實(shí)驗(yàn)24 離體家兔腸肌運(yùn)動(dòng)

實(shí)驗(yàn)24離體家兔腸肌運(yùn)動(dòng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康挠^察某些因素對腸肌運(yùn)動(dòng)的影響消化道平滑肌興奮性較低，收縮緩慢并有自律性。消化管運(yùn)動(dòng)的基本形式是蠕動(dòng)和緊張性收縮，小腸還有分節(jié)運(yùn)動(dòng)。給予離體腸肌以接近于在體情況的適宜環(huán)境，消化道平滑肌仍可保持良好的生理特性。二、實(shí)驗(yàn)材料和方法材料家兔；麥?zhǔn)显〔郏壓銣仄?，張力換能器，生物信號采集處理系統(tǒng)；臺(tái)氏溶液。方法實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)連接和參數(shù)設(shè)置麥?zhǔn)显〔壑屑?0ml的臺(tái)氏液，調(diào)節(jié)超級恒溫器的溫度，使麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)溫度恒定在38度。通氣管接95%02+5%C02混合氣體通道。同螺絲夾調(diào)節(jié)氣體管道的氣體流量，調(diào)節(jié)至浴槽中氣泡一個(gè)個(gè)逸出為止，張力換能器與生物信號采集處理系統(tǒng)相連。儀器參數(shù)：RM6420系統(tǒng)參數(shù)：點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)菜單中的“腸肌記錄”，儀器參數(shù)：通道時(shí)間常數(shù)為直流，濾波頻率10Hz，靈敏度3g,采樣頻率200Hz,掃描速度1ms/div。離體家兔十二指腸標(biāo)本制備取家兔一只，用木追擊其頭部至昏，立即剖開腹腔，找到十二指腸大乳頭處，然后取10cm左右一段置于氧飽和的臺(tái)氏液中，用注射器吸取臺(tái)氏液將腸內(nèi)容物沖洗干凈，后將其剪成小段（約1~1.5cm）,換以新鮮臺(tái)氏液備用（注意操作時(shí)勿牽拉腸段以免影響收縮功能）。去小腸腸管于盛有臺(tái)氏液的培養(yǎng)皿中，在其兩端對角壁處，分別用縫針穿線并打結(jié)。注意保持腸道通暢，勿使其封閉。標(biāo)本固定腸管一端連線于浴槽固定鉤上，然后放入38攝氏度的麥?zhǔn)显〔壑?。再將腸管的另一段系結(jié)在張力換能器的懸臂梁上，調(diào)節(jié)張力至2~3g。2.4.1在浴槽中滴加入Ach，觀察其反應(yīng)，反應(yīng)穩(wěn)定后換液沖洗。2.4.2在浴槽中滴加腎上腺素溶液后，觀察其反應(yīng)，反應(yīng)穩(wěn)定后換液沖洗。2.4.3在浴槽中滴加HCI，觀察并記錄其收縮幅度，反應(yīng)穩(wěn)定后換液沖洗。2.4.4在浴槽中滴加NaOH,記錄其收縮幅度，待曲線恢復(fù)至基線或基本穩(wěn)定后換液沖洗。將浴槽中臺(tái)氏液的溫度降低到25攝氏度，觀察其反應(yīng)，反應(yīng)穩(wěn)定后換液沖洗。同螺絲夾調(diào)節(jié)氣體管道的氣體流量，調(diào)節(jié)至浴槽中無氣泡冒出為止，觀察其反應(yīng)并記錄。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果生物信號波形加入Ach后的腸肌運(yùn)動(dòng) 加入腎上腺素后的腸肌運(yùn)動(dòng)加入NaOH后的腸肌運(yùn)動(dòng) 加入Hcl后的腸肌運(yùn)動(dòng)四、實(shí)驗(yàn)討論ACh可明顯興奮胃腸道平滑肌，使其收縮幅度、張力、蠕動(dòng)增加。其作用機(jī)制是：Ach作用于十二指腸M受體，使平滑肌Ca2+通道開放，Ca2+內(nèi)流，Ca2+胞漿濃度增加，平滑肌收縮加快加強(qiáng)，表現(xiàn)為收縮力變大，頻率增強(qiáng)?！?】NE的作用主要在于受體的不同，肌腸細(xì)胞膜上存在a和B受體，a受體又分為a抑制型受體和a興奮型受體。NE作用于a抑制型受體，對小腸的作用是抑制的，引起腸肌膜上一種特異性受體活化，使K+外流增多，細(xì)胞膜發(fā)生超級化，腸肌興奮性降低，肌張力減弱。同時(shí)，NE還作用于B受體(主要是內(nèi)受體)，作用機(jī)制是：①引起腸肌細(xì)胞膜中的cAMP合成增多，cAMP激活腸肌膜及肌漿網(wǎng)上Ca2+泵活動(dòng)，使肌漿中Ca2+濃度降低；②K+及Ca2外流增加，加速膜的超極化，促進(jìn)了肌腸肌張力降低。消化道平滑肌對化學(xué)刺激敏感，小腸的PH約為7.0~8.0，過高或過低的PH都會(huì)影響肌腸的收縮，滴加1滴NaOH后，臺(tái)氏液的PH值處于7.8~8.0之間，處于肌腸收縮的最適PH，肌腸運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)。其作用機(jī)制，細(xì)胞外OH-升高時(shí)，促進(jìn)Ca2+通道開放，使Ca2+內(nèi)流增加，Ca2+胞漿濃度增加，平滑肌收縮加快加強(qiáng)，表現(xiàn)為收縮力變大，頻率增強(qiáng)。滴加一滴HCL后，臺(tái)氏液的PH低于肌腸收縮的最適范圍(7.0~8.0)，收縮減弱。其機(jī)制是：當(dāng)細(xì)胞外H+升高時(shí)，機(jī)制Ca2+通道開放，使Ca2+內(nèi)流減少，Ca2+胞漿濃度降低；同時(shí)可干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程： H+能與Ca2+競爭鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纖維對Ca2+的敏感性和Ca2+從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放減少。因此，滴加一滴HCL后，表現(xiàn)為平滑肌收縮力變小，處于舒張狀態(tài)，收縮頻率降低?！?】浸浴小腸的臺(tái)氏液溫度以37.5°C左右為宜，低于或高于這個(gè)溫度，都會(huì)影響結(jié)果。消化道平滑肌對溫度刺激敏感，將38C的臺(tái)氏液迅速換成25C的臺(tái)氏液，參與代謝活動(dòng)的各種酶活性降低，使代謝水平降低，興奮性減弱，可出現(xiàn)收縮曲線基線下移，頻率變慢，收縮幅度變小。曲線中還出現(xiàn)基線先上升再下移的現(xiàn)象，這是因?yàn)榻禍乇旧韺δc道是一種刺激，也可短暫地加強(qiáng)代謝活動(dòng)，所以肌張力短暫升高。肌腸運(yùn)動(dòng)需要消耗能量，當(dāng)停止通氧后，肌腸缺氧，有氧代謝障礙，產(chǎn)能障礙，ATP減少，肌腸運(yùn)動(dòng)得不到能量供給，因此，肌腸表現(xiàn)為平滑肌收縮力變小，收縮頻率降低。五、 實(shí)驗(yàn)結(jié)論一定濃度的Ach、NaOH可促進(jìn)肌腸運(yùn)動(dòng)