滅菌–驗證和確認的要求

滅菌–

驗證和確認的要求MrsRobynIsaacson1Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第1頁!滅菌

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概述目標討論“無菌”的定義簡要地闡述滅菌的方法以濕熱滅菌為例，闡述滅菌過程/程序驗證需要采用的方法滅菌的日常監(jiān)控及控制對其它滅菌法特殊問題的綜述性討論2Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第2頁!無菌產品

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概述有些藥品必須是無菌的注射劑、眼用制劑、灌洗液、血液透析有二類無菌藥品最終滅菌產品（可在其最終容器中滅菌的產品）不能最終滅菌且須以無菌制造工藝生產的產品3Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第3頁!滅菌

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概述“無菌”的定義是什么?沒有微生物實際上，無法證明絕對沒有微生物的說法將無菌定義為污染品的概率為百萬分之一(10-6)這也就是無菌保證水平SterilityAssuranceLevel(SAL)微生物的殺滅遵循對數規(guī)則4Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第4頁!“無菌”的定義D值

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使微生物下降一個對數單位(殺滅90%)所需的時間或劑量D-Value用“D值”來表示微生物的耐熱性/耐受性5Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第5頁!“無菌”的定義舉例

初始菌的污染水平(生物負荷)為100時，滅菌過程必須使活菌下降8個對數單位這需要8個D值（如微生物的D為2分鐘，則8x2=16分鐘），才能使微生物下降8個對數單位，無菌保證水平達到10-6)(Z點)6Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第6頁!濕熱滅菌飽和蒸汽常用程序：121℃，15分鐘134℃，3分鐘可采用其它較低溫度和較長時間的程序（如115℃30分鐘）這些方法可用于：水性注射劑，眼用制劑、灌洗液、血液透析劑和無菌制造工藝中采用的設備的滅菌7Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第7頁!干熱滅菌殺滅是一個氧化過程需要高的溫度和長的滅菌時間典型的程序：160℃，120分鐘170℃，60分鐘180℃，30分鐘玻璃小瓶干熱滅菌用的隧道滅菌器，可采用高得多的溫度（300℃）和很短的時間8Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第8頁!環(huán)氧乙烷氣體二種均可：或是純的，也可以是與其它惰性氣體的混合物需要水分/濕度是一個復雜的過程典型的程序1-24小時氣體濃度；25-1200mg/L25-65℃；相對濕度：30-85%9Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第9頁!輻射滅菌伽馬射線由鈷60或銫137放射性核素產生，或一電子發(fā)生器獲得的加速電子常見的劑量為25kilograys(kGy)（千戈）劑量取決于生物負荷(不可預計的微生物的耐受性)滅菌工藝須適當驗證用于：干燥的藥品熱穩(wěn)定性差的容器它可導致難以接受的變化10Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第10頁!驗證概述滅菌程序的選擇必須考慮其對產品的適用性最終滅菌是首選的方法濕熱滅菌（在滅菌柜內高壓滅菌）是最常見的最終滅菌法熱力滅菌不應對產品帶來不良影響必須確立容器/密封件的完好性/可靠性被滅菌品如是密封的，它應含水，或材料可排除空氣并讓蒸汽穿透(濕熱)滅菌11Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第11頁!驗證方案濕熱滅菌-續(xù)：所有設備的性能，如壓力表、閥門、報警系統(tǒng)、計時器、汽流速度/壓力、冷卻水流速、程序控制系統(tǒng)功能、門密封圈及空氣阻斷系統(tǒng)、及過濾器監(jiān)控設備和工藝性能的方法，以及實驗室測試方法負責所有滅菌階段并最終評估的人員(應有經驗、受過必要的培訓并授予應有的權力)12Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第12頁!驗證-校準應對指示劑進行校驗應對物理及化學指示劑進行測試，以證明它們對溫度和時間的響應符合要求生物指示劑應計數，并測試其暴熱過程中對時間/溫度的響應對市售的生物指示劑而言

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應有計數、D值及暴熱響應的檢驗證書*。如企業(yè)內部定期測試，可認可測試的結果。企業(yè)自制的生物指示劑，必須全面測試其特性(D-值、

鑒別特性)并確認它適用于滅菌程序所有的指示劑都應在適當的條件下，在其有效期內保存13Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第13頁!驗證

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程序的開發(fā)Fo可按下式計算：Fo=ΔtΣ10(T-121/Z)式中：“Δt”溫度T下測試的間隔時間“T”是產品滅菌時間t的溫度“Z”是溫度系數，它是D值變化一個對數單位溫度需調節(jié)的度數14Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第14頁!驗證

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程序的開發(fā)滅菌的二種方法過度殺滅法存活概率法當產品能經受過量的熱處理而無不良影響時，可采用過度殺滅法此程序的Fo至少達到12D為1分鐘的微生物，可下降12對數單位(假設每個容器有106

微生物，12對數單位下降值將造成10-6

的存活概率，無菌保證達到百萬分之一)(通常生物負荷要低得多，與D為1分鐘相比，其耐熱性也差得多)15Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第15頁!

滅菌程序的驗證基本原則安裝確認(IQ)保證設備按供貨商的技術要求完成安裝運行確認(OQ)保證設備、關鍵控制設備及儀表能在規(guī)定的各種參數范圍內正常運行性能確認(PQ)證明滅菌裝載的所有部分都達到了滅菌條件采用物理及微生物（生物指示劑）的手段進行試驗16Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第16頁!設備的確認運行確認保證設備、關鍵控制設備及儀表能在規(guī)定的各種參數范圍內正常運行用3次或更多次數的運行來證明控制、報警、監(jiān)控設備及運行指示系統(tǒng)正常運行能可靠保持腔室壓力可保持腔室的真空度(如有此功能時)書面規(guī)程正確地闡明了設備的運行要求每次運行均能符合按預先設定的參數要求17Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第17頁!性能確認物理的性能確認-(2)確定腔室最大及最小裝載的熱分布狀況多個熱電偶放置在整個腔室（不在產品容器中），以確定裝載對熱分布的影響應使用生產中采用所有規(guī)格的容器進行熱分布試驗應記錄熱電偶放置的位置應記錄每次試驗的冷點，包括排水點/地漏的位置重復運行，以確認可變性/波動情況腔室每一裝載的熱分布情況均應有記錄18Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第18頁!性能確認物理的性能確認-(4)熱竄透(2)大裝量的容器，熱竄透試驗可能有必要測試容器中的冷點分布圖有必要包裝，如外袋（overwrapping）的影響一旦確定了冷點，就需要進行3次運行試驗，以確定重現性19Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第19頁!性能確認驗證報告必須證明達到了驗證方案中的各種技術要求，任何偏差，均應說明理由每年須進行再驗證(通常認可每年一次)任何變更或修改都應進行評價可能只需要再確認裝載方式的變化、新的容器/密封系統(tǒng)或程序參數的變更，需要進行全面的再驗證20Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第20頁!常規(guī)生產冷卻水應當是無菌的已滅菌和未滅菌品之間要加以區(qū)分采用物理隔離(如雙扉滅菌柜)貼簽或用目視可見的指示劑，如滅菌指示帶定期檢查容器，檢查容器/密封件系統(tǒng)的完整性應建立蒸汽質量標準，定期檢查蒸汽中的污染21Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第21頁!其它滅菌工藝其它滅菌工藝應遵循濕熱滅菌相類似的方法有驗證方案要對設備進行校準/校驗要確定滅菌工藝肯定能賦予所需的無菌保證值水平-SAL(10-6)IQ,OQ,PQ有明確的常規(guī)監(jiān)控的要求22Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第22頁!其它滅菌工藝輻射滅菌通常采用委托外單位滅菌的方法(需保證經驗證的狀態(tài)，分清責任)需根據被滅菌品的生物負荷狀況來定生物指示劑可作為輔助手段，但它們對輻射的耐受性可能不如天然的強請參見國際標準ISO11137中定義的方法23Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第23頁!其它滅菌工藝氣體和薰蒸劑如環(huán)氧乙烷、汽化過氧化氫只有無其它辦法時，方可采用本法必須證明滅菌工藝對產品無不良影響包裝必須能穿透氣體，且需一定濕度保證產品裝載在滅菌前充分加熱并濕潤(稱為“創(chuàng)造條件”)需考慮到驗證是在夏天還是冬天進行24Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第24頁!參考文獻ISO/EN17665-Sterilizationofhealthcareproducts-MoistHeat(Parts1and2)ISO/EN11135-Sterilizationofhealthcareproducts-EthyleneOxide(Parts1and2)ISO/EN11137-Sterilizationofhealthcareproducts-Radiation(Parts1,2and3)“ValidationofMoistHeatSterilizationProcesses:CycleDesign,Development,QualificationandongoingControl.PDATechnicalReportNo.1Revised200725Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第25頁!“無菌”的定義MICROBIALINACTIVATIONNt=Noe-kt020040060080010001200TimeNoofsurvivingorganisms-2.00-1.50-1.00-0.500.000.501.001.502.002.503.003.50NoremainingLogNoremainingNoremaining10003681355018721000LogNoremaining3.002.572.131.701.260.830.39-0.04-0.47-0.91-1.34012345678910微生物的滅活微生物存活數微生物殘存數微生物殘存數的對數26Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第26頁!“無菌”的定義一個滅菌程序/過程必須賦予（產品）百萬分之一的無菌保證水平(10-6)百萬分之一（10-6）是無法測試的滅菌過程將微生物降低至零，加上一個安全因子，使微生物再獲得6個對數單位的下降值，這樣就達到了所需的無菌保證水平27Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第27頁!滅菌–概述常用的滅菌方法濕熱滅菌干熱滅菌氣體滅菌(環(huán)氧乙烷-Ethyleneoxide)輻射滅菌(伽馬/Gamma或電子流)過濾其它

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紫外,蒸汽和甲醛過氧化氫28Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第28頁!濕熱滅菌不適用于非水性/干粉類制劑的滅菌它是滅菌的首選方法29Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第29頁!干熱滅菌用于：玻璃器皿、無菌制造工藝中用的容器、非水性熱穩(wěn)定性粉未及液體（油類）還可以用于玻璃器具的去熱原(250℃)(熱原

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存在于某些細菌的細胞壁，進入人體后能導致發(fā)燒的物質)30Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第30頁!環(huán)氧乙烷滅菌用于：熱穩(wěn)定性差的容器干粉的表面通氣要充分，降低毒性殘留物31Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第31頁!除菌過濾將微生物從液體和氣體中濾除除菌過濾器的名義孔徑：0.2-0.22μ由乙酰乙酸乙酯或其它聚合材料組成過濾材料應與被過濾液體有好的兼容性用于大宗藥液、氣體及通氣過濾器32Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第32頁!驗證方案濕熱滅菌的要求其它滅菌法要求相似每個滅菌程序的驗證方案應包括以下細節(jié)產品類型、容器/密封系統(tǒng)滅菌的目標，所需的無菌保證水平對時間、溫度、壓力、裝載方式的詳細說明對所有設備及輔助系統(tǒng)的類型、型號、能力和運行范圍的詳細說明33Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第33頁!驗證-校準應由有資質的實驗室采用適當的方法進行試驗，試驗應有相應記錄所有儀器必須校準，例如溫度記錄儀和溫度探頭熱電偶夾套及腔室的壓力探頭計時器冷卻水監(jiān)控用的電導儀水/蒸汽的流量計采用冷卻水時的水位指示儀溫度計，包括熱電偶用的，腔室監(jiān)控及實驗室監(jiān)控用的參照溫度計34Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第34頁!驗證

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程序的開發(fā)Fo的概念與121℃等效的滅菌率/殺滅率

121℃滅菌1分鐘，相當于Fo=1.

殺滅率在升溫及降溫期間可以累計

一個熱力滅菌程序的典型溫度-時間曲線121℃滅菌15分鐘的程序，Fo應為多少？35Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第35頁!驗證

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程序的開發(fā)一個滅菌程序的最低Fo與生物負荷/污染菌的耐熱性(D-值)相關

Fo=D121(LogA-LogB)

式中：“D121”是產品容器中耐熱性最強的菌在121℃下，下降1個對數單位（殺滅90%）所需的時間“A”是每個容器中的微生物數“B”系最大允許的殘存概率(無菌保證水平，10-6)36Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第36頁!驗證

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程序的開發(fā)熱不穩(wěn)定產品所用的存活概率法滅菌程序的驗證要達到將生物負荷殺滅至100(Y點)的水平,并再至少要下降6個對數單位(Z點)的額外安全因素。所需最低Fo取決于生物負荷及其耐熱性如生物負荷為102(100)，D值為1，那么所需的Fo為多少？37Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第37頁!設備的確認安裝確認保證設備按供貨商的技術要求完成安裝考慮新的及現有的設備

滅菌柜類型、建造材料、能量供應、輔助系統(tǒng)、報警和監(jiān)控系統(tǒng)的技術要求，并確認其公差范圍及準確度的要求現有設備有文件和記錄，能證明設備滿足滅菌工藝的技術要求38Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第38頁!性能確認性能確認證明滅菌裝載的所有部分都達到了滅菌條件需進行物理及生物指示劑的確認試驗物理的空載熱分布試驗時間及溫度最長/最高的程序確定熱分布方式，包括冷點位置應采用多溫度探頭（熱電偶）放置位置應有文件和記錄，保證熱分布是均勻的39Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第39頁!性能確認物理的性能確認-

(3)通過熱竄透確定腔室所有裝載中最高及最低溫度點每個裝載必須與蒸汽接觸需要在產品容器中測試升溫最高/最快、最慢/最低點的位置

需考慮所有變量，如容器大小、設計、材料、溶液粘度、灌裝裝體積。應考慮最大裝量及最難加熱/升溫最慢的產品。采用常規(guī)運行的參數，每個滅菌程序要測試最大及最小裝量的數據40Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第40頁!性能確認性能確認–用生物指示劑的試驗生物指示劑挑戰(zhàn)試驗采用存活概率法時，需做此試驗除US及澳大利亞外，當滅菌程序是121℃15分鐘時，可能不需要做此試驗當滅菌程序能力>采用通常認為最苛刻條件下常用的生物指示劑

Geobacillusstearothermophilus（嗜熱脂肪桿菌）時，此試驗可不做。可采用其它生物指示劑作性能確認。以產品生物負荷為基礎的方法（存活概率法）需要做大量的工作。生物指示劑應安放在靠近熱電偶冷點的裝載中（此位置在熱竄透試驗中確定）除有證據證明滅菌程序出錯外，任何長菌均以不合格論處41Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November2009滅菌–驗證和確認的要求共47頁，您現在瀏覽的是第41頁!常規(guī)生產常規(guī)生產應考慮的問題應控制生產環(huán)境有各種程序/措施來降低滅菌前的生物負荷應規(guī)定生物負荷限度，盡管這對過度殺滅程序并不那么重要應規(guī)定從灌裝到滅菌的間隔時限應定期對容器/密封件系統(tǒng)的完整性進行檢查如系有抽真空的滅菌程序，則需定期對腔室進行檢漏試驗42Manufactureofsterilemedicines–AdvancedworkshopforSFDAGMPinspectors-Nanjing,November