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細(xì)胞工程概論北方民族大學(xué)生物科學(xué)與工程學(xué)院課件制作與主講:曹君邁2009.2第一章緒論
第一節(jié)生物工程一、掌握生物工程的概念二、了解生物工程的發(fā)展史三、生物工程的基本內(nèi)容四、生物工程在國民經(jīng)濟(jì)中的地位五、現(xiàn)代生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)一、生物工程的概念
1.定義:是以生命科學(xué)為基礎(chǔ),利用生物體系和工程學(xué)原理產(chǎn)生生物制品和創(chuàng)造新物種的一門綜合技術(shù)。(p1)或者說:利用生物有機(jī)體或部分組織、器官、細(xì)胞等發(fā)展新工藝和制造新產(chǎn)品的一門科學(xué)技術(shù)。1982年國際合作及發(fā)展組織對生物技術(shù)進(jìn)行了重新定義:生物技術(shù)是應(yīng)用自然科學(xué)和工程原理,依靠微生物、動(dòng)物、植物作為反應(yīng)器將物料進(jìn)行加工以提供產(chǎn)品來為社會(huì)服務(wù)的技術(shù)。二、生物工程的發(fā)展史1、古代生物工程階歷史:4000多年前-20世紀(jì)30年代。
產(chǎn)品特點(diǎn):化合物結(jié)構(gòu)較簡單,屬初級代謝產(chǎn)物。
生產(chǎn)過程:設(shè)備要求不高、規(guī)模不大、過程較簡單,屬嫌氣發(fā)酵。
2、近代生物工程階段
歷史:1928-60年代
產(chǎn)品特點(diǎn):產(chǎn)品類型多,包括:初級代謝產(chǎn)物、次級代謝產(chǎn)物、以及生物轉(zhuǎn)化、酶反應(yīng)等產(chǎn)品。
生產(chǎn)過程:技術(shù)要求高,需在無菌條件下進(jìn)行。大多數(shù)過程為好氣發(fā)酵,發(fā)酵規(guī)模巨大。三、生物工程的基本內(nèi)容按照生物工程的研究或操作層次分為:微觀生物工程:染色體操作、細(xì)胞重組等。宏觀生物工程:試管植物、發(fā)酵罐。按照生物工程改造的對象,主要包括基因工程、蛋白質(zhì)工程、酶工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工程和生物化學(xué)工程六個(gè)方面。p3按照應(yīng)用的生產(chǎn)部門有農(nóng)業(yè)、環(huán)境、醫(yī)學(xué)、衛(wèi)生、公安等多個(gè)方面?;蚬こ淌巧锕こ痰暮诵摹;蚬こ痰暮诵募夹g(shù)是DNA重組?,F(xiàn)階段生物工程是以核酸和蛋白質(zhì)為主的工程。
基因工程:對基因加工改造和創(chuàng)新,主要方法是DNA重組。
蛋白質(zhì)工程:是以人門所需的蛋白質(zhì)為目的生物工程。通過蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)反向設(shè)計(jì)、選擇或修改相應(yīng)基因,和基因工程獲得所需蛋白質(zhì)。
酶工程:是以人們所需的酶為目的,通過基因工程和蛋白質(zhì)工程獲得所需的酶。已知有的酶本質(zhì)不是蛋白質(zhì)而是核酸,目前的酶工程僅限于本質(zhì)為蛋白質(zhì)的酶。
細(xì)胞工程:是以細(xì)胞和細(xì)胞器為對象進(jìn)行操作,最終獲得人們所需的細(xì)胞、組織或個(gè)體。
發(fā)酵工程:是生物工程的主要終端,通過反應(yīng)器的設(shè)計(jì)和發(fā)酵工藝的建立,對獲得的工程菌或細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn),最終分離提取所需的生物工程產(chǎn)品。
生物化學(xué)工程:生物化學(xué)工程是由生物科學(xué)與化學(xué)工程相結(jié)合的交叉學(xué)科,主研究新型生物反應(yīng)器和新型分離技術(shù)以及設(shè)備的開發(fā)、生物反應(yīng)過程的數(shù)學(xué)模型建立和在線檢測及控制手段完善。五、現(xiàn)代生命科學(xué)研究的的熱點(diǎn)1、以蛋白質(zhì)工程為主要內(nèi)容的生物大分子結(jié)構(gòu)與功能研究2、以信號傳遞和相互作用為基礎(chǔ)的基因控制細(xì)胞機(jī)理研究3、在完成人類及所有生物基因測序后對基因結(jié)構(gòu)和遺傳語言研究4、開展包括分子水平上的以實(shí)現(xiàn)遺傳、發(fā)育、進(jìn)化大統(tǒng)一為目的的綜合理論研究5、研究神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)和神經(jīng)信息處理機(jī)制,揭示腦工作原理6、心理、智力、性格、行為模式的行為學(xué)機(jī)制和量化研究7、生態(tài)學(xué)在微觀與宏觀結(jié)合、理論與控制結(jié)合上進(jìn)行定量、預(yù)測和工程化方向研究8、人體功能(包括潛在功能如經(jīng)絡(luò)、氣功、特異功能等方面)研究另外:人工生命體的合成第二節(jié)
細(xì)胞工程一、細(xì)胞工程
細(xì)胞工程是運(yùn)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的方法,通過類似工程學(xué)的步驟,在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上,按照人們的意愿改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)以獲得新型生物或特種產(chǎn)品的一門綜合性科學(xué)技術(shù)。(p7)
二、細(xì)胞工程的發(fā)展歷史1838,馬勒在脊椎動(dòng)物腫瘤細(xì)胞中觀察到多核現(xiàn)象1902,哈泊蘭德預(yù)言了植物細(xì)胞的全能性;1907,美國哈里森培養(yǎng)了蛙胚神經(jīng)組織;1934,荷蘭溫特發(fā)現(xiàn)生長素;White以番茄根尖為外植體第一個(gè)成功的獲得了活躍生長的無性繁殖系。1958,Steward利用胡羅卜根尖為外植體成功的獲得了單細(xì)胞培養(yǎng)的再生植株。證明了植物細(xì)胞的全能性。1960,英國諾丁汗大學(xué)科金教授使用酶解方法從番茄幼苗根部制備得到大量原生質(zhì)體;1972,美國卡爾森等用NaNO3為融合誘導(dǎo)劑,將來自不同種的煙草原生質(zhì)體進(jìn)行融合,獲得世界上第一個(gè)體細(xì)胞雜種植株;1977,英國胚胎工程技術(shù),首例試管嬰兒;1997,多莉克隆羊;2001,首例克隆豬…三、細(xì)胞工程的主要研究內(nèi)容及技術(shù)手段1.研究內(nèi)容(p9-10)動(dòng)植物細(xì)胞與組織培養(yǎng);細(xì)胞融合;染色體工程;胚胎工程;細(xì)胞遺傳工程
四、細(xì)胞工程重要應(yīng)用及其與其它生物工程的關(guān)系 (一)細(xì)胞工程重要應(yīng)用(p11-13)優(yōu)質(zhì)植物快速培育與繁殖;動(dòng)物胚胎工程快速繁殖優(yōu)良、瀕危品種;利用動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)活性產(chǎn)物、藥品;新型動(dòng)植物品種的培育;供醫(yī)學(xué)器官修復(fù)或者移植的組織工程;轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物的生物工程反應(yīng)器;在遺傳學(xué)、發(fā)育學(xué)等領(lǐng)域的理論研究;在能源、環(huán)保等領(lǐng)域的應(yīng)用。(二)細(xì)胞工程與其它生物工程之間的關(guān)系1.細(xì)胞工程的建立依賴于相關(guān)科學(xué)理論的發(fā)展。2.為生物學(xué)研究提供新的實(shí)驗(yàn)體系。3.細(xì)胞工程必須和其它生物技術(shù)結(jié)合才能更好地發(fā)揮作用。(p14)細(xì)胞工程與其它生物工程之間的關(guān)系圖解(p14)
例1:糧食與蔬菜生產(chǎn)利用細(xì)胞工程技術(shù)進(jìn)行作物育種,是迄今人類受益最多的一個(gè)方面。我國在這一領(lǐng)域已達(dá)到世界先進(jìn)水平,以花藥單倍體育種途徑,培育出的水稻品種或品系有近百個(gè),小麥有30個(gè)左右。其中河南省農(nóng)科院培育的小麥新品種,具有抗倒伏、抗銹病、抗白粉病等優(yōu)良性狀。在常規(guī)的雜交育種中,育成一個(gè)新品種一般需要8~10年,而用細(xì)胞工程技術(shù)對雜種的花藥進(jìn)行離體培養(yǎng),可大大縮短育種周期,一般提前2~3年,而且有利優(yōu)良性狀的篩選。前面已介紹過的微繁殖技術(shù),在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上也有廣泛的用途,其技術(shù)比較成熟,并已取得較大的經(jīng)濟(jì)效益。例如,我國已解決了馬鈴薯的退化問題,日本麒麟公司已能在1000升容器中大量培養(yǎng)無病毒微型馬鈴薯塊莖作為種薯,實(shí)現(xiàn)種薯生產(chǎn)的自動(dòng)化。通過植物體細(xì)胞的遺傳變異,篩選各種有經(jīng)濟(jì)意義的突變體,為創(chuàng)造種質(zhì)資源和新品種的選育發(fā)揮了作用?,F(xiàn)已選育出優(yōu)質(zhì)的番茄、抗寒的亞麻、以及水稻、小麥、玉米等新品系。有希望通過這一技術(shù)改良作物的品質(zhì),使它更適合人類的營養(yǎng)需求。細(xì)胞工程的的技術(shù)與應(yīng)用實(shí)例例2:園林花卉在果樹、林木生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用細(xì)胞工程技術(shù)主要是微繁殖和去病毒技術(shù)。幾乎所有的果樹都患有病毒病,而且多是通過營養(yǎng)體繁殖代代相傳的。用去病毒試管苗技術(shù),可以有效地防止病毒病的侵害,恢復(fù)種性并加速繁殖速度。目前,香蕉、柑橘、山楂、葡萄、桃、梨、荔枝、龍眼、核桃等十余種果樹的試管苗去病毒技術(shù),已基本成熟。香蕉去病毒試管苗的微繁殖技術(shù)已成為產(chǎn)業(yè)化商品化的先例之一。因?yàn)橄憬妒侨扼w植物,必須通過無性繁殖延續(xù)后代,傳統(tǒng)方法一般采用芽繁殖,感病嚴(yán)重,繁殖率低;而采用去病毒的微繁殖技術(shù)不僅改進(jìn)了品質(zhì),畝產(chǎn)量約提高30%~50%,很容易被蕉農(nóng)接受。近年來,對經(jīng)濟(jì)林木組織培養(yǎng)技術(shù)的研究也受到很大的重視。采用這一技術(shù)可比常規(guī)方法提前數(shù)年進(jìn)行大面積種植。特別是有些林木的種子休眠期很長,常規(guī)育種十分費(fèi)時(shí)。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),現(xiàn)已研究成功的林木植物試管苗已達(dá)百余種,如松屬、按樹屬、楊屬中的許多種,還有泡桐、槐樹、銀杏、茶、棕櫚、咖啡、椰子樹等。其中桉樹、楊樹和花旗松等大面積應(yīng)用于生產(chǎn),澳大利亞已實(shí)現(xiàn)桉樹試管苗造林,用幼芽培養(yǎng)每年可繁殖40萬株。例3資料:植物基因工程的新進(jìn)展自1983年首次獲得轉(zhuǎn)基因煙草、馬鈴薯以來,短短十余年間,植物基因工程的研究和開發(fā)進(jìn)展十分迅速。國際上獲得轉(zhuǎn)基因植株的植物已達(dá)35科,120種以上,包括水稻、玉米、馬鈴薯等作物;棉花、大豆、油菜、亞麻、向日葵等經(jīng)濟(jì)作物;番茄、黃瓜、芥菜、甘藍(lán)、花椰菜、胡蘿卜、茄子、生菜、芹菜等蔬菜作物;苜蓿、白三葉草等牧草;蘋果、核桃、李、木瓜、甜瓜、草莓等瓜果;矮牽牛、菊花、香石竹、伽藍(lán)菜等花卉;以霸占楊樹等造林樹種。應(yīng)該說轉(zhuǎn)基因植物研究取得了令人鼓舞的突破性進(jìn)展。
2000年,法國科學(xué)家利用基因技術(shù)“制造”出了一只可以發(fā)出綠色熒光的兔子“Alba”。應(yīng)用了受精卵顯微注射技術(shù),從水母身上采集了熒光蛋白,基因改良后,使它的發(fā)光率比
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