藥代動(dòng)力學(xué)研究(附件)

第三節(jié)

藥物非臨床(línchuánɡ)藥代動(dòng)力學(xué)研究1第一頁，共三十一頁。

藥代動(dòng)力學(xué)(Pharmcokinetics)是研究藥物在體內(nèi)(tǐnèi)處置的藥理學(xué)分支學(xué)科，重點(diǎn)是研究藥物的吸收、分布、代謝、排泄四個(gè)主要環(huán)節(jié)。

第二頁，共三十一頁。非臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究的目的，是揭示新藥在動(dòng)物體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律，說明藥物的吸收、分布(fēnbù)、代謝和排泄等過程的動(dòng)態(tài)變化及其特點(diǎn)，并可定量描述。一、目的意義第三頁，共三十一頁。1、為藥效學(xué)和毒理學(xué)評價(jià)提供了藥物或活性代謝物濃度數(shù)據(jù)，是產(chǎn)生、決定或說明藥效或毒性大小的根底；2、作為提供藥效或毒性靶器官的依據(jù)；3、也是藥物制劑學(xué)研究的主要依據(jù)和工具，并為設(shè)計(jì)和優(yōu)化臨床研究給藥方案(fāngàn)提供有關(guān)依據(jù)。第四頁，共三十一頁?！惨弧吃囼?yàn)(shìyàn)目的明確〔二〕分析方法可靠〔三〕試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理〔包括試驗(yàn)藥品、試驗(yàn)動(dòng)物的選擇、試驗(yàn)方案、給藥途徑和給藥劑量等〕〔四〕所得參數(shù)全面，滿足評價(jià)要求〔五〕對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行綜合分析與評價(jià)〔六〕具體問題具體分析二、根本(jīběn)原那么第五頁，共三十一頁。

1、血藥濃度-時(shí)間曲線

2、藥物的吸收

3、藥物的分布

4、藥物的排泄(páixiè)

5、藥物與血漿蛋白的結(jié)合

6、代謝轉(zhuǎn)化試驗(yàn)

7、對藥物代謝酶活性的影響

三、具體(jùtǐ)研究工程第六頁，共三十一頁。四、試驗(yàn)(shìyàn)設(shè)計(jì)

〔一〕總體要求

1、實(shí)驗(yàn)藥品

應(yīng)提供受試藥物的名稱、批號、來源(láiyuán)、純度、保存條件及配制方法。使用的受試藥物應(yīng)與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究使用的一致。第七頁，共三十一頁。2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

一般采用(cǎiyòng)成年和健康的動(dòng)物。常用動(dòng)物有小鼠、大鼠、兔、豚鼠、犬和猴等。選擇動(dòng)物的原那么如下:

第八頁，共三十一頁。

①首選動(dòng)物：盡可能與藥效學(xué)和毒理學(xué)研究一致。

②盡量在清醒狀態(tài)下實(shí)驗(yàn)，動(dòng)力學(xué)研究最好從同一動(dòng)物屢次采樣。

③創(chuàng)新藥應(yīng)選用兩種或兩種以上的動(dòng)物，其中一種為嚙齒類動(dòng)物；另一種為非嚙齒類動(dòng)物。其他類型的藥物(yàowù)，可選用一種動(dòng)物〔首選非嚙齒類動(dòng)物，如犬或猴等〕。

④口服用藥不宜選用兔等食草類動(dòng)物。第九頁，共三十一頁。3、劑量選擇

動(dòng)物體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究(yánjiū)應(yīng)設(shè)置至少三個(gè)劑量組，其高劑量最好接近最大耐受劑量，中、小劑量根據(jù)動(dòng)物有效劑量的上下限范圍選取。4、給藥途徑

所用的給藥途徑和方式，應(yīng)盡可能與臨床用藥一致。

第十頁，共三十一頁。

〔二〕生物樣本(yàngběn)的藥物測定方法

生物樣品的藥物測定方法包括色譜法、放射性核素標(biāo)記法、免疫學(xué)和微生物學(xué)方法。應(yīng)根據(jù)待測藥物的性質(zhì)，選擇特異性好、靈敏度高的測定方法。第十一頁，共三十一頁?！踩尘唧w(jùtǐ)研究工程1、血藥濃度-時(shí)間曲線〔藥-時(shí)曲線〕〔1〕受試動(dòng)物數(shù)：采用成年健康(jiànkāng)動(dòng)物。首選動(dòng)物盡量與藥效或毒性研究所用動(dòng)物一致。盡量在清醒狀態(tài)下進(jìn)行。在正式試驗(yàn)前應(yīng)將動(dòng)物進(jìn)實(shí)驗(yàn)室適應(yīng)3-5天?？诜o藥一般給藥前12小時(shí)撤食。第十二頁，共三十一頁。藥時(shí)曲線的每個(gè)時(shí)間點(diǎn)有不少于5個(gè)數(shù)據(jù)為限計(jì)算所需動(dòng)物數(shù)。最好從同一動(dòng)物屢次取樣，盡量防止用多只動(dòng)物合并(hébìng)樣本。多只動(dòng)物合并樣本應(yīng)相應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)，以減少個(gè)體差異對試驗(yàn)結(jié)果的影響。第十三頁，共三十一頁。受試動(dòng)物采用雌雄各半，如發(fā)現(xiàn)藥動(dòng)學(xué)存在(cúnzài)明顯的性別差異，應(yīng)增加動(dòng)物數(shù)以便了解藥物在雌雄動(dòng)物體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)的差異情況。對于單一性別用藥，可選擇與臨床用藥一致的性別。第十四頁，共三十一頁?！?〕采樣點(diǎn)確實(shí)定：給藥前采血作為空白樣品。給藥后的一個(gè)完整的血藥濃度-時(shí)間曲線，應(yīng)包括藥物的吸收相、平衡(pínghéng)相和消除相，采樣點(diǎn)的設(shè)計(jì)應(yīng)兼顧到這三個(gè)時(shí)相。

第十五頁，共三十一頁。

一般在吸收分布相至少需要2個(gè)采樣(cǎiyànɡ)點(diǎn)，平衡相至少需要3個(gè)采樣(cǎiyànɡ)點(diǎn)，消除相至少需要6個(gè)點(diǎn)。整個(gè)采樣(cǎiyànɡ)時(shí)間至少應(yīng)持續(xù)到3~5個(gè)半衰期，或持續(xù)到血藥濃度為Cmax的1/10-1/20。

第十六頁，共三十一頁。在正式試驗(yàn)前，選擇2-3只動(dòng)物進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，然后根據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果，審核并修正(xiūzhèng)原設(shè)計(jì)的采樣點(diǎn)。

假設(shè)口服給藥，一般在給藥前應(yīng)禁食12小時(shí)以上，以排除食物對藥物吸收的影響。第十七頁，共三十一頁。

〔3〕藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算：將試驗(yàn)(shìyàn)中測得的各受試動(dòng)物的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)分別進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的估算，求得受試物的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。要提供的根本數(shù)據(jù)：

第十八頁，共三十一頁。靜脈注射給藥，應(yīng)提供t1/2〔消除半衰期〕、Vd〔表觀分布容積〕、AUC〔血藥濃度-時(shí)間曲線下面積(miànjī)〕、CL〔去除率〕等參數(shù)值；血管外給藥，除提供上述藥代參數(shù)外,尚應(yīng)提供Cmax〔頂峰濃度〕,Tmax〔達(dá)峰時(shí)間〕和Ka〔吸收速度〕等藥代參數(shù),以反響藥物吸收的規(guī)律。第十九頁，共三十一頁。

2、藥物(yàowù)的吸收

對于經(jīng)口給藥的創(chuàng)新性藥物，應(yīng)進(jìn)行整體動(dòng)物，以及在體或離體腸道吸收試驗(yàn)以闡述藥物吸收特性；口服等制劑要提供其生物利用度參數(shù)。對于血管外給藥的水溶性藥物，應(yīng)提供其絕對生物利用度。第二十頁，共三十一頁。3、藥物的分布

選用大鼠或小鼠做組織分布試驗(yàn)較為方便。通常(tōngcháng)選擇一個(gè)劑量〔一般以有效劑量為宜〕給藥后，至少測定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨骼肌等組織的濃度，以了解藥物在體內(nèi)的主要分布組織。第二十一頁，共三十一頁。4、藥物的代謝

別離鑒定體液中的代謝產(chǎn)物。創(chuàng)新藥，需了解在體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化(zhuǎnhuà)情況，確定主要代謝轉(zhuǎn)化(zhuǎnhuà)途徑。FDA規(guī)定，當(dāng)代謝產(chǎn)物累積超過劑量的1%時(shí)應(yīng)分析代謝物。

第二十二頁，共三十一頁。對作為前藥的新藥,除對其代謝途徑和主要活性代謝物結(jié)構(gòu)確證外,尚應(yīng)對原藥和活性代謝物進(jìn)行系統(tǒng)的藥代動(dòng)力學(xué)研究(yánjiū)?？山Y(jié)合體外研究，觀察肝、腎等組織勻漿、細(xì)胞懸液、微粒體或灌流器官對藥物的代謝作用。第二十三頁，共三十一頁。4、藥物的排泄

確定主要排泄途徑，如尿、糞、膽汁、呼吸氣體、乳汁等，測定排泄速度和排泄量。

1〕尿和糞的藥物排泄：一般采用小鼠或大鼠，要將動(dòng)物放入代謝籠內(nèi)，選定一個(gè)有效(yǒuxiào)劑量給藥后，按一定的時(shí)間間隔分段收集尿或糞的全部樣品。第二十四頁，共三十一頁。2〕膽汁排泄：一般用大鼠在乙醚麻醉下作膽管插管引流，待動(dòng)物清醒后，以各種途徑給藥，并以適宜的時(shí)間間隔分段收集膽汁，進(jìn)行藥物測定(cèdìng)。如果主要以原形從膽汁排泄，要進(jìn)一步觀察肝-腸循環(huán)3〕其它途徑排泄第二十五頁，共三十一頁。5、藥物與血漿(xuèjiāng)蛋白的結(jié)合

研究藥物與血漿蛋白結(jié)合的方法有平衡透析法、超過濾法、分配平衡法、凝膠過濾法、光譜法等。第二十六頁，共三十一頁。根據(jù)藥物的理化性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)室條件，可選擇使用一種(yīzhǒnɡ)方法進(jìn)行三個(gè)濃度〔包括有效濃度〕的血漿蛋白結(jié)合試驗(yàn)，每個(gè)濃度至少重復(fù)試驗(yàn)三次，以了解藥物的血漿蛋白結(jié)合率是否有濃度依賴性。第二十七頁，共三十一頁。對蛋白結(jié)合率高于90%以上的藥物，進(jìn)行體外藥物競爭結(jié)合試驗(yàn)(shìyàn)，即選擇臨床上有可能合并使用的高蛋白結(jié)合率藥物考察對所研究藥物蛋白結(jié)合率的影響。

第二十八頁，共三十一頁。6、對藥物代謝酶活性的影響

對于創(chuàng)新藥，應(yīng)觀察藥物對細(xì)胞色素P450同工酶的誘導(dǎo)或抑制作用。在臨床前階段可以用底物法觀察對動(dòng)物和人肝微粒體P450酶的抑制作用，比較種屬差異。藥物對酶的誘導(dǎo)作用可觀察整體(zhěngtǐ)動(dòng)物屢次給藥后的肝P450酶或在藥物反復(fù)作用后的肝細(xì)胞〔最好是人肝細(xì)胞〕P450酶活性的變化。第二十九頁，共三十一頁。謝謝(xièxie)！36第三十頁，共三十一頁。內(nèi)容(nèiróng)