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動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體知識(shí)回顧植物細(xì)胞A(番茄)植物細(xì)胞B(馬鈴薯)去除細(xì)胞壁脫分化再分化原生質(zhì)體融合再生出細(xì)胞壁正在融合的原生質(zhì)體雜種細(xì)胞愈傷組織雜種植株(番茄-馬鈴薯)人鼠細(xì)胞雜交融合實(shí)驗(yàn)動(dòng)物細(xì)胞融合一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)1.概念動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。2.誘導(dǎo)方式物理法:化學(xué)法:生物法:滅活的病毒(如:仙臺(tái)病毒)電激、振動(dòng)、離心聚乙二醇(PEG)一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)什么是滅活的病毒?滅活的病毒滅活喪失感染性、保留融合活性一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)4.融合原理:膜融合→質(zhì)融合→核融合2個(gè)核→1個(gè)核2個(gè)細(xì)胞→1雜交個(gè)細(xì)胞細(xì)胞膜的流動(dòng)性3.融合過(guò)程:一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)5.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用:一、動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)小結(jié):植物、動(dòng)物細(xì)胞融合的比較比較項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合的方法誘導(dǎo)方法用途細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合使細(xì)胞分散后誘導(dǎo)細(xì)胞融合物理法、化學(xué)法、物理法、化學(xué)法、生物法(滅活病毒)獲得雜種植株主要用于制備單克隆抗體

二、單克隆抗體制備閱讀教材P52的內(nèi)容,完成下列問(wèn)題:1.抗體由哪種細(xì)胞產(chǎn)生?2.獲得抗體的傳統(tǒng)方法是什么?有哪些缺點(diǎn)?

二、單克隆抗體抗體:能夠與抗原發(fā)生特異性結(jié)合B淋巴細(xì)胞效應(yīng)B淋巴細(xì)胞記憶B淋巴細(xì)胞分化抗體強(qiáng)調(diào):效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞,下文將其簡(jiǎn)稱為B淋巴細(xì)胞抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn):產(chǎn)量低、純度低,且抗體的特異性差、靈敏度低。如何解決這個(gè)問(wèn)題呢?單克隆抗體!二、單克隆抗體設(shè)想思路克隆單一的B淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞群,直接培養(yǎng)細(xì)胞提取單克隆抗體。每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體;不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同。人生總是很多憾事!如何解決這個(gè)問(wèn)題呢?B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無(wú)限增殖,不能得到大量的單一性質(zhì)的抗體;1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體骨髓瘤細(xì)胞能無(wú)限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案:動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體既能產(chǎn)生特異性抗體,又能無(wú)限增殖的細(xì)胞二、單克隆抗體的過(guò)程分析√BB

、B瘤、瘤瘤(B、瘤)(一選)選擇性培養(yǎng)基:只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞(二選):選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)二、單克隆抗體的過(guò)程三、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用1.特點(diǎn)特異性強(qiáng)靈敏度高可大量制備診斷試劑治療疾病運(yùn)載藥物2.應(yīng)用三、單克隆抗體的特點(diǎn)和應(yīng)用診斷試劑——最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速早早孕:由抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體制成,懷孕時(shí)人絨毛膜促性腺激素(HCG)含量明顯升高,用相應(yīng)抗體檢測(cè),靈敏度高,妊娠第8天即可檢出。

“生物導(dǎo)彈”=單克隆抗體+藥物

生物導(dǎo)彈

主要用于癌癥治療,單克隆抗體作為載體,運(yùn)載抗癌藥物,形成“生物導(dǎo)彈”,準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。優(yōu)點(diǎn):作用位置準(zhǔn)確,不損傷正常的細(xì)胞,療效高,毒副作用小。本節(jié)小結(jié)兩個(gè)過(guò)程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程單克隆抗體制備過(guò)程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法

——滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞——雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)——單克隆抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)重點(diǎn)1.科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合,得到雜交細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體,與骨髓瘤細(xì)胞融合的是()AA.經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞C.經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞B.不經(jīng)過(guò)免疫的T淋巴細(xì)胞D.不經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞跟蹤訓(xùn)練2.單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的()DA.

B淋巴細(xì)胞B.T淋巴細(xì)胞C.骨髓瘤細(xì)胞D.雜交瘤細(xì)胞3:胃癌是我國(guó)發(fā)生率很高的一種惡性疾病,制備抑制胃癌細(xì)胞增殖的單克隆抗體對(duì)治療胃癌具有重要意義。抗胃癌單克隆抗體制備過(guò)程如下圖。人的胃癌細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞小鼠乙丙(專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性)抗胃癌單克隆抗體注射篩選融合克隆化培養(yǎng)甲(1)抗胃癌單克隆抗體制備過(guò)程中要用到

技術(shù)。(2)甲代表

細(xì)胞。(3)通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞是否產(chǎn)生所需的專一抗體,篩選出丙,該過(guò)程中所選用的抗原是

。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞融合B淋巴人的胃癌細(xì)胞3:胃癌是我國(guó)發(fā)生率很高的一種惡性疾病,制備抑制胃癌細(xì)胞增殖的單克隆抗體對(duì)治療胃癌具有重要意義。抗胃癌單克隆抗體制備過(guò)程如下圖。人的胃癌細(xì)胞骨髓瘤細(xì)胞小鼠乙丙(專一抗體檢驗(yàn)陽(yáng)性)抗胃癌單克隆抗體注射篩選融合克隆化培養(yǎng)甲(4)

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