知識總結(jié)：基因探針及其應(yīng)用_第1頁
知識總結(jié)：基因探針及其應(yīng)用_第2頁
知識總結(jié)：基因探針及其應(yīng)用_第3頁
全文預(yù)覽已結(jié)束

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、PAGE3基因探針及其應(yīng)用當(dāng)前人類基因組研究方興未艾，許多基因的結(jié)構(gòu)、功能相繼得到闡明。人類基因組有3109個堿基對，約有10萬個基因在不停地工作，我們該如何從這龐大的基因組中找到自已感興趣的目的基因，尤其是單拷貝基因這里就需要用到核酸雜交技術(shù)。所謂核酸雜交，是根據(jù)堿基配對原理，以已知DNA片斷（基因片斷）作為探針與待測樣品DNA片斷進行雜交，從而判斷兩者的一致性或同源性程度。其中，選擇、制備合適的基因探針至關(guān)重要。1基因探針的概念基因探針，即核酸探針，是一段帶有檢測標(biāo)記，且順序已知的，與目的基因互補的核酸序列（DNA或RNA）。基因探針通過分子雜交與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜交信號，能從浩翰的基因

2、組中把目的基因顯示出來。根據(jù)雜交原理，作為探針的核酸序列至少必須具備以下兩個條件：應(yīng)是單鏈，若為雙鏈，必須先行變性處理。應(yīng)帶有容易被檢測的標(biāo)記。探查不同的目的基因和不同種類的基因缺陷，應(yīng)當(dāng)選擇使用不同種類和長度的探針。2基因探針的種類總體上，基因探針可以分為人工合成的DNA探針和天然的克隆探針兩鐘。人工合成的DNA探針（主要是指寡核苷醚探針）用磷酸三酯法或亞磷酸三酯法等化學(xué)法人工合成，目前均由DNA合成儀合成。最常見的寡核苷酸探針長度在1830個堿基之間。其特異性可以根據(jù)需要加以改變，以識別靶序列中單堿基變化。如果被測基因的序列已知，基因缺陷主要是點突變，可以人工合成一段與被測序列互補的寡苷酸

3、探針。通常是兩種寡核苷酸探針同時使用，一個與正常序列互補，一個與缺陷序列互補，通過分子雜交，將缺陷基因與正?；騾^(qū)別開來。天然的克隆探針是對天然核酸序列進行克隆得到，大致包括cDNA探針、基因組探針、RNA探針、內(nèi)含子序列探針和小衛(wèi)星DNA探針等。最常見的有三種：cDNA探針：經(jīng)典方法是先從細胞總RNA中分離出mRNA，再由逆轉(zhuǎn)錄途徑從mRNA合成cDNA，構(gòu)建cDNA文庫，并用適當(dāng)方法從文庫中篩選出所需的cDNA克隆。也可應(yīng)用2，這種驚人的密度大大提高了基因探針的檢測效率。由于基因芯片技術(shù)的迅速發(fā)展，將使基因探針的應(yīng)用更為廣泛?？梢灶A(yù)見，今后基因探針技術(shù)的發(fā)展必將日益突出地體現(xiàn)出“規(guī)模化”、“自動化”、“程序化”、

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論