H抗原抗原結(jié)構(gòu)和分型O抗原霍亂弧菌生物型O1群霍亂弧菌分為古典生物型和ElTor生物型兩種生物型具有相同的抗原結(jié)構(gòu)兩種生物型多數(shù)生物學(xué)性狀相似霍亂弧菌生物型O1群霍亂弧菌分為古典生物型和ElTor生物型霍亂弧菌兩種生物型的鑒別鑒別試驗(yàn)古典生物型ElTor生物型V-P-+羊紅細(xì)胞溶解-+50U多粘菌素SR雞紅細(xì)胞凝集-+Ⅳ組噬菌體裂解+-Ⅴ組噬菌體裂解-+霍亂弧菌兩種生物型的鑒別鑒別試驗(yàn)古典生物型ElTor生物型V霍亂弧菌分群、型O抗原是霍亂弧菌分群和型的基礎(chǔ)根據(jù)O抗原不同分為139個(gè)血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群稱為非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（見下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）++-稻葉型（AC）+-+彥島型（ABC）+++霍亂弧菌分群、型O抗原是霍亂弧菌分群和型的基礎(chǔ)血清型A抗原B抵抗力與變異ElTor型抵抗力較古典型強(qiáng)，在水中存活時(shí)間長對(duì)酸性物質(zhì)敏感對(duì)慶大霉素耐受多次傳代可失去典型形態(tài)而成為桿狀抵抗力與變異ElTor型抵抗力較古典型強(qiáng)，臨床意義致病物質(zhì)：霍亂腸毒素，導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，分泌大量腸液。所致疾?。航?jīng)腸道傳染，引起烈性腸道傳染?。魜y，為甲類傳染病。典型病人糞便呈“米泔水”樣病后可獲得牢固免疫，以SIgA為主。我國霍亂流行菌株以ElTor小川型為主。臨床意義致病物質(zhì)：霍亂腸毒素，導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，作用機(jī)制示意圖作用機(jī)制示意圖弧菌科及檢驗(yàn)課件微生物檢驗(yàn)－－標(biāo)本采集發(fā)病早期采集標(biāo)本以“米泔水”樣便為主，及時(shí)送檢卡－布培養(yǎng)基保存嚴(yán)密包裝，專人送檢微生物檢驗(yàn)－－標(biāo)本采集發(fā)病早期采集標(biāo)本檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌培養(yǎng)堿性蛋白胨水分離培養(yǎng)（TCBS、堿性平板）生化鑒定分型血清學(xué)鑒定確診報(bào)告初步報(bào)告快速診斷直接涂片動(dòng)力、制動(dòng)試驗(yàn)檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（TCBS、堿性檢驗(yàn)方法－－顯微鏡檢查涂片染色：標(biāo)本直接涂片革蘭染色，注意形態(tài)、排列動(dòng)力觀察：壓滴法或暗視野鏡檢，注意運(yùn)動(dòng)方式制動(dòng)試驗(yàn)：O1診斷血清與菌體結(jié)合，動(dòng)力消失檢驗(yàn)方法－－顯微鏡檢查涂片染色：標(biāo)本直接涂片革蘭染色，注意形分離培養(yǎng)標(biāo)本接種堿性蛋白胨水增菌6～8小時(shí)，轉(zhuǎn)種TCBS或慶大霉素瓊脂，TCBS：出現(xiàn)黃色菌落慶大霉素瓊脂：出現(xiàn)中心灰褐色的菌落分離培養(yǎng)標(biāo)本接種堿性蛋白胨水增菌6～8小時(shí)，轉(zhuǎn)種TCBS或慶鑒定生化反應(yīng)：粘絲試驗(yàn)、霍亂紅反應(yīng)確定血清群：O1群診斷血清與可疑菌落作玻片凝集，以確定是否為O1群確定血清型：與分型診斷血清作玻片凝集，以確定血清型別確定生物型：第Ⅳ組噬菌體裂解試驗(yàn)多粘菌素B敏感試驗(yàn)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)溶血試驗(yàn)鑒定生化反應(yīng)：粘絲試驗(yàn)、霍亂紅反應(yīng)副溶血性弧菌－－生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，或微彎，單端鞭毛，無芽孢，無莢膜營養(yǎng)要求不高，嗜鹽性，最適鹽濃度3.5％NaCl，無鹽培養(yǎng)基不生長TCBS：形成不發(fā)酵蔗糖的綠色菌落神奈川現(xiàn)象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔紅細(xì)胞，不溶解馬紅細(xì)胞副溶血性弧菌－－生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，或微彎，單端鞭毛，無副溶血性弧菌－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血素（耐熱直接溶血素和耐熱相關(guān)溶血素）所致疾?。菏橙敫比苎曰【廴镜柠}腌食品，引起食物中毒副溶血性弧菌－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血素（耐熱直接溶血素和耐氣單胞菌屬形態(tài)染色：革蘭陰性桿菌，或球桿狀、絲狀，極端鞭毛，無芽孢生長條件：兼性厭氧；營養(yǎng)要求不高生長溫度較寬，0℃～45℃嗜冷菌37℃以下生長嗜溫菌10～42℃生長氣單胞菌屬形態(tài)染色：氣單胞菌屬生長現(xiàn)象TCBS上不生長血平板：灰白、光滑、凸起菌落腸道選擇平板：形成不發(fā)酵乳糖菌落生化反應(yīng)氧化酶＋、觸酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣6.5％NaCl不生長O129不敏感多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥氣單胞菌屬生長現(xiàn)象氣單胞菌屬－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血毒素、細(xì)胞毒素所致疾?。耗c道感染：是夏季腹瀉常見病原菌腸外感染：敗血癥、傷口感染等多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥氣單胞菌屬－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血毒素、細(xì)胞毒素檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落腸毒素測定初步生化反應(yīng)涂片染色鏡檢血標(biāo)本氧化酶TCBS生長O/129耐鹽試驗(yàn)檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)全面生化反應(yīng)可疑菌落鑒定試驗(yàn)與腸道桿菌、非發(fā)酵菌鑒別與鄰單胞菌屬和弧菌屬鑒別氣單胞菌屬種間鑒別鑒定試驗(yàn)與腸道桿菌、非發(fā)酵菌鑒別腸道桿菌、非發(fā)酵菌、弧菌科鑒別鑒定試驗(yàn)?zāi)c桿菌科非發(fā)酵菌弧菌科氧化酶－＋＋葡萄糖氧化/發(fā)酵（O/F）FO／－F鞭毛周鞭毛單、叢、周單、叢腸道桿菌、非發(fā)酵菌、弧菌科鑒別鑒定試驗(yàn)?zāi)c桿菌科非發(fā)酵菌弧菌科鑒定依據(jù)革蘭陰性桿菌，叢鞭毛腸道選擇平板上無色透明菌落氧化酶＋、葡萄糖發(fā)酵＋O/129：RTCBS：－6.5％NaCl：－鑒定依據(jù)革蘭陰性桿菌，叢鞭毛鄰單胞菌屬－－主要性狀只有一個(gè)菌種：類志賀鄰單胞菌革蘭陰性桿菌，單鞭毛或叢鞭毛，無芽孢，無莢膜兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高在SS平板形成不發(fā)酵乳糖菌落氧化酶＋，葡萄糖發(fā)酵＋O/129：STCBS：不生長6.5％NaCl：不生長賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸雙水解均＋多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥鄰單胞菌屬－－主要性狀只有一個(gè)菌種：類志賀鄰單胞菌鄰單胞菌屬－－臨床意義腹瀉、食物中毒，多見于夏季敗血癥、腦膜炎等，多見于免疫力低下者，感染率低，但死亡率高。鄰單胞菌屬－－臨床意義腹瀉、食物中毒，多見于夏季鄰單胞菌屬－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落初步生化反應(yīng)涂片染色鏡檢血標(biāo)本氧化酶TCBS生長O/129耐鹽試驗(yàn)鄰單胞菌屬－－檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)全面生鄰單胞菌屬－－鑒定與志賀菌屬鑒別：氧化酶、動(dòng)力、血清學(xué)與氣單胞菌屬鑒別：O/129，肌醇試驗(yàn)與弧菌屬鑒別：TCBS、6.5％NaCl生長試驗(yàn)鄰單胞菌屬－－鑒定與志賀菌屬鑒別：氧化酶、動(dòng)力、血清學(xué)弧菌科常規(guī)檢驗(yàn)弧菌科常規(guī)檢驗(yàn)37弧菌科種類弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬發(fā)光菌屬等弧菌科種類弧菌屬弧菌科共同特征革蘭陰性菌需氧兼性厭氧營養(yǎng)要求不高氧化酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣弧菌科共同特征革蘭陰性菌弧菌科三個(gè)菌屬的鑒別試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬甘露醇+/-+-鳥氨酸+/--+精氨酸+/-+/-+O/129敏感SRSTCBS生長+--嗜鹽性+/---弧菌科三個(gè)菌屬的鑒別試驗(yàn)弧菌屬氣單胞菌屬鄰單胞菌屬甘露醇+/霍亂弧菌是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體包括古典生物型和ElTor生物型O139是新的流行菌株霍亂弧菌是引起烈性腸道傳染病霍亂的病原體形態(tài)染色革蘭陰性弧形或逗點(diǎn)狀單鞭毛，運(yùn)動(dòng)呈“穿梭樣”或“流星樣”無芽孢，無莢膜在新鮮糞便中成“魚群樣”排列形態(tài)染色革蘭陰性霍亂弧菌革蘭染色鞭毛染色霍亂弧菌革蘭染色鞭毛染色培養(yǎng)特性兼性厭氧營養(yǎng)要求不高耐堿不耐酸，常用pH8.4～9.2堿性培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中形成菌膜菌落圓形、較大、扁平培養(yǎng)特性兼性厭氧霍亂弧菌常用培養(yǎng)基堿性蛋白胨水堿性瓊脂平板慶大霉素瓊脂平板（含亞碲酸鉀）硫代硫酸鈉-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖瓊脂平板（TCBS）亞碲酸鉀瓊脂平板霍亂弧菌常用培養(yǎng)基堿性蛋白胨水生化反應(yīng)試驗(yàn)名稱結(jié)果試驗(yàn)名稱結(jié)果氧化酶+吲哚+硝酸鹽還原+葡萄糖+賴氨酸+蔗糖+鳥氨酸+甘露醇+精氨酸雙水解-0％、1％NaCl+V-Pd7％、10％NaCl-明膠液化+生化反應(yīng)試驗(yàn)名稱結(jié)果試驗(yàn)名稱結(jié)果氧化酶+吲哚+硝酸鹽還原+葡抗原結(jié)構(gòu)和分型O抗原H抗原抗原結(jié)構(gòu)和分型O抗原霍亂弧菌生物型O1群霍亂弧菌分為古典生物型和ElTor生物型兩種生物型具有相同的抗原結(jié)構(gòu)兩種生物型多數(shù)生物學(xué)性狀相似霍亂弧菌生物型O1群霍亂弧菌分為古典生物型和ElTor生物型霍亂弧菌兩種生物型的鑒別鑒別試驗(yàn)古典生物型ElTor生物型V-P-+羊紅細(xì)胞溶解-+50U多粘菌素SR雞紅細(xì)胞凝集-+Ⅳ組噬菌體裂解+-Ⅴ組噬菌體裂解-+霍亂弧菌兩種生物型的鑒別鑒別試驗(yàn)古典生物型ElTor生物型V霍亂弧菌分群、型O抗原是霍亂弧菌分群和型的基礎(chǔ)根據(jù)O抗原不同分為139個(gè)血清群O1群包括古典生物型和ElTor生物型其他群稱為非O1群（非凝集弧菌）O1群血清型（見下表）血清型A抗原B抗原C抗原小川型（AB）++-稻葉型（AC）+-+彥島型（ABC）+++霍亂弧菌分群、型O抗原是霍亂弧菌分群和型的基礎(chǔ)血清型A抗原B抵抗力與變異ElTor型抵抗力較古典型強(qiáng)，在水中存活時(shí)間長對(duì)酸性物質(zhì)敏感對(duì)慶大霉素耐受多次傳代可失去典型形態(tài)而成為桿狀抵抗力與變異ElTor型抵抗力較古典型強(qiáng)，臨床意義致病物質(zhì)：霍亂腸毒素，導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，分泌大量腸液。所致疾?。航?jīng)腸道傳染，引起烈性腸道傳染?。魜y，為甲類傳染病。典型病人糞便呈“米泔水”樣病后可獲得牢固免疫，以SIgA為主。我國霍亂流行菌株以ElTor小川型為主。臨床意義致病物質(zhì)：霍亂腸毒素，導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞分泌功能亢進(jìn)，作用機(jī)制示意圖作用機(jī)制示意圖弧菌科及檢驗(yàn)課件微生物檢驗(yàn)－－標(biāo)本采集發(fā)病早期采集標(biāo)本以“米泔水”樣便為主，及時(shí)送檢卡－布培養(yǎng)基保存嚴(yán)密包裝，專人送檢微生物檢驗(yàn)－－標(biāo)本采集發(fā)病早期采集標(biāo)本檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌培養(yǎng)堿性蛋白胨水分離培養(yǎng)（TCBS、堿性平板）生化鑒定分型血清學(xué)鑒定確診報(bào)告初步報(bào)告快速診斷直接涂片動(dòng)力、制動(dòng)試驗(yàn)檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌培養(yǎng)分離培養(yǎng)（TCBS、堿性檢驗(yàn)方法－－顯微鏡檢查涂片染色：標(biāo)本直接涂片革蘭染色，注意形態(tài)、排列動(dòng)力觀察：壓滴法或暗視野鏡檢，注意運(yùn)動(dòng)方式制動(dòng)試驗(yàn)：O1診斷血清與菌體結(jié)合，動(dòng)力消失檢驗(yàn)方法－－顯微鏡檢查涂片染色：標(biāo)本直接涂片革蘭染色，注意形分離培養(yǎng)標(biāo)本接種堿性蛋白胨水增菌6～8小時(shí)，轉(zhuǎn)種TCBS或慶大霉素瓊脂，TCBS：出現(xiàn)黃色菌落慶大霉素瓊脂：出現(xiàn)中心灰褐色的菌落分離培養(yǎng)標(biāo)本接種堿性蛋白胨水增菌6～8小時(shí)，轉(zhuǎn)種TCBS或慶鑒定生化反應(yīng)：粘絲試驗(yàn)、霍亂紅反應(yīng)確定血清群：O1群診斷血清與可疑菌落作玻片凝集，以確定是否為O1群確定血清型：與分型診斷血清作玻片凝集，以確定血清型別確定生物型：第Ⅳ組噬菌體裂解試驗(yàn)多粘菌素B敏感試驗(yàn)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)溶血試驗(yàn)鑒定生化反應(yīng)：粘絲試驗(yàn)、霍亂紅反應(yīng)副溶血性弧菌－－生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，或微彎，單端鞭毛，無芽孢，無莢膜營養(yǎng)要求不高，嗜鹽性，最適鹽濃度3.5％NaCl，無鹽培養(yǎng)基不生長TCBS：形成不發(fā)酵蔗糖的綠色菌落神奈川現(xiàn)象＋：致病性副溶血性弧菌能溶解人或兔紅細(xì)胞，不溶解馬紅細(xì)胞副溶血性弧菌－－生物學(xué)性狀革蘭陰性桿菌，或微彎，單端鞭毛，無副溶血性弧菌－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血素（耐熱直接溶血素和耐熱相關(guān)溶血素）所致疾?。菏橙敫比苎曰【廴镜柠}腌食品，引起食物中毒副溶血性弧菌－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血素（耐熱直接溶血素和耐氣單胞菌屬形態(tài)染色：革蘭陰性桿菌，或球桿狀、絲狀，極端鞭毛，無芽孢生長條件：兼性厭氧；營養(yǎng)要求不高生長溫度較寬，0℃～45℃嗜冷菌37℃以下生長嗜溫菌10～42℃生長氣單胞菌屬形態(tài)染色：氣單胞菌屬生長現(xiàn)象TCBS上不生長血平板：灰白、光滑、凸起菌落腸道選擇平板：形成不發(fā)酵乳糖菌落生化反應(yīng)氧化酶＋、觸酶＋發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣6.5％NaCl不生長O129不敏感多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥氣單胞菌屬生長現(xiàn)象氣單胞菌屬－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血毒素、細(xì)胞毒素所致疾?。耗c道感染：是夏季腹瀉常見病原菌腸外感染：敗血癥、傷口感染等多數(shù)菌株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶，對(duì)青霉素耐藥氣單胞菌屬－－臨床意義致病物質(zhì)：溶血毒素、細(xì)胞毒素檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)（血平板、Mac）全面生化反應(yīng)可疑菌落腸毒素測定初步生化反應(yīng)涂片染色鏡檢血標(biāo)本氧化酶TCBS生長O/129耐鹽試驗(yàn)檢驗(yàn)程序標(biāo)本增菌分離培養(yǎng)全面生化反應(yīng)可疑菌落鑒定試驗(yàn)與腸道桿菌、非發(fā)酵菌鑒別與鄰單胞菌屬和弧菌屬鑒別氣單胞菌屬種間鑒別鑒定試驗(yàn)與腸道桿菌、非