自身免疫病及免疫檢驗(yàn)優(yōu)選ppt資料

自身免疫(miǎnyì)病及免疫(miǎnyì)檢驗(yàn)第一頁，共48頁。第二十五章自身免疫(miǎnyì)病及免疫(miǎnyì)檢驗(yàn)第二頁，共48頁。目錄

概述

1自身免疫病的發(fā)病機(jī)制2自身免疫病檢驗(yàn)3自身抗體檢測實(shí)驗(yàn)選擇的原則4第三頁，共48頁。1.自身耐受(self-tolerance)正常情況下，免疫系統(tǒng)對宿主自身的組織和細(xì)胞不產(chǎn)生免疫應(yīng)答。2.自身免疫(autoimmunity)當(dāng)某種原因使自身耐受性破壞時(shí)，免疫系統(tǒng)就會(huì)對自身組織成分(chéngfèn)、細(xì)胞成分(chéngfèn)及其產(chǎn)物發(fā)生免疫應(yīng)答。第一節(jié)概述(ɡàishù)一、基本知識(shí)第四頁，共48頁。3.自身免疫病(autoimmunedisease，AID)自身免疫應(yīng)答過強(qiáng)或持續(xù)時(shí)間過久，表現(xiàn)為質(zhì)和量的異常(yìcháng)，所產(chǎn)生的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細(xì)胞對表達(dá)自身靶抗原的細(xì)胞和組織發(fā)動(dòng)攻擊，導(dǎo)致?lián)p傷或功能障礙，并出現(xiàn)相應(yīng)臨床癥狀。第五頁，共48頁。二、自身(zìshēn)免疫病的分類1.按病程分為急性和慢性兩種2.按病因清楚與否分為原發(fā)性與繼發(fā)性兩種3.按受累的解剖系統(tǒng)分為結(jié)締組織病、神經(jīng)肌肉疾病、消化系統(tǒng)病和內(nèi)分泌疾病等4.按自身抗原(kàngyuán)的分布范圍分為器官特異性和非器官特異性兩類第六頁，共48頁。分類疾病結(jié)締組織系統(tǒng)性紅斑狼瘡、干燥綜合征、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、混合性結(jié)締組織病內(nèi)分泌系統(tǒng)橋本甲狀腺炎、Graves病、Addison病、胰島素依賴性糖尿病消化系統(tǒng)萎縮性胃炎、潰瘍性胃炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化血液系統(tǒng)惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜心血管系統(tǒng)風(fēng)濕性心肌炎泌尿系統(tǒng)腎小球腎炎呼吸系統(tǒng)特發(fā)性肺纖維化神經(jīng)系統(tǒng)重癥肌無力、多發(fā)性神經(jīng)炎皮膚蕁麻疹按發(fā)病(fābìng)部位的解剖系統(tǒng)分類第七頁，共48頁。器官(qìguān)特異性自身免疫病器官(qìguān)非特異性自身免疫病患者的病變常局限于某一特定的器官(qìguān)，由對器官(qìguān)的特異性抗原的免疫應(yīng)答引起全身性或系統(tǒng)性自身免疫性疾??；患者的病變可見于多種器官及結(jié)締組織（結(jié)締組織病或膠原病）按自身抗原的分布范圍分類第八頁，共48頁。器官特異性病名自身抗原橋本甲狀腺炎甲狀腺球蛋白和甲狀腺微粒體甲狀腺功能亢進(jìn)(Graves病)TSH受體Addison病腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞自身免疫性萎縮性胃炎胃壁細(xì)胞、內(nèi)因子潰瘍性結(jié)腸炎結(jié)腸黏膜細(xì)胞重癥肌無力乙酰膽堿受體交感性眼炎眼晶狀體蛋白胰島素依賴型糖尿病胰島β細(xì)胞胰島素抵抗型糖尿病胰島素受體原發(fā)性膽汁性肝硬化小膽管上皮細(xì)胞第九頁，共48頁。器官非特異性病名自身抗原SLE細(xì)胞核成分、細(xì)胞漿成分RA變性IgG、類風(fēng)濕相關(guān)的核抗原SS涎腺上皮細(xì)胞混合性結(jié)締組織病細(xì)胞核(RNP)自身免疫性溶血性貧血紅細(xì)胞特發(fā)性血小板減少性紫癜血小板特發(fā)性白細(xì)胞減少癥白細(xì)胞硬皮病細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞核染色體著絲點(diǎn)多發(fā)性肌炎細(xì)胞核蛋白第十頁，共48頁。三、自身免疫病的共同(gòngtóng)特點(diǎn)1.血清(xuèqīng)中有自身抗體或自身反應(yīng)性致敏T淋巴細(xì)胞。自身抗體和（或）自身反應(yīng)性T細(xì)胞作用于靶抗原所在的組織細(xì)胞，導(dǎo)致組織損傷和功能障礙。2.可復(fù)制出與AID相似的動(dòng)物模型，并可通過血清(xuèqīng)或致敏的淋巴細(xì)胞使疾病被動(dòng)轉(zhuǎn)移。3．有一定的遺傳傾向。病情轉(zhuǎn)歸與自身免疫反應(yīng)的強(qiáng)度密切相關(guān)。4．部分自身免疫病好發(fā)于女性，且發(fā)病率隨年齡增長而上升。5．免疫抑制劑治療有效但不能根治。第十一頁，共48頁。一、自身(zìshēn)抗原形成第二節(jié)自身免疫病的發(fā)病(fābìng)機(jī)制1.隱蔽(yǐnbì)抗原的釋放2.自身抗原改變交感性眼炎第十二頁，共48頁。3.分子(fēnzǐ)模擬4．表位擴(kuò)展(kuòzhǎn)第十三頁，共48頁。2.B細(xì)胞(xìbāo)的多克隆激活二、免疫細(xì)胞和免疫調(diào)節(jié)功能(gōngnéng)的異常3.調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的功能(gōngnéng)異常1.T、B細(xì)胞的異常活化4.

MHC-II類分子異常表達(dá)第十四頁，共48頁。三、遺傳(yíchuán)因素自身免疫病HLA基因相關(guān)系數(shù)強(qiáng)直性脊柱炎 B27 87．4 全身性紅斑狼瘡DR2/DR35．8 1型糖尿病DR3/DR410類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎DR44．2Graves病DR33橋本氏甲狀腺炎DR53多發(fā)性硬化DR24．1重癥肌無力DR32．5HLA基因(jīyīn)與自身免疫病相關(guān)性舉例第十五頁，共48頁。四、生理(shēnglǐ)因素五、環(huán)境因素1.自身(zìshēn)免疫病的發(fā)病率隨年齡增長呈上升趨勢；2.自身(zìshēn)免疫病的發(fā)病也具有明顯的性別差異，女性發(fā)病率較高自身免疫病的發(fā)生(fāshēng)與日曬、潮濕、寒冷等環(huán)境因素可能有關(guān)。第十六頁，共48頁。1.自身抗體(kàngtǐ)介導(dǎo)細(xì)胞破壞六、自身免疫病的病理損傷(sǔnshāng)機(jī)制病理(bìnglǐ)機(jī)制：II型超敏反應(yīng)常見疾?。盒律鷥喝茇?、重癥肌無力、Graves病第十七頁，共48頁。自身(zìshēn)免疫性溶血性貧血第十八頁，共48頁。重癥肌無力

第十九頁，共48頁。Graves病第二十頁，共48頁。3.自身(zìshēn)反應(yīng)性T細(xì)胞引發(fā)炎癥性損傷2.循環(huán)免疫(miǎnyì)復(fù)合物介導(dǎo)組織損傷病理(bìnglǐ)機(jī)制：III型超敏反應(yīng)病理機(jī)制：IV型超敏反應(yīng)第二十一頁，共48頁。抗核抗體（antinuclearantibody，ANA)是以真核細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱；在某些因素(yīnsù)作用下改變細(xì)胞核某些成分性質(zhì)，激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生許多抗不同核成分的抗體。第三節(jié)自身(zìshēn)免疫病檢驗(yàn)一、自身抗體(kàngtǐ)的檢測（一）抗核抗體檢測第二十二頁，共48頁。ANA主要是IgG，也有IgM、IgA、IgD和IgE；ANA無器官特異性和種屬特異性；ANA主要存在(cúnzài)于血清中；將檢出ANA作為AID存在(cúnzài)的依據(jù)。第二十三頁，共48頁?？笵NA抗體(kàngtǐ)：抗dsDNA/抗nDNA、抗ssDNA/抗dDNA等抗組蛋白抗體(kàngtǐ)(AHA)：抗H1、抗H2A、抗H2B、抗H3、抗H4抗體(kàngtǐ)等抗非組蛋白抗體(kàngtǐ)：抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、抗SSA、抗Sm、抗SSB、抗Jo-1、抗Rib抗體(kàngtǐ)、AnuA、抗DNP、抗DM53抗體(kàngtǐ)抗RANA抗體(kàngtǐ)、抗著絲點(diǎn)、抗Ku抗體(kàngtǐ)等抗核仁抗體(kàngtǐ)：抗PM-Scl抗體(kàngtǐ)、抗Th/To抗體(kàngtǐ)、抗U3-RNP、抗4-6-S-RNA抗體(kàngtǐ)等1.ANA的類型(lèixíng)和臨床意義ANA譜第二十四頁，共48頁。①抗天然(tiānrán)DNA(nativeDNA,nDNA)抗體，又稱抗雙鏈DNA(doublestrandedDNA,dsDNA)抗體。②抗變性(biànxìng)DNA(denaturedDNA,dDNA)抗體，又稱抗單鏈DNA(singlestrandedDNA,ssDNA)抗體。對SLE有高特異性;SLE診斷(zhěnduàn)標(biāo)準(zhǔn)之一緩解期降低70%～90%SLE活動(dòng)期增高藥物療效抗dsDNA抗體抗DNA抗體第二十五頁，共48頁?？菇M蛋白抗體(kàngtǐ)（anti-histonicantibody,AHA）：由H1、H2A、H2B、H3和H4五個(gè)亞單位，各自都有特異性抗體(kàngtǐ)；AHA檢出百分率抗dsDNA507090100藥物誘導(dǎo)性狼瘡(lángchuāng)只能檢出此SLEAHAAHA抗組蛋白抗體(kàngtǐ)第二十六頁，共48頁?？商崛⌒院丝乖?extractablenuclearantigen，ENA)是鹽水可提取性核抗原的總稱，是非組蛋白的核蛋白，屬酸性核蛋白抗原，由許多(xǔduō)小分子量的RNA和多肽組成。抗ENA抗體(kàngtǐ)第二十七頁，共48頁。對類風(fēng)濕有特異(tèyì)診斷價(jià)值的ENA：抗nRNP(nuclearRNP,nRNP)抗體；抗Sm抗體；抗SSA抗體；抗SSB抗體；抗Scl-70抗體；抗Jo-1抗體；抗核糖體抗體。第二十八頁，共48頁。核蛋白(DNP)由DNA和蛋白質(zhì)組成。DNP抗原(kàngyuán)有不溶性及可溶性兩種，分別產(chǎn)生相應(yīng)的抗體。檢出百分(bǎifēn)率抗DNP20406080SLE非活動(dòng)期

SLE活動(dòng)期抗不溶性DNP抗體(kàngtǐ)抗DNP抗DNP100RA滑膜液中抗DNP抗可溶性DNP抗體（1）抗DNP抗體第二十九頁，共48頁?？购诵◇w抗體（anti-nucleosomeantibody，AnuA)核小體是細(xì)胞核染色質(zhì)的基本組成單位(dānwèi);細(xì)胞凋亡致核小體大量蓄積，并誘導(dǎo)B細(xì)胞產(chǎn)生AnuAAnuA是SLE特異的標(biāo)志性抗體。抗dsDNA抗體(kàngtǐ)抗核小體(xiǎotǐ)抗體抗dsDNA和抗Sm陰性的SLE陽性率為60%～80%，特異性＞97%。（2）抗核小體抗體第三十頁，共48頁。

常見AID的ANA陽性檢出率疾病ANA（%）疾病ANA（%）SLE≥95SS70～80MCTD≥95PM/DM30PSS85～95RA20～30第三十一頁，共48頁。2.ANA的檢測(jiǎncè)方法稀釋患者(huànzhě)血清可做定量檢測，1:80稀釋仍呈陽性對診斷SLE有較大參考價(jià)值。（1）間接熒光(yíngguāng)免疫法第三十二頁，共48頁?？购丝贵w核型與相關(guān)疾病核型熒光圖形抗體相關(guān)疾病周邊型核周環(huán)狀熒光抗dsDNASLE、慢活肝炎均質(zhì)型核呈均質(zhì)熒光抗DNA、AHA、AnuASLE、RA、PSS、慢性肝病斑點(diǎn)型核內(nèi)顆粒狀熒光抗ENAMCTD、SLE、PSS、SS、PM核仁型核仁有熒光抗核仁抗體PSS、雷諾現(xiàn)象、SLE著絲點(diǎn)型核漿細(xì)小相同顆粒熒光抗著絲點(diǎn)PSS、CREST綜合征第三十三頁，共48頁。均質(zhì)型抗核抗體(kàngtǐ)核型著絲點(diǎn)型核仁(hérén)型斑點(diǎn)(bāndiǎn)型第三十四頁，共48頁。用間接(jiànjiē)ELISA檢測抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體和抗核小體抗體。（2）ELISA法第三十五頁，共48頁。SDS加待檢血清(xuèqīng)形成分子(fēnzǐ)大小不同區(qū)帶分離(fēnlí)電轉(zhuǎn)移PVDF膜或NC膜抗ENA與相應(yīng)抗原特異結(jié)合抗人IgG·HRPENA—抗ENA—抗人IgG·HRP（3）免疫印跡法顯色并判讀結(jié)果第三十六頁，共48頁。類風(fēng)濕因子(rheumatoidfactor，RF):抗變性IgG的自身抗體，可為19S的IgM，也可為7S的IgG和IgA?？膳c人變性IgG結(jié)合(jiéhé)，但不與正常IgG發(fā)生凝集。RF可在RA患者檢出，約70%～90%的血清、約60%的滑膜液可檢出IgG類的RF；（二）類風(fēng)濕因子(yīnzǐ)測定第三十七頁，共48頁?？购丝贵w(kàngtǐ)核型ELISA、熒光免疫法稀釋待檢血清至一定濃度后，加入定量的變性IgG診斷試劑，即用透射比濁或速率散射(sǎnshè)比濁儀，檢測血清中的RF。四、生理(shēnglǐ)因素RA，SS，SLE，原發(fā)性膽汁性肝硬化,抗nRNP(nuclearRNP,nRNP)抗體；AnuA是SLE特異的標(biāo)志性抗體?？蓮?fù)制出與AID相似的動(dòng)物模型，并可通過血清(xuèqīng)或致敏的淋巴細(xì)胞使疾病被動(dòng)轉(zhuǎn)移。IgM、IgG和IgA類RF可用ELISA檢測(jiǎncè)，臨床上多采用雙抗原夾心法或間接ELISA進(jìn)行測定。第三十六頁，共48頁。全身性或系統(tǒng)性自身免疫性疾??；惡性貧血、自身免疫性溶血性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜抗非組蛋白抗體(kàngtǐ)：抗nRNP/抗U1RNP、抗Scl-70、直接凝集試驗(yàn)、Coombs試驗(yàn)抗核糖體抗體。二、細(xì)胞(xìbāo)檢查IgG類抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后發(fā)生變性(biànxìng)；炎癥過程亦可發(fā)生IgG變性(biànxìng)，構(gòu)成自身抗原，刺激機(jī)體產(chǎn)生各種抗IgG抗體；滑膜液中的IgG類RF與變性(biànxìng)IgG結(jié)合可形成中等大小的免疫復(fù)合物，相比血清中的IgM類RF更易致病。第三十八頁，共48頁。RF檢測(jiǎncè)方法最常采用的檢測方法。以吸附在聚苯乙烯膠乳(jiāorǔ)顆粒上的IgG作診斷試劑，與待檢血清中的RF結(jié)合后，出現(xiàn)膠乳(jiāorǔ)凝集顆粒。此法的靈敏度和特異性不高，且只能檢出血清中的IgM類的RF。1.間接膠乳(jiāorǔ)凝集試驗(yàn)第三十九頁，共48頁。稀釋待檢血清至一定濃度后，加入定量的變性IgG診斷試劑，即用透射比濁或速率散射(sǎnshè)比濁儀，檢測血清中的RF。此法快速、敏感性高、精密度高、穩(wěn)定性好、可定量分析，但仍只能檢測IgM類RF。2.免疫(miǎnyì)比濁法第四十頁，共48頁。IgM、IgG和IgA類RF可用ELISA檢測(jiǎncè)，臨床上多采用雙抗原夾心法或間接ELISA進(jìn)行測定。3.ELISA法第四十一頁，共48頁。（三）其他自身(zìshēn)抗體測定其他自身抗體的檢測方法與臨床意義自身抗體的類型檢測方法臨床意義抗甲狀腺球蛋白抗體(A-TG)熒光免疫法、ELISA、RIA橋本甲狀腺炎抗甲狀腺過氧化物酶抗體ELISAGraves

病,橋本甲狀腺炎抗乙酰膽堿受體抗體(AchR-Ab)ELISA、RIA重癥肌無力抗平滑肌抗體(SMA)熒光免疫法、ELISA、RIA自身免疫性肝炎,慢性活動(dòng)性肝炎,原發(fā)性膽汁性肝硬化抗線粒體抗體(AMA)熒光免疫法、ELISA、RIARA，SS，SLE，原發(fā)性膽汁性肝硬化,慢性活動(dòng)性肝炎,持續(xù)性肝阻塞抗胃壁細(xì)胞抗體熒光免疫法惡性貧血抗胰島素抗體（IAA）ELISA胰島素依賴性糖尿病抗精子抗體（AsAb）ELISA、熒光免疫法不育癥,不孕癥抗紅細(xì)胞抗體直接凝集試驗(yàn)、Coombs試驗(yàn)新生兒溶血,自身免疫性溶血性貧血抗血小板抗體ELISA法、ABC-ELISA法原發(fā)性血小板減少性紫癜、輸血史抗心磷脂抗體（ACA）RIA、ELISASLE，血栓,自發(fā)性流產(chǎn),血小板減少抗腎小球基底膜抗體(GBM-Ab)熒光免疫法Goodpasture綜合征,狼瘡腎炎第四十二頁，共48頁。二、細(xì)胞(xìbāo)檢查（一）淋巴細(xì)胞檢測(jiǎncè)1．特異性致敏淋巴細(xì)胞2．淋巴細(xì)胞數(shù)量(shùliàng)和比例如淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)或吞噬細(xì)胞移動(dòng)抑制試驗(yàn)檢測淋巴細(xì)胞的總數(shù)、T、B細(xì)胞分類與計(jì)數(shù)、CD4/CD8亞群比例等進(jìn)行第四十三頁，共48頁。（二）狼瘡（lupuserythmatosus，LE）細(xì)胞(xìbāo)試驗(yàn)LE細(xì)胞為胞漿內(nèi)含有大塊狀聚合DNA的中性粒細(xì)胞。有75％～80％的SLE病人(bìngrén)LE呈陽性，RA、結(jié)節(jié)性動(dòng)脈炎、