微生物檢驗(yàn)-070沙門氏菌

致病菌的食品衛(wèi)生學(xué)意義食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定任何食品中不得檢出致病菌致病菌對(duì) 健康的 是直接和肯定的根據(jù)不同食品被污染的特點(diǎn)重點(diǎn)檢驗(yàn)?zāi)承┘?xì)菌如蛋禽肉主檢沙門氏菌，罐頭檢肉毒梭菌等微生物毒素也是重點(diǎn)，如金葡的腸毒素、黃曲霉毒素等微生物與食物概念：指攝入了含有生物性、化學(xué)性有害物質(zhì)的食品或把 有害物質(zhì)當(dāng)作食品攝入后出現(xiàn)的非傳染性的急性、亞急性疾病。特點(diǎn)：潛伏期短，來勢(shì)急劇，短時(shí)多人同時(shí)發(fā)??；臨床表現(xiàn)大致相同；與吃某種 食品有關(guān)；高，人與人之間并不傳染。分類：微生物性（細(xì)菌性、真菌性），化學(xué)性，動(dòng)、植物性，以細(xì)菌性最常見。細(xì)菌性食物概念：由于食入被病原菌或其毒素污染的食物后所引起的以急性腸胃炎為主的疾病。分類： 型、毒素型、不定型病原菌常見食品潛伏期病程癥狀沙門氏菌肉乳蛋6-8h3-7d腹痛發(fā)熱冷汗頭痛副溶血性弧菌水產(chǎn)品腌制品8-24h1-3d腹痛腹瀉蠟樣芽孢桿菌米飯肉乳淀粉類30-60min1d腹痛腹瀉第一節(jié)食品中腸道致病桿菌的檢驗(yàn)一、沙門氏菌檢驗(yàn)沙門氏菌屬是一群形態(tài)和培養(yǎng)特性都類似的腸桿菌科中的一個(gè)大屬，也是腸桿菌科中最重要的病原菌屬，它包括2000多個(gè)型。沙門氏菌病常在動(dòng)物中廣泛，人的沙門氏菌和帶菌也非常普通。由于動(dòng)物的生前或食品受到污染，均可使人發(fā)生食物。世界各地的食物中，沙門氏菌食物常占首位或第二位。沙門氏菌常作為食品和其他食品的致病菌指標(biāo)。因此，檢查食品中的沙門氏菌極為重要。(一)形態(tài)與染色沙門氏菌為革蘭氏

較為細(xì)長的桿菌，(1-3)μm×(0.4-0.9)μm；不產(chǎn)生芽胞，一般無莢膜，但在粘液樣變異時(shí)，可見菌體周圍粘液層增厚。除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌外，其余都具有周身鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，但也偶爾出現(xiàn)無鞭毛的變種和不運(yùn)動(dòng)變株。除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌及仙臺(tái)、傷寒、甲型副傷寒等沙門氏菌外，絕大多數(shù)都具有纖毛，能吸附于細(xì)胞表面和凝集紅血球。(二)命名沙門氏菌屬內(nèi)各種菌型的名稱，大致有：1．根據(jù)所致疾病命名如引起傷寒病的菌型，命名為傷寒沙門氏菌(S.typhi)；引起豬霍亂病的菌型，命名為豬霍亂沙門氏菌(S.cholerae-suis)，引起馬的菌型，命名為馬 沙門氏菌(S.abortus-equi)等。2．根據(jù)首先發(fā)現(xiàn)的地區(qū)命名如

沙門氏菌(S.shanghai)、自貢沙門氏菌(S.zigong)、仙臺(tái)沙門氏菌(S.sendai)、維也納沙門氏菌(S.wien)、倫敦沙門氏菌(S.london)等。3．根據(jù)人名命名如查理沙門氏菌（S.chailey）、阿德萊沙門氏菌(S.adelaide)，以發(fā)現(xiàn)者的名字命名。(三)培養(yǎng)特性沙門氏菌為需氧或兼性厭氧菌，一般在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長良好，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后呈圓形、光滑、濕潤、半透明、邊緣整齊、直徑2mm～3mm；粗糙型菌落，邊緣不整齊，表面干燥。雞白痢、雞傷寒和甲型傷寒沙門氏菌等在普通瓊脂培養(yǎng)基上生長貧瘠，形成侏儒型的菌落，乙型副傷寒沙門氏菌和霍亂沙門氏菌可呈粘液狀生長，經(jīng)37℃培養(yǎng)24h后再置室溫

1d～2d，則可看到菌落周圍有一圈粘液堤。沙門氏菌最適生長溫度為35℃～37℃，10h～42h能生長，最適生長pH為7.2～7.4。在培養(yǎng)基中若加入硫代硫酸鈉、胱氨酸、血清、葡萄糖、淀粉、腦心浸液、膠體硫或甘油等，均有助于本菌的生長。沙門氏菌屬按其生化特性，可分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ五個(gè)亞屬，其中亞屬Ⅲ又稱為亞利桑那菌，它們?cè)趤喠蛩徙U瓊脂、DHL瓊脂、HE瓊脂和SS瓊脂平板上培養(yǎng)特性各不相同。亞硫酸鉍瓊脂(BS)產(chǎn)硫化氫菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色，菌落周圍培養(yǎng)基可呈黑色或棕色；有些菌株不產(chǎn)生硫化氫，形成灰綠色的菌落，周圍培養(yǎng)基不變。1/5DHL瓊脂無色半透明：產(chǎn)硫化氫菌落中心帶黑色或幾乎全黑色。亞利桑那菌乳糖陽性菌株是粉色。2/5HE瓊脂藍(lán)綠色或藍(lán)色，多數(shù)菌株產(chǎn)硫化氫，菌落中心黑色或幾乎全黑色。亞利桑那菌乳糖陽性菌株是黃色。3/5SS瓊脂無色半透明：產(chǎn)硫化氫菌株有的菌落中心帶黑色，但不如以上培養(yǎng)基明顯。亞利桑那菌乳糖陽性菌株是粉色。4/5XLD瓊脂培養(yǎng)基多數(shù)菌株產(chǎn)硫化氫，菌落中心黑色或幾乎全黑色。(四)抗原結(jié)構(gòu)沙門氏菌具有復(fù)雜的抗原結(jié)構(gòu)，一般可分為四種：菌體抗原，又稱為Ｏ抗原；鞭毛抗原，又稱為H抗原；表面抗原又稱K抗原；以及菌毛抗原。1、菌體抗原(O抗原)沙門氏菌的Ｏ抗原主要存在于細(xì)菌細(xì)胞壁的最外層，是多糖—類脂—蛋白質(zhì)的復(fù)合物，簡(jiǎn)稱脂多糖，也就是本屬細(xì)菌的內(nèi)毒素。O抗原很穩(wěn)定，能耐熱100℃達(dá)數(shù)小時(shí)。O抗原含有許多不同的多糖成分，分別以1，2，3…等

數(shù)字表示，例如：甲型傷寒

沙門氏菌的Ｏ抗原有1、2、12；豬霍亂沙門氏菌的O抗原有6、7。O抗原與抗Ｏ 混合后，在56℃經(jīng)4h～12h或37℃過夜，出現(xiàn)顆粒狀不易搖散的Ｏ凝集現(xiàn)象。2、鞭毛抗原(H抗原)沙門氏菌的H抗原存在于鞭毛上，化學(xué)成分為蛋白質(zhì)，其特異性主要是由蛋白質(zhì)多肽鏈上氨基酸的排列順序及空間構(gòu)型來決定的。H抗原對(duì)熱不穩(wěn)定，經(jīng)加熱60℃～70℃15min，或

及酸處理后即被破壞。要使H抗原完全破壞，必須將培養(yǎng)物煮沸2.5h，短時(shí)間的加熱僅能破壞其可凝性凝集結(jié)合力，但不能破壞其凝集產(chǎn)生的能力。H抗原與抗H

經(jīng)56℃2h后，可出現(xiàn)疏松易于搖散的絮狀凝集，稱為H凝集。具有鞭毛的細(xì)菌，經(jīng)

固定后，其菌體抗原全部被遮蓋，故不能與菌體抗體(O抗體)發(fā)生凝集。H抗原可分為兩相，第1相為特異相，用英文小寫字母表示；第2相為非特異性相，用

數(shù)字表示，但少數(shù)也有用英文字母來表示的。例如：豬傷寒沙門氏菌的H抗原第一相c，第二相1、5； 沙門氏菌的第一相e、h，第二相l(xiāng)、5。具有兩相鞭毛抗原的細(xì)菌稱為雙相菌，僅具有一相鞭毛抗原的細(xì)菌稱為單相菌。如甲型副傷寒沙門氏菌只具有1相抗原a。3、表面抗原(K抗原)主要包括Vi抗原和M抗原。Vi抗原（微莢膜抗原，virulence）K抗原中的Vi抗原很重要，少數(shù)沙門氏菌如傷寒沙門氏

菌、丙型副傷寒沙門氏菌、都柏林沙門氏菌等具有Vi抗原。具有Vi抗原的細(xì)菌有抗吞噬作用和保護(hù)細(xì)菌避免相應(yīng)抗體

在補(bǔ)體參與下的溶菌作用，故毒力較強(qiáng)。Vi抗原由多糖所組成，很不穩(wěn)定，不耐熱，60℃

30min、100℃

5min、石炭酸處理或人工培養(yǎng)后易

。含有Vi抗

原的細(xì)菌懸浮液于無水乙醇或甘油中比較穩(wěn)定，加熱亦不

易破壞。經(jīng)

處理后，Vi抗原含量雖然減少，但不完全。Vi抗原位于菌體的最表層，罩在O抗原的表面。因此具有Vi抗原的細(xì)菌，由于O抗原被Vi抗原所包圍，可O抗原與抗O

發(fā)生凝集，O抗原不凝集，必須加熱60℃30min或100℃5min破壞Vi抗原后，O抗原才能與抗O

發(fā)生凝集。Vi抗原對(duì)鑒定傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌、都柏林沙門氏菌很重要。凡初步生化反應(yīng)符合沙門氏菌，而不與A～F群（組）O多價(jià) 或各單價(jià) 凝集者，均應(yīng)作Vi凝集試驗(yàn)。（2）M抗原黏多糖成分，大多數(shù)沙門氏菌在某種狀態(tài)下放置（如室溫放置）或培養(yǎng)基中含甘油、高濃度鹽時(shí)產(chǎn)生。M抗原能耐熱60℃1h，加熱100℃2h后，其可凝集性及抗體產(chǎn)生能力即被破壞，而凝集素結(jié)合能力仍然保存。用50％乙醇及1mol/L鹽酸處理后，其抗原被滅活。經(jīng) 處理或60℃處理1h后的活菌抗原，能刺激機(jī)體產(chǎn)生M凝集素。除乙型副傷寒沙門氏菌外，M抗原也可見于其他某些沙門氏菌，如鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、幕尼黑沙門氏菌、腸炎沙門氏菌、鴨沙門氏菌，故在菌型鑒定上無特殊意義。4、菌毛抗原（F抗原）沙門氏菌的菌毛有抗原性，用其免疫能獲得高效價(jià)的

。60℃加熱不能改變培養(yǎng)物的菌毛狀態(tài)，這樣處理的菌毛在相應(yīng)的抗 中仍能發(fā)生凝集，并能產(chǎn)生血細(xì)胞凝集反應(yīng)。100℃lh或120℃30min處理后，幾乎全部細(xì)菌失去菌毛，離心后重新混懸于鹽水中，不能再被抗原 凝集。菌毛凝集發(fā)生較迅速，呈云絮狀，故易與鞭毛凝集

。但不同之處是菌毛凝集不因0.005mol/L鹽酸或。以1mol/L鹽酸處理20h，凝集，并喪失其血細(xì)胞50％

處理而能使它不再與抗菌毛凝集性。(五)抗原變異1、H-O變異H－O變異指有動(dòng)力的菌株(H型)喪失H抗原而成為無動(dòng)力的變種(O型)，這些變種性質(zhì)十分穩(wěn)定，一般不能逆轉(zhuǎn)。2、S-T-R變異這是指喪失O抗原，由光滑型(S型)過渡到T

(transient)型或粗糙型(R型)的一種變異。T型菌含有一種新的對(duì)熱穩(wěn)定的抗原，稱為T抗原。T型菌不含有正常的O抗原，是介于S—R型間的過渡形體，其形態(tài)光滑，與S型無法鑒別，但不被O

凝集。3、型體變異型體變異指菌體抗原含量的改變，包括O型變異和V－W型變異。O變異沙門氏菌以O(shè)抗原分群，其中某些次要抗原1、6和12可出現(xiàn)在一個(gè)以上的 群內(nèi);例如某些含有O－1

抗原的菌株平板，取單個(gè)菌落用特異的O－1

分別鑒定則可發(fā)現(xiàn)：有的菌落可能

O－l抗原，結(jié)果與O－l

出現(xiàn)了明顯凝集(+++)；而另一些菌株可能含

有少量的O－1抗原，所以呈弱凝集反應(yīng)(+)，甚至

。（2）V－W變異這是指失去Vi抗原的變異。初次從患者分離到的具有Vi抗原的菌株稱V菌株。V菌株在人工培養(yǎng)基上多次移種后，逐漸失去Vi抗原而變成W型菌株，但其O及H抗原不受影響，也就是說仍可與相應(yīng)的O

中發(fā)生凝集。4、位相變異位相變異是鞭毛抗原的一種質(zhì)的改變。這種變異在沙門氏菌中的雙相菌中常有，而單相菌不發(fā)生這種變異，因而在雙相菌鑒定時(shí)非常重要。通常在一個(gè)培養(yǎng)物內(nèi)二相并存，一株雙相菌移種至平板，l相與2相的菌落各占半數(shù)，但挑取單個(gè)菌落（第1相或2相)在培養(yǎng)基上多次移種后，其后代又可出現(xiàn)第1相與第2相菌落各半的情況，這種由一相變?yōu)榱硪幌嗟淖儺?，稱為位相變異。一株雙相菌，如果分離H抗原為單相時(shí)，大多是因一相掩蓋另一相抗原。此時(shí)可用誘導(dǎo)法促使另一相抗原出現(xiàn)，一般都可恢復(fù)為雙相菌。(六)抵抗力沙門氏菌對(duì)熱及外界環(huán)境的抵抗力屬于中等。60℃20min～30min即被殺死；在普通水中雖不易繁殖，但可存活2周～3周；在自然環(huán)境的糞便可生存1～2個(gè)月；在冰箱中可生存3～4個(gè)月；在-25℃可存活10個(gè)月左右；在干燥的墊草中可存活8周～20周。當(dāng)水煮或油炸大塊魚、肉、香腸、肉餅時(shí)，若食品 溫度達(dá)不到足以殺死細(xì)菌的情況下，就會(huì)有細(xì)菌殘留。對(duì)化學(xué)藥品的抵抗力較弱。如以5％苯酚或1︰500升處理，5min可殺死；膽鹽、煌綠及孔雀綠等對(duì)本屬細(xì)菌的抑制作用較大腸桿菌為小。?？捎靡?/p>

選擇性培養(yǎng)基；對(duì)氯霉素敏感(目前發(fā)現(xiàn)，許多菌株都能抵抗一定濃度的硫胺類、土霉素和鏈霉素等藥品)。（七）沙門氏菌食物沙門氏菌能引起人和動(dòng)物的疾病，主要是通過消化道傳染。沙門氏菌食物 的癥狀是：急性胃腸炎，如

、腹痛、腹瀉和因細(xì)菌毒素引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀（如發(fā)燒、頭痛、有時(shí)有痙攣）。少量沙門氏菌一般不會(huì)引起

。 發(fā)生跟菌量、菌型、毒力大小以及 差異有關(guān)。由沙門氏菌所引起的病統(tǒng)稱為沙門氏菌病。沙門氏菌病是我國及世界各地常見病及多發(fā)病，是現(xiàn)代微生物學(xué)、流行病學(xué)和傳染病學(xué)中的重要內(nèi)容之一。沙門氏菌屬的細(xì)菌都有致病性。有的

型專對(duì)人致病，如傷寒沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌為人類的傷寒和副傷寒病原菌；有些

型專對(duì)動(dòng)物致病，如馬 和羊

沙門型為宿主特異性較強(qiáng)氏菌為馬和羊的病原菌。專對(duì)人或?qū)?duì)動(dòng)物致病的的沙門氏菌。有些

型的沙門氏菌對(duì)人和動(dòng)物都有致病性，它們的宿主特異性較弱。如乙型副傷寒沙門氏菌、丙型副傷寒沙門氏菌為人類副傷寒病原菌；鼠傷寒沙門氏菌為鼠傷寒的病原菌；腸炎沙門氏菌、都柏林沙門氏菌為牛傷寒的病原菌等，這些沙門氏菌既為動(dòng)物的病原菌又是人的致病菌。1、流行病學(xué)沙門氏菌是引起食物 的常見病原菌。常見食物中毒沙門氏菌的主要來源見表。2.沙門氏菌污染食物的原因很多，其主要原因?yàn)棰俨⌒蠡虿∏?/p>

制成食品；②病畜或病禽的糞便污染了食物；③帶菌人在制作食物的過程中污染了食物；④生熟食品未分開而造成的交叉污染。當(dāng)很多人共進(jìn)同一種染菌食物時(shí)，并非所有進(jìn)食者都得病，而患病類型也常不一致，這與機(jī)體反應(yīng)狀態(tài)和致病菌的數(shù)量有關(guān)。中以兒童及其青壯年為多見。病后的免疫力不強(qiáng)，可反復(fù)，甚至同一血清型細(xì)菌而發(fā)病。3、預(yù)防①加強(qiáng)食品衛(wèi)生管理，防止污染：主要應(yīng)采取積極措施控制沙門氏菌的病畜肉類流入市場(chǎng)。②控制繁殖：沙門氏菌的最適繁殖溫度為37℃，但在

20℃以上即能大量繁殖。因此低溫食品是一項(xiàng)重要預(yù)防措施。③殺滅病原菌：加熱殺滅病原微生物也是預(yù)防食物中毒的重要措施。（八）沙門氏菌檢驗(yàn)程序GB

4789.4-2010GB

4789.4-2010沙門氏菌檢驗(yàn)流程前增菌：用無選擇性的培養(yǎng)基使處于瀕死狀態(tài)的細(xì)菌恢力;BPW選擇性增菌：使沙門氏菌優(yōu)勢(shì)繁殖，其它細(xì)菌受到抑制;SC+TTB選擇性平板分離培養(yǎng)：BS+XLD/HE/顯色培基生化試驗(yàn)：鑒定分離出來的細(xì)菌是否符合沙門氏菌的生化譜，可采用API20E等成套生化試劑學(xué)鑒定：特異性鑒定到種。BS→XLDDHLHE前增菌BPW（堿性蛋白胨水）：用于修復(fù)受損傷的沙門氏菌，但由于其不具有選擇性，因此增菌時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致雜菌生長過多干擾鑒定結(jié)果，故建議最好控制在4h為好。增菌后的樣品與選擇性培養(yǎng)基按1：10加入，例如1mL樣品加入10mL

SC中前增菌而直接進(jìn)行選擇性增菌的樣品最好與增菌液按1：1稀釋，而不可按1：10稀釋，因?yàn)槭称分猩抽T氏菌數(shù)量較少，1：10稀釋將降低檢出率。常用選擇性培養(yǎng)基比較SC

（

酸鹽胱氨酸增菌液）TTB（四硫磺酸鈉煌綠增菌液）MM酸鹽抑菌胱氨酸促生長四硫酸鈉和煌綠抑菌氯化鎂和孔雀綠抑菌適合傷寒沙門菌和甲型副傷寒沙門菌生長，37℃適合其他沙門菌生長，42℃，18-24h為防漏檢宜SC+TTB/MM主要雜菌為大腸埃希氏菌，而兩者區(qū)別在于是否發(fā)酵乳糖，故加入乳糖、酸堿指示劑兩個(gè)指針來判斷可疑菌落加入硫化氫是因?yàn)榈贗II屬產(chǎn)硫化氫而緩慢發(fā)酵乳糖

BS選擇性最強(qiáng)，可延長時(shí)間以免沙門菌生長亦被抑制多采用BS搭配DHL/SS/HE/WS，互補(bǔ)防漏檢指示系統(tǒng)指示效果及可疑菌落特點(diǎn)BS葡萄糖+H2S黑色有金屬光澤、棕褐或灰色，周圍培基黑或棕色，或不產(chǎn)硫化氫而呈灰綠色DHL乳糖+H2S乳糖（+）：粉紅色，（-）：無色半透明無色半透明，產(chǎn)硫化氫者中心黑色SS乳糖+H2SHE乳糖+H2S乳糖（+）：黃色，（-）：藍(lán)色藍(lán)綠色或藍(lán)色，產(chǎn)硫化氫者中心黑色WS乳糖+H2S三糖鐵（TSI）試驗(yàn)原理葡萄糖（1g/L）蔗糖（10g/L）乳糖（10g/L）原理：三糖利用培養(yǎng)基：干粉或生化管接種方法：穿刺劃線結(jié)果：產(chǎn)酸／堿，產(chǎn)氣，硫化氫注意：

斜面三糖鐵培養(yǎng)基成分除牛肉膏、蛋白胨外，主要有葡萄糖(1g/L)、乳糖(10g/L)、蔗糖(10g/L)、二價(jià)鐵鹽、酚紅等，pH為7.4。培養(yǎng)基做好后，擺成斜面，培養(yǎng)基顏色為磚紅色。使用時(shí)先將待檢菌株穿刺接種，然后再將待檢菌株劃線接種于斜面上，36℃培養(yǎng)18～24h。三糖鐵（TSI）反應(yīng)模式及意義葡萄糖乳糖蔗糖說

明+++分解糖類產(chǎn)酸→pH↓→指示劑變黃→斜面底層均產(chǎn)酸變黃記為A/A模式+--斜面因葡糖含量少故分解完后利用蛋白胨產(chǎn)堿且大于酸量故由黃而深紅，記為K，底層無氧故緩慢分解葡糖而產(chǎn)酸變黃記為A，K/A模式++-由于乳糖或蔗糖量大故斜面和底層均產(chǎn)酸變黃，亦為A/A模式+-+若分解硫化氫則產(chǎn)生黑色FeS沉淀，若分解糖類產(chǎn)氣則可見氣泡或裂縫只有斜面和底層均產(chǎn)酸，且賴氨酸脫羧酶

者才可排除為沙門菌的可能性其余情況既可能是也可能不是沙門氏菌屬的細(xì)菌化鉀和賴氨國標(biāo)中采用靛基質(zhì)、尿素、酸四項(xiàng)生化試驗(yàn)。若硫化氫＋、靛基質(zhì)－、尿素－、

化鉀－、賴氨酸＋，可判斷為沙門氏菌屬，這是典型沙門氏菌的反應(yīng)。商品化的成套生化試劑盒API生化鑒定系統(tǒng)是法國梅里埃生物公司 的微生物生化檢測(cè)系列產(chǎn)品，原理是利用細(xì)菌對(duì)于各類化學(xué)物質(zhì)（碳水化合物、氨基酸及蛋白質(zhì)、無機(jī)鹽類等）的代謝能力以及酶類的存在與否等生化特性來鑒定細(xì)菌的 法，當(dāng)反應(yīng)能夠?qū)е路磻?yīng)體系的PH值變化或產(chǎn)生顯色物質(zhì)，加入合適的酸堿指示劑或顯色劑就可以反映出來。API試驗(yàn)的本質(zhì)就是利用生化試驗(yàn)的方法，檢測(cè)細(xì)菌對(duì)各種物質(zhì)的代謝作用及其代謝產(chǎn)物，常用于細(xì)菌的鑒別。1.分離單個(gè)菌落2.調(diào)制菌液3.將菌液接種到小杯中4.試條放進(jìn)孵育

箱內(nèi)，35–37度，18-24h5.附加試劑加進(jìn)適當(dāng)小孔內(nèi)7.將反應(yīng)結(jié)果輸入數(shù)據(jù)庫

中得到生化譜代碼8.

自動(dòng)查詢報(bào)告最符合的菌名6.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)色卡判讀反應(yīng)結(jié)果梅里埃Vitek-2和其它國產(chǎn)成套試劑玻片凝集法原理單價(jià)

：含單一抗體的多價(jià)

：含多種抗體的

如A~F多價(jià)步驟：先多價(jià)后單價(jià)，先常見的后不常見的，先O后H，根據(jù)結(jié)果查表得到鑒定菌種抗原準(zhǔn)備：多采用15g/L瓊脂斜面培養(yǎng)物若O

不凝集可轉(zhuǎn)種至高含量（2.5

~3%）瓊脂培基上，干燥利于O-Ag發(fā)育玻片凝集法操作先應(yīng)在玻片上滴加1滴生理鹽水，加入菌苔做對(duì)照并觀察是否自凝，若有則