中藥制劑檢測技術(shù)第四章雜質(zhì)檢查

第四章中藥制劑的雜質(zhì)檢查技術(shù)

(CheckofForeignMatter)

第一節(jié)概述

一、雜質(zhì)的定義

一般是指無醫(yī)療作用且能影響制劑質(zhì)量的或?qū)θ梭w產(chǎn)生危害作用的物質(zhì)。

二、雜質(zhì)檢查的意義

為了確保中藥制劑的安全性，《中國藥典》2005年版對雜質(zhì)檢查做出重要修訂，收載了原子吸收分光光度法（AAS）、電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICPMS）等先進(jìn)技術(shù)，對重金屬、砷鹽等有害物質(zhì)進(jìn)行檢測；增加了有機(jī)磷類農(nóng)藥、除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留量的檢查項目。三、雜質(zhì)的來源

中藥制劑中的雜質(zhì)主要來源于三個方面：一是由中藥材原料中帶入；二是在生產(chǎn)制備過程中引入；三是貯存過程中受外界條件的影響使中藥制劑的理化性質(zhì)改變而產(chǎn)生的。

四、雜質(zhì)的分類

中藥制劑的雜質(zhì)分為一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)兩類。1.一般雜質(zhì)

指自然界中分布比較廣泛，普遍存在于藥材之中，易在中藥制劑的生產(chǎn)過程中引入的雜質(zhì)。如泥沙（硅酸鹽）、重金屬、砷鹽、有機(jī)氯類農(nóng)藥、甲醇、酸、堿、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽等。它們的檢查方法均在《中國藥典》附錄中加以規(guī)定。2.特殊雜質(zhì)

指在制劑生產(chǎn)和貯存過程中，可能引入或產(chǎn)生的某種（類）特有雜質(zhì)，而非大多數(shù)制劑普遍存在的。這類雜質(zhì)被列入《中國藥典》中有關(guān)品種檢查項下。如，大黃流浸膏中的土大黃苷、阿膠中的揮發(fā)性堿性物質(zhì)和附子理中丸中的烏頭堿等。五、雜質(zhì)的限量檢查

在不影響療效和不產(chǎn)生毒副作用的前提下，允許制劑中的雜質(zhì)在一定限度范圍內(nèi)存在。因此，中國藥典規(guī)定的雜質(zhì)檢查均為限量檢查。

六、雜質(zhì)限量是指藥品中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾（%）或百萬分之幾（ppm）來表示。雜質(zhì)限量公式：雜質(zhì)最大允許量樣品量雜質(zhì)限量％（ppm）=×100%（106)七、雜質(zhì)檢查方法（一）比較分析法（比色法）

即取一定量與被檢雜質(zhì)相同的純物質(zhì)或其他對照品配制成標(biāo)準(zhǔn)溶液，與一定量供試品溶液，在相同實驗條件下，比較反應(yīng)結(jié)果（如顏色深淺），從而確定制劑中雜質(zhì)的含量是否超過規(guī)定的限度。重金屬、砷鹽、烏頭堿等雜質(zhì)檢查即采用該法。由于樣品（S）中所含雜質(zhì)的含量是通過與雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行比較來確定的，雜質(zhì)的最大允許量也就是雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積（V）與其濃度（C）的乘積，因此雜質(zhì)限量（L）可按下式計算：

計算實例（P137）1.阿膠中砷鹽限度的計算2.黃連上清丸重金屬檢查時，所需標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液體積的計算。SV×C×100%（106)L%（ppm）=②準(zhǔn)確測定法

采用重量法、儀器分析法等測定雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量，并與雜質(zhì)限量比較做出判斷?；曳郑嗌常?、農(nóng)殘、鉛等有害元素、甲醇等雜質(zhì)的檢查均采用此法。③靈敏度測定法

該法不用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行對比分析，而是在供試品溶液中加入檢測試劑，在一定條件下，觀察有無反應(yīng)發(fā)生，即以該反應(yīng)的靈敏度來控制雜質(zhì)限量。如肉桂油中重金屬檢查。（P138）第二節(jié)灰分檢查法

（AshTest）

一、意義

灰分檢查主要是控制藥材和中藥制劑中泥沙等雜質(zhì)的含量，對于保證藥品品質(zhì)和潔凈度有著重要意義。1.總灰分

系指樣品經(jīng)高溫?zé)胱?，破壞分解后，剩下的非揮發(fā)性灰燼。較純凈的藥材或制劑，其總灰分主要為生理灰分即藥品本身所含的各種鹽類（例如夏枯草中的鉀鹽，大黃、甘草、紅花中的草酸鈣等，故生理灰分不屬于雜質(zhì)。），以及少量允許存在的外來無機(jī)雜質(zhì)（泥沙等）。在生理灰分相對穩(wěn)定的前提下，藥品具有一定的總灰分含量限度。如果總灰分含量超限，則說明藥品含有過多的泥沙（主含硅酸鹽）等外來雜質(zhì)。二、灰分檢查包括總灰分檢查和酸不溶性灰分檢查。2.酸不溶性性灰分系指總灰分加加鹽酸處理后后，得到的不不溶于鹽酸的的灰分。由于于草酸鈣等生生理灰分可溶溶于稀鹽酸，，而泥沙（主主要為硅酸鹽鹽）等外來無無機(jī)雜質(zhì)難溶溶于稀鹽酸，，因此，對于于那些生理灰灰分含量差異異較大，特別別是在組織中中含草酸鈣較較多的中藥（（例如大黃）），酸不溶性性灰分能更準(zhǔn)準(zhǔn)確反映其中中泥砂等雜質(zhì)質(zhì)的摻雜程度度。三、總灰分測測定法1.測定原原理：供試品在500～600℃高溫?zé)胱谱疲蛊渲杏杏袡C(jī)物全部氧氧化分解成二二氧化碳、水水等逸出，而而無機(jī)成分生生成灰分殘渣渣，根據(jù)殘渣渣重量，即可可計算出供試試品中的總灰灰分的含量。。2.操作方方法供試品粉碎，，過二號篩，，混合均勻，，取供試品2～5g（如需測定酸不不溶性灰分，，可取供試品品3～5g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱稱定重量（準(zhǔn)準(zhǔn)確至0.01g）緩緩熾熱，注注意避免燃燒燒，至完全炭炭化時，逐漸漸升高溫度至至500～600℃，使使完全灰化并并至恒重。根根據(jù)殘渣重量量，計算供試試品中總灰分分的含量（%）。3.注意事事項①測定前，坩堝堝應(yīng)洗凈，干干燥至恒重（（連續(xù)兩次干干燥或熾灼后后的重量差異異在0.3mg以下）。供試試品熾灼后也也要至恒重。。②取供試品品2~3g（3~5g），可用托盤天平平（感量0.1g）；稱定重量（準(zhǔn)準(zhǔn)確至0.01g），應(yīng)使用分析天天平（感量0.001g）。③移動坩堝應(yīng)使使用坩堝鉗，，不得徒手操操作；稱量操操作應(yīng)準(zhǔn)確無無誤，否則影影響測定結(jié)果果。.④對馬福福爐的使用要要嚴(yán)格按操作作規(guī)程操作。。⑤如供試品品不易灰化，，可將坩堝放放冷，加熱水水或10%硝硝酸銨溶液2ml，使殘渣濕潤，，然后置水浴浴上蒸干，殘殘渣照前法熾熾灼，至坩堝堝內(nèi)容物完全全灰化。⑥熾灼操作作時，實驗人人員不得離去去，并注意防防止供試品燃燃燒或引起其其它事故。4.計算總灰分含量（（%）=M1/M×100%M為熾灼前供試試品的重量，，gM1為熾灼后供試試品的重量，，g5.結(jié)果判斷將計算結(jié)果與與藥品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)進(jìn)行比較，低低于或等于限限度的，總灰灰分符合規(guī)定定；高于限度度的，則不符符合規(guī)定。四、酸不溶性性灰分測定法法1.測定原理理供試品在500～600℃高溫?zé)胱谱疲蛊渲杏杏袡C(jī)物完全氧氧化分解逸出出，往殘留灰灰分中加入稀稀鹽酸，溶解解其中的草酸酸鈣等生理灰灰分，濾去酸酸水，得到難難溶性殘渣（（酸不溶性灰灰分），根據(jù)據(jù)殘渣重量，，即可計算出出供試品中酸酸不溶性灰分分的含量。2.操作方法法按上述總灰分分測定法制備備供試品的總總灰分。取所所得的灰分，，在坩堝中加加入稀鹽酸約約10ml，用表面皿覆蓋蓋坩堝，置水水浴上加熱10分鐘，表表面皿用熱水水5ml沖洗，洗液并并入坩堝中，，用無灰濾紙紙濾過，坩堝堝內(nèi)的殘渣用用水洗于濾紙紙上，并洗滌滌至洗液不顯顯氯化物反應(yīng)應(yīng)為止。濾渣渣連同濾紙移移至同一坩堝中，干燥燥，熾灼至恒恒重。根據(jù)殘殘渣重量計算算供試品中酸酸不溶性灰分分的含量（%）。3.注意事項項(同總灰分分測定法)4.計算(同總灰分測測定法)5.結(jié)果判斷(同同總灰分測定定法)五、應(yīng)用實例例（P141）1.阿膠的總總灰分測定2.九味羌活活丸的酸不溶溶性灰分測定定九味羌活丸是是由羌活等九九味中藥制成成的水丸，其其中黃芪、甘甘草和地黃等等多種根類藥藥材，易帶入入泥沙等雜質(zhì)質(zhì)。因此中國國藥典規(guī)定了了酸不溶性灰灰分檢查。第二節(jié)重重金屬檢查法法（HeavyMetalTest）一、重金屬定定義系指在實驗條條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金金屬雜質(zhì)。藥藥品中常見的的重金屬有鉛鉛、汞、砷、、鎘、銅等，，由于鉛較易易帶入藥品中中，且對人體體危害較大，，故進(jìn)行重金金屬檢查時常常以鉛為代表。二、檢查意義義重金屬毒性較較大，易積蓄蓄，可導(dǎo)致機(jī)機(jī)體嚴(yán)嚴(yán)重中毒癥狀狀。為保證藥藥品的安全性性，中國藥典典加強(qiáng)了重金金屬檢查力度度，對某些中中成藥尤其是是含礦物類中中藥的品種，，規(guī)定了重金金屬檢查項目目。例如阿膠的重重金屬限量不不得過30ppm，黃連上清丸的的重金屬限量量不得過25ppm，地奧心血康的的重金屬不得得過20ppm。中國藥典收載載了四種重金金屬檢查法，，即第一法（（硫代乙酰胺法法）、第二法（（熾灼法）、第三法（（硫化鈉法）、第四法（（微孔濾膜法）。★標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液液的制備稱取硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝硝酸5ml與水50ml溶解后，用水水稀釋至刻度度，搖勻，作作為貯備液。。臨用前，精精密量取貯備備液10ml，置100ml量瓶中，加水水稀釋至刻度度，搖勻，即即得（每1ml相當(dāng)于10μg的Pb）。（一）第一法法（硫代乙酰酰胺法）本法適用于供供試品不需有有機(jī)破壞，在在酸性溶液中中顯色的重金金屬限量檢查查。1.測定原理理硫代乙酰胺在在弱酸條件下下水解，產(chǎn)生生硫化氫，可可與供試品中中重金屬離子子生成有色的的金屬硫化物物的均勻混懸懸液，再與一一定量標(biāo)準(zhǔn)鉛鉛溶液經(jīng)同法法處理所呈顏顏色進(jìn)行對照照比較，檢查查藥品中重金金屬是否超限限。三、檢查方法法pH3.5CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2SPb2++H2SPbS(棕黑)↓+2H+2.操作方法法取25ml納氏比色管兩兩支，甲管中中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶溶液一定量與與醋酸鹽緩沖沖液（pH3.5））2ml后，加水或各各藥品項下規(guī)規(guī)定的溶劑稀稀釋成25ml，制得對照品溶溶液。乙管中中加入按各藥藥品項下規(guī)定定的方法制成成的供試品溶溶液25ml；再在甲乙兩管管中分別加硫硫代乙酰胺試試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置置白紙上，自自上向下透視視，比較兩管管顏色深淺。。3.主要注意意事項（P143）（1）若供試試品溶液有顏顏色，可用外外消色法排除除其干擾，即即在甲管中滴滴加少量的稀稀焦糖溶液或或其他無干擾擾的有色溶液液，使之與乙乙管顏色一致致。（稀焦糖糖溶液制備法法見P143）（2）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)應(yīng)在臨用前精精密量取標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)鉛貯備液稀稀釋配制，以以防硝酸鉛水水解而造成誤誤差，配制標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液應(yīng)應(yīng)使用不含鉛鉛的玻璃儀器器。4.結(jié)果判斷斷乙管中顯出的的顏色比甲管管淺或接近，，則重金屬限限量檢查符合合規(guī)定，若乙乙管中顯出的的顏色比甲管管深，則重金金屬限量檢查查不符合規(guī)定定。圖甲管乙乙管甲管乙乙管（二）、第二二法（熾灼法法）本法適用于供試品需有機(jī)機(jī)破壞，在酸酸性溶液中顯顯色的重金屬屬限量檢查。大多數(shù)中成成藥采用此法法檢查重金屬屬。1.測定原理理：供試品先經(jīng)高溫?zé)胱剖褂袡C(jī)物分解解，重金屬被被游離出來。。再與硫代乙乙酰胺水解產(chǎn)產(chǎn)生的硫化氫氫生成有色金金屬硫化物的的均勻混懸液液，與一定量量標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液液經(jīng)同法處理理所呈顏色進(jìn)進(jìn)行比較，從從而判斷供試試品中重金屬屬是否超限。。2.操作方法法（1）供試品品溶液的制備備取供試品一定定量，緩緩熾熾灼至完全炭炭化，放冷，，加硫酸0.5～1.0ml，使恰濕潤，用用低溫加熱至至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化化氮蒸氣除盡盡后，放冷，，在500～～600℃熾熾灼使完全灰灰化，放冷，，加鹽酸2ml，置水浴上蒸干干后加水15ml，滴加氨試液至至對酚酞指示示液顯中性，，再加醋酸鹽鹽緩沖液（pH3.5））2ml，微熱溶解后，，移置納氏比比色管（乙管管）中，加水水稀釋成25ml，即得。（2）對照品品溶液的制備備取配制供試品品溶液的試劑劑，置瓷皿中中蒸干后，加加醋酸鹽緩沖沖液（pH3.5））2ml與水15ml，微熱溶解后，，移置納氏比比色管（甲管管）中，加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一一定量，再用用水稀釋成25ml，即得。（3）檢查法法在甲乙兩管中中分別加硫代代乙酰胺試液液各2ml，搖勻，放置2分鐘，同置置白紙上，自自上向下透視視，乙管中顯顯出顏色與甲甲管比較，不不得更深。3.注意事項項（1）熾灼樣樣品還可采用用熾灼殘渣檢查查法（附錄ⅨJ）規(guī)定的方法。。（2）灼燒樣樣品時，溫度度必須控制在在500～600℃。加入硫酸和和硝酸可促使使有機(jī)物完全全分解,且加加熱使二者揮揮盡，否則影影響測定。（3）制備對對照品溶液時時，取配制供供試品溶液的的試劑，是指指等量吸取配配制供試品溶溶液時所用的的硫酸、硝酸酸、鹽酸和氨氨試液等試劑劑。目的在于于消除這些試劑劑可能夾帶的的重金屬對測測定的干擾。。（4）其他注注意事項見第第一法（硫代代乙酰胺法））4.結(jié)果判斷斷乙管中顯出的的顏色比甲管管淺或接近，，則重金屬限限量檢查符合合規(guī)定，若乙乙管中顯出的的顏色比甲管管深，則重金金屬限量檢查查不符合規(guī)定定。(三)第三三法（（硫化化鈉法法）本法適適用于于能溶于堿堿而不不溶于于稀酸酸（或在在稀酸酸中即即生成成沉淀淀）的的藥品品中的的重金金屬限限量檢檢查。。1.測測定原原理：在堿性性條件件下，，某些些重金金屬的的溶解解度增增大，，滴加加硫化化鈉試試液，，可與與重金金屬離離子生生成有有色硫硫化物物的均均勻混混懸液液，與與一定定量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛鉛溶液液經(jīng)同同法處處理所所呈顏顏色進(jìn)進(jìn)行對對比，，檢查查供試試品中中重金金屬是是否超超限。。Pb2++Na2S→→PbS↓↓+2Na+2.操操作方方法取供試試品適適量，，加氫氫氧化化鈉試試液5ml與水20ml溶解后后，置置納氏氏比色色管中中，加加硫化化鈉試試液5滴，，搖勻勻，與與一定定量的的標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)鉛溶溶液同同樣處處理后后的顏顏色比比較，，不得得更深深。3.結(jié)結(jié)果果判斷斷乙管中中顯出出的顏顏色比比甲管管淺或或接近近，則則重金金屬限限量檢檢查符符合規(guī)規(guī)定，，若乙乙管中中顯出出的顏顏色比比甲管管深，，則重重金屬屬限量量檢查查不符符合規(guī)規(guī)定(四)、第第四法法（微微孔濾濾膜法法）本法適適用于于溶液液顏色色較深深或重重金屬屬限量量較低低的品品種。。1.測測定原原理：：用微孔孔濾膜膜過濾濾，使使重金金屬硫硫化物物沉淀淀富集集成色色斑，，通過過供試試品斑斑點與與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)鉛斑斑的色色澤比比較，，檢查查供試試品中中重金金屬是是否超超限。。2.操操作方方法（1））標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)鉛斑斑的制制備精密量量取標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛鉛溶液液一定定量，，置小小燒杯杯中，，用水水或各各藥品品項下下規(guī)定定的溶溶劑稀稀釋成成10ml，，加入醋醋酸鹽鹽緩沖沖液（（pH3.5）2ml與硫代代乙酰酰胺試試液1.0ml，，搖勻，，放置置10分種種，用用50ml注射器器轉(zhuǎn)移移至微微孔濾濾膜裝裝置（（濾器器)中進(jìn)行行壓濾濾(濾濾速約約為每每分鐘鐘1ml)，濾畢，，取下下濾膜膜，放放在濾濾紙上上干燥燥，即即得。。A為濾器器上蓋蓋部分分，入入口處處應(yīng)能能與50ml注射器器緊密密連接接；B為連接接頭；；C主墊圈圈（外外徑10mm，，內(nèi)徑6mm））；D為濾膜膜，直直徑10mm，，孔徑3.0μm，，用前經(jīng)經(jīng)在水水中浸浸泡24小小時以以上；；E為尼龍龍墊網(wǎng)網(wǎng)（孔孔徑不不限）），直直徑10mm；；F為濾器器下部部，出出口處處套上上一合合適橡橡皮管管。（2））檢查查法取按各各藥品品項下下規(guī)定定方法法制成成的供供試品品溶液液10ml，，加入醋醋酸鹽鹽緩沖沖液（（pH3.5）2ml與硫代代乙酰酰胺試試液1.0ml，，搖勻，，放置置10分種種，用用50ml注射器器轉(zhuǎn)移移至濾濾器中中進(jìn)行行壓濾濾(濾濾速約約為每每分鐘鐘1ml)，濾畢，，取下下濾膜膜，放放在濾濾紙上上干燥燥。將將生成成的供供試品品斑點點與標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛鉛斑比比較，，不得得更深深。3.注注意事事項（1））若供供試溶溶液有有顏色色或渾渾濁，，應(yīng)用用濾膜膜進(jìn)行行預(yù)濾，如濾濾膜上上有污污染，，即換換濾膜膜再濾濾，直直至濾濾膜不不再染染色；；然后后取濾濾液10ml，，按規(guī)定定加入入的醋醋酸鹽鹽緩沖沖液和和硫代代乙酰酰胺試試液反反應(yīng)顯顯色，，移至至濾器器中進(jìn)進(jìn)行壓壓濾，，制成成供試試品斑斑點。。（2））壓濾濾時，，應(yīng)讓讓注射射器內(nèi)內(nèi)管自自然下下降，，產(chǎn)生生的壓壓力比比較均均勻，，使過過濾速速度達(dá)達(dá)到每每分鐘鐘1ml左右；；對于于較黏黏稠的的樣品品溶液液，可可施加加一均勻壓壓力使達(dá)到到該速速度，，以保保證色色斑色色調(diào)的的均勻勻性。。濾過過時如如濾器器中存存在氣氣泡則則會影影響色色斑質(zhì)質(zhì)量，，故在在安裝裝輔助助濾板板、濾濾膜和和墊圈圈時應(yīng)應(yīng)以水水排除氣氣泡。4.結(jié)結(jié)果判判斷供試品品斑點點顏色色比標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛鉛斑的的顏色色淺或或接近近，則則重金金屬檢檢查符符合規(guī)規(guī)定；；供試試品生生斑點點顏色色比標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)鉛鉛斑的的顏色色深，，則重重金屬屬檢查查不符符合規(guī)規(guī)定。。四、應(yīng)用實實例（P148））（一））冰片片中重重金屬屬檢查查冰片大大多為為人工工合成成品，，故又又稱合合成龍龍腦。。在制制備過過程中中可能能引入入重金金屬，，因此此中國國藥典典規(guī)定定采用用第一一法對對其重重金屬屬進(jìn)行行檢查查。.（二））地奧奧心血血康中中重金金屬檢檢查地奧心心血康康的原原料藥藥為薯薯蕷科科植物物黃山山藥、、穿山山龍薯薯蕷的的根莖莖提取取物，，為淺淺黃色色或淺淺棕黃黃色粉粉末。。生產(chǎn)產(chǎn)中可可能引引入重重金屬屬，中中國藥藥典規(guī)規(guī)定采采用第二法法檢查重重金屬屬。第三節(jié)節(jié)砷砷鹽鹽檢查查法（ArsenicTest））一、定定義砷鹽檢檢查法法系指指用于于藥品品中微微量砷砷鹽（（以As計算））的限量檢檢查方法。。二、意意義中藥中中殘存存的三價砷砷鹽毒性極極強(qiáng)，，可引引起嚴(yán)嚴(yán)重的的中毒毒癥，，危害害生命命安全全。故故《中中國藥藥典》》對某某些中中藥制制劑規(guī)規(guī)定了了砷鹽鹽限量量檢查查項目目，以以保證證用藥藥安全全。如阿膠中砷砷鹽含量不不得過3ppm，黃連上清丸丸中砷鹽含含量不得過過2ppm。三、操作方方法《中國藥典典》收載了了兩種砷鹽鹽檢查法，，即第一法法（古蔡氏氏法）、第第二法（二二乙基二硫硫代氨基甲甲酸銀法））?！鴺?biāo)準(zhǔn)砷溶液液的制備稱取三氧化二砷砷0.132g，置1000ml量瓶中，加加20%氫氫氧化鈉溶溶液5ml溶解后，用用適量的稀稀硫酸中和和，再加稀稀硫酸10ml，用水稀釋至至刻度，搖搖勻，作為為貯備液。。臨用前，，精密量取取貯備液10ml，置1000ml量瓶中，加加稀硫酸10ml，用水稀釋至至刻度，搖搖勻，即得得（每1ml相當(dāng)于1μg的As）。（一）*第第一法（古古蔡氏法））1.測定原原理：本法系采用用鋅和酸作用所產(chǎn)生生的初生態(tài)氫與供試品中中微量砷鹽鹽（AsO33-）反應(yīng)生成揮揮發(fā)性砷化氫（AsH3），再與溴化汞試紙紙（HgBr2）作用生成成黃色至棕棕色砷斑。比較供試試品與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷溶液在在同一條件件下所顯的的砷斑的顏顏色深淺，，從而檢查查藥品中砷砷鹽是否超超限。AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2OAsH3+2HgBr2→2HBr+AsH（HgBr）2（黃色）AsH3+3HgBr2→3HBr+As（（HgBr）3（棕色）2.古蔡氏氏法測砷裝裝置（P151圖）A.錐形瓶B.磨口塞（中中有一孔））C.導(dǎo)氣管（裝裝入醋酸鉛鉛棉花60mg）D.有機(jī)玻璃旋旋塞E.有機(jī)玻璃樣品標(biāo)準(zhǔn)砷溶液液還原反應(yīng)(25-40℃)AsH3↑砷斑標(biāo)準(zhǔn)砷溶液樣品醋酸鉛棉花花溴化汞試紙紙H2S↑3.測定方方法（1）供試試品砷斑的的制備①樣品的有有機(jī)破壞中成藥一般般需先行有有機(jī)破壞再再測砷。破壞方法有有堿破壞法法、酸破壞壞法及直接接炭化法等等，以氫氧氧化鈣堿破破壞法較為為常用。取取一定量的的供試品，，加入等量量的無砷氫氫氧化鈣混混勻后，加加水濕潤，，烘干，在在小火上小小心熾灼（（注意不使使內(nèi)容物濺濺出）至煙煙霧除盡，，移入高溫溫爐中在500～600℃熾熾灼至灰化化。同時作作空白，留留做標(biāo)準(zhǔn)砷砷斑用。②供試品砷砷斑的制備備將有機(jī)破壞壞所得灰分分（殘渣））放冷，移移入A瓶，按各品品種項下規(guī)規(guī)定，加入入一定量鹽鹽酸和水溶溶解，再加碘化鉀鉀試液5ml與酸性氯化化亞錫試液液5滴，在在室溫放置置10分鐘鐘后，另鋅鋅粒2g，立即將導(dǎo)氣氣管C密塞于A瓶上，并將將A瓶置25～40℃水浴中，反應(yīng)45分分鐘，取出溴化化汞試紙，，即得。（2）標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷斑的制制備將上述空白白灰分用鹽鹽酸溶液(5ml鹽酸+21ml水)溶解并并移入A瓶中，再精精密加入標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)砷溶液液2ml，照供試品砷砷斑的制備備，自“再再加碘化鉀鉀試液5ml”起，依法操操作，即得得。4.結(jié)果判判斷供試品砷斑斑顏色比標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏顏色淺或接接近，則砷砷鹽限量檢檢查符合規(guī)規(guī)定；若供供試品砷斑斑顏色比標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)砷斑顏顏色深，則則砷鹽限量量檢查不符符合規(guī)定。。5.主要注注意事項（1）砷斑斑易退色，，故供試品品砷斑和標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)砷斑應(yīng)應(yīng)平行制備備，并迅速速比色。（2）鋅粒粒大小影響響反應(yīng)速度度，其直直徑以2mm左右（過一一號篩）為為宜。（3）氯化化亞錫與碘碘化鉀的存存在，可促促使砷化氫氫生成反應(yīng)應(yīng)定量完成成。（4）醋酸酸鉛棉花主主要是吸收收除去H2S等干擾性雜雜質(zhì)。應(yīng)按按規(guī)定填充充且不易易填充得太太緊。H2S+Pb（CH3COO）2PbS+2CH3COOH（5）溴化化汞試紙宜宜用質(zhì)量較較好、組織織疏松的中中速定量濾濾紙新鮮制制備。（二）第二二法（二乙基二硫硫代氨基甲甲酸銀法Ag-DDC法）本法可避免免目測誤差差，靈敏度度高，顯色色穩(wěn)定，重重現(xiàn)性好。。1.測定原原理利用金屬鋅鋅與酸作用用產(chǎn)生新生態(tài)氫，與藥品中中的微量亞亞砷酸鹽反反應(yīng)生成具具有揮發(fā)性性的砷化氫氫，用Ag-DDC試液吸收，，使Ag-DDC還原生成紅色膠態(tài)銀銀，與同條件件下一定量量標(biāo)準(zhǔn)砷溶溶液所產(chǎn)生生的紅色膠膠態(tài)銀在510nm處測吸收度度，進(jìn)行比較較，以判定定砷鹽的含含量是否限限量。反應(yīng)式2.Ag-DDC法測測砷砷裝裝置置3.測測定定方方法法（1））標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷砷對對照照液液的的制制備備：：精密密量量取取標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷砷溶溶液液5ml，，置A瓶中中，，加加鹽鹽酸酸5ml與水水21ml，，再加加碘碘化化鉀鉀試試液液5ml與酸酸性性氯氯化化亞亞錫錫試試液液5滴滴，，在在室室溫溫放放置置10分分鐘鐘后后，，加加鋅鋅粒粒2g，，立即即將將導(dǎo)導(dǎo)氣氣管管C與A瓶密密塞塞，，使使生生成成的的砷砷化化氫氫氣氣體體導(dǎo)導(dǎo)入入已已精精密密加加入入5mlAg-DDC試液液的的D管中中，，并并將將A瓶置置25～～40℃℃水水浴浴中中反反應(yīng)應(yīng)45分分鐘鐘，，取取出出D管，，添添加加氯氯仿仿至至刻刻度度，，混混勻勻，，即即得得。。（2））檢檢查查法法：：取照照各各藥藥品品項項下下規(guī)規(guī)定定方方法法制制成成的的供供試試液液，，置置A瓶中中，，照照標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷砷對對照照液液的的制制備備，，自自““再再加加碘碘化化鉀鉀試試液液5ml””起，，依依法法操操作作。。將將所所得得溶溶液液與與標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷砷對對照照液液同同置置白白色色背背景景上上，，從從D管上上方方向向下下觀觀察察、、比比較較，，所得得溶溶液液的的顏顏色色不不得得比比標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷砷對對照照液液更更深深。必必要要時時，，可可將將所所得得溶溶液液轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移移至至1cm吸收收池池中中，，用用適適宜宜的的分分光光光光度度計計或或比比色色計計在在510nm波長長處以以Ag-DDC試液液作作空空白白，，測測定定吸吸收收度度，，與與標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)砷砷對對照照液液按按同同法法測測得得的的吸吸收收度度比比較較，，不不得得更更大大。。4.注注意意事事項項（（P154））（1）反反應(yīng)應(yīng)的的溫溫度度和和時時間間本法法在在25～40℃℃水浴浴中中反反應(yīng)應(yīng)45分鐘鐘為為宜宜。。在在此此溫溫度度下下，，有有部部分分氯氯仿仿?lián)]揮發(fā)發(fā)損損失失，，故故在在比比色色前前應(yīng)應(yīng)添添加加氯氯仿仿至至5.00ml，搖勻后再再進(jìn)行比色色測定。二二乙基二硫硫代氨基甲甲酸銀試液液在配制后后兩周內(nèi)穩(wěn)穩(wěn)定，因該該試液呈淺淺黃綠色，，應(yīng)考慮背背景補(bǔ)償，，測吸收度度時要用此此試液作空空白。（2）醋酸鉛棉棉花取脫脂棉，，浸入醋酸酸鉛試液與與水的等溶溶混合液中中，濕透后后，擠壓除除去過多的的溶液，并并使疏松，，在100℃以下溫度干干燥后，置置玻璃塞瓶瓶中，在干干燥處保存存。5.應(yīng)用實例（1）黃連連上清丸中中的砷鹽檢檢查本品含有礦礦物藥石