高二生物【7】微生物的實驗室培養(yǎng)

微生物的實驗室培養(yǎng)高二年級生物學(xué)果酒泡菜酸奶腐乳法國科學(xué)家巴斯德研究和利用微生物的前提——防止雜菌污染、獲得純凈培養(yǎng)物為培養(yǎng)的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件確保無處不在的其他微生物無法入侵微生物的實驗室培養(yǎng)無菌技術(shù)2培養(yǎng)基的制備1微生物的純化培養(yǎng)3培養(yǎng)基的制備1盛有液體培養(yǎng)基的錐形瓶盛有固體培養(yǎng)基的錐形瓶和培養(yǎng)皿長有大腸桿菌菌落的固體培養(yǎng)基按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)——培養(yǎng)基（一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽）1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成培養(yǎng)基組分提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素蛋白胨10g碳源、氮源和維生素NaCl5g無機鹽H2O定容至1000mL氫元素、氧元素乳酸桿菌霉菌大腸桿菌破傷風(fēng)桿菌計算、稱量溶化滅菌滅菌后的培養(yǎng)基倒平板無菌操作臺1.滅菌后的培養(yǎng)基待溫度降到50℃左右時,才能用來倒平板；2.錐形瓶口要通過火焰；3.平板冷凝后要倒置；4.若不慎將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，則不用該平板來培養(yǎng)微生物。注意事項無菌技術(shù)2100℃煮沸5-6min煮沸消毒化學(xué)藥劑巴氏消毒紫外線70-75℃煮30min或80℃煮15min酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等紫外線照射30min消毒防止雜菌污染，有效避免操作者自身被微生物感染滅菌濕熱滅菌利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。高壓蒸汽滅菌效果最好。干熱滅菌使用干熱滅菌箱，在160-170℃中加熱1-2h可達(dá)到滅菌目的。灼燒滅菌將微生物的接種工具直接在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可徹底滅菌。微生物的純化培養(yǎng)3接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體培養(yǎng)物由單一個體繁殖所獲得的微生物群體純培養(yǎng)物獲得純培養(yǎng)物的過程純化培養(yǎng)純化大腸桿菌通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線，將聚集的菌種逐步稀釋分散平板劃線法將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基的表面培養(yǎng)稀釋涂布平板法平板劃線法視頻網(wǎng)址鏈接：/s?__biz=MzU5MzQwMjI2Ng==&mid=2247483882&idx=1&sn=80348c0841ce9a5016b44886da42ba9c&chksm=fe10411fc967c8099832b6871b7761f60bcf104f8a55cd07f67c3ba9bf17384b261a605c216f&token=1330435245&lang=zh_CN#rd平板劃線操作的注意事項1每次劃線前后都要灼燒接種環(huán)2灼燒接種環(huán)后，要等其冷卻后再劃線3在做第二次以及其后的劃線操作時，必須從上一次劃線的末端開始劃線系列稀釋操作注意：稀釋時使用的移液管要提前滅菌處理。

操作時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1-2cm處。涂布平板法視頻網(wǎng)址鏈接：/s?__biz=MzU5MzQwMjI2Ng==&mid=2247483883&idx=1&sn=a9d505cde065d66a0041e86ae29d5e37&chksm=fe10411ec967c80821974f91c634c1c59902b2e3bf2330e2742a84987419c040a96e5a8d0a7a&token=1330435245&lang=zh_CN#rd涂布平板操作的注意事項1將涂布器末端浸在盛有70%酒精的燒杯中，取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后再將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。2操作中一定要注意防火！不要將過熱的涂布器放在盛有酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。恒溫培養(yǎng)箱未接種的培養(yǎng)基（空白對照組）接種的培養(yǎng)基（實驗組）教學(xué)反饋與評價4能夠說明大腸桿菌的生長需要葡萄糖，但不能證明是否需要生長因子自變量是葡萄糖的有無，