動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷規(guī)范化工作程序

李春

四川省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心2011年10月動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷規(guī)范化程序

及獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室考核準(zhǔn)備工作

第一部分、動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷規(guī)范化程序監(jiān)測(cè)任務(wù)制定樣品采集與送檢實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)樣品流轉(zhuǎn)檢測(cè)記錄檢測(cè)報(bào)告統(tǒng)計(jì)分析一、監(jiān)測(cè)任務(wù)的制定國(guó)家、省、市、縣逐級(jí)制定監(jiān)測(cè)計(jì)劃并組織實(shí)施《2011年四川省動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)計(jì)劃》《2011年四川省口蹄疫等主要?jiǎng)游镆卟×餍胁W(xué)調(diào)查方案》監(jiān)測(cè)原則——“五結(jié)合”省級(jí)監(jiān)測(cè)與地方監(jiān)測(cè)相結(jié)合定點(diǎn)監(jiān)測(cè)與全面監(jiān)測(cè)相結(jié)合日常監(jiān)測(cè)與集中監(jiān)測(cè)相結(jié)合抗體監(jiān)測(cè)與病原學(xué)監(jiān)測(cè)相結(jié)合疫病監(jiān)測(cè)與流行病學(xué)調(diào)查相結(jié)合監(jiān)測(cè)模式——“四定”模式定點(diǎn)、定期、定量、定性二、樣品采集與送檢動(dòng)物疫病采樣技術(shù)規(guī)范DB51/T949—2009動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)采樣方法

NY/T541-2002采樣原則：適時(shí)、典型、無(wú)菌、適量和生物統(tǒng)計(jì)根據(jù)不同的檢測(cè)要求采集不同樣品（血液、組織器官、內(nèi)容物、分泌物、排泄物或其他材料）無(wú)法估計(jì)病因時(shí)，可進(jìn)行系統(tǒng)全面的樣品采集進(jìn)行流調(diào)、抗體監(jiān)測(cè)、健康評(píng)估或環(huán)境衛(wèi)生檢測(cè)時(shí)，樣品數(shù)量應(yīng)滿(mǎn)足生物統(tǒng)計(jì)學(xué)的要求死亡畜禽，采集樣品夏天不得超過(guò)6h，冬天不超過(guò)24h疑似炭疽，禁止解剖；一般采耳靜脈或割耳尖

2.1樣品的采集2.1.1血樣的采集根據(jù)動(dòng)物種類(lèi)確定采血部位。選用真空管、無(wú)菌注射器、無(wú)菌采血瓶、毛細(xì)管的采血，采血量須滿(mǎn)足試驗(yàn)需要若需抗凝血，則視實(shí)驗(yàn)要求選擇抗凝劑。如需血清，則待血凝固后無(wú)菌分離血清并分裝于滅菌瓶（管）中。3.8%檸檬酸鈉溶10%EDTA溶液0.1%肝素鈉動(dòng)物采血部位動(dòng)物采血部位豬耳靜脈、前腔靜脈雞翅靜脈、心臟牛耳靜脈、頸靜脈、尾靜脈鴨鵝翅靜脈、腳蹼靜脈、心臟羊耳靜脈、頸靜脈兔耳靜脈、心臟2.1樣品的采集2.1.2家禽咽喉、泄殖腔拭子采集棉簽插入后捻轉(zhuǎn)2-3圈，兩個(gè)拭子一并置入盛0.8mL左右的生理鹽水或0.01MPBS（含雙抗）的1.5mLEP管中。其它動(dòng)物拭子采集類(lèi)似。2.1.3實(shí)質(zhì)臟器的采集肺臟、肝臟、脾臟、扁桃體、淋巴結(jié)、脊髓。無(wú)菌采集臟器組織塊放入無(wú)菌容器內(nèi)。每塊組織應(yīng)單獨(dú)放在無(wú)菌容器中，注明采樣動(dòng)物名稱(chēng)、日期、組織。注意防止組織間互相污染。2.1樣品的采集

2.1.4其它樣品采集

皮膚、奶樣、精液、胚胎、腸內(nèi)容物、糞樣、尿液、腦、脊髓等

2.1.5注意事項(xiàng)個(gè)人防護(hù)（炭疽等人畜共患?。┎蓸雍蟮臒o(wú)害化處理畜禽及其產(chǎn)品無(wú)害化處理采樣廢棄物無(wú)害化處理環(huán)境消毒采樣器械消毒樣品外包裝消毒2.2樣品包裝

液體：離心管封口瓶有形病料：塑料自封袋，大袋套小袋，分病例包裝《高致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范》

2.3樣品標(biāo)識(shí)管上、瓶上、袋上都要標(biāo)識(shí)清楚，用防脫色記號(hào)筆樣品編號(hào)要與“采樣單”對(duì)應(yīng)，惟一性、可追溯性采樣單一式三份（被采樣單位、采樣/送檢單位、檢測(cè)單位）采樣單記錄內(nèi)容包括：動(dòng)物場(chǎng)（廠(chǎng)）地址、動(dòng)物種類(lèi)、群體規(guī)模、發(fā)病日期、臨床癥狀、治療用藥、樣品編號(hào)、采樣人、采樣日期等。

2.4樣品保存抗凝血：4-8℃冷藏，不超過(guò)1w。血清：短時(shí)間可4-8℃冷藏冷藏，否則須-20℃以下保存病毒檢測(cè)樣品：短時(shí)間可冷藏，否則須-20℃以下保存，無(wú)條件的可置滅菌50%甘油-PBS液中冷藏，不宜反復(fù)凍融。細(xì)菌檢測(cè)病料：冷藏，不宜冷凍，可置滅菌液體石蠟或30%甘油-PBS液/鹽水中冷藏。動(dòng)物疫病檢測(cè)測(cè)用樣品一般般存放條件樣品名稱(chēng)檢測(cè)項(xiàng)目貯存溫度保存時(shí)間其它事項(xiàng)血清血清學(xué)檢測(cè)4℃5天血清解凍時(shí)，先放4℃冰箱解凍，再放室溫。禁止反復(fù)凍融-20℃以下三個(gè)月奶樣品血清學(xué)檢測(cè)4℃5天細(xì)菌學(xué)檢測(cè)4℃5天病毒學(xué)檢測(cè)24h內(nèi)送檢分泌物、排泄物細(xì)菌學(xué)檢測(cè)4℃5天病毒學(xué)檢測(cè)4℃盡快送檢糞便鼻咽拭子細(xì)菌學(xué)檢測(cè)4℃5天病毒學(xué)檢測(cè)-30℃以下24h內(nèi)送檢加含抗生素PBS病毒保存液組織樣品病理組織學(xué)4℃或室溫放入10％福爾馬林溶液中固定細(xì)菌學(xué)檢測(cè)4℃或0℃以下5天病毒學(xué)檢測(cè)-30℃以下-70℃以下24h內(nèi)送檢-70℃下可長(zhǎng)期保存可加30～50％甘油生理鹽水或PBS病毒保存液2.6樣品送檢2.6.1樣品運(yùn)輸密封、無(wú)泄漏漏、冷藏保存存運(yùn)輸，2.6.2樣品送檢“送檢單”或“委托檢測(cè)測(cè)書(shū)”一式兩兩份（送檢單單位、檢測(cè)單單位）要有詳細(xì)的““采樣單”《高致病性動(dòng)物物病原微生物物菌（毒）種種或者樣本運(yùn)運(yùn)輸包裝規(guī)范范》三、實(shí)驗(yàn)室檢檢測(cè)檢測(cè)記錄檢測(cè)操作任務(wù)下達(dá)收樣檢測(cè)報(bào)告三、實(shí)驗(yàn)室檢檢測(cè)3.1.1樣品的接收按送檢方出具具的“抽樣登登記表”或““檢測(cè)委托書(shū)書(shū)”等送檢憑憑證檢查樣品品狀態(tài)，清點(diǎn)點(diǎn)數(shù)量，核實(shí)實(shí)無(wú)誤后，辦辦理接收手續(xù)續(xù),填寫(xiě)“送檢樣樣品登記表””3.1.2樣品的編號(hào)、、登記樣品包裝外貼貼XX-XXX編號(hào)，并注明明樣品類(lèi)別、、樣品數(shù)、要要求檢測(cè)項(xiàng)目目的總標(biāo)簽；；該樣品編號(hào)號(hào)作為唯一性性標(biāo)識(shí)，直至至檢測(cè)工作結(jié)結(jié)束。3.1樣品流轉(zhuǎn)3.1樣品流轉(zhuǎn)3.1.3樣品的發(fā)放按程序要求填填寫(xiě)檢測(cè)任務(wù)務(wù)書(shū)，送相應(yīng)應(yīng)檢測(cè)室檢測(cè)測(cè)主檢人員領(lǐng)取取樣品，進(jìn)行行樣品交接簽簽字，再次對(duì)對(duì)樣品進(jìn)行核核實(shí)凡委托檢測(cè)或或仲裁檢測(cè)樣樣品應(yīng)有備份份3.1樣品流轉(zhuǎn)3.1.4樣品的檢測(cè)檢測(cè)方法選擇擇：1.國(guó)家或行業(yè)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的技技術(shù)方法2.行業(yè)主管部門(mén)門(mén)規(guī)定的技術(shù)術(shù)方法3.國(guó)際通用的技技術(shù)方法4.經(jīng)確認(rèn)可靠并并經(jīng)用戶(hù)認(rèn)可可的新研究方方法5.有標(biāo)準(zhǔn)或合格格證書(shū)的診斷斷試劑3.1樣品流轉(zhuǎn)3.1.5樣品的保管應(yīng)根據(jù)不同樣樣品的生物學(xué)學(xué)特性及檢測(cè)測(cè)項(xiàng)目要求，，對(duì)樣品妥善善保管。待檢樣品、在在檢樣品、己己檢樣品的存存放應(yīng)有明確確標(biāo)識(shí)。樣品出入庫(kù)清清楚，帳物相相符。3.1.6檢測(cè)后樣品的的處理檢測(cè)室完成檢檢測(cè)工作后，，將已檢樣品品放回樣品保保管室保存。。檢完樣品的保保存期為三個(gè)個(gè)月。超過(guò)保存期的的樣品，由實(shí)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人人批準(zhǔn)后作無(wú)無(wú)害化處理。。3.1樣品流轉(zhuǎn)3.2檢測(cè)記錄使用的實(shí)驗(yàn)室室記錄要求規(guī)規(guī)范統(tǒng)一，符符合質(zhì)量管理理要求原始記錄所包包含的信息要要求完整，內(nèi)內(nèi)容真實(shí)實(shí)施檢測(cè)、校校核二級(jí)簽字字審核制度3.3檢測(cè)報(bào)告檢測(cè)報(bào)告應(yīng)供供盡可能祥實(shí)實(shí)的信息(1)樣品名稱(chēng)、數(shù)數(shù)量；(2)樣品惟一性標(biāo)標(biāo)識(shí)；(3)樣品送檢時(shí)間間及來(lái)源；(4)檢測(cè)方法和依依據(jù)；(5)出具報(bào)告獸醫(yī)醫(yī)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)識(shí)識(shí)；(6)出具報(bào)告日期期和時(shí)間；(7)出具報(bào)告單位位、地址、電電話(huà)；(8)清晰準(zhǔn)確的檢檢測(cè)結(jié)果或結(jié)結(jié)論；(9)編制人、審核核人、批準(zhǔn)人人簽字3.3檢測(cè)報(bào)告及時(shí)出具檢測(cè)測(cè)報(bào)告報(bào)告要準(zhǔn)確、、客觀(guān)格式要規(guī)范符合質(zhì)量管理理要求3.3檢測(cè)報(bào)告嚴(yán)格實(shí)施批準(zhǔn)準(zhǔn)人、審核人人、制表人三三級(jí)審核制度度檢測(cè)結(jié)論要加加蓋檢驗(yàn)專(zhuān)用用印章，并騎騎縫加蓋檢驗(yàn)驗(yàn)專(zhuān)用章四、統(tǒng)計(jì)分析析檢測(cè)數(shù)據(jù)的統(tǒng)統(tǒng)計(jì)分析從所收集的眾眾多檢測(cè)數(shù)據(jù)據(jù)中，選擇合合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)學(xué)指標(biāo)，采用用相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)計(jì)分析方法，，從中得出有有價(jià)值的結(jié)論論。分析方法：主要包括：描描述性分析、、趨勢(shì)性分析析、干預(yù)性分分析、統(tǒng)計(jì)推推斷分析四、統(tǒng)計(jì)分析析結(jié)果上報(bào)及時(shí)性：周周報(bào)、月報(bào)準(zhǔn)確性：按標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)核實(shí)、真真實(shí)報(bào)送信息息適用性：針對(duì)對(duì)不同對(duì)象提提供不同的信信息全面性：提供供適用、詳盡盡的信息上報(bào)原則四、統(tǒng)計(jì)分析析上報(bào)的形式1.報(bào)表：月報(bào)、、季報(bào)、半年年報(bào)、年報(bào)2.專(zhuān)題報(bào)告：3.簡(jiǎn)報(bào)、通信、、專(zhuān)刊（輯））4.會(huì)議交流5.咨詢(xún)通過(guò)“全國(guó)動(dòng)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)測(cè)與疫情信息息系統(tǒng)”月報(bào)報(bào)四、統(tǒng)計(jì)分析析存在的問(wèn)題監(jiān)測(cè)結(jié)果和疫疫情信息上報(bào)報(bào)不及時(shí)存在瞞報(bào)和漏漏報(bào)等現(xiàn)象檢測(cè)測(cè)方方法法和和試試劑劑不不統(tǒng)統(tǒng)一一，，上上報(bào)報(bào)監(jiān)監(jiān)測(cè)測(cè)結(jié)結(jié)果果的的準(zhǔn)準(zhǔn)確確性性差差異異大大監(jiān)測(cè)測(cè)結(jié)結(jié)果果統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)分分析析不不夠夠，，未未能能實(shí)實(shí)際際指指導(dǎo)導(dǎo)防防疫疫工工作作。。建立立有有效效地地機(jī)機(jī)制制有有利利于于監(jiān)監(jiān)測(cè)測(cè)工工作作的的推推進(jìn)進(jìn)將監(jiān)監(jiān)測(cè)測(cè)工工作作開(kāi)開(kāi)展展的的真真實(shí)實(shí)性性、、及及時(shí)時(shí)性性以以及及監(jiān)監(jiān)測(cè)測(cè)工工作作的的質(zhì)質(zhì)量量納納入入目目標(biāo)標(biāo)考考核核加強(qiáng)強(qiáng)技技術(shù)術(shù)培培訓(xùn)訓(xùn)、、規(guī)規(guī)范范檢檢測(cè)測(cè)程程序序第二二部部分分、、獸獸醫(yī)醫(yī)系系統(tǒng)統(tǒng)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室考考核核準(zhǔn)準(zhǔn)備備工工作作四川川省省獸獸醫(yī)醫(yī)系系統(tǒng)統(tǒng)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室考考核核工工作作實(shí)實(shí)施施方方案案（川川畜畜食食函函【2010】】128號(hào)））省畜畜牧牧食食品品局局負(fù)負(fù)責(zé)責(zé)全全省省各各市市（（州州））級(jí)級(jí)和和縣縣（（市市、、區(qū)區(qū)））級(jí)級(jí)獸獸醫(yī)醫(yī)系系統(tǒng)統(tǒng)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室的的考考核核工工作作省動(dòng)動(dòng)物物疫疫病病預(yù)預(yù)防防控控制制中中心心具具體體承承擔(dān)擔(dān)考考核核工工作作指導(dǎo)導(dǎo)思思想想：：以以考考促促建建、、規(guī)規(guī)范范管管理理、、提提升升能能力力一、、考考核核工工作作目目標(biāo)標(biāo)實(shí)現(xiàn)現(xiàn)獸獸醫(yī)醫(yī)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室科學(xué)學(xué)化化建建設(shè)設(shè)制度度化化管管理理規(guī)范范化化運(yùn)運(yùn)行行安全全化化操操作作工作目標(biāo)分級(jí)級(jí)實(shí)實(shí)施施、、全全面面推推進(jìn)進(jìn)原則則上上在在2011年底底前前通通過(guò)過(guò)考考核核、、延延期期考考核核需需提提交交申申請(qǐng)請(qǐng)。。二、、考考核核準(zhǔn)準(zhǔn)備備工工作作對(duì)照照考考核核細(xì)細(xì)則則和和建建設(shè)設(shè)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)完善善設(shè)設(shè)施施條條件件制定定管管理理制制度度加強(qiáng)強(qiáng)人人員員培培訓(xùn)訓(xùn)規(guī)范范檢檢測(cè)測(cè)活活動(dòng)動(dòng)準(zhǔn)備備申申請(qǐng)請(qǐng)考考核核材材料料各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室三、、考考核核的的主主要要內(nèi)內(nèi)容容實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室設(shè)設(shè)施施1儀器器設(shè)設(shè)備備2工作作人人員員3實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室管管理理4檢測(cè)測(cè)工工作作5檔案案管管理理6現(xiàn)場(chǎng)場(chǎng)檢檢測(cè)測(cè)操操作作7共現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)場(chǎng)考考核核84項(xiàng)市級(jí)級(jí)關(guān)關(guān)鍵鍵項(xiàng)項(xiàng)25個(gè)縣級(jí)級(jí)關(guān)關(guān)鍵鍵項(xiàng)項(xiàng)22個(gè)四、、現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)場(chǎng)考考核核易易出出現(xiàn)現(xiàn)的的不不符符合合項(xiàng)項(xiàng)4.1實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室設(shè)設(shè)施施功能能室室的的設(shè)設(shè)置置和和布布局局（（7+2）功能能分分區(qū)區(qū)和和儀儀器器擺擺放放重要要實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室設(shè)設(shè)洗洗眼眼設(shè)設(shè)施施、、自自動(dòng)動(dòng)水水開(kāi)開(kāi)關(guān)關(guān)、、空空調(diào)調(diào)門(mén)窗窗密密封封、、有有效效防防蚊蚊蠅蠅和和老老鼠鼠警示示標(biāo)標(biāo)識(shí)識(shí)常用用警警示示標(biāo)標(biāo)識(shí)識(shí)緊急急疏疏散散標(biāo)標(biāo)志志實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室入入口口處處貴重重精精密密儀儀器器有毒毒有有害害物物品品高溫溫高高速速設(shè)設(shè)備備菌毒毒種種保保存存處處標(biāo)識(shí)識(shí)注意意安安全全4.2儀器器設(shè)設(shè)備備生物物安安全全柜柜（（不不能能用用超超凈凈工工作作臺(tái)臺(tái)））、、通通風(fēng)風(fēng)櫥櫥、、移移動(dòng)動(dòng)紫紫外外燈燈（（23+10）重要要儀儀器器設(shè)設(shè)備備專(zhuān)專(zhuān)人人管管理理（（文文件件任任命命））有的的儀儀器器處處于于工工作作狀狀態(tài)態(tài)重要要儀儀器器有有使使用用記記錄錄4.3工作作人人員員專(zhuān)業(yè)業(yè)技技術(shù)術(shù)人人員員比比例例80%培訓(xùn)訓(xùn)計(jì)計(jì)劃劃和和內(nèi)內(nèi)容容完完整整、、有有檔檔案案記記錄錄制定實(shí)驗(yàn)室所有人員培訓(xùn)計(jì)劃制定運(yùn)輸和清潔員等人員培訓(xùn)計(jì)劃嚴(yán)格執(zhí)行培訓(xùn)計(jì)劃包括對(duì)新員工的指導(dǎo)培訓(xùn)計(jì)劃包括對(duì)有經(jīng)驗(yàn)員工的周期性再培訓(xùn)培訓(xùn)計(jì)劃主要內(nèi)容4.4實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室管管理理質(zhì)量量管管理理體體系系要要簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單，，易易嚴(yán)嚴(yán)格格遵遵照照?qǐng)?zhí)執(zhí)行行專(zhuān)人人進(jìn)進(jìn)行行標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)查查新新和和查查新新記記錄錄專(zhuān)人人進(jìn)進(jìn)行行劇劇毒毒、、危危險(xiǎn)險(xiǎn)物物品品和和器器材材等等管管理理，，并并要要采采取取監(jiān)監(jiān)督督措措施施（（雙雙人人雙雙鎖鎖等等））對(duì)實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)廢廢棄棄物物無(wú)無(wú)害害化化處處理理要要有有關(guān)關(guān)證證明明記記錄錄所有有需需要要專(zhuān)專(zhuān)人人管管理理的的都都需需要要文文件件任任命命4.5檢測(cè)測(cè)工工作作樣品品編編號(hào)號(hào)要要規(guī)規(guī)范范（（沒(méi)沒(méi)有有做做到到唯唯一一性性標(biāo)標(biāo)識(shí)識(shí)））對(duì)樣樣品品的的流流向向及及檢檢驗(yàn)驗(yàn)進(jìn)進(jìn)度度要要進(jìn)進(jìn)行行有有效效監(jiān)監(jiān)控控原始始記記錄錄信信息息要要完完整整，，記記錄錄規(guī)規(guī)范范原始始記記要要實(shí)實(shí)施施檢檢測(cè)測(cè)、、校校核核二二級(jí)級(jí)簽簽字字審審核核制制度度檢測(cè)測(cè)報(bào)報(bào)告告要要嚴(yán)嚴(yán)格格實(shí)實(shí)施施批批準(zhǔn)準(zhǔn)人人、、審審核核人人、、制制表表人人三三級(jí)級(jí)審審