體液免疫球蛋白的測定

第十八章體液免疫球蛋白的測定第十八章體液免疫球蛋白的測定AssayforhumoralIg第一部分目的要求和教學(xué)內(nèi)容一、目的要求：掌握免疫球蛋白定量測定的方法參考值及應(yīng)用評(píng)價(jià)。了解免疫球蛋白定量的醫(yī)學(xué)意義。二、教學(xué)內(nèi)容：1．免疫球蛋白定量的常用檢測方法和參考值2.免疫球蛋白定量檢測方法評(píng)價(jià)及應(yīng)用。3.免疫球蛋白定量臨床意義1）血清Ig定量臨床意義。2）尿微量Ig定量臨床意義。3）腦脊液Ig定量臨床意義。第二部分測試題一、選擇題：(一)單項(xiàng)選擇題(A型題)1．CSF中一般以IgG指數(shù)反映中樞NS鞘內(nèi)合成IgG能力（）A．IgG指數(shù)=CSF中IgG/血清中IgGB．IgG指數(shù)=CSF中IgG/CSF中ALbC．IgG指數(shù)=CSF中IgG/血清中IgG÷CSF中白蛋白/血清中白蛋白D．IgG指數(shù)=血清中IgG/CSF中IgG÷血清中白蛋白/CSF中白蛋白2.單項(xiàng)瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)可用于免疫球蛋白的測定，有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是：A．應(yīng)選擇特異性強(qiáng)、效價(jià)高、親和力高的抗體Ｂ．制板時(shí)溫度控制在50℃~60Ｃ．待測樣品抗原如果含量高，應(yīng)稀釋后再檢測Ｄ．不同批次抗血清都可以使用相同的標(biāo)準(zhǔn)曲線Ｅ．同一批次抗血清可以使用相同的標(biāo)準(zhǔn)曲線3.免疫球蛋白的測定可用于哪些疾病的檢測：A．Ig全缺乏疾病B．選擇性Ig缺乏癥C．單克隆Ig血癥D．多克隆Ig血癥E．以上所有疾病4．人類免疫球蛋白占血漿蛋白總量的：A．5％B．10％C．15％D．20％E．50％5．免疫濁度測定法出現(xiàn)測量誤差的最大因素是：A．抗體過量B．鉤狀效應(yīng)C．環(huán)境溫度影響D．加入抗原、抗體的時(shí)間E．光源的強(qiáng)弱和波長的影響6．血清中缺乏IgG患者，易患下列哪種疾?。篈．革蘭陰性細(xì)菌敗血癥B．化膿性感染C．反復(fù)呼吸道感染D．巨球蛋白血癥E．重鏈病7．類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者，Ig以哪型增高為主：A．IgAB．IgDC．IgED．IgGE．IgM8．腦脊液中Ig濃度依次是：A．IgG＞IgM＞IgAB．IgG＞IgA＞IgMC．IgM＞IgA＞IgGD．IgM＞IgG＞IgAE．IgA＞IgM＞IgG9．血清中IgE含量升高，常見于下列哪種情況：A．大量吸煙B．妊娠末期C．SLED．中毒性骨髓疾病E．腎病綜合癥10．免疫電泳常采用的抗血清是：A．IgG、IgM、IgA、IgD、IgCB．IgG、IgM、IgA、k、λC．IgG、IgA、IgD、k、λD．IgG、IgM、IgD、k、λE．IgG、IgM、IgA、sIgA、IgC11．M蛋白于相應(yīng)抗體反應(yīng)形成沉淀弧有何特點(diǎn)：A．較普通沉淀弧寬，向抗體槽凸出B．較普通沉淀弧窄，向抗體槽凹出C．較普通沉淀弧寬，向抗體槽凹出D．較普通沉淀弧窄，向抗體槽凸出E．與普通沉淀弧寬一樣（二）、配伍題(問題1~4)A.IgGB.IgAC.IgMD.IgEE.SIgA1.人體血液中含量最多和最主要的免疫球蛋白是：2.能通過胎盤的免疫球蛋白是：3．在外分泌液中含最多的免疫球蛋白是：4．在初乳中含量最多的免疫球蛋白。二、填空題1．免疫球蛋白根據(jù)重鏈的不同可分為（），（），（），（）和（）五類。2．免疫固定電泳的特點(diǎn)是：（）、（）、（）、（）。3．Ig中k/λ比率正常范圍是（）三、名詞解釋體液免疫(humoralimmunity):M蛋白（monoclonalprotein）:3.本-周蛋白（bence-Jones）:4.冷球蛋白：四、簡答題1．血清免疫球蛋白測定方法有那些？2．免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義？3．如何評(píng)估腎小球?yàn)V膜破壞程度？4．如何判定血腦屏障受損程度？五、論述題１．試述本周蛋白檢測的意義？第三部分參考答案與題解一、選擇題：(一)單項(xiàng)選擇題(A型題)1．C2.D3.C4.D5.Ｂ6.Ｂ7.E8.Ｂ9.Ｃ10.Ｂ11.Ａ（二）配伍題1．Ａ2．Ａ3．Ｅ4．Ｅ二、填空題1IgMIgGIgAIgEIgD2．周期短、敏感性高、分辨清晰、結(jié)果易于分析。3．1.2～2.4三、名詞解釋1．體液免疫(humoralimmunity):B細(xì)胞介導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答。2．M蛋白（monoclonalprotein）:單克隆免疫球蛋白，是B淋巴細(xì)胞或漿細(xì)胞單克隆異常增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白；3.本-周蛋白（bence-Jones）:尿中游離的免疫球蛋白輕連。4.冷球蛋白：一組低溫下發(fā)生沉淀，加溫后又復(fù)溶的Ig。四、簡答題1．血清免疫球蛋白測定方法有那些？答：單向免疫擴(kuò)散法：原理，優(yōu)點(diǎn)：簡單，條件要求低，但抗體需要高效價(jià)高特異性，靈敏度：mg/ml免疫比濁法:原理，優(yōu)點(diǎn)：檢測結(jié)果準(zhǔn)確，精密度高，耗時(shí)短，靈敏度高ug/ml2．免疫球蛋白IgG、IgA、IgM測定有何意義？答：IgG、IgA、IgM均升高則慢性疾病，IgG升高則多為細(xì)菌感染導(dǎo)致，新生兒血清IgM升高則常為宮內(nèi)感染。單一Ig顯著升高則多為免疫增殖病：多發(fā)性骨髓瘤，重鏈病、惡性淋巴瘤。Ig降低則體液免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷。3．如何評(píng)估腎小球?yàn)V膜破壞程度？答：根據(jù)選擇性尿蛋白指數(shù)-SPI評(píng)估腎小球?yàn)V膜破壞程度表明腎臟有高度選擇性的排泌分子量小的蛋白質(zhì)，SPI≤0.1表明腎臟有高度選擇性的排泌分子量小的蛋白質(zhì)，此時(shí)腎臟輕度病變。SPI≥0.2表明腎臟非選擇性的排泌分子量較大的蛋白質(zhì)，此時(shí)有膜性腎病，膜增值性腎炎和腎病綜合癥。尿中IgA顯著升高出現(xiàn)在原發(fā)性腎小球腎炎和慢性腎小球腎炎，IgG升高出現(xiàn)在原發(fā)性腎小球腎炎和慢性腎小球腎炎，IgM升高出現(xiàn)在慢性腎炎，4．如何判定血腦屏障受損程度？答檢測白蛋白商值(Albquotient)=[(ALbCSF×AlbS)×1000]反應(yīng)血腦屏障受損程度。＜9時(shí)提示無明顯受損，9-15為輕度受損，15-33為中度受損，33-100為重度受損；＞100為完全破裂。五、論述題１．本周蛋白即尿中游離的免疫球蛋白輕鏈，其檢測對(duì)輕鏈病的診斷是必不可少的項(xiàng)目，并對(duì)多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥、重鏈病等疾病的診斷、鑒別和預(yù)后判斷均有一定幫助。本周蛋白在pH5．0的條件下，加熱至50-60℃至90℃進(jìn)行化學(xué)方法的檢測。這種加熱沉淀法簡便易行。但敏感度低，也不能確定輕鏈的型別。也可使用抗k和λ型輕鏈抗血清進(jìn)行免疫電泳分析，為提高檢出率，尿標(biāo)本宜先用聚乙二醇通過半透膜濃縮。游離輕鏈往往與其中一型(k或λ)的抗血清反應(yīng)，在β-γ區(qū)附近形成一條致密的弓形沉淀弧。有時(shí)輕鏈外還含有其他蛋白，要注意識(shí)別。如多克隆免疫球蛋白常同時(shí)與k和λ兩型抗輕鏈血清形成沉淀弧，而單克隆免疫球蛋白(M蛋白)雖只與其中一型抗輕鏈血清反應(yīng)，但也與某一型重鏈抗血清產(chǎn)生一位置相同的沉淀弧，通過觀察分析多可作出正確判斷。輕鏈病患者尿中可測得本周蛋白，但由于其分子量較小，易迅速自腎臟排出，故血中反而呈陰性，檢測時(shí)應(yīng)該注意。非分泌型骨髓瘤患者蛋白區(qū)帶電泳中不能檢出單克隆丙種球蛋白的M區(qū)帶，往往呈現(xiàn)