網(wǎng)織紅細胞檢測課件

網(wǎng)織紅細胞檢測技術

及臨床應用

任燕歌概念網(wǎng)織紅細胞（reticulocyte,Ret或Reti）界于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間的過渡階段細胞。因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后，呈現(xiàn)點狀或線網(wǎng)狀結構，故名網(wǎng)織紅細胞。單能干細胞原始紅細胞早幼紅細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞網(wǎng)織紅細胞成熟紅細胞多能干細胞紅細胞發(fā)育過程圖網(wǎng)織紅細胞檢測技術網(wǎng)織紅細胞計數(shù)方法

活體染色手工鏡檢

血液自動分析儀法

流式細胞術檢測法

手工鏡檢法原理活體染料的堿性著色基團（帶正電荷）可與網(wǎng)織紅細胞RNA的磷酸基（帶負電荷）結合，使RNA膠體間的負電荷減少而發(fā)生凝縮，形成有色的點狀、線狀甚至連綴成網(wǎng)狀結構，而血紅蛋白著色相對較淡。借此在光鏡下與成熟紅細胞相區(qū)別。操作方法①取干凈試管一只，加入10g/L煌焦油藍溶液2~3滴，然后加入等量的血液混勻后放置15~20min，使紅細胞充分染色；②取少許染色好的血液，在潔凈載玻片上推成薄而均勻的血膜，干燥后用瑞氏染液復染(也可不復染）；③在顯微鏡低倍鏡下選擇細胞分布均勻著色清晰的部位，用油鏡在血片上計數(shù)至少1000個紅細胞分布區(qū)域內(nèi)的網(wǎng)織紅細胞再除以1000計算出網(wǎng)織紅細胞的百分率。同時進行紅細胞計數(shù)，可計算網(wǎng)織紅細胞的絕對值?；铙w染色圖檢測儀器檢測技術流式細胞術（flowcytometry）原理RNA經(jīng)堿性熒光染料處理后，根據(jù)熒光強度反映細胞內(nèi)RNA含量，可將Reti分為高熒光強度網(wǎng)織紅細胞（HFR）、中等熒光強度網(wǎng)織紅細胞（MFR）和低熒光強度網(wǎng)織紅細胞（LFR）三部分。利用上述三個指標可計算網(wǎng)織紅細胞的成熟指數(shù)（reticulocytematerationindex,RMI）。RMI對評價骨髓移植后造血功能恢復情況和EPO的療效，以及監(jiān)護放、化療對骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。檢測圖示網(wǎng)織紅細胞平面散射圖方法學評價手工鏡檢法的優(yōu)點是便捷、成本低。目前仍為臨床實驗室的常規(guī)檢驗方法。但致命的缺點是影響因素多、重復性差，CV≥20%，以低Reti的標本尤為明顯。即使進行絕對值計算，也因Reti計數(shù)不準確、某些貧血網(wǎng)織紅細胞提前釋放而失去其可靠性。這些不足嚴重影響了該指標的臨床應用。須加強質(zhì)量控制，必要時對計數(shù)結果加以校正。方法學評價自動化儀器在許多方面具有標準化程序，試劑穩(wěn)定、反應時間一致，計數(shù)細胞量大、具有質(zhì)控和校準能力，因此在精密度和準確度上明顯優(yōu)于顯微鏡計數(shù)法。但儀器價格比較偏高，試劑成本和質(zhì)控成本大，影響到基層醫(yī)院、小型實驗室的使用期望及推廣。

臨床應用部分臨床意義網(wǎng)織紅細胞不僅僅是個計數(shù)參數(shù)問題，更有許多新的參數(shù)被引入臨床應用、科研和基礎研究。網(wǎng)織紅細胞的增加或減少直接反映了骨髓紅細胞的生成能力，主要用于對紅細胞減少性疾病、溶血性貧血、治療監(jiān)測或骨髓移植后骨髓造血功能的恢復、監(jiān)測放療和化療對骨髓造血功能的影響評估等方面。網(wǎng)織紅細胞增高提示骨髓造血功能旺盛見于各種增生性貧血如缺鐵性貧血、巨幼細胞性(缺乏葉酸、維生素B12)貧血、失血性貧血,尤以溶血性貧血時增加最為顯著,常>10%。缺鐵性貧血及巨幼細胞性貧血在給予鐵劑、維生素B12、葉酸治療之后,可見網(wǎng)織紅細胞明顯增加。

缺鐵性貧血正細胞貧血

網(wǎng)織紅細胞增高正?；驕p低急性出血溶血綜合征骨髓衰減慢性貧血圖2骨髓浸潤性貧血

圖1再障性貧血大細胞貧血網(wǎng)織紅細胞降低增高葉酸、VitB12缺乏未經(jīng)治療的葉酸、VitB12缺乏葉酸或VitB12缺乏的急性失血網(wǎng)織紅細胞反應缺鐵性貧血或巨幼細胞貧血分別給予鐵劑、維生素B12或葉酸治療2-3d后，網(wǎng)織紅細胞計數(shù)值開始上升，7-10d達到最高(10%左右)；兩周以后逐漸降至正常水平，紅細胞、血紅蛋白開始升高。該過程表示貧血得到糾正。若網(wǎng)織紅細胞居高不下，提示尚未達到治療效果。網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)網(wǎng)織紅細胞成熟指數(shù)（RMI）計算參數(shù)計算公式：RMI=（MFR+HFR）/LFR×100%※RMI對評價骨髓移植后造血功能恢復情況和EPO的療效，以及監(jiān)護放、化療對骨髓的抑制作用具有更高的敏感性。臨床價值血液病的診斷和治療網(wǎng)織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞，在周圍血液中的數(shù)值可反映骨髓紅細胞的生成功能，因而對血液病的診斷和治療反應的觀察均有其重要意義。放、化療監(jiān)測

機體接受放、化療后，如出現(xiàn)骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才檢測到網(wǎng)織紅細胞的降低。而停止放、化療，骨髓功能恢復后，又見上