植物組織培養(yǎng)作業(yè)

PAGEPAGE6植物組織培養(yǎng)作業(yè)1、什么是植物組織培養(yǎng)？答：植物組織培養(yǎng)，又稱植物克隆，是指通過無菌操作分離植物體的一部分（接種到培養(yǎng)基上，在人工控制的條件下（）進行培養(yǎng)，使其產(chǎn)生完整植株的過程。2、什么是"外植體"?答：外植體泛指第一次接種所使用的植物組織、器官等一切材料。如，頂芽、莖段、葉片等。3？5植株培養(yǎng)：對完整植株材料的培養(yǎng)，包括扦插苗培養(yǎng)和種子苗培養(yǎng)。實培養(yǎng)、種子培養(yǎng)。組織培養(yǎng)（各種組織、愈傷組織）：養(yǎng)、薄壁組織培養(yǎng)、輸導(dǎo)組織培養(yǎng)。非融合培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)（）養(yǎng)、微室培養(yǎng)。4、植物組織培養(yǎng)有哪些特點？答：植物組織培養(yǎng)的特點：培養(yǎng)條件可以人為控制生長周期短，繁殖率高管理方便，利于工廠化生產(chǎn)和自動化控制5、你認(rèn)為植物組織培養(yǎng)技術(shù)在當(dāng)前的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有什么價值？為什么？答：植物組織培養(yǎng)技術(shù)在當(dāng)前農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的價值及原因：快速繁殖種苗用組織培養(yǎng)的方法進行快速繁殖是生產(chǎn)上最有潛力的應(yīng)用，包括花卉觀賞植物、蔬菜、果樹、大田作物及其他經(jīng)濟作物。快繁技術(shù)不受季節(jié)等條件的限制，生長周期短，而且能使不能或很難繁殖的植物進行增殖。無病毒苗的培養(yǎng)組織培養(yǎng)無病毒苗的方法已在很多作物的常規(guī)生產(chǎn)上得到應(yīng)用，如馬鈴薯，甘薯，草莓，蘋果，香石竹，菊花等，而且已有不少地區(qū)建立了無病毒苗的生產(chǎn)中心，這對于無病毒苗的培養(yǎng)、鑒定、繁殖、保存、利用和研究，形成了一個規(guī)范的系統(tǒng)程序，從而達到了保持園藝植物的優(yōu)良種性和經(jīng)濟性狀的目的。在育種上的應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)為育種提供了許多手段和方法，使育種工作在新的條件下更有效的進行。主要以下幾點應(yīng)用：①倍性育種，縮短育種年限，雜種優(yōu)勢明顯；②克服遠緣雜交的不親合性和不孕性（胚培養(yǎng)）；③保存種質(zhì)。4）人工種子①人工種子結(jié)構(gòu)完整，體積小，便于貯藏與運輸，可直接播種和機械化操作。②不受季節(jié)和環(huán)境限制，胚狀體數(shù)量多、繁殖快、利于工廠化生產(chǎn)。③利于繁殖周期長、自交不親和、珍貴稀有的一些植物，也可大量繁殖無病毒材料。④可在人工種子中加入抗生素、菌肥、農(nóng)藥等成分，提高種子活力和品質(zhì)。⑤體細胞胚由無性繁殖體系產(chǎn)生，可以估定雜種優(yōu)勢。5）工廠化育苗工廠化育苗的特點是繁殖快，整齊、一致，無病蟲害，周期短，周年生產(chǎn)，性狀穩(wěn)定，并且在生產(chǎn)上有如下作用：①有利于繁殖系數(shù)低、雜合材料的快速繁殖；出的表現(xiàn)型優(yōu)異植株的優(yōu)良遺傳性；④組織培養(yǎng)育苗的無毒化生產(chǎn)，還可減少病害傳總之，隨著組織培養(yǎng)這一技術(shù)的發(fā)展及各種培養(yǎng)方法的廣泛應(yīng)用，使這一技術(shù)在遺傳育種、品種繁育等方面表現(xiàn)出了巨大的潛力，特別是生物工程和工廠化育苗實施以后，它將以新興產(chǎn)業(yè)的面目在技術(shù)革命中發(fā)揮重大作用。6？分實驗室及其作用如下：洗滌室（準(zhǔn)備室），器具的洗滌、干燥、消毒配置室，進行藥品的配置、保存、分裝滅菌室，培養(yǎng)基及使用器具的消毒與滅菌，放置拖鞋、工作服、工作帽接種室，進行材料的接種，內(nèi)置超凈工作臺或接種箱培養(yǎng)室，將接種的材料進行無菌培養(yǎng)生長的場所7？pH？PH，5?6.55.8PH的組成而不同。pH0.2?0.8,pH，0.5pHpH>6.0<5.0好。81）,胞和原生質(zhì)體培養(yǎng)，專為培養(yǎng)煙草細胞而設(shè)計的。B5植物，尤其木本植物組培可選擇，專為培養(yǎng)大豆根細胞而設(shè)計的。White2計。2N6水稻等禾谷類作物花藥培養(yǎng)而設(shè)計。

KNQ和NH4 SC4含量高，適合花藥培養(yǎng)，專為KM-8P廣泛用于原生質(zhì)體培養(yǎng)，包括融合的培養(yǎng)，專為原生質(zhì)體培養(yǎng)而設(shè)計。9、培養(yǎng)基的成分主要包括有哪些？答：培養(yǎng)基的成分主要包括：水、無機鹽、有機物、植物激素、培養(yǎng)體的支持材料、其它輔助性物質(zhì)。10、培養(yǎng)基中常用的植物激素有哪些？各有何作用？答：培養(yǎng)基中常用的植物激素及其作用：生長素類：IAAIBA24-D，NAA等。（10.510.8mg/L）就可促進生長，其次是莖和芽。細胞分裂素類：這類激素是腺嘌呤的衍生物，包括 6-BA（6-芐基腺嘌）、Kt（kinetin）Zt（zeatin）等。其作用：①誘導(dǎo)芽的分化促進側(cè)芽萌發(fā)生長。細胞分裂素與生長素相互作用，當(dāng)組織內(nèi)細胞分裂素/生長素的比值高時，誘導(dǎo)愈傷組織或器官分化出不定芽；②促進細胞分裂與擴大。細胞分裂素多用于誘導(dǎo)不定芽的分化、莖、苗的增殖；③抑制根的分化。避免在生根培養(yǎng)時使用。20GA。其作用：促莖伸長，促胚發(fā)育成植株；打破休眠。4）脫落酸：ABA其作用：抑制細胞分裂和神長、促進脫落和衰老、促進休眠和提高抗逆能力，促進氣孔關(guān)閉；影響開花；影響性分化等。11、外植體的選擇需注意哪些問題？什么季節(jié)取材最好？答：1）外植體的選擇需注意的問題：不同的植物、器官和組織其形態(tài)發(fā)生能力很不相同。在組培中，選擇合適的，最易表達全能性的部位，是決定組培系成功建立的前提之一。在選擇植物外植體進行組織培養(yǎng)時，還要考慮待培養(yǎng)材料的來源是否保證，是否容成苗；同時要考慮到該外植體，特別是經(jīng)過脫分化產(chǎn)生的愈傷組織，是否會引起不良變異，喪失原品種的優(yōu)良性狀。2）對大多數(shù)植物而言，應(yīng)在生長開始的季節(jié)采樣較好，若在生長末期或已進入休眠期時取樣，則外植體可能對誘導(dǎo)反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)。在母株生長旺盛的季節(jié)取材料，不僅成活率高而且增殖率也大。如，馬鈴薯在 12月和4月所取的外植2-35-11月間所取的材料，則很少能夠再生。12、在組織培養(yǎng)過程中，常用的滅菌方法有哪些？答：常用的滅菌方法可分為物理的和化學(xué)的兩類1）物理方法滅菌：①濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）一培養(yǎng)基滅菌④過濾滅菌（不耐熱的物質(zhì)）⑤紫外線一空間滅菌2）化學(xué)方法滅菌：①.熏蒸滅菌②擦涂滅菌一物體表面滅菌③消毒劑滅菌一用于植物材料表面滅菌13、何謂外植體褐變？產(chǎn)生褐變的主要原因？如何防止減輕褐變現(xiàn)象的發(fā)生？答：1）外植體褐變，是指在接種后，其表面開始褐變，有時甚至?xí)拐麄€培養(yǎng)基褐變的現(xiàn)象。2）產(chǎn)生褐變的主要原因：①植物品種：研究表明，由于多酚氧化酶活性上的差異，不同品種間的褐變現(xiàn)象是不同的。因此，在培養(yǎng)過程中應(yīng)該有所選擇，對不同的品種分別進行處理。②生理狀態(tài)：由于外植體的生理狀態(tài)不同，在接種后褐變程度也有所不同。一般來說，幼嫩的組織在接種后褐變程度不明顯，而老熟的組織在接種后褐變程度較為嚴(yán)重。③培養(yǎng)基成分：濃度過高的無機鹽會使某些觀賞植物的褐變程度增加，此外，細胞分裂素的水平過高也會刺激某些外植體的多酚氧化酶的活性，從而使褐變現(xiàn)象加深。④培養(yǎng)條件不當(dāng)：如果光照過強、溫度過高、培養(yǎng)時間過長等，均可使多酚氧化酶的活性提高，從而加速被培養(yǎng)的外植體的褐變程度。3）防止、減輕褐變現(xiàn)象發(fā)生的措施：象明顯減輕。減輕材料的褐變現(xiàn)象。0.1%0.512-24h7-l0d后，褐變現(xiàn)象便會得到控制或大為減輕。14答：1）試管苗的特點：形態(tài)解剖方面根：①無根毛。②根與苗的輸導(dǎo)組織不相連。葉：①葉的角質(zhì)和蠟質(zhì)層不發(fā)達，容易蒸騰失水。②無表皮毛，保水和反光能力差。③葉細胞結(jié)構(gòu)疏松。④葉氣孔突出，張大。生理功能方面

⑤葉存在排水孔。①根的生理功能：低，吸水能力弱。②葉片表面極易散失水分。③氣孔不能關(guān)閉④葉光和能力較低，C02固定能力差2）移栽前要注意：移栽要抓三個關(guān)鍵：①水分的平衡（不要失水過多）②溫度和光照（不能太高）③光和能力逐步形成或加強提高移栽成活率的技術(shù)措施①移栽前的工作：試管苗馴化處理，措施是對外界要增加濕度、減弱光照；對試管內(nèi)要通透氣體、增施二氧化碳肥料、逐步降低空氣濕度等；對栽培馴化基質(zhì)要進行菌。移栽前可將培養(yǎng)物不開口移到自然光照下鍛煉 2-3d，讓試管苗接受強光的照射，使其長得壯實起來，然后再開口練苗 1-2d，經(jīng)受較低濕度的處理，以適應(yīng)將來自然濕度的條件。6X6cm-10x10cm料缽，也可用育苗盤。15、為什么說植物器官培養(yǎng)是組織培養(yǎng)的一個最重要的方面？廣。器官培養(yǎng)是研究器官生長、營養(yǎng)代謝、生理生化、組織分化和形態(tài)建成的最好材料和方法；而且器官培養(yǎng)在生產(chǎn)實踐上具有重要的應(yīng)用價值。所以說植物器官培養(yǎng)是組織培養(yǎng)的一個最重要的方面。16、植物脫毒培養(yǎng)的意義是什么？答：植物脫毒培養(yǎng)的意義：去除病毒危害，提咼作物品質(zhì)與產(chǎn)量6070花卉、蔬菜和果樹等得到廣泛的應(yīng)用。減少環(huán)境污染，有利于保護環(huán)境栽培去病毒植物可減少藥劑的使用17、簡述植物莖尖脫毒和熱處理脫毒的原理與方法答：1）植物莖尖脫毒原理：感染病毒植株的體內(nèi)病毒的分布不均勻，病毒的數(shù)量隨植株部位及年齡而異，越靠近莖頂端區(qū)域的病毒的感染程度越低，生長點 （分生組織0.1-1.0mm區(qū)）則幾乎不含或含病毒很少。莖尖培養(yǎng)脫毒，由于其脫毒效果好，后代穩(wěn)定，所以是目前培育無病毒苗最廣泛和最重要的一個途徑。方法：外植體培養(yǎng)，包括①莖尖：頂端分生組織及其下方 1—3個幼葉原構(gòu)成。②莖的頂端分生組織：莖的最幼齡葉原基上方的一部分，最大直徑約100um，最大長度約250um熱處理脫毒方法：①溫湯浸漬處理：50C10min至數(shù)小時。（）35~40C38C35C