食品微生物檢測基礎(chǔ)與常用儀器課件

食品微生物實驗室基礎(chǔ)與常用儀器目錄食品微生物實驗室概況食品微生物實驗室常用儀器食品微生物實驗室檢測項目（舉例）食品微生物實驗室基礎(chǔ)知識一、食品微生物實驗室概況食品微生物實驗室的功能分區(qū).主要分區(qū)主要作用辦公室登記待檢驗樣品；出檢測報告；處理有關(guān)文件資料；放松休息等通用實驗室是進(jìn)行微生物學(xué)檢驗準(zhǔn)備工作和非無菌操作實驗時使用，也可供理化檢驗及科研工作使用。一般均配備實驗臺、儀器柜、通風(fēng)櫥、凳子等。為方便工作實驗的開展，通常配備常用的儀器（分光光度計、pH計、干燥箱、電爐等）及常用的各種玻璃器皿和常用的各種化學(xué)試劑、藥品等。滅菌室滅菌室主要用于培養(yǎng)基、玻璃器皿、試劑等的滅菌，室內(nèi)應(yīng)備有高壓蒸汽滅菌器、烘箱等滅菌設(shè)備及設(shè)施。準(zhǔn)備室用于培養(yǎng)基的配置和樣品的處理等，室內(nèi)設(shè)有試劑柜、存放器具或材料的專柜、實驗臺、電爐、冰箱、天平和上下水道、電源等。洗滌室用以消毒洗滌待用與已用之玻璃器皿,培養(yǎng)基及污物。室內(nèi)應(yīng)備有器皿柜和試驗臺，加熱器、蒸鍋，洗刷器皿用的盆、桶等，還應(yīng)有各種瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等更衣室是進(jìn)入無菌室之前工作人員進(jìn)行更衣、洗手的地方。室內(nèi)設(shè)置無菌室及緩沖室的電源控制開關(guān)和放置無菌操作時穿的工作服、鞋、帽子、口罩等。緩沖室是進(jìn)入緩沖室之前所經(jīng)過的房間，安裝有鼓風(fēng)機(jī)，以減少操作人員進(jìn)入無菌操作室時的污染。保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。要求比較高的微生物學(xué)檢驗項目如致病菌的檢驗，應(yīng)設(shè)有多個緩沖室。無菌室是微生物學(xué)檢驗過程無菌操作的場所，要求密封、清潔，安裝紫外燈和空調(diào)設(shè)備（帶過濾設(shè)備）及傳遞物品用的傳遞小窗。還應(yīng)配置有超凈工作臺和普通工作臺。恒溫培養(yǎng)室進(jìn)行微生物培養(yǎng)的房間，通常配備有恒溫培養(yǎng)箱、水浴鍋、厭氧培養(yǎng)箱及振蕩培養(yǎng)箱等，或整個房間安裝保溫、控溫設(shè)備。房間要求保持清潔，有防塵、防噪音等功能。食品微生物實驗室（圖集）培養(yǎng)基制備室培養(yǎng)室洗涮間超凈工作臺

微生物的培養(yǎng)都是在特定培養(yǎng)基中進(jìn)行無菌培養(yǎng)，那么無菌培養(yǎng)必然需要超凈工作臺提供一個無菌的工作環(huán)境。超凈工作臺的用途是微生物的接種及處理時的無菌操作。培養(yǎng)箱

1、電熱恒溫培養(yǎng)箱：一般控制的溫度范圍為：室溫＋５～６５度。用于一般細(xì)菌的培養(yǎng)；

2、生化培養(yǎng)箱：一般控制的溫度范圍為：５～５０度。用于細(xì)菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)；

3、厭氧培養(yǎng)箱：用于厭氧微生物的培養(yǎng)；

天平天平用于精確稱量各類試劑。實驗室常用的是電子天平，電子天平按照精度不同有不同的級別。移液器用于精密量取各種液體。均質(zhì)器用于從固體樣品中提取細(xì)菌。用微生物均質(zhì)器制備微生物檢測樣本具有樣品無污染、無損傷、不升溫、不需要滅菌處理，不需洗刷器皿等特點，是微生物實驗中使用較為方便的儀器。搖床/振蕩器在微生物實驗操作過程中，液體培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌時需要在特定溫度下振蕩使用。高壓蒸汽滅菌器用途：培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物的滅菌。恒溫干燥箱恒溫干燥箱是用于滅菌和洗滌后的物品烘干。烘箱有不同的控溫范圍，用戶可以根據(jù)實驗需求進(jìn)行選擇。

顯微鏡生物顯微鏡用于微生物和微小物品結(jié)構(gòu)，形態(tài)等的觀察。pH計/酸度計用于配置試劑時精確測量PH值，從而保證配置的溶液的精確性。有時也需要利用pH計測定樣品溶液的酸堿度。菌落計數(shù)器

可協(xié)助操作者計數(shù)菌落數(shù)量。紅外線滅菌器用于接種環(huán)、接種針、剪刀等的滅菌。1、4℃適合儲存某些溶液、試劑、藥品等。2、-20℃適用于某些試劑、藥品、配好的抗生素等。3、-80℃適合某些長期低溫保存的樣品、大腸桿菌菌種、感受態(tài)等的保存。常用儀器主要功能天平用于樣品和培養(yǎng)基、試劑等的稱量。一般要求具備精度達(dá)到萬分之一的分析天平超凈工作臺為實驗的開展提供一個相對無菌的操作臺。冰箱用于樣品和試劑的存儲高壓蒸汽滅菌器培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄物、采樣器、紗布、衣物的滅菌。紅外線滅菌器進(jìn)行接種環(huán)、接種針等的滅菌。電熱恒溫干燥箱用于吸管，平皿類玻璃器皿的干熱、滅菌和烘烤。生化培養(yǎng)箱用于微生物的培養(yǎng)。電熱恒溫培養(yǎng)箱用于一樣微生物的培養(yǎng)。厭氧培養(yǎng)箱用于厭氧微生物的培養(yǎng)。水浴鍋用于培養(yǎng)基等的冷卻保溫以及某些細(xì)菌（如大腸桿菌）的水浴保溫培養(yǎng)。PH計|酸度計用于培養(yǎng)基、試劑等pH的測定和調(diào)整。均質(zhì)器用于固體或半固體樣品的均質(zhì)處理。實驗參考條件：8000~10000r/min均質(zhì)1~2min。搖床/振蕩器用于試樣的振蕩、混勻。離心機(jī)用于收集微生物菌體以及其他沉淀物。離心機(jī)有冷凍和常溫之分。有些樣品由于在常溫下不太穩(wěn)定，需要低溫環(huán)境，要視樣品的種類而定。顯微鏡觀察細(xì)菌形態(tài)和動力、微生物和微小物品結(jié)構(gòu)的必備儀器。用于微生物的觀察。實驗參考條件：10×~100×。菌落計數(shù)器可幫助操作者計數(shù)菌落總數(shù)、大腸菌群等細(xì)菌數(shù)量。通過放大，拍照，計數(shù)等方式來準(zhǔn)確的獲取菌落的數(shù)量。紫外燈用于大腸桿菌等的熒光檢查，參考條件：長波紫外光燈，366nm，功率≤6W。電爐用于培養(yǎng)基、試劑等的溶解、加熱。食品微生物實驗室檢測項目（舉例）食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群計數(shù)：儀器配置：天平：感量0.1g；均質(zhì)器；振蕩器；電熱恒溫培養(yǎng)箱；恒溫水浴箱；pH計或pH比色管或精密pH試紙；菌落計數(shù)器；冰箱：2℃~5℃；超凈工作臺，滅菌器，電爐食品微生物實驗室基礎(chǔ)知識2、生物安全柜和超凈工作臺的區(qū)別？

a）生物安全柜是基于層流原理，在操作區(qū)內(nèi)通過高效過濾器送出垂直向下流動的潔凈空氣，在操作區(qū)前后形成負(fù)壓區(qū)，以防止柜內(nèi)氣溶膠外逸。按其對人員、環(huán)境和受試樣本的保護(hù)程度可將其分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級。正面開放的Ⅰ級和Ⅱ級生物安全柜，與規(guī)范的微生物學(xué)技術(shù)一起使用時，可以為實驗室人員及臨近環(huán)境提供相當(dāng)水平的防擴(kuò)散作用；Ⅱ級生物安全柜還能提供防護(hù)，以免柜內(nèi)的微生物擴(kuò)散至外界環(huán)境；Ⅲ級生物安全柜可以為實驗室人員、公眾和環(huán)境提供最大程度的保護(hù)。b）超凈工作臺亦是基于層流原理設(shè)計，通過高效過濾器可在操作臺的局部空間形成無塵無菌狀態(tài)，它對操作者沒有保護(hù)作用，但所形成的局部凈化環(huán)境可避免操作過程污染雜菌的可能，故其只能應(yīng)用于非危險性微生物的操作，如用于藥品、微生物制劑、組織細(xì)胞等的無菌操作。3、菌落總數(shù)：

食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下（如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間等）培養(yǎng)后，所得每g（mL）檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。

衛(wèi)生學(xué)意義：

1、作為判定樣品被污染程度的標(biāo)志；

2、用作觀察樣品中細(xì)菌的性質(zhì)和繁殖動態(tài)；

3、對樣品進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)綜合評價時提供科學(xué)依據(jù)。4、大腸菌群：

定義：在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。衛(wèi)生學(xué)意義：

1、是評價衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)，作為食品中糞便污染指標(biāo)：

2、食品中檢出大腸菌群，表明該食品有糞便污染，即可能有腸道致病菌的存在，因而也就有可能通過污染的食品引起腸道傳染病的流行。大腸菌群數(shù)的高低，表明了糞便污染的程度，也反映對人體健康危害性的大小。5、革蘭氏染色

細(xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶紫染色，而經(jīng)碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細(xì)菌紫色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細(xì)菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽性菌（G+），后者為革蘭氏陰性菌（