藥理學(xué)實驗課(經(jīng)典實用)

藥理學(xué)實驗課

實驗課程簡介實驗課程安排共18學(xué)時（1）實驗基本技能（2）嗎啡鎮(zhèn)痛實驗（5）藥物對家兔尿量的影響（6）傳出神經(jīng)藥物對家兔血壓的影響（4）藥物對家兔離體腸平滑肌的作用（3）藥物抗炎實驗藥理學(xué)實驗課實驗課程學(xué)習(xí)要求實驗前實驗中實驗后1.預(yù)習(xí)實驗指導(dǎo)，明確實驗?zāi)康暮鸵螅浞至私鈱嶒灧椒?/p>

2.進入實驗室，必須穿白大衣.3.檢查實驗器材

1.根據(jù)實驗內(nèi)容進行小組內(nèi)分工2.嚴格、準(zhǔn)確地按照指導(dǎo)中的實驗方法進行實驗操作。3.仔細、真實的記錄實驗結(jié)果。1.死亡動物放在指定地點；存活動物放入籠內(nèi)。2.將器材洗凈擦干，放回原處3.每小組輪流負責(zé)搞好實驗室內(nèi)衛(wèi)生。藥理學(xué)實驗課實驗課程學(xué)習(xí)目的DBCA鞏固藥理學(xué)基本理論學(xué)習(xí)基本的實驗方法培養(yǎng)實事求是的學(xué)習(xí)作風(fēng)培養(yǎng)動手能力、科研能力藥理學(xué)實驗課基本實驗操作不同給藥途徑的藥物對小鼠睡眠時間的影響藥理學(xué)實驗一、藥理學(xué)實驗課實驗?zāi)康模?）掌握小鼠給藥的基本方法。2）比較不同給藥途徑藥物起效的時間快慢。實驗原理：不同的給藥途徑的藥物起效時間不相同。1實驗?zāi)康募霸硭幚韺W(xué)實驗課實驗動物：小鼠實驗藥物：1%戊巴比妥鈉2主要實驗材料藥理學(xué)實驗課3稱重、分組腹腔給藥皮

下

給

藥灌胃給藥（0.1ml/10g）小鼠翻正反射消失時翻正反射再次恢復(fù)時間主要實驗過程藥理學(xué)實驗課1小鼠基本捉拿、固定方法

2小鼠基本給藥方法實驗基本技能藥理學(xué)實驗課右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚，無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。如圖-1。單手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、無名指和手掌壓住尾根部，再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠雙耳及頭部皮膚而固定。如圖-2。圖1圖2注意事項：小鼠固定方法藥理學(xué)實驗課注意事項：1.取背部及后腿皮下，注射時用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚，右手持注射器將針頭刺入，固定后即進行注射。

皮下注射藥理學(xué)實驗課注意事項：

1、針頭刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破內(nèi)臟。針頭與腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。

2、使用針頭不宜太粗，避免藥液注射后從注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。

腹腔注射藥理學(xué)實驗課注意事項：1.用左手拇指和食指抓住鼠兩耳和頭部皮膚，其他三指抓住背部皮膚，將鼠抓持在手掌內(nèi)，固定好動物，頭部和頸部保持很平,右手取注射器進行灌胃。

2.灌時針頭沿鼠口角通過食管進入胃內(nèi)。灌時如很通暢，則表示針頭已進入胃內(nèi)；如動物有嘔吐動物或強烈掙扎，必須拔出后按上述方法重新操作。決不可進針不順硬向里插。

灌胃給藥藥理學(xué)實驗課（1）注意基本給藥途徑的正確操作。（2）注意小鼠翻正反射消失時間判定（＞1min）。（3）客觀真實的記錄實驗數(shù)據(jù)。4實驗注意事項藥理學(xué)實驗課影響藥物起效的因素有哪些？請分析本次實驗中，那些因素可影響實驗結(jié)果。？仔細觀察記錄實驗結(jié)果，結(jié)合藥理學(xué)總論知識思考，何種給藥途徑起效最快。為什么？問題與思考藥理學(xué)實驗課嗎啡鎮(zhèn)痛實驗藥理學(xué)實驗二、藥理學(xué)實驗課實驗?zāi)康模孩僬莆真?zhèn)痛藥的實驗方法。（熱板法、扭體法）②觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用。實驗原理：熱刺激或者化學(xué)刺激物使小鼠產(chǎn)生疼痛反應(yīng)，觀察給藥前后小鼠疼痛反應(yīng)的變化。（痛閾值、扭體次數(shù)）1實驗?zāi)康募霸硭幚韺W(xué)實驗課實驗動物：小鼠（雌性）實驗藥物：0.4%嗎啡

主要儀器：熱板測痛儀（RB-200智能熱板儀）2主要實驗材料藥理學(xué)實驗課3

設(shè)定儀器溫度（55℃）動物初篩給藥組：0.4%嗎啡0.1ml/10g給藥組：生理鹽水0.1ml/10g腹腔注射

給藥后30min、45min、60min再次測定各組小鼠痛閾值。主要實驗過程（熱板法）藥理學(xué)實驗課篩選指標(biāo)：小鼠的痛閾值——即小鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)的時間。

以小鼠添后足作為出現(xiàn)疼痛觀察指標(biāo)。

測定2次痛閾值，以痛閾值大于5秒，小于30秒，做為篩選合格動物。

小鼠篩選方法：藥理學(xué)實驗課動物隨即分組給藥組：0.4%嗎啡0.1ml/10g腹腔注射

30min后各組小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）；記錄15min內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù)。對照組：生理鹽水0.1ml/10g3小鼠扭體反應(yīng)主要實驗過程（扭體法）藥理學(xué)實驗課熱板儀溫度設(shè)定：55℃±0.5℃。室溫:以15～20oC為宜。熱板法中動物性別的選擇：雌性。痛閾值判定指標(biāo)：添后足。痛閾值時間：初篩（＞5s、＜30s）。超過60s動物未添足，將動物取出，痛閾值以60s計算。實驗中保持小鼠足底及熱板內(nèi)干燥。冰醋酸現(xiàn)用現(xiàn)配。4實驗注意事項藥理學(xué)實驗課兩種鎮(zhèn)痛模型的區(qū)別？嗎啡藥理學(xué)作用、機制？？問題與思考藥理學(xué)實驗課藥理學(xué)實驗

抗炎實驗三、藥理學(xué)實驗課1.1實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)利用化學(xué)藥物或者雞蛋清制急性炎癥動物模型方法。觀察糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。1.2實驗原理：化學(xué)刺激物或者蛋清，可致動物急性炎癥，出現(xiàn)局部腫脹。比較給予藥物前后動物局部腫脹程度的變化從而觀察到藥物的抗炎作用。1實驗?zāi)康募霸硭幚韺W(xué)實驗課實驗動物：小鼠、大鼠（雄性）實驗藥物：氫化可的松主要儀器（PV-200足趾腫脹測定儀）

2主要實驗材料藥理學(xué)實驗課

動物稱重、分組踝關(guān)節(jié)的突起點標(biāo)記，作為測量標(biāo)志（見后圖）給藥組：氫化可的松溶液1ml/100g

體重對照組：生理鹽水1ml/100g

體重腹腔注射

30min，從右后足掌心向掌跖關(guān)節(jié)方向進針，皮下注射新鮮蛋清0.1ml。(見后圖)注射蛋清后30min、60min、90min，測量右后足的體積，3實驗主要步驟（大鼠足腫脹）藥理學(xué)實驗課皮下注射新鮮蛋清大鼠足外踝標(biāo)記實驗照片藥理學(xué)實驗課小鼠稱重、標(biāo)記、分組給藥組：氫化可的松0.1ml/10g腹腔注射

30min后用二甲苯50μl均勻涂抹每只鼠的右耳

對照組：生理鹽水0.1ml/10g3

90mim后小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。主要實驗步驟（小鼠耳腫脹）藥理學(xué)實驗課抗炎實驗中動物性別的選擇：雄性。測定大鼠足體積時，選定統(tǒng)一測量位置（大鼠足外踝關(guān)節(jié)突起）。小鼠耳廓滴加二甲苯時，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內(nèi)。小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。4實驗注意事項藥理學(xué)實驗課炎癥的表現(xiàn)以及炎癥的類型有哪些？？本實驗中選擇雄性動物的原因？問題與思考藥理學(xué)實驗課常見炎癥模型介紹1非特異性炎癥模型：急性大鼠足腫脹小鼠耳腫脹白細胞游走法2非特異性炎癥模型：慢性棉球植入法大鼠巴豆氣囊法3免疫性炎癥弗氏完全佐劑致炎法藥理學(xué)實驗課藥理學(xué)實驗

藥物對家兔離體腸平滑肌的作用四、藥理學(xué)實驗課1.1實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)離體平滑肌器官的實驗方法。觀察擬膽堿藥和抗膽堿藥對離體家兔腸平滑肌的作用。1.2實驗原理：乙酰膽堿通過激動M受體興奮胃腸平滑??；阿托平可阻斷M受體；氯化鋇直接興奮胃腸平滑肌。1實驗?zāi)康募霸硭幚韺W(xué)實驗課2主要實驗材料實驗動物：家兔實驗藥物：乙酰膽堿溶液（1:10萬）、0.1%硫酸阿托品溶液、1%氯化鋇溶液主要儀器：離體平滑肌槽、生物機能系統(tǒng)藥理學(xué)實驗課3①離體腸肌的制備取回腸置冷臺氏液中制備離體腸肌家兔處死實驗主要步驟1藥理學(xué)實驗課3②安裝離體實驗裝置在浴槽（大試管）中，加入臺氏液至標(biāo)線處，加熱，維持水溫38°C±0.5°C。實驗主要步驟2藥理學(xué)實驗課3③安裝離體實驗裝置取回腸，固定于平滑肌槽內(nèi)調(diào)整懸掛絲線松勁程度調(diào)節(jié)通氣閥每秒鐘1-2個氣泡點擊桌面中BL-420圖標(biāo)，進入主菜單實驗主要步驟3藥理學(xué)實驗課實驗主要步驟4正常曲線乙酰膽堿阿托品乙酰膽堿1.腸管穩(wěn)定10分鐘，記錄一段正?；顒忧€。2.加入1:10萬乙酰膽堿溶0.2ml，記錄其收縮幅度3.收縮到最高點時，立即加入0.1%硫酸阿托0.1ml。觀察結(jié)果。4.平滑肌收縮穩(wěn)定后，再加入1:10萬乙酰膽堿溶液，相比較，觀察結(jié)果有何不同。3④添加藥液藥理學(xué)實驗課實驗主要步驟5Bacl2乙酰膽堿加入1%氯化鋇溶液1ml待作用至最高點時，加入0.1%硫酸阿托品溶液0.1ml，再次觀察結(jié)果。3④添加藥液藥理學(xué)實驗課沖洗和分離腸管時動作應(yīng)輕柔，盡量避免牽拉腸管。腸管穿線時，對角線穿過腸壁，只需穿過一層腸壁。臺氏液應(yīng)保持在38±0.5°C，換液時，臺氏液亦應(yīng)38±0.5°C。加藥時不要把藥液直接加到回腸上，以免影響結(jié)果。浴溫和腸肌的張力均可影響實驗結(jié)果，應(yīng)注意調(diào)節(jié)。4實驗注意事項藥理學(xué)實驗課阿托品是否對于乙酰膽堿和氯化鋇均有拮抗作用？？實驗中能影響離體腸肌收縮活性的必要條件有哪些？問題與思考藥理學(xué)實驗課藥理學(xué)實驗四、藥物的利尿作用藥理學(xué)實驗課1.1實驗?zāi)康模?/p>

學(xué)習(xí)學(xué)習(xí)利尿的實驗方法.

觀察利尿藥對尿量的影響。1.2實驗原理：呋噻米屬高效利尿藥，通過抑制髓袢升枝粗段對氯化鈉的重吸收而達到利尿作用。1實驗?zāi)康募霸硭幚韺W(xué)實驗課2主要實驗材料實驗動物：雄性家兔，體重2—3kg

實驗藥物：3%戊巴比妥鈉、1%呋噻米、主要儀器：燒杯、膀胱漏斗、10ml量筒。

藥理學(xué)實驗課1、取家兔1只，稱重，清水灌胃30ml/kg

3實驗主要步驟1藥理學(xué)實驗課2、30min后，用3%戊巴比妥鈉1ml/kg經(jīng)耳緣靜脈注射麻醉實驗主要步驟2藥理學(xué)實驗課3、家兔背位固定于兔臺上。恥骨聯(lián)合前正中切開腹部皮膚4～6cm，暴露膀胱。

實驗主要步驟3藥理學(xué)實驗課4、分離輸尿管，結(jié)扎尿道內(nèi)口。在膀胱游離部作荷包縫合，然后剪開小口插入膀胱漏斗并固定。

實驗主要步驟4藥理學(xué)實驗課5、記錄10分鐘正常尿量；耳緣靜脈注入呋噻米0.5ml/kg，觀察并記錄各藥給藥后10min尿液滴數(shù)及尿量。

實驗主要步驟5藥理學(xué)實驗課家兔麻醉過程中，控制麻醉藥推注速度，密切觀察實驗過程中家兔情況。手術(shù)過程中，動作輕柔，以免損傷膀胱。準(zhǔn)確找到輸尿管，注意輸尿管的生理比鄰位置。4實驗注意事項藥理學(xué)實驗課？呋塞米強大利尿作用的原因是什么？尿液生成的正常過程？問題與思考藥理學(xué)實驗課藥理學(xué)實驗傳出神經(jīng)系統(tǒng)藥物對家兔動脈血壓的影響五、藥理學(xué)實驗課1.1實驗?zāi)康模簩W(xué)習(xí)麻醉動物急性血壓實驗的方法。觀察傳出神經(jīng)藥物對動物血壓的影響。1.2實驗原理：鹽酸腎上腺素溶液、酚妥拉明溶液等藥物能與心肌或者血管平滑肌上的相應(yīng)受體結(jié)合，從而影響家兔的血壓。1實驗?zāi)康募霸硭幚韺W(xué)實驗課2主要實驗材料1

實驗動物：家兔實驗藥物：3%戊巴比妥鈉溶液、0.001%腎上腺素溶液、0.001%去甲腎上腺素溶液、0.001%異丙腎上腺素溶液、酚妥拉明（1%溶液）

、普萘洛爾（0.01%溶液）、乙酰膽堿（0.001%溶液）、阿托品（0.01%溶液）.藥理學(xué)實驗課2主要實驗材料2主要儀器：壓力換能器、BL-420生物機能實驗系統(tǒng)、手術(shù)刀、手術(shù)剪、止血鉗、氣管插管、動脈插管、動脈夾、頭皮靜脈注射針頭等。藥理學(xué)實驗課3①麻醉與手術(shù)稱重、麻醉、固定腹腔注射3%戊巴比妥鈉1ml/kg耳緣靜脈，建立靜脈輸液通道頸正中切口，分離氣管；插入氣管插管實驗主要步驟１藥理學(xué)實驗課實驗照片分離氣管氣管插管藥理學(xué)實驗課3①麻醉與手術(shù)分離得到頸總動脈頸總動脈插管氣管一側(cè)的頸動脈鞘內(nèi)分離頸總動脈，進行頸總動脈插管

實驗主要步驟２藥理學(xué)實驗課3②連接實驗儀器連接壓力換能器后，打開電腦，點擊桌面上的BL-420圖標(biāo)，進入血壓實驗系統(tǒng)。

實驗主要步驟３藥理學(xué)實驗課異丙腎上腺素（0.1ml/kg）普萘洛爾（0.2ml/kg）異丙腎上腺素（0.1ml/kg）腎上腺素（0.1ml/kg）去甲腎上腺素（0.1ml/kg）酚妥拉明（0.1ml/kg)

腎上腺素（0.1ml/kg）乙酰膽堿（0.1ml/kg）阿托品（0.1ml/kg）乙酰膽堿（0.1ml/kg）