4、黃酮類化合物課件

第九章黃酮類化合物（flavonoids）2010年3月23日~4月6日第九章黃酮類化合物（flavonoids）2010年31前言黃酮類化合物是廣泛分布在自然界的一大類化合物，多數(shù)具有顏色，在植物體內(nèi)一部分與糖結(jié)合成苷類化合物（存在于植物的花、葉、果實等組織），一部分游離存在（存在于木質(zhì)部堅硬組織)。對植物的生長發(fā)育、開花結(jié)果以及抵御異物侵入等方面起著重要作用。前言黃酮類化合物是廣泛分布在自然界的一大類化合物，多數(shù)具有顏2學(xué)習(xí)內(nèi)容（一）黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)與分類(掌握)（二）黃酮類化合物的理化性質(zhì)(掌握)（三）黃酮類化合物的提取分離(掌握)（四）黃酮類化合物的鑒定與結(jié)構(gòu)測定（熟悉）（五）黃酮類化合物的生理活性（了解）學(xué)習(xí)內(nèi)容（一）黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)與分類(掌握)31、基本結(jié)構(gòu)基本母核為2-苯基色原酮類化合物。三個環(huán)編號取代基：OH、OCH3、OCH2O等。取代位置ACB124581’6’1、基本結(jié)構(gòu)基本母核為2-苯基色原酮類化合物。ACB124542、分類黃酮（醇）類二氫黃酮（醇）類異黃酮類、二氫異黃酮類查耳酮類花色素類、黃烷類橙酮（噢哢）類雙黃酮類區(qū)分要點：雙鍵、B環(huán)連接位置、C環(huán)的完整性與環(huán)上的取代等。分類2、分類黃酮（醇）類區(qū)分要點：雙鍵、B環(huán)連接位置、C環(huán)的完整5黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：完全的母核結(jié)構(gòu)。黃酮醇與黃酮的區(qū)別：3-OH的有無。木犀草素槲皮素分類黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：完全的母核結(jié)構(gòu)。木犀草素槲皮素分類6二氫黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：C2-C3之間無雙鍵。二氫黃酮醇與二氫黃酮的區(qū)別：3-OH的有無。甘草苷杜鵑素分類二氫黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：C2-C3之間無雙鍵。甘草苷杜鵑素7異黃酮類、二氫異黃酮類結(jié)構(gòu)特點：B環(huán)連接在C3位。異黃酮和二氫異黃酮的區(qū)別：C2-C3之間雙鍵的有無。大豆素紫檀素分類異黃酮類、二氫異黃酮類結(jié)構(gòu)特點：B環(huán)連接在C3位。大豆素紫檀8查耳酮類結(jié)構(gòu)特點：C環(huán)開環(huán)。注意編號不同。1’2’4’135αβ紅花苷分類查耳酮類結(jié)構(gòu)特點：C環(huán)開環(huán)。1’2’4’135αβ紅花苷分類9花青素類：C環(huán)為苯環(huán)結(jié)構(gòu)，1位氧帶正電荷。兒茶素飛燕草素黃烷類C4無羰基，C2-C3無雙鍵。分類花青素類：C環(huán)為苯環(huán)結(jié)構(gòu)，1位氧帶正電荷。兒茶素飛燕草素黃烷10橙酮（噢哢）類：C環(huán)為五元環(huán)。硫磺菊素雙黃酮類：兩分子黃酮組成。銀杏素分類橙酮（噢哢）類：C環(huán)為五元環(huán)。硫磺菊素雙黃酮類：兩分子黃酮組11理化性質(zhì)一、性狀1、存在狀態(tài)2、旋光性3、顏色二、溶解性（熟悉）1、苷元2、苷三、酸堿性（掌握）四、顯色反應(yīng)（重點掌握）理化性質(zhì)一、性狀12一、性狀1、苷元為結(jié)晶性固體，苷類為無定性粉末。2、苷元除二氫黃酮（醇）類、黃烷（醇）有旋光性外，其它無旋光性；苷類化合物多為左旋性。3、顏色：具明顯顯色，多數(shù)黃色或橙色，與交叉共軛體系有關(guān)。理化性質(zhì)一、性狀1、苷元為結(jié)晶性固體，苷類為無定性粉末。理化性質(zhì)13二、溶解性1、苷元一般難溶或不溶于水，易溶于有機溶劑。2、平面型結(jié)構(gòu)的水溶性小于非平面型結(jié)構(gòu)。3、OH越多，水溶性越強。4、苷類化合物的糖數(shù)越多，水溶性越強。5、3-O-glc苷的水溶性>7-O-glc苷。理化性質(zhì)二、溶解性1、苷元一般難溶或不溶于水，易溶于有機溶劑。理化性14三、酸堿性1、酸性：7，4’-二-OH>7或4’-OH>一般酚羥基>5-OH。（原因？）2、堿性：1-O原子有堿性。理化性質(zhì)濃HClCl-..三、酸堿性1、酸性：7，4’-二-OH>7或4’-OH>一15四、顯色反應(yīng)(一)、還原反應(yīng)(二)、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)(三)、硼酸顯色反應(yīng)（了解)(四)、堿性試劑顯色反應(yīng)（熟悉）理化性質(zhì)顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng)(一)、還原反應(yīng)理化性質(zhì)顯色反應(yīng)16(一）、還原反應(yīng)HCl—Mg粉（Zn)反應(yīng)1、操作：樣品溶于甲醇或乙醇中，加入少許鎂粉（鋅粉）振搖，滴加濃HCl幾滴，觀察顏色（必要時可加熱）。2、結(jié)果：黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）--橙紅色~紫紅色。查爾酮、橙酮不顯色。3、干擾組分的排除：花青素、部分查爾酮。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)(一）、還原反應(yīng)HCl—Mg粉（Zn)反應(yīng)理化性質(zhì)顯色反應(yīng)17（一）、還原反應(yīng)NaBH4反應(yīng)（專屬性較高的還原劑）1、操作：樣品溶于乙醇中，加入2%NaBH4乙醇液，稍后加入濃HCl或濃H2SO4數(shù)滴，觀察顏色。2、結(jié)果：二氫黃酮類呈紫色或紫紅色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（一）、還原反應(yīng)NaBH4反應(yīng)（專屬性較高的還原劑）理化性質(zhì)18（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)（ZrOCl2)1、操作：樣品甲醇溶液加入2%ZrOCl2的甲醇溶液，觀察顏色；然后再加入2%的枸櫞酸，再觀察顏色。2、結(jié)果：黃酮類化合物分子中有游離的3或5-OH時生成黃色絡(luò)合物，但5-OH黃酮的絡(luò)合物遇枸櫞酸后顏色會褪去。3、應(yīng)用：鑒別3-OH或5-OH黃酮。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)（ZrOC19（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)醋酸鎂（MgAc2)反應(yīng)1、操作：在濾紙上滴加樣品液，噴以醋酸鎂的甲醇液，加熱干燥，觀察結(jié)果。2、結(jié)果：二氫黃酮（醇）類顯藍色熒光。黃酮（醇）和異黃酮顯黃色~橙色~褐色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)醋酸鎂（MgAc2)反應(yīng)理化性20（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)AlCl3顯色反應(yīng)1、操作：樣品的乙醇液滴于濾紙上噴1%的AlCl3乙醇液顯色，在紫外燈下觀察熒光顏色。2、結(jié)果：除4’-OH黃酮醇或7、4’-二OH黃酮醇顯天藍色熒光外，其它顯黃色熒光。3、應(yīng)用：定性定量分析。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)AlCl3顯色反應(yīng)理化性質(zhì)顯色21（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鉛鹽反應(yīng)：1、醋酸鉛只能與分子中具有鄰二酚羥基或兼有3-OH或5-OH結(jié)構(gòu)的化合物作用。2、堿式醋酸鉛的沉淀范圍廣。3、生成黃色~紅色沉淀。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鉛鹽反應(yīng)：理化性質(zhì)顯色反應(yīng)22（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)氯化鍶（SrCl2)反應(yīng)1、操作：樣品甲醇液中加入3滴0.01mol/L的SrCl2甲醇液，再加入氨氣飽和的甲醇溶液后觀察有無沉淀出現(xiàn)。2、結(jié)果：具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物生成綠色~棕色乃至黑色沉淀。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)氯化鍶（SrCl2)反應(yīng)理化性23（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)FeCl3反應(yīng)：多數(shù)黃酮化合物分子結(jié)構(gòu)中有酚羥基，遇FeCl3可產(chǎn)生正反應(yīng)，但一般含有H鍵締合的酚羥基才呈現(xiàn)顯著的顏色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)FeCl3反應(yīng)：理化性質(zhì)顯色反24（三）硼酸顯色反應(yīng)5-OH黃酮或2’-OH查爾酮為正反應(yīng)。在草酸存在下顯黃色并帶有綠色熒光；但在枸櫞酸丙酮存在下只顯黃色而無熒光。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)5-OH黃酮或2’-OH查爾酮為正反應(yīng)。理25（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑：氨氣、Na2CO3等。1、OH-H+無色橙黃色理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑：氨氣、Na2CO3等。OH26（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)2、黃酮醇在堿性條件下先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣?、黃酮類化合物當(dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或3、4’-二羥基取代時在堿液中不安定，由黃色變成深紅色乃至綠棕色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)2、黃酮醇在堿性條件下先呈黃色，通入27黃酮類化合物的提取原則：1、苷和極性較大的苷元一般用極性較大的溶劑提取，如甲醇-水（1：1）或甲醇；一些多糖苷可以用沸水提取。2、苷元一般用極性較小的溶劑提取，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。3、提取苷時注意破酶。提取與分離黃酮類化合物的提取原則：提取與分離28黃酮類化合物的提取方案1：溶劑提取法。提取與分離藥材粗品醇提浸膏EtOH提取、濃縮乙醚液Et2O提取不溶物BuOH液不溶物n-BuOH提取？？？黃酮類化合物的提取方案1：溶劑提取法。提取與分離藥材粗品醇提29黃酮類化合物的提取方案2：堿溶酸沉淀法1、原理：黃酮類化合物多數(shù)有酚羥基，顯酸性，可溶于堿水中，再加酸后又可沉淀析出。2、常用堿：石灰水、Na2CO3、稀NaOH、堿性稀醇等。提取與分離黃酮類化合物的提取方案2：堿溶酸沉淀法提取與分離30黃酮類化合物的分離方法一、柱色譜1、硅膠色譜法：主要用于分離非平面型黃酮及高度甲基化的黃酮（醇）的分離。2、聚酰胺柱層析法：3、GFC法二、pH梯度萃取法提取與分離黃酮類化合物的分離方法一、柱色譜提取與分離31聚酰胺柱層析法Rf的比較1、2、提取與分離小大大小聚酰胺柱層析法Rf的比較提取與分離小32Rf的比較3、4、提取與分離小大大小Rf的比較3、提取與分離小33Rf的比較5、用含水流動相洗脫時：三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷元用有機溶劑洗脫時：苷元>苷提取與分離Rf的比較5、用含水流動相洗脫時：三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷34GFC法分離苷元時主要是吸附作用，OH越多，吸附越牢，Rf越小。分離苷時主要是分子篩作用，分子越大，Rf越大。提取與分離GFC法分離苷元時主要是吸附作用，OH越多，吸附越牢，Rf越35pH梯度萃取法提取與分離黃酮類化合物5%Na2CO35%NaHCO34%NaOH0.2%NaOH溶于有機溶劑中有機液有機層堿水層？堿水層？有機層堿水層？有機層堿水層？有機層pH梯度萃取法提取與分離黃酮類化合物5%Na2CO35%Na36提取分離實例：蕓香苷的提取提取與分離1、蕓香苷的結(jié)構(gòu)式2、提取思路3、方案確定A、溶劑法B、堿水提取法溶解性：水溶性強酸堿性：有酸性提取分離實例：蕓香苷的提取提取與分離1、蕓香苷的結(jié)構(gòu)式2、提37溶劑法槐米粗粉沸水煎煮30分鐘，兩次。趁熱濾過。藥渣水提液放冷，過濾。濾液沉淀重結(jié)晶，過濾。蕓香苷注意？方法？方法？注意？提取與分離溶劑法槐米粗粉沸水煎煮30分鐘，兩次。趁熱濾過。藥渣水提液放38堿水提取法槐米粗粉6倍量硼砂水液，石灰乳調(diào)PH8~9，煎煮2次。藥渣水提液HCl調(diào)PH3~4，攪拌，析晶，過濾。濾液沉淀重結(jié)晶，過濾。蕓香苷目的？目的？PH可否調(diào)到1~2提取與分離堿水提取法槐米粗粉6倍量硼砂水液，石灰乳調(diào)PH8~9，煎煮239提取分離實例：黃芩苷的提取提取與分離1、黃芩苷的結(jié)構(gòu)式：2、提取思路3、方案確定：堿水提取法4、流程圖書寫提取分離實例：黃芩苷的提取提取與分離1、黃芩苷的結(jié)構(gòu)式：2、40鑒定PC:可采用雙向展開法：第一向展開采用某種醇性溶劑，第二向展開用水或極性較大的溶劑展開。TLC：1、硅膠TLC2、聚酰胺TLC鑒定與結(jié)構(gòu)測定鑒定PC:鑒定與結(jié)構(gòu)測定41結(jié)構(gòu)測定—紫外光譜的應(yīng)用一般程序：1、測定樣品甲醇中的UV光譜；2、測定加入診斷試劑后的UV光譜；3、如樣品為苷類化合物，則先進行水解再測定光譜。鑒定與結(jié)構(gòu)測定結(jié)構(gòu)測定—紫外光譜的應(yīng)用一般程序：鑒定與結(jié)構(gòu)測定42黃酮類化合物在甲醇液中的

UV光譜特征苯甲酰系統(tǒng)產(chǎn)生峰帶Ⅱ（220~280nm）桂皮酰系統(tǒng)產(chǎn)生峰帶Ⅰ（300~400nm）AB黃酮類化合物在甲醇液中的

UV光譜特征苯甲酰系統(tǒng)桂皮酰系統(tǒng)A43黃酮（醇）的UV特征峰Ⅰ300~400nm，峰Ⅱ220~280nm。峰Ⅰ受A環(huán)、B環(huán)影響，氧化程度越高，吸收帶越長移。峰Ⅱ主要受A環(huán)影響，B環(huán)可影響其峰形。200300400(nm)示意圖黃酮（醇）的UV特征峰Ⅰ300~400nm，峰Ⅱ220~2844查爾酮的UV特征峰Ⅰ300~390nm，峰Ⅱ220~270nm。峰Ⅰ有時開裂為Ⅰa（340~390nm）、Ⅰb（300~320nm）。峰Ⅰ受整個母核氧化的影響，尤其2’-OH影響最大。200400(nm)示意圖查爾酮的UV特征峰Ⅰ300~390nm，峰Ⅱ220~270n45異黃酮、二氫黃酮（醇）的UV特征峰Ⅱ為主峰，峰Ⅰ常成為其肩峰。異黃酮峰Ⅱ245~270nm；二氫黃酮峰Ⅱ270~295nm。200300（nm)示意圖異黃酮、二氫黃酮（醇）的UV特征峰Ⅱ為主峰，峰Ⅰ常成為其肩峰46加入診斷試劑后引起的吸收峰位移在結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用1、甲醇鈉A、有3-OH，無4’-OH時，帶Ⅰ紅移50~60nm，強度降低。B、無3-OH，有4’-OH時，帶Ⅰ紅移40~60nm，強度不降低。C、3-OH、4’-OH同時存在時，帶Ⅰ隨處理時間的延長而衰退。加入診斷試劑后引起的吸收峰位移在結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用1、甲醇鈉472、醋酸鈉用于7-OH的鑒別。有7-OH時帶Ⅱ紅移5~20nm，若同時有6、8-氧代，則位移幅度減小。醋酸鈉熔融后若帶Ⅰ紅移40~60nm，強度不降，說明有4’-OH。5、6、7-三OH；5、7、8-三OH；3、3’、4’-三OH存在時吸收峰衰減。2、醋酸鈉用于7-OH的鑒別。483、醋酸鈉/硼酸用于鑒別鄰二酚羥基。B環(huán)有鄰二酚羥基帶Ⅰ紅移12~30nm，A環(huán)有鄰二酚羥基帶Ⅱ紅移5~10nm。3、醋酸鈉/硼酸用于鑒別鄰二酚羥基。494、AlCl3/AlCl3+HCl用于鑒別3-OH、5-OH、鄰二酚羥基的存在。(1)樣品+AlCl3/HCl光譜=樣品+CH3OH表明無3-OH或5-OH，或3-OH、5-OH被取代（2）樣品+AlCl3/HCl光譜≠樣品+CH3OH帶Ⅰ紅移35~55nm，有5-OH，無3-OH；帶Ⅰ紅移60nm，有3-OH，無5-OH；帶Ⅰ紅移50~60nm，同時有3-OH和5-OH。4、AlCl3/AlCl3+HCl用于鑒別3-OH、5-OH50（3）樣品+AlCl3/HCl光譜=樣品+AlCl3表明A、B環(huán)均無鄰二酚羥基。（4）樣品+AlCl3/HCl光譜≠樣品+AlCl3帶Ⅰ藍移30~40nm，B環(huán)有鄰二酚羥基；帶Ⅰ藍移20nm，B環(huán)有鄰三酚羥基；帶Ⅰ藍移50~65nm，A、B環(huán)均有鄰二酚羥基。（3）樣品+AlCl3/HCl光譜=樣品+AlCl351結(jié)構(gòu)測定—1H-HMR的應(yīng)用一、A環(huán)質(zhì)子信號比B環(huán)質(zhì)子信號在高場，即A環(huán)質(zhì)子的化學(xué)位移值<B環(huán)質(zhì)子。二、A環(huán)質(zhì)子1、5、7-二-OH黃酮6.27，d6.55，d結(jié)構(gòu)測定—1H-HMR的應(yīng)用一、A環(huán)質(zhì)子信號比B環(huán)質(zhì)子信號在527-OH黃酮8.00，dddd7-OH黃酮8.00，dddd53B-環(huán)質(zhì)子7.3，d6.8，dB-環(huán)質(zhì)子7.3，d6.8，d54C-環(huán)質(zhì)子6.3，sC-環(huán)質(zhì)子6.3，s55黃酮類化合物的生理活性對心血管系統(tǒng)的作用：降低血管脆性及異常的通透性；擴冠；降血脂；抗血栓等?？垢螕p傷抗炎作用抗菌、抗病毒瀉下作用解痙作用止咳、祛痰作用抗癌作為甜味劑使用黃酮類化合物的生理活性對心血管系統(tǒng)的作用：降低血管脆性及異常56小結(jié)黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)與分類。理化性質(zhì)（顏色、溶解性、酸堿性、顯色反應(yīng)）。黃酮類化合物的提取方案，層析行為。UV光譜特征及加入診斷試劑的應(yīng)用。1H-NMR的分析。小結(jié)黃酮類化合物的基本結(jié)構(gòu)與分類。57第九章黃酮類化合物（flavonoids）2010年3月23日~4月6日第九章黃酮類化合物（flavonoids）2010年358前言黃酮類化合物是廣泛分布在自然界的一大類化合物，多數(shù)具有顏色，在植物體內(nèi)一部分與糖結(jié)合成苷類化合物（存在于植物的花、葉、果實等組織），一部分游離存在（存在于木質(zhì)部堅硬組織)。對植物的生長發(fā)育、開花結(jié)果以及抵御異物侵入等方面起著重要作用。前言黃酮類化合物是廣泛分布在自然界的一大類化合物，多數(shù)具有顏59學(xué)習(xí)內(nèi)容（一）黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)與分類(掌握)（二）黃酮類化合物的理化性質(zhì)(掌握)（三）黃酮類化合物的提取分離(掌握)（四）黃酮類化合物的鑒定與結(jié)構(gòu)測定（熟悉）（五）黃酮類化合物的生理活性（了解）學(xué)習(xí)內(nèi)容（一）黃酮類化合物基本結(jié)構(gòu)與分類(掌握)601、基本結(jié)構(gòu)基本母核為2-苯基色原酮類化合物。三個環(huán)編號取代基：OH、OCH3、OCH2O等。取代位置ACB124581’6’1、基本結(jié)構(gòu)基本母核為2-苯基色原酮類化合物。ACB1245612、分類黃酮（醇）類二氫黃酮（醇）類異黃酮類、二氫異黃酮類查耳酮類花色素類、黃烷類橙酮（噢哢）類雙黃酮類區(qū)分要點：雙鍵、B環(huán)連接位置、C環(huán)的完整性與環(huán)上的取代等。分類2、分類黃酮（醇）類區(qū)分要點：雙鍵、B環(huán)連接位置、C環(huán)的完整62黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：完全的母核結(jié)構(gòu)。黃酮醇與黃酮的區(qū)別：3-OH的有無。木犀草素槲皮素分類黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：完全的母核結(jié)構(gòu)。木犀草素槲皮素分類63二氫黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：C2-C3之間無雙鍵。二氫黃酮醇與二氫黃酮的區(qū)別：3-OH的有無。甘草苷杜鵑素分類二氫黃酮（醇）類結(jié)構(gòu)特點：C2-C3之間無雙鍵。甘草苷杜鵑素64異黃酮類、二氫異黃酮類結(jié)構(gòu)特點：B環(huán)連接在C3位。異黃酮和二氫異黃酮的區(qū)別：C2-C3之間雙鍵的有無。大豆素紫檀素分類異黃酮類、二氫異黃酮類結(jié)構(gòu)特點：B環(huán)連接在C3位。大豆素紫檀65查耳酮類結(jié)構(gòu)特點：C環(huán)開環(huán)。注意編號不同。1’2’4’135αβ紅花苷分類查耳酮類結(jié)構(gòu)特點：C環(huán)開環(huán)。1’2’4’135αβ紅花苷分類66花青素類：C環(huán)為苯環(huán)結(jié)構(gòu)，1位氧帶正電荷。兒茶素飛燕草素黃烷類C4無羰基，C2-C3無雙鍵。分類花青素類：C環(huán)為苯環(huán)結(jié)構(gòu)，1位氧帶正電荷。兒茶素飛燕草素黃烷67橙酮（噢哢）類：C環(huán)為五元環(huán)。硫磺菊素雙黃酮類：兩分子黃酮組成。銀杏素分類橙酮（噢哢）類：C環(huán)為五元環(huán)。硫磺菊素雙黃酮類：兩分子黃酮組68理化性質(zhì)一、性狀1、存在狀態(tài)2、旋光性3、顏色二、溶解性（熟悉）1、苷元2、苷三、酸堿性（掌握）四、顯色反應(yīng)（重點掌握）理化性質(zhì)一、性狀69一、性狀1、苷元為結(jié)晶性固體，苷類為無定性粉末。2、苷元除二氫黃酮（醇）類、黃烷（醇）有旋光性外，其它無旋光性；苷類化合物多為左旋性。3、顏色：具明顯顯色，多數(shù)黃色或橙色，與交叉共軛體系有關(guān)。理化性質(zhì)一、性狀1、苷元為結(jié)晶性固體，苷類為無定性粉末。理化性質(zhì)70二、溶解性1、苷元一般難溶或不溶于水，易溶于有機溶劑。2、平面型結(jié)構(gòu)的水溶性小于非平面型結(jié)構(gòu)。3、OH越多，水溶性越強。4、苷類化合物的糖數(shù)越多，水溶性越強。5、3-O-glc苷的水溶性>7-O-glc苷。理化性質(zhì)二、溶解性1、苷元一般難溶或不溶于水，易溶于有機溶劑。理化性71三、酸堿性1、酸性：7，4’-二-OH>7或4’-OH>一般酚羥基>5-OH。（原因？）2、堿性：1-O原子有堿性。理化性質(zhì)濃HClCl-..三、酸堿性1、酸性：7，4’-二-OH>7或4’-OH>一72四、顯色反應(yīng)(一)、還原反應(yīng)(二)、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)(三)、硼酸顯色反應(yīng)（了解)(四)、堿性試劑顯色反應(yīng)（熟悉）理化性質(zhì)顯色反應(yīng)四、顯色反應(yīng)(一)、還原反應(yīng)理化性質(zhì)顯色反應(yīng)73(一）、還原反應(yīng)HCl—Mg粉（Zn)反應(yīng)1、操作：樣品溶于甲醇或乙醇中，加入少許鎂粉（鋅粉）振搖，滴加濃HCl幾滴，觀察顏色（必要時可加熱）。2、結(jié)果：黃酮（醇）、二氫黃酮（醇）--橙紅色~紫紅色。查爾酮、橙酮不顯色。3、干擾組分的排除：花青素、部分查爾酮。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)(一）、還原反應(yīng)HCl—Mg粉（Zn)反應(yīng)理化性質(zhì)顯色反應(yīng)74（一）、還原反應(yīng)NaBH4反應(yīng)（專屬性較高的還原劑）1、操作：樣品溶于乙醇中，加入2%NaBH4乙醇液，稍后加入濃HCl或濃H2SO4數(shù)滴，觀察顏色。2、結(jié)果：二氫黃酮類呈紫色或紫紅色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（一）、還原反應(yīng)NaBH4反應(yīng)（專屬性較高的還原劑）理化性質(zhì)75（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)（ZrOCl2)1、操作：樣品甲醇溶液加入2%ZrOCl2的甲醇溶液，觀察顏色；然后再加入2%的枸櫞酸，再觀察顏色。2、結(jié)果：黃酮類化合物分子中有游離的3或5-OH時生成黃色絡(luò)合物，但5-OH黃酮的絡(luò)合物遇枸櫞酸后顏色會褪去。3、應(yīng)用：鑒別3-OH或5-OH黃酮。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鋯鹽—枸櫞酸顯色反應(yīng)（ZrOC76（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)醋酸鎂（MgAc2)反應(yīng)1、操作：在濾紙上滴加樣品液，噴以醋酸鎂的甲醇液，加熱干燥，觀察結(jié)果。2、結(jié)果：二氫黃酮（醇）類顯藍色熒光。黃酮（醇）和異黃酮顯黃色~橙色~褐色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)醋酸鎂（MgAc2)反應(yīng)理化性77（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)AlCl3顯色反應(yīng)1、操作：樣品的乙醇液滴于濾紙上噴1%的AlCl3乙醇液顯色，在紫外燈下觀察熒光顏色。2、結(jié)果：除4’-OH黃酮醇或7、4’-二OH黃酮醇顯天藍色熒光外，其它顯黃色熒光。3、應(yīng)用：定性定量分析。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)AlCl3顯色反應(yīng)理化性質(zhì)顯色78（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鉛鹽反應(yīng)：1、醋酸鉛只能與分子中具有鄰二酚羥基或兼有3-OH或5-OH結(jié)構(gòu)的化合物作用。2、堿式醋酸鉛的沉淀范圍廣。3、生成黃色~紅色沉淀。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)鉛鹽反應(yīng)：理化性質(zhì)顯色反應(yīng)79（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)氯化鍶（SrCl2)反應(yīng)1、操作：樣品甲醇液中加入3滴0.01mol/L的SrCl2甲醇液，再加入氨氣飽和的甲醇溶液后觀察有無沉淀出現(xiàn)。2、結(jié)果：具有鄰二酚羥基的黃酮類化合物生成綠色~棕色乃至黑色沉淀。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)氯化鍶（SrCl2)反應(yīng)理化性80（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)FeCl3反應(yīng)：多數(shù)黃酮化合物分子結(jié)構(gòu)中有酚羥基，遇FeCl3可產(chǎn)生正反應(yīng)，但一般含有H鍵締合的酚羥基才呈現(xiàn)顯著的顏色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（二）、金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)FeCl3反應(yīng)：理化性質(zhì)顯色反81（三）硼酸顯色反應(yīng)5-OH黃酮或2’-OH查爾酮為正反應(yīng)。在草酸存在下顯黃色并帶有綠色熒光；但在枸櫞酸丙酮存在下只顯黃色而無熒光。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（三）硼酸顯色反應(yīng)5-OH黃酮或2’-OH查爾酮為正反應(yīng)。理82（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑：氨氣、Na2CO3等。1、OH-H+無色橙黃色理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)堿性試劑：氨氣、Na2CO3等。OH83（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)2、黃酮醇在堿性條件下先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣?、黃酮類化合物當(dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或3、4’-二羥基取代時在堿液中不安定，由黃色變成深紅色乃至綠棕色。理化性質(zhì)顯色反應(yīng)（四）、堿性試劑顯色反應(yīng)2、黃酮醇在堿性條件下先呈黃色，通入84黃酮類化合物的提取原則：1、苷和極性較大的苷元一般用極性較大的溶劑提取，如甲醇-水（1：1）或甲醇；一些多糖苷可以用沸水提取。2、苷元一般用極性較小的溶劑提取，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等。3、提取苷時注意破酶。提取與分離黃酮類化合物的提取原則：提取與分離85黃酮類化合物的提取方案1：溶劑提取法。提取與分離藥材粗品醇提浸膏EtOH提取、濃縮乙醚液Et2O提取不溶物BuOH液不溶物n-BuOH提取？？？黃酮類化合物的提取方案1：溶劑提取法。提取與分離藥材粗品醇提86黃酮類化合物的提取方案2：堿溶酸沉淀法1、原理：黃酮類化合物多數(shù)有酚羥基，顯酸性，可溶于堿水中，再加酸后又可沉淀析出。2、常用堿：石灰水、Na2CO3、稀NaOH、堿性稀醇等。提取與分離黃酮類化合物的提取方案2：堿溶酸沉淀法提取與分離87黃酮類化合物的分離方法一、柱色譜1、硅膠色譜法：主要用于分離非平面型黃酮及高度甲基化的黃酮（醇）的分離。2、聚酰胺柱層析法：3、GFC法二、pH梯度萃取法提取與分離黃酮類化合物的分離方法一、柱色譜提取與分離88聚酰胺柱層析法Rf的比較1、2、提取與分離小大大小聚酰胺柱層析法Rf的比較提取與分離小89Rf的比較3、4、提取與分離小大大小Rf的比較3、提取與分離小90Rf的比較5、用含水流動相洗脫時：三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷元用有機溶劑洗脫時：苷元>苷提取與分離Rf的比較5、用含水流動相洗脫時：三糖苷>雙糖苷>單糖苷>苷91GFC法分離苷元時主要是吸附作用，OH越多，吸附越牢，Rf越小。分離苷時主要是分子篩作用，分子越大，Rf越大。提取與分離GFC法分離苷元時主要是吸附作用，OH越多，吸附越牢，Rf越92pH梯度萃取法提取與分離黃酮類化合物5%Na2CO35%NaHCO34%NaOH0.2%NaOH溶于有機溶劑中有機液有機層堿水層？堿水層？有機層堿水層？有機層堿水層？有機層pH梯度萃取法提取與分離黃酮類化合物5%Na2CO35%Na93提取分離實例：蕓香苷的提取提取與分離1、蕓香苷的結(jié)構(gòu)式2、提取思路3、方案確定A、溶劑法B、堿水提取法溶解性：水溶性強酸堿性：有酸性提取分離實例：蕓香苷的提取提取與分離1、蕓香苷的結(jié)構(gòu)式2、提94溶劑法槐米粗粉沸水煎煮30分鐘，兩次。趁熱濾過。藥渣水提液放冷，過濾。濾液沉淀重結(jié)晶，過濾。蕓香苷注意？方法？方法？注意？提取與分離溶劑法槐米粗粉沸水煎煮30分鐘，兩次。趁熱濾過。藥渣水提液放95堿水提取法槐米粗粉6倍量硼砂水液，石灰乳調(diào)PH8~9，煎煮2次。藥渣水提液HCl調(diào)PH3~4，攪拌，析晶，過濾。濾液沉淀重結(jié)晶，過濾。蕓香苷目的？目的？PH可否調(diào)到1~2提取與分離堿水提取法槐米粗粉6倍量硼砂水液，石灰乳調(diào)PH8~9，煎煮296提取分離實例：黃芩苷的提取提取與分離1、黃芩苷的結(jié)構(gòu)式：2、提取思路3、方案確定：堿水提取法4、流程圖書寫提取分離實例：黃芩苷的提取提取與分離1、黃芩苷的結(jié)構(gòu)式：2、97鑒定PC:可采用雙向展開法：第一向展開采用某種醇性溶劑，第二向展開用水或極性較大的溶劑展開。TLC：1、硅膠TLC2、聚酰胺TLC鑒定與結(jié)構(gòu)測定鑒定PC:鑒定與結(jié)構(gòu)測定98結(jié)構(gòu)測定—紫外光譜的應(yīng)用一般程序：1、測定樣品甲醇中的UV光譜；2、測定加入診斷試劑后的UV光譜；3、如樣品為苷類化合物，則先進行水解再測定光譜。鑒定與結(jié)構(gòu)測定結(jié)構(gòu)測定—紫外光譜的應(yīng)用一般程序：鑒定與結(jié)構(gòu)測定99黃酮類化合物在甲醇液中的

UV光譜特征苯甲酰系統(tǒng)產(chǎn)生峰帶Ⅱ（220~280nm）桂皮酰系統(tǒng)產(chǎn)生峰帶Ⅰ（300~400nm）AB黃酮類化合物在甲醇液中的

UV光譜特征苯甲酰系統(tǒng)桂皮酰系統(tǒng)A100黃酮（醇）的UV特征峰Ⅰ300~400nm，峰Ⅱ220~280nm。峰Ⅰ受A環(huán)、B環(huán)影響，氧化程度越高，吸收帶越長移。峰Ⅱ主要受A環(huán)影響，B環(huán)可影響其峰形。200300400(nm)示意圖黃酮（醇）的UV特征峰Ⅰ300~400nm，峰Ⅱ220~28101查爾酮的UV特征峰Ⅰ300~390nm，峰Ⅱ220~270nm。峰Ⅰ有時開裂為Ⅰa（340~390nm）、Ⅰb（300~320nm）。峰Ⅰ受整個母核氧化的影響，尤其2’-OH影響最大。200400(nm)示意圖查爾酮的UV特征峰Ⅰ300~390nm，峰Ⅱ220~270n102異黃酮、二氫黃酮（醇）的UV特征峰Ⅱ為主