免疫分析方法課件

免疫分析方法目錄原理應(yīng)用分類免疫擴(kuò)散技術(shù)（Immunodiffusion）免疫電泳技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù)原理免疫分析法利用抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)檢測(cè)各種物質(zhì)（藥物、激素、蛋白質(zhì)、微生物等）的分析方法分類非標(biāo)記免疫分析技術(shù)：免疫擴(kuò)散、免疫電泳標(biāo)記的免疫分析技術(shù)：酶免疫分析、放射免疫分析、其它免疫分析法（熒光免疫技術(shù)、膠體金免疫技術(shù)、發(fā)光免疫技術(shù)和鐵蛋白免疫技術(shù)等）免疫擴(kuò)散技術(shù)（Immunodiffusion）基本原理：可溶性的抗原和相應(yīng)的抗體在溶液或凝膠中彼此接觸，形成不溶性抗原-抗體復(fù)合物沉淀。單向免疫擴(kuò)散(Singleimmunodiffusion)基本原理：指抗原和抗體兩種成分中只有一種擴(kuò)散，另一種被固定在凝膠中。雙向免疫擴(kuò)散（Doubleimmunodiffusion)基本原理：指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在瓊脂介質(zhì)中相互擴(kuò)散，彼此相遇后形成一定類型的特異性沉淀線。免疫電泳技術(shù)基本原理：免疫擴(kuò)散與電泳技術(shù)相結(jié)合。類型：對(duì)流免疫電泳、火箭免疫電離、免疫電泳、雙向免疫電泳（交叉免疫電泳）對(duì)流免疫電泳基本原理：多數(shù)蛋白質(zhì)抗原在堿性緩沖液中帶負(fù)電荷，在電泳時(shí)從負(fù)極向正極移動(dòng)?？贵w在堿性緩沖液只帶微弱的負(fù)電荷，且相對(duì)分子質(zhì)量較大，電泳力較小，在瓊脂電滲力作用下由正極向負(fù)極移動(dòng)。結(jié)果抗原和抗體定向?qū)α?，在兩孔間相遇時(shí)發(fā)生反應(yīng)，并在比例合適處形成肉眼可見白色沉淀線。火箭免疫電泳（Rocketimmunoelectrophoresis)基本原理：也稱免疫擴(kuò)散，抗原在含有定量抗體的瓊脂糖中泳動(dòng)，兩者比例適宜時(shí)，在較短時(shí)間內(nèi)生成錐形的沉淀峰。在一定濃度范圍內(nèi)，沉淀峰的高度與抗原含量成正比。免疫電泳基本原理：先將待側(cè)樣本作瓊脂凝膠電泳，各蛋白抗原組分被分成不同的區(qū)帶，然后與電泳方向平行挖一小槽，加入相應(yīng)的抗血清，把分成區(qū)帶的蛋白抗原成分作雙向免疫擴(kuò)散，在各區(qū)帶相應(yīng)的位置形成沉淀弧。免疫標(biāo)記技術(shù)基本原理：采用熒光素、同位素或酶等示蹤物質(zhì)標(biāo)記抗體（或抗原）進(jìn)行抗原-抗體反應(yīng)，通過對(duì)免疫復(fù)合物中的標(biāo)記物的測(cè)定，達(dá)到對(duì)免疫反應(yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)的目的。標(biāo)記免疫技術(shù)主要類型：放射免疫技術(shù)、酶免疫技術(shù)、熒光免疫技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)放射免疫標(biāo)記技術(shù)（RIA）基本原理:根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理，以放射性同位素標(biāo)記抗原或抗體，根據(jù)射線的多少定性或定量測(cè)定待檢標(biāo)本中抗體或抗原的量。酶免疫標(biāo)記技術(shù)（ELISA）基本