某些因素對(duì)離體蛙心活動(dòng)的影響

某些因素對(duì)

離體蛙心活動(dòng)的影響【目的要求】1、學(xué)習(xí)斯氏離體蛙心灌流法。2、觀察Na＋、K＋、Ca2＋及腎上腺素、乙酰膽堿等對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響?！净驹怼啃呐K的正常節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的內(nèi)環(huán)境（如Na＋，K＋，Ca2＋等的濃度及比例、pH值和溫度），而內(nèi)環(huán)境的變化則直接影響到心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)。在體心臟還受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)的雙重支配，交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素，使心肌收縮力加強(qiáng)，傳導(dǎo)速度加快，心率加快；迷走神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，使心肌收縮力減弱，心肌傳導(dǎo)速度減慢，心率減慢。將失去神經(jīng)支配的離體心臟保持于適宜的理化環(huán)境中（如任氏液），在一定時(shí)間內(nèi)仍能產(chǎn)生自動(dòng)節(jié)律性興奮和收縮。而改變?nèi)问弦旱慕M成成分，離體心臟的活動(dòng)就會(huì)受到影響。因此可用人工灌流的方法，研究心勝活動(dòng)的規(guī)律及特點(diǎn)；還可觀察灌流液成分的改變對(duì)離體心臟活動(dòng)的影響?！緞?dòng)物、器材與試劑】【方法與步驟】1、離體蛙心的制備（斯氏蛙心插管法）先用蛙心夾夾住少許心尖部肌肉(不要夾過(guò)多，以免因夾破心室而漏液)。2、插好離體心臟的套管固定在支架上，再將蛙心夾上的系線與張力傳感器相連。注：勿便灌流液滴到傳感器上。調(diào)節(jié)記錄儀上的收縮曲線的幅度適中。3、實(shí)驗(yàn)觀察（圖11）(1)記錄正常心搏曲線。(2)改用0.65%NaCl溶液灌流，并作好加藥標(biāo)記，觀察心搏變化。待曲線出現(xiàn)明顯變化時(shí)，立即吸去套管中的灌流液，同時(shí)做好沖洗標(biāo)記，并用新鮮任氏液清洗2－3次，待心搏恢復(fù)正常，注意：換液時(shí)切勿碰套管，以免影響描記曲線的基線，同時(shí)保持灌流液面一致(以下同)。任氏液配制方法見(jiàn)下表NaCl

6.5gKCl

0.14gCaCl2

0.12gNaHCO30~2gNaH2PO4

0.01gGlu

2.0g水1000ml（其中g(shù)lu

可加可不加，加的話可以多保存幾天）(3)向套管內(nèi)加1－2滴3%CaCl2溶液（較細(xì)的套管需少加）溶液，作好加藥記號(hào)，觀察心搏曲線的頻率及振幅變化。當(dāng)曲線出現(xiàn)明顯變化時(shí)，應(yīng)立即吸去套管中的灌流液，并做好沖洗標(biāo)記，迅速用新鮮任氏液清洗2－3次，待心搏恢復(fù)正常。(4)同法向套管內(nèi)加入1－2滴1%KCl溶液，記錄心搏曲線的變化。當(dāng)心搏曲線變化時(shí)，同法更換灌流液，待心搏恢復(fù)正常。(5)同法記錄套管中加入1－2滴腎上腺素溶液(1/10，000)后心搏曲線的變化。(7)同法記錄套管中加入1－2滴乙酰膽堿溶液(1/100，000)后心搏曲線的變化。(8)酸堿的影響：加3%乳酸1～2滴，待效應(yīng)明顯后，再加1滴2.5%NaHCO3，觀察曲線的變化?！咀⒁馐马?xiàng)】1、制備離體心臟標(biāo)本時(shí)，勿傷及靜脈竇。2、蛙心夾應(yīng)在心室舒張期一次性?shī)A住心尖，避免因夾傷心臟而導(dǎo)致漏液。3、每一觀察項(xiàng)目都應(yīng)先描記一段正常曲線，然后再加藥并記錄其效應(yīng)。加藥時(shí)應(yīng)在心跳曲線上予以標(biāo)記，以便觀察分析。4、各種滴管應(yīng)分開(kāi)，不可混用。5、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，插管內(nèi)灌流液面高度應(yīng)保持恒定；儀器的各種參數(shù)一經(jīng)調(diào)好，應(yīng)不再變動(dòng)。6、給藥后若效果不明顯，可再適量滴加，并密切注意藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。給藥量必須適度，加藥出現(xiàn)變化后，就應(yīng)立即更換任氏液，否則會(huì)造成不可挽回的后果，尤其是K＋稍有過(guò)量，即可導(dǎo)致難以恢復(fù)的心臟停跳。7、標(biāo)本制備好后，若心臟功能狀態(tài)不好（不搏動(dòng)），可向插管內(nèi)滴加1～2滴3%CaCl2或1：10，000腎上腺素，以促進(jìn)（起動(dòng)）心臟搏動(dòng)。在實(shí)驗(yàn)程序安排上也可考慮促進(jìn)和抑制心臟搏動(dòng)的藥物交換使用。8、謹(jǐn)防灌流液沿絲線流入張力傳感器內(nèi)而損壞其電子元件?！舅伎碱}】1、用實(shí)驗(yàn)說(shuō)明內(nèi)環(huán)境相對(duì)恒定的重要意義。2、分析有的蛙心標(biāo)本套