流感病毒臨床標(biāo)本的采集方法運(yùn)輸保存鄭課件

概述流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織概述流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，1一、采樣對象和時(shí)間采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物）、人禽流感待查病例

流感樣病例:發(fā)熱（體溫≥38℃），伴咳嗽或咽痛之一者，而缺乏其它的實(shí)驗(yàn)室確定診斷依據(jù)采集時(shí)間：病人發(fā)病后的頭三天一、采樣對象和時(shí)間采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物2二、采樣液要求常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有毒性），PH7.4-7.6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液采樣液應(yīng)包含有一定量的蛋白質(zhì)和抗菌素標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐械蜏乇４娑?、采樣液要求常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有3Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基4

抗生素名稱終濃度慶大霉素0.1mg/ml抗真菌素2Ug/ml采樣液抗生素含量抗生素名稱終濃度慶大霉素0.1mg/ml抗真菌素2Ug5三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：咽拭子鼻拭子漱口液鼻咽吸取物鼻洗液三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：61、咽拭子

用滅菌棉簽（最好用塑料柄、尼龍拭子，因?yàn)槟绢^柄棉拭子會抑制PCR實(shí)驗(yàn)）擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去1、咽拭子7鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求上清液可直接接種或低溫保存對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月然后，用平皿或燒杯收集洗液操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有毒性），PH7.九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)六、臨床標(biāo)本的處理原則標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐械蜏乇４娑鄶?shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織采咽拭子的器材和容器鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。采咽拭子的器材和容器82、鼻拭子

將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去2、鼻拭子9采鼻拭子的器材和容器采鼻拭子的器材和容器10標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物）、人禽流感待查病例上清液可直接接種或低溫保存用10ml生理鹽水漱喉。6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾辛⑴R床標(biāo)本的處理原則收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次八、臨床標(biāo)本的的處理原則操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。人禽流感標(biāo)本的運(yùn)送、接收和保藏應(yīng)當(dāng)符合我國《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國務(wù)院424號令）的有關(guān)要求。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基

3、鼻咽吸取物

用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次

標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法3、鼻咽吸取11內(nèi)有HEPA膜進(jìn)風(fēng)道鼻咽吸取裝置出風(fēng)道內(nèi)有HEPA膜進(jìn)風(fēng)道鼻咽吸取裝置出風(fēng)道12吸取過程正確錯(cuò)誤錯(cuò)誤不要觸摸病人的臉!吸取過程正確錯(cuò)誤錯(cuò)誤不要觸摸病人的臉!134、漱口液用10ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。然后，用平皿或燒杯收集洗液4、漱口液145、鼻洗液

患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過程洗兩側(cè)鼻孔5、鼻洗液15四、標(biāo)本收集注意事項(xiàng)操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)采集標(biāo)本要有一定力度標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾袠?biāo)本管上寫明：醫(yī)院名稱，標(biāo)本號，患者姓名，性別，采樣日期標(biāo)本采集后盡量在24小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離。24小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行病毒分離的標(biāo)本應(yīng)放-70℃或以下四、標(biāo)本收集注意事項(xiàng)操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自16新鮮的臨床采集標(biāo)本應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存凍存的臨床采集標(biāo)本應(yīng)在凍存的條件下，低溫送至實(shí)驗(yàn)室五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求新鮮的臨床采集標(biāo)本五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求17流感病毒臨床標(biāo)本的采集方法運(yùn)輸保存鄭課件18流感病毒臨床標(biāo)本的采集方法運(yùn)輸保存鄭課件19六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)20七、臨床標(biāo)本的處理方法含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復(fù)擠壓后取出鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存

七、臨床標(biāo)本的處理方法含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚21含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復(fù)擠壓后取出未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本然后，用平皿或燒杯收集洗液標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；七、臨床標(biāo)本的處理方法將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去采樣液應(yīng)包含有一定量的蛋白質(zhì)和抗菌素肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存六、臨床標(biāo)本的處理原則六、臨床標(biāo)本的處理原則6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液七、臨床標(biāo)本的處理方法漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。接種細(xì)胞或雞胚含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反22八、臨床標(biāo)本的的處理原則

臨床標(biāo)本處理后，將原始標(biāo)本分為三份:一份（40％）用于雞胚接種，一份（30％）用于MDCK細(xì)胞接種，一份（30％）保存待復(fù)核用。對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月八、臨床標(biāo)本的的處理原則臨床標(biāo)本處理后，將原始標(biāo)23流感病毒株的運(yùn)輸寄送流感毒株標(biāo)本的包裝要求病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里將裝標(biāo)本的密封袋放入專用運(yùn)輸箱內(nèi)（或疫苗冷藏包），放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的材料標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法流感病毒株的運(yùn)輸寄送流感毒株標(biāo)本的包裝要求24九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)1．采集人禽流感臨床樣本時(shí)，采集人員需要做好個(gè)人防護(hù)，戴防護(hù)口罩、帽子、護(hù)目鏡、手套、防護(hù)衣、鞋套。2.

人禽流感標(biāo)本的運(yùn)送、接收和保藏應(yīng)當(dāng)符合我國《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國務(wù)院424號令）的有關(guān)要求。3．人禽流感臨床標(biāo)本的處理、分裝在生物安全二級的實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行，采用生物安全三級防護(hù)。4．人禽流感病毒分離、培養(yǎng)、純化，微量中和試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)必須在生物安全三級（BSL-3級）實(shí)驗(yàn)室里操作。5．臨床標(biāo)本病毒核酸提取在生物安全二級（BSL-2級）實(shí)驗(yàn)室的二級生物安全柜里進(jìn)行，采用生物安全三級防護(hù)。6．用滅活的抗原進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制（HI）實(shí)驗(yàn)、RT-PCR病毒核酸檢測可以在生物安全二級（BSL-2級）實(shí)驗(yàn)室里操作。九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)1．采集人禽流感臨床樣本時(shí)，25謝謝!謝謝!26三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：咽拭子鼻拭子漱口液鼻咽吸取物鼻洗液三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：272、鼻拭子

將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去2、鼻拭子28

3、鼻咽吸取物

用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次

3、鼻咽吸取物294、漱口液用10ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。然后，用平皿或燒杯收集洗液4、漱口液30六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)31鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。六、臨床標(biāo)本的處理原則然后，用平皿或燒杯收集洗液收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基然后，用平皿或燒杯收集洗液鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎?；颊呷∽耍^微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。上清液可直接接種或低溫保存如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織七、臨床標(biāo)本的處理方法將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾惺r(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存上清液可直接接種或低溫保存上清液可直接接種或低溫保存流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)六、臨床標(biāo)本的處理原則用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)然后，用平皿或燒杯收集洗液未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存上清液可直接接種或低溫保存多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物）、人禽流感待查病例收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次七、臨床標(biāo)本的處理方法上清液可直接接種或低溫保存病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。標(biāo)本管上寫明：醫(yī)院名稱，標(biāo)本號，患者姓名，性別，采樣日期如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。七、臨床標(biāo)本的處理方法患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。上清液可直接接種或低溫保存凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。七、臨床標(biāo)本的處理方法漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。上清液可直接接種或低溫保存上清液可直接接種或低溫保存多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復(fù)擠壓后取出未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月24小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行病毒分離的標(biāo)本應(yīng)放-70℃或以下應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾惺占槿〉恼骋?，并用采樣?ml涮洗收集器3次多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去七、臨床標(biāo)本的處理方法上清液可直接接種或低溫保存6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本六、臨床標(biāo)本的處理原則上清液可直接接種或低溫保存肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。上清液可直接接種或低溫保存然后，用平皿或燒杯收集洗液常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有毒性），PH7.六、臨床標(biāo)本的處理原則Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾胁僮饕?xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次6．用滅活的抗原進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制（HI）實(shí)驗(yàn)、RT-PCR病毒核酸檢測可以在生物安全二級（BSL-2級）實(shí)驗(yàn)室里操作。鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。然后，用平皿或燒杯收集洗液應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基七、臨床標(biāo)本的處理方法多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織6．用滅活的抗原進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制（HI）實(shí)驗(yàn)、RT-PCR病毒核酸檢測可以在生物安全二級（BSL-2級）實(shí)驗(yàn)室里操作。用10ml生理鹽水漱喉。應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；上清液可直接接種或低溫保存鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。接種細(xì)胞或雞胚鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼32概述流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織概述流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，33一、采樣對象和時(shí)間采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物）、人禽流感待查病例

流感樣病例:發(fā)熱（體溫≥38℃），伴咳嗽或咽痛之一者，而缺乏其它的實(shí)驗(yàn)室確定診斷依據(jù)采集時(shí)間：病人發(fā)病后的頭三天一、采樣對象和時(shí)間采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物34二、采樣液要求常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有毒性），PH7.4-7.6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液采樣液應(yīng)包含有一定量的蛋白質(zhì)和抗菌素標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐械蜏乇４娑⒉蓸右阂蟪Ｓ玫牟蓸右河校浩胀ㄈ鉁ㄖ挥糜陔u胚，對細(xì)胞有35Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基36

抗生素名稱終濃度慶大霉素0.1mg/ml抗真菌素2Ug/ml采樣液抗生素含量抗生素名稱終濃度慶大霉素0.1mg/ml抗真菌素2Ug37三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：咽拭子鼻拭子漱口液鼻咽吸取物鼻洗液三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：381、咽拭子

用滅菌棉簽（最好用塑料柄、尼龍拭子，因?yàn)槟绢^柄棉拭子會抑制PCR實(shí)驗(yàn)）擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去1、咽拭子39鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求上清液可直接接種或低溫保存對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月然后，用平皿或燒杯收集洗液操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。常用的采樣液有：普通肉湯（只用于雞胚，對細(xì)胞有毒性），PH7.九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)六、臨床標(biāo)本的處理原則標(biāo)本采集后應(yīng)立即放入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐械蜏乇４娑鄶?shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織采咽拭子的器材和容器鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。采咽拭子的器材和容器402、鼻拭子

將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去2、鼻拭子41采鼻拭子的器材和容器采鼻拭子的器材和容器42標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物）、人禽流感待查病例上清液可直接接種或低溫保存用10ml生理鹽水漱喉。6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾辛⑴R床標(biāo)本的處理原則收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次八、臨床標(biāo)本的的處理原則操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。人禽流感標(biāo)本的運(yùn)送、接收和保藏應(yīng)當(dāng)符合我國《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國務(wù)院424號令）的有關(guān)要求。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎?；颊呷∽耍^微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基

3、鼻咽吸取物

用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次

標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法3、鼻咽吸取43內(nèi)有HEPA膜進(jìn)風(fēng)道鼻咽吸取裝置出風(fēng)道內(nèi)有HEPA膜進(jìn)風(fēng)道鼻咽吸取裝置出風(fēng)道44吸取過程正確錯(cuò)誤錯(cuò)誤不要觸摸病人的臉!吸取過程正確錯(cuò)誤錯(cuò)誤不要觸摸病人的臉!454、漱口液用10ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。然后，用平皿或燒杯收集洗液4、漱口液465、鼻洗液

患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。然后讓患者低頭使生理鹽水流出，用平皿或燒杯收集洗液。重復(fù)此過程洗兩側(cè)鼻孔5、鼻洗液47四、標(biāo)本收集注意事項(xiàng)操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)采集標(biāo)本要有一定力度標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾袠?biāo)本管上寫明：醫(yī)院名稱，標(biāo)本號，患者姓名，性別，采樣日期標(biāo)本采集后盡量在24小時(shí)內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離。24小時(shí)內(nèi)未能進(jìn)行病毒分離的標(biāo)本應(yīng)放-70℃或以下四、標(biāo)本收集注意事項(xiàng)操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自48新鮮的臨床采集標(biāo)本應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存凍存的臨床采集標(biāo)本應(yīng)在凍存的條件下，低溫送至實(shí)驗(yàn)室五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求新鮮的臨床采集標(biāo)本五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求49流感病毒臨床標(biāo)本的采集方法運(yùn)輸保存鄭課件50流感病毒臨床標(biāo)本的采集方法運(yùn)輸保存鄭課件51六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)52七、臨床標(biāo)本的處理方法含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復(fù)擠壓后取出鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存

七、臨床標(biāo)本的處理方法含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚53含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反復(fù)擠壓后取出未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本然后，用平皿或燒杯收集洗液標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；七、臨床標(biāo)本的處理方法將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去采樣液應(yīng)包含有一定量的蛋白質(zhì)和抗菌素肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存六、臨床標(biāo)本的處理原則六、臨床標(biāo)本的處理原則6的Hank’s液，Eagel`s培養(yǎng)液或水解乳蛋白溶液七、臨床標(biāo)本的處理方法漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。上清液可直接接種或低溫保存肺組織材料：肺組織材料在無菌條件下，用高壓滅菌的乳缽研磨后，用生理鹽水配成20%懸液，2000rpm離心10min，取上清加入抗生素。接種細(xì)胞或雞胚含聚丙烯纖維的拭子的采集標(biāo)本:先將含聚丙烯纖維的拭子在管壁反54八、臨床標(biāo)本的的處理原則

臨床標(biāo)本處理后，將原始標(biāo)本分為三份:一份（40％）用于雞胚接種，一份（30％）用于MDCK細(xì)胞接種，一份（30％）保存待復(fù)核用。對于病毒分離陽性的標(biāo)本－70℃保存6個(gè)月八、臨床標(biāo)本的的處理原則臨床標(biāo)本處理后，將原始標(biāo)55流感病毒株的運(yùn)輸寄送流感毒株標(biāo)本的包裝要求病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。蓋上蓋子后不應(yīng)有泄漏，推薦使用螺口細(xì)胞保存管保存和運(yùn)輸流感病毒標(biāo)本直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里將裝標(biāo)本的密封袋放入專用運(yùn)輸箱內(nèi)（或疫苗冷藏包），放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的材料標(biāo)本運(yùn)輸：異地運(yùn)輸可以采用郵寄或快遞的方法流感病毒株的運(yùn)輸寄送流感毒株標(biāo)本的包裝要求56九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)1．采集人禽流感臨床樣本時(shí)，采集人員需要做好個(gè)人防護(hù)，戴防護(hù)口罩、帽子、護(hù)目鏡、手套、防護(hù)衣、鞋套。2.

人禽流感標(biāo)本的運(yùn)送、接收和保藏應(yīng)當(dāng)符合我國《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（國務(wù)院424號令）的有關(guān)要求。3．人禽流感臨床標(biāo)本的處理、分裝在生物安全二級的實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行，采用生物安全三級防護(hù)。4．人禽流感病毒分離、培養(yǎng)、純化，微量中和試驗(yàn)等實(shí)驗(yàn)必須在生物安全三級（BSL-3級）實(shí)驗(yàn)室里操作。5．臨床標(biāo)本病毒核酸提取在生物安全二級（BSL-2級）實(shí)驗(yàn)室的二級生物安全柜里進(jìn)行，采用生物安全三級防護(hù)。6．用滅活的抗原進(jìn)行紅細(xì)胞凝集抑制（HI）實(shí)驗(yàn)、RT-PCR病毒核酸檢測可以在生物安全二級（BSL-2級）實(shí)驗(yàn)室里操作。九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)1．采集人禽流感臨床樣本時(shí)，57謝謝!謝謝!58三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：咽拭子鼻拭子漱口液鼻咽吸取物鼻洗液三、臨床標(biāo)本的采集常用的標(biāo)本種類：592、鼻拭子

將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去2、鼻拭子60

3、鼻咽吸取物

用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。先將收集器頭部插入鼻腔，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次

3、鼻咽吸取物614、漱口液用10ml生理鹽水漱喉。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。然后，用平皿或燒杯收集洗液4、漱口液62六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)盡快進(jìn)行接種分離，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行接種的可置于4℃保存，如未能接種應(yīng)置-70℃或以下保存凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存六、臨床標(biāo)本的處理原則新鮮的標(biāo)本送至實(shí)驗(yàn)室后，病毒分離標(biāo)本應(yīng)63鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎。六、臨床標(biāo)本的處理原則然后，用平皿或燒杯收集洗液收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基Eagel`s基礎(chǔ)培養(yǎng)基然后，用平皿或燒杯收集洗液鼻洗液標(biāo)本:充分振蕩標(biāo)本管，將粘液打碎?；颊呷∽耍^微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。上清液可直接接種或低溫保存如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織七、臨床標(biāo)本的處理方法將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去標(biāo)本采集后應(yīng)迅速至于冰上或者4℃以下保存，因?yàn)榱鞲胁《緦岷苊舾惺r(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。直接在塑料管上用油性記號筆寫明病毒的名稱，同時(shí)也將病毒標(biāo)本有關(guān)信息填在“流感/人禽流感毒株送檢單”內(nèi)，送檢單應(yīng)單獨(dú)放在防水的袋子里漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存上清液可直接接種或低溫保存上清液可直接接種或低溫保存流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)六、臨床標(biāo)本的處理原則用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液。五、臨床標(biāo)本的運(yùn)送要求病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。操作要細(xì)心，嚴(yán)防標(biāo)本間交叉污染，要做好自我保護(hù)然后，用平皿或燒杯收集洗液未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存上清液可直接接種或低溫保存多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織采樣對象：流感樣病例（沒有服用過抗病毒藥物）、人禽流感待查病例收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次將棉簽頭部浸入3-4ml采集液中，尾部棄去流感病毒分離成功與否很大程度上取決于臨床標(biāo)本的質(zhì)量，及其保存運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)鼻咽吸取液：用干凈滅菌過的毛細(xì)吸管，在無菌條件下反復(fù)吹打收集的溶液，以便打碎粘液，同樣置4℃待其自然沉淀5～10分鐘，取上清5ml。收集抽取的粘液，并用采樣液5ml涮洗收集器3次七、臨床標(biāo)本的處理方法上清液可直接接種或低溫保存病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。標(biāo)本管上寫明：醫(yī)院名稱，標(biāo)本號，患者姓名，性別，采樣日期如未能分離的標(biāo)本應(yīng)置-70℃或以下保存未能24小時(shí)內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室的，應(yīng)置-70℃或以下保存應(yīng)在4℃條件下，24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至全國流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室；病毒標(biāo)本必須放在大小適合的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料管里，擰緊。七、臨床標(biāo)本的處理方法患者取坐姿，頭微后仰，用移液管將5ml生理鹽水注入一側(cè)鼻孔，囑患者同時(shí)發(fā)K音以關(guān)閉咽腔。九、禽流感標(biāo)本采集的生物安全防護(hù)將滅過菌干凈的棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出，以同一拭子擦拭兩側(cè)鼻孔。上清液可直接接種或低溫保存凍存的標(biāo)本送到實(shí)驗(yàn)室后，24小時(shí)內(nèi)能進(jìn)行病毒分離的，可以放置4℃保存。七、臨床標(biāo)本的處理方法漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。上清液可直接接種或低溫保存上清液可直接接種或低溫保存多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織漱時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢”聲，讓生理鹽水在咽部轉(zhuǎn)動。多