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實驗二、植物原生質(zhì)體制備與觀察引言:植物原生質(zhì)體是指包在植物細(xì)胞壁內(nèi)的生活物質(zhì),課通過混合酶液消化細(xì)胞壁而獲得。原生質(zhì)體經(jīng)適宜的培養(yǎng)能合成新壁,并進(jìn)行細(xì)胞分裂,經(jīng)特殊有道可生成完成完整植株。出去細(xì)胞壁后為原生質(zhì)所包圍的“裸露細(xì)胞”,是開展基礎(chǔ)研究的理想材料。其中酶解法分離原生質(zhì)體是一個常用的技術(shù),其原理是植物細(xì)胞壁主要由纖維素、半纖維素和果膠質(zhì)組成,因而使用纖維素酶、半纖維素酶和果膠酶能講解細(xì)胞壁成分,除去細(xì)胞壁。1材料與方法1.1材料:實驗室準(zhǔn)備的粉色百合花瓣。實驗在北京市北京科技大學(xué)理化樓120進(jìn)行。1.2方法:1.2.1試劑配制將0.6mM甘露醇、8mMCaCl2、7mMNaH2PO4H2O、3mMMES加于干凈的錐形瓶中,調(diào)節(jié)pH至5.6,配制成原生質(zhì)體分離的母液。在對實驗材料進(jìn)行酶解前,加入1.0%纖維素酶及0.6%離析酶。1.2.2材料酶解及觀察先將幼嫩的粉色百合花瓣取下至小培養(yǎng)皿中,用鑷子尖頭撕去花瓣表皮,在一小培養(yǎng)皿中盡量剪碎花肉。取1m^^A酶的母液于離心管中,取少許剪碎的實驗材料進(jìn)行酶解。在室溫下酶解60min,每隔30min取少許溶液制片,顯微鏡觀察原生質(zhì)體的細(xì)胞形態(tài)并拍照。2結(jié)果與討論
2.1實驗圖片
些細(xì)胞細(xì)胞壁已經(jīng)三:一個半小時實驗結(jié)論2觀察??梢栽趫D以在圖二酶解圖中看到已經(jīng)呈小組分別酶解30分鐘、60分鐘、些細(xì)胞細(xì)胞壁已經(jīng)三:一個半小時實驗結(jié)論2觀察??梢栽趫D以在圖二酶解圖中看到已經(jīng)呈小組分別酶解30分鐘、60分鐘、9一小時處又添亍準(zhǔn)備的纖維素匿的酶解,細(xì)胞形態(tài)會由長方形變?yōu)閳A形,所以顯微鏡下觀察到的原生質(zhì)體是圓形的。參考文獻(xiàn):王莉,姚占軍,植
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