中國胃癌HER2檢測-指南解讀-鄭杰課件

中國胃癌HER2檢測指南解讀

（2011版）概述本指南推薦IHC與FISH和（或）DSISH相結(jié)合的檢測策略胃癌有必要進(jìn)行準(zhǔn)確的HER2檢測

HER2狀態(tài)檢測首先選用免疫組織化學(xué)法（IHC）

IHC3+的病例視為HER2陽性

IHC2+的病例建議進(jìn)一步行原位雜交（ISH：FISH和或DSISH）檢測，IHC2+/ISH+的病例視為HER2陽性

IHC1+和IHC0病例，IHC2+/ISH-病例視為HER2陰性

胃癌HER2檢測應(yīng)在有能力的實驗室進(jìn)行

檢測質(zhì)量取決于標(biāo)本的采集、處理過程、IHC/ISH檢測方法和評判標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)行問題一1.請問您所在的醫(yī)院胃癌HER2檢測是否屬于常規(guī)檢測項目？是否不清楚問題三請您對多學(xué)科合作對胃癌HER2檢測的重要性打分（0-5重要性逐漸遞增），請按投票器選擇012345胃癌HER2檢測切片脫水包埋固定HER2檢測的相關(guān)流程切片檢測判讀標(biāo)本收取問題四貴單位胃癌手術(shù)標(biāo)本送到病理科處理的時間？A30分鐘內(nèi)B1小時內(nèi)C2小時內(nèi)D>2小時E不清楚

標(biāo)本類型原發(fā)病灶的手術(shù)切除標(biāo)本原發(fā)病灶的胃鏡活檢標(biāo)本建議取6-8塊，以獲得足夠的樣本組織，多點活檢對準(zhǔn)確的檢測有必要切除標(biāo)本離體后20–30分鐘內(nèi)進(jìn)行標(biāo)記、切開、固定等初步處理后，及時送病理科活檢標(biāo)本的大小≥2x2x2mm3原發(fā)灶活檢組織、手術(shù)切除組織皆有的病例，建議使用手術(shù)切除組織進(jìn)行檢測標(biāo)本采集標(biāo)本固定采用新鮮配制10%中性緩沖福爾馬林作為固定液固定液的量應(yīng)為組織的10倍手術(shù)切除標(biāo)本的固定時間為8–48h(至少1h/mm組織)活檢標(biāo)本的固定時間不超過24h(至少1h/mm組織)不宜使用其它固定液，非10%中性緩沖福爾馬林制劑可能會妨礙IHC和ISH檢測的可靠性不宜用微波快速固定組織規(guī)范的標(biāo)本固定是HER2檢測質(zhì)量的保障；保存良好的組織形態(tài)，防止細(xì)胞內(nèi)蛋白和核酸的丟失標(biāo)本準(zhǔn)備固定較差示例：乳腺癌HER2IHC檢測固定較差會導(dǎo)致染色結(jié)果的異質(zhì)性胞質(zhì)染色可能是由固定較差導(dǎo)致圖片由WHanna提供固定較差示例：胃癌HER2

IHC檢測固定不完全會導(dǎo)致假陽性檢查結(jié)果胞質(zhì)染色可能由于使用了不恰當(dāng)?shù)墓潭ǚ绞綀D片由TargosMolecularPathology.提供固定較差示例：HER2ISH檢測圖片由Abbott/Vysis.提供固定不完全-SISH，“空核”固定不完全導(dǎo)致探針信號較弱或缺失過度染色會導(dǎo)致持續(xù)性自發(fā)熒光探針信號可能較弱或缺失HER2檢測HER2過表達(dá)的檢測HER2擴(kuò)增的檢測免疫組織化學(xué)染色方法（IHC）自動化

原位雜交方法（ISH）

FISHDualSISH實驗室總體要求應(yīng)當(dāng)在有條件的實驗室進(jìn)行，擁有試驗所需的儀器和設(shè)備及空間條件

實驗室掌握包括標(biāo)本的制備、抗體的選擇、抗原修復(fù)方法及其它相關(guān)技術(shù)；探針的選擇、檢測預(yù)處理方法及其它相關(guān)技術(shù)

實驗室經(jīng)過嚴(yán)格的內(nèi)部和外部質(zhì)量控制程序驗證，建立完善的實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作流程（SOP）

實驗室技術(shù)員具備相關(guān)資質(zhì)及經(jīng)過合格培訓(xùn)結(jié)果判讀和分析普通光學(xué)顯微鏡熒光顯微鏡病理醫(yī)生需要經(jīng)過培訓(xùn)

IHC評分標(biāo)準(zhǔn)和乳腺癌有所不同樣本：活檢組織和切除組織有所不同觀察：高異質(zhì)性需要全面觀察所有腫瘤組織溝通：結(jié)果不確定時需要與腫瘤科醫(yī)生溝通IHC判讀標(biāo)準(zhǔn)

（參照ToGA經(jīng)驗，所有圖片來自SCC）0無反應(yīng)或腫瘤細(xì)胞膜染色<10%

1+≥10%腫瘤細(xì)胞微弱或隱約膜染色，細(xì)胞膜僅部分區(qū)域著色2+

≥10%腫瘤細(xì)胞弱到中度的完全或細(xì)胞基底部和兩側(cè)邊膜染色3+

≥10%腫瘤細(xì)胞完全性或基底部和兩側(cè)邊膜強(qiáng)染色（對3+的病例同時表明百分率，注明是否有異質(zhì)性）IHC結(jié)果判讀時應(yīng)注意：細(xì)胞質(zhì)著色應(yīng)忽略不計，正常胃黏膜上皮細(xì)胞不應(yīng)著色

HER2檢測-IHCFISH，HER2紅色信號增多，局部呈簇狀，CEP17信號1-2個，比值7.2，有擴(kuò)增（100×）

FISH，HER2和CEP17信號各1-2個，比值1.65，無擴(kuò)增（100×）

FISH：嚴(yán)格按照試劑盒標(biāo)準(zhǔn)程序執(zhí)行HER2檢測-FISH圖片來自SCCDSISHHER2黑色信號擴(kuò)增，呈簇狀；CEP17紅色信號1-2個；比值15，有擴(kuò)增(100×)

DSISHHER2和CEP17信號各1-2個，比值<0.8，無擴(kuò)增(100×)

DSISH：實驗室應(yīng)先進(jìn)行嚴(yán)格的對比試驗和程序優(yōu)化

嚴(yán)格按照所用全自動染色儀器的優(yōu)化程序和SOP執(zhí)行HER2檢測-DSISH圖片來自SCC檢測報告內(nèi)容胃癌HER2IHC/ISH檢測報告臨床信息：姓名

性別

年齡

門診／住院號

送檢醫(yī)師

聯(lián)系方式

檢測日期

年

月

日標(biāo)本信息：病理號/蠟塊號

標(biāo)本類型：手術(shù)切除□活檢□腫瘤部位：胃食道交界處□胃底□胃體□胃竇□幽門管□轉(zhuǎn)移灶□標(biāo)本固定液種類（10％中性緩沖福爾馬林）是□ 否□標(biāo)本離體至固定時間(如有記錄)

分鐘標(biāo)本固定的時間(如有記錄)

分鐘組織學(xué)類型/分級

Laurén分型

臨床分期TNMHER2IHC檢測報告檢測信息：抗體信息(克隆號／生產(chǎn)商)

檢測方法 手工/半自動□ 全自動□對照設(shè)置情況3+□0□樣本量是否足夠用于評估 是□ 否□具有膜著色的腫瘤細(xì)胞的百分比

%著色的異質(zhì)性 有□ 無□腫瘤細(xì)胞膜染色模式完整□基底和側(cè)膜（U-shaped)□兩者皆有□判讀結(jié)果：

0□ l+□ 2+□3+□ 無法判讀□結(jié)論：陽性□；不確定□；陰性□；無法判讀□檢測人員：技術(shù)員

病理醫(yī)師

HER2ISH檢測報告

檢測信息：探針信息(生產(chǎn)商/商品號)

檢測方法

對照設(shè)置情況陽性對照□陰性對照□樣本量是否足夠用于評估 是□ 否□IHC檢測結(jié)果 0□ l+□2+□ 3+□ 無法判讀□判讀結(jié)果：

用于評估的腫瘤細(xì)胞數(shù)量

HER2信號總數(shù)／CEPl7信號總數(shù)

HER2信號數(shù)平均值／細(xì)胞核

CEPl7信號數(shù)平均值／細(xì)胞核

17號染色體是否為多體 是□ 否□結(jié)論： 陽性(擴(kuò)增)□ 陰性(無擴(kuò)增)□ 無法判讀□檢測人員： 技術(shù)員病理醫(yī)生

實驗室質(zhì)量控制

（2）實驗室內(nèi)、外部質(zhì)量控制和SOP的主要要求如下準(zhǔn)備開展GCHER2檢測的實驗室應(yīng)選擇1～2家已較好開展該項檢測的實驗進(jìn)行25～100例標(biāo)本的對比驗證或通過參加有關(guān)外部質(zhì)量控制活動來實現(xiàn)，外部質(zhì)控陽性和陰性結(jié)果的一致性應(yīng)達(dá)到90％以上，每年應(yīng)進(jìn)行1～2次從事GCHER2檢測的實驗室技術(shù)人員和病理醫(yī)師應(yīng)進(jìn)行必要的培訓(xùn)和資格考核實驗室質(zhì)量控制

（3）實驗室應(yīng)建立完善的SOP，并做好每次檢測情況的記錄和存檔工作任何改變操作程序和試劑的行為均應(yīng)重新進(jìn)行嚴(yán)格的驗證內(nèi)部質(zhì)控應(yīng)包括同一組織不同批次染色結(jié)果的重復(fù)性分析，每次染色陽性、陰性對照的設(shè)置，如有可能還應(yīng)沒置包括低表達(dá)／低擴(kuò)增對照檢測相關(guān)的儀器和設(shè)備需定期維護(hù)、校驗類似乳腺癌亮視野檢測方法有優(yōu)勢Her2檢測流程樣本收集鏡下觀察異質(zhì)性高需要觀察整張切片檢測所需時間胃癌進(jìn)展快，宜及時獲得結(jié)果多學(xué)科參與結(jié)果判讀與乳腺癌有所不同胃癌HER2檢測：基本過程和特殊性數(shù)量、質(zhì)量合適的含有腫瘤組織的活檢標(biāo)本

具有代表性的手術(shù)切除標(biāo)本多學(xué)科協(xié)作共同努力醫(yī)生和技術(shù)員

知識更新和觀念改變患者和醫(yī)生多學(xué)科協(xié)作檢測HER2：臨床醫(yī)生之角色采樣手術(shù)和胃鏡活檢（6-8塊組織）固定10%中性緩沖福爾馬林樣本送檢（離體時間）30分鐘結(jié)果解讀

HER2+

IHC01+2+3+

HER2陽性多學(xué)科協(xié)作檢測HER2：病理醫(yī)生之角色WolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–145.檢測結(jié)果分析檢查備檢標(biāo)本是否可用正確設(shè)立內(nèi)部對照組依照國際評分系統(tǒng)進(jìn)行評分檢測結(jié)果報告使用標(biāo)準(zhǔn)化HER2檢測結(jié)果報告表報告內(nèi)容應(yīng)包括標(biāo)本取樣，固定，檢測方法及評分系統(tǒng)多學(xué)科檢測治療小組(MDT)會議學(xué)科協(xié)作檢測HER2：技術(shù)員之角色處理:

避免影響檢測結(jié)果之因素--最佳固定時間及固定方法--石蠟包埋--組織切片的合理時間

(最好于HER2檢測前切片)--標(biāo)本脫蠟方法:

使用標(biāo)準(zhǔn)化/經(jīng)驗證之檢測步驟--IHC--ISHFISH

DualSISHWolffAC,etal.JClinOncol2007;25:118–1