血液質(zhì)量控制檢查方法（血站技術操作規(guī)程）

血液質(zhì)量控制檢查方法1外觀1.1檢查方法：于光線明亮處目視檢查2標簽2.1檢查方法：于光線明亮處目視檢查3容量3.1檢查方法3.1.1稱量血袋重量3.1.2計算公式注：如果適用，還應減去抗凝劑容量。4無菌試驗4.1檢測方法無菌試驗方法遵從中華人民共和國藥典（2015年版）三部“無菌檢查法”要求。使用細菌培養(yǎng)儀進行無菌試驗應參照廠家使用說明書。4.2注意事項留取血液樣本前，應當將血袋中的血液充分混勻，混勻時動作應輕柔，不能產(chǎn)生泡沫，也不能使其溶血。5Hb測定檢測方法見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“血紅蛋白測定”。使用血細胞計數(shù)儀測定的應參照廠家使用說明。6游離Hb測定7血細胞比容檢測方法見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“紅細胞比容”。使用血細胞計數(shù)儀測定的應參照廠家使用說明。8儲存期末溶血率8.1檢測方法在血液儲存期的最后一周內(nèi)取樣，按5、6和7測定總血紅蛋白、上清游離血紅蛋白、血細胞比容。8.2計算公式9白細胞殘留量9.1檢測方法用留取的去白細胞血液標本進行殘余白細胞檢測。材料：大容量Nageotte血細胞計數(shù)盤、顯微鏡、結晶紫染色液。結晶紫染色液配制儲存液配制：250mg結晶紫溶于250ml的50%醋酸溶液中。室溫放置可保存6個月。使用液配制：1份儲存液加9份3%的醋酸溶液，最終濃度為：結晶紫0.01mg%（W/V），醋酸7.7%（V/V）。然后使用0.22μ過濾器過濾。計數(shù)方法：50μl血液標本加入450μl使用液中，充分混勻。在Nageotte計數(shù)池中加入上述混合液，將計數(shù)池置于帶蓋潮濕容器中，于室溫放置10～15分鐘。在200倍顯微鏡下對計數(shù)池中兩個計數(shù)區(qū)（每區(qū)有20個長方形格）的白細胞計數(shù)，40行相當于50μl。計算：Nageotte計數(shù)盤公式中：10為稀釋倍數(shù)，50μl為計數(shù)池2個區(qū)的容積每袋中殘余白細胞數(shù)按下列公式計算：殘余白細胞數(shù)/袋=白細胞數(shù)/ml×去白細胞血液容量（ml）/袋或使用其它經(jīng)驗證可使用的方法。10紅細胞計數(shù)檢測方法見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“紅細胞計數(shù)”。使用血細胞計數(shù)儀測定的應參照廠家使用說明。11血小板計數(shù)檢測方法見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“血小板計數(shù)”。使用血細胞計數(shù)儀測定的應參照廠家使用說明。12血漿蛋白測定檢測方法見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“血清總蛋白的測定”。13上清液蛋白含量檢測方法參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“腦脊液總蛋白測定”。14pH測定14.1測定方法14.2注意事項使用國家計量部門檢定合格的pH儀。樣品從血袋中移出后應立即進行檢測，以防標本在空氣中暴露時間過長而CO2逸出，導致pH測定值比實際值偏高。15凝血因子Ⅷ活性測定測定方法見現(xiàn)行有效的《全國臨床檢驗操作規(guī)程》“凝血因子Ⅷ的活性測定（一期法）”。使用血凝儀測定時參照廠家使用說明書。16纖維蛋白原測定17甘油殘留量17.1過碘酸鈉法原理：根據(jù)過碘酸鈉能氧化有機化合物中的羥基、胺基，使甘油氧化成酸和醛，以溴甲酚紫作指示劑；并用氫氧化鈉進行滴定。從消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)，即可算出樣品中所含甘油的量。試劑：16.5%鎢酸鈉溶液：稱取16.5克鎢酸鈉，用蒸餾水溶解，再加蒸餾水稀釋至100ml。0.5mol/LH2SO4：吸30ml濃硫酸緩緩注入水中，冷卻至室溫，加水稀釋至1000ml。0.1%溴甲酚紫溶液：0.1g溴甲酚紫溶入20ml0.02mol/LNaOH溶液中，再加入蒸餾水稀釋至100mL。14%過碘酸鈉：14g過碘酸鈉先加入少量蒸餾水中溶解，加入2mL濃硫酸使其完全溶解，用蒸餾水稀釋至100mL。操作方法：按下表操作步驟制備血濾液血濾液制備試劑mL備注測定樣品15.0蒸餾水75.016.5%Na2WO46.00.5mol/LH2SO47.5用力振搖，進行過濾注：試驗操作時應在三角燒瓶中進行分析測定的步驟如下表：試劑空白（mL）樣品（mL）備注過濾后的上清液蒸餾水0.1%溴甲酚紫溶液0.1mol/LNaOH溶液14%過碘酸鈉38℃恒溫0.1%溴甲酚紫溶液0.1mol/LNaOH溶液100.010.015100.010.02滴滴定至藍色15分鐘2滴滴定至藍色計算：0.1mol/LNaOH溶液相當于0.00921g甘油17.2滲透壓測定法正常血清的滲克分子濃度為289mmol（289mOsm），甘油含量為1%（10g/L）時，其滲克分子濃度為420mmol（420mOsm），因此滲透壓測定法可作為一種檢測去甘油紅細胞甘油殘存量的參考方法，操作方法應參照滲透壓儀器生產(chǎn)廠家使用說明書。17.3折射儀測定法使用折射儀是測定滲克分子濃度的一種篩選方法。折射儀讀數(shù)到28（如折射儀型號為10401，折射指數(shù)或比重<1.3384T.S.）與甘油水平不高于1%（90g/L）相關。折射儀測定法可作為一種檢測甘油含量的參考方法。方法見生產(chǎn)廠家使用說明書。17.4由于不同方法的準確性和精密度存在差異，可根據(jù)要求選擇以上相應方法或其它方法（如：GPO-PAP二步法）。若采用商品化試劑盒，操作應按試劑盒說明書進行。18中性粒細胞計數(shù)檢測方法見《全國臨床檢驗操作規(guī)程》（第4版）“白細胞計數(shù)”。使用血細胞計數(shù)儀測定的應參照廠家使用說明。19亞甲藍殘留量19.1測試樣品準備19.2標準品的制備取亞甲藍粉末約38mg，精密稱定，置100mL量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度。精密量取50μl置50mL容量瓶中，用血漿稀釋至刻度，配成最終濃度為約1.0μmol/L的亞甲藍對照血漿。檢測過濾前后樣品溶液時，必須用同樣的方法萃取檢測標準品。19.3測定用含1％乙酸的甲醇溶液作試劑空白，在654nm±2nm波長處測定