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植物染色體標(biāo)本的制備與觀察實(shí)驗(yàn)報(bào)告600字
實(shí)驗(yàn)七植物染色體標(biāo)本的制備與觀察一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)植物染色體標(biāo)本的制備技術(shù),掌握染色體的技術(shù)方法,了解染色體的生物學(xué)意義。二、實(shí)驗(yàn)用品Carnoy固定液、0.1%秋水仙素溶液、1mol/HCL、Schiff溶液、亞硫酸水溶液(漂洗液)、混合酶液(纖維素酶、果膠酶各1%-2%)、Carborfuchsin(卡寶品紅)染液配方1、配方2三、實(shí)驗(yàn)方法1.取材:將大蒜培養(yǎng),待胚根長(zhǎng)達(dá)1-2cm時(shí)。竊取0.5cm長(zhǎng)的根尖部分。2.預(yù)處理:將切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室溫下處理3-4h3.固定:取出根尖,投入Carnoy液固定2-24h,換入70%酒精,暫時(shí)保存4.水解:把根尖投入預(yù)熱的58-60℃1mol/HCL中,恒溫下水解14-15min.5.染色:用配方2染5-10min6.用蒸餾水西區(qū)多余染液7.酶解:酶解20min左右8.洗滌:用蒸餾水洗滌,除去殘留酶液后加45%醋酸。9.壓片:將根尖置于載玻片上,滴半滴45%醋酸,蓋上蓋玻片,壓片10.鏡檢四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析這是用大蒜根尖所制的玻片觀察到的,只能看到被染色的核,但未能清晰觀察搭配中期分裂相中染色體的排列。分析實(shí)驗(yàn)失敗原因如下:1.處理時(shí)間不對(duì),處理時(shí)細(xì)胞未處于分裂中期2.所用試劑配的有問(wèn)題,導(dǎo)致最終只能看到核被染色,但看不到中期染色體的清晰排布。
第二篇:實(shí)驗(yàn)七植物染色體標(biāo)本的制備與觀察實(shí)驗(yàn)報(bào)告(1)1800字細(xì)胞及遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告陳香燕201008030103生科1班實(shí)驗(yàn)七植物染色體標(biāo)本的制備與觀察(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)植物染色體標(biāo)本的制備技術(shù),掌握染色體的技術(shù)方法,了解染色體的生物學(xué)意義。(二)實(shí)驗(yàn)原理植物染色體標(biāo)本的制備,常用分生組織,如根尖、莖尖和嫩葉做材料。常規(guī)壓片法仍是當(dāng)今觀察植物染色體常用的方法,其程序包括取材、預(yù)處理、固定、解離、染色和壓片等步驟。由于秋水仙素可以阻斷細(xì)胞在分裂中期紡錘體(微管二聚體)的形成,以至于不能拉動(dòng)染色體分開(kāi)向細(xì)胞兩極,因此可以使細(xì)胞分裂停止在分裂中期,再經(jīng)過(guò)染色,壓片,鏡檢之后便可觀察到細(xì)胞的染色體形態(tài)。(三)實(shí)驗(yàn)用品一、材料:蠶豆二、試劑1.Carnoy固定液2.0.1%秋水仙素溶液3.1mol/LHCl4.Schiff試劑5.亞硫酸水溶液(漂洗液)6.Carborfuchsin(卡寶品紅)染液(四)實(shí)驗(yàn)方法步驟1.取材:將蠶豆種子培養(yǎng)在培養(yǎng)皿內(nèi)的濕濾紙上,室溫或28°C下發(fā)芽,待胚根長(zhǎng)達(dá)1~2cm時(shí),切取0.5cm長(zhǎng)的根尖部分。2.預(yù)處理:將切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室溫下處理3~4h。3.水解:把根尖投入預(yù)熱的58~60°C1mol/L熱HCl中,恒溫條件下水解14~15min4.染色:倒去熱HCl,滴加卡寶品紅少許,染色5~10分鐘。5.洗滌:吸去卡寶品紅試劑,用蒸餾水換洗2~3次,每次1~2min。除去殘留染色液后加幾滴45%醋酸。6.壓片:用吸管從醋酸中吸取材料,置干凈載玻片上,材料周圍保留半滴45%醋酸,蓋上蓋玻片,其上放一片吸水紙。左手指壓住吸水紙的左邊,右手指從吸水紙的左端向右方輕輕抹去,再用鉛筆擦頭從蓋玻片上輕輕敲打,使細(xì)胞均用散開(kāi)。7.鏡檢:把壓好的片子放在顯微鏡下,先觀察細(xì)胞分散狀況和中期分裂相的多少,再檢查分裂中期細(xì)胞中染色體是否完全散開(kāi)。如若染色體分散不好而難以分辨和計(jì)數(shù),可取下片子,平放桌面上,用手指隔著吸水紙?jiān)谏w玻片上稍施壓力,如果操作細(xì)心,用力適度,便可很容易得到染色體分散良好的壓片標(biāo)本,供觀察,計(jì)數(shù)和照相用。(五)實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。(六)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析與討論結(jié)果分析:由上圖實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,可以較清晰的看到根尖細(xì)胞核內(nèi)的染色體,細(xì)胞分散均勻,形態(tài)完整,中期分裂相中染色體數(shù)目較齊全,說(shuō)明本實(shí)驗(yàn)較成功,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,第一次用Schiff試劑染色,效果不夠理想,可于水解后改用卡寶品紅染色(5~10min)。獲得上圖的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,這是由于卡寶品紅具有染色快、著色深以及適用性廣等特點(diǎn),因此多數(shù)植物的根尖、幼芽、花藥以及培養(yǎng)的細(xì)胞或愈傷組織,經(jīng)卡寶品紅染色,都能得到良好的結(jié)果。討論:植物染色體標(biāo)本的制備與觀察的實(shí)驗(yàn)要獲得成功,關(guān)鍵要注意哪幾個(gè)問(wèn)題?1、要保證植物種子的發(fā)芽成功,即要注意室內(nèi)溫度在28°C內(nèi),給予適當(dāng)充足的水分,不能讓種子干涸死亡。若發(fā)芽條件不適宜,導(dǎo)致種子發(fā)芽結(jié)果不理想,會(huì)使根尖細(xì)胞分裂不旺盛,或沒(méi)有分裂,最終實(shí)驗(yàn)將觀察不到染色體,只能看到細(xì)胞的大致輪廓以及核的形態(tài)。2、秋水仙素液的濃度要在0.1%之內(nèi),不能過(guò)濃或稀,處理時(shí)間在3~4小時(shí),若處理時(shí)間不夠長(zhǎng),則有可能使抑制紡錘體失敗,導(dǎo)致不能成功看到形態(tài)清晰的染色體。3、染色時(shí),最好用卡寶品紅進(jìn)行染色,得到的效果比Schiff試劑染色效果好,染色時(shí)間應(yīng)在5~10分鐘內(nèi),時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則使染色過(guò)深。觀察不清楚染色體的形態(tài)。4、壓片時(shí)一定要注意不能留有氣泡,否則影響鏡檢的效果,用鉛筆擦頭從蓋玻片上輕輕敲打時(shí),要用力適度,若用力過(guò)猛,則容易將蓋玻片壓碎,一定要細(xì)心的將蓋玻片壓在載玻片的材料上,趕走氣泡,同時(shí)使細(xì)胞均用散開(kāi),若染色體分散不開(kāi)或不完全則鏡檢時(shí)難以分辨和計(jì)數(shù)。5、試驗(yàn)中為什么取2~3mm的根尖部分制作裝片?因?yàn)槟苓M(jìn)行細(xì)胞分裂的分生區(qū)處于此部位。6、處于細(xì)胞有絲分裂的那一時(shí)期細(xì)胞數(shù)量最多?此現(xiàn)象說(shuō)明什么?處于間期的細(xì)胞數(shù)目最多,因?yàn)榧?xì)
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