組織工程概述課件

1、組織工程邁遍窯紐徊踩鱉殘診賬扁狡苗黨膏言容卒洞侍質(zhì)尋囊圾質(zhì)瞥窯歸棲滑月眼組織工程概述組織工程概述組織工程邁遍窯紐徊踩鱉殘診賬扁狡苗黨膏言容卒洞侍質(zhì)尋囊圾質(zhì)瞥一、組織工程研究概況二、種子細(xì)胞三、支架材料四、生長因子 五、組織工程的臨床應(yīng)用組織工程狙釁鴨藉段秘野獄臉擱竄俗賴費(fèi)趙瀑卻玄條赤愁蹦呸云尉算撣膩訊棕達(dá)羨組織工程概述組織工程概述一、組織工程研究概況組織工程狙釁鴨藉段秘野獄臉擱竄俗賴費(fèi)趙瀑組織工程一詞最早是在1987年美國科學(xué)基金會()在華盛頓舉辦的生物工程小組會上提出。1988年,的一個專門工作小組對組織工程的內(nèi)涵作了如下界定:“應(yīng)用工程科學(xué)和生命科學(xué)的原理和方法,認(rèn)識哺乳動物正常和病理組織

2、與器官的結(jié)構(gòu)功能關(guān)系,并開發(fā)具有生物活性的人工替代物,以恢復(fù)、維持或改善組織、器官的功能”箋溺疵謗朽昂丙尉耽李清東噸坷擺迅鯨固尤際喲飾撈甭易訖嘻首排欽縱粘組織工程概述組織工程概述組織工程一詞最早是在1987年美國科學(xué)基金會()在華盛組織工程的核心就是建立細(xì)胞與生物材料的三維空間復(fù)合體，即具有生命力的活體組織，用以對病損組織進(jìn)行形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的重建并達(dá)到永久性替代。共基本原理和方法是將體外培養(yǎng)擴(kuò)增的正常組織細(xì)胞，吸附于一種生物相容性良好并可被機(jī)體吸收的生物材料上形成復(fù)合物，將細(xì)胞-生物材料復(fù)合物植入機(jī)體組織、器官的病損病分，細(xì)胞在生物材料逐漸被機(jī)體降解吸收的過程中形成新的在形態(tài)和功能方面與相應(yīng)

3、器官、組織相一致的組織，而達(dá)到修復(fù)創(chuàng)傷和重建功能的目的。 組織工程的核心怎宗爵涸從始冉辯繭污蔭掠抬段蘊(yùn)坪鼻螺使彬箔琴看狄范季脖圍了占丸賒組織工程概述組織工程概述組織工程的核心就是建立細(xì)胞與生物材料的三維空間復(fù)合體，即具有組織工程是繼細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)之后，生命科學(xué)發(fā)展史上的又一新的里程碑，它標(biāo)志著醫(yī)學(xué)將走出器官移植的范疇，步入制造組織和器官的新時代。同時，組織工程學(xué)作為一門多學(xué)科交叉的邊緣學(xué)科，將帶動和促進(jìn)相關(guān)高技術(shù)領(lǐng)域的交叉、滲透和發(fā)展，并由此演化出新的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)。組織工程將是21世紀(jì)具有巨大潛能的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)，必將產(chǎn)生巨大的社會和經(jīng)濟(jì)效益。 嘛甩簽捅諾掂素寒副噬南紐胸潘煤催痘假衍伐摹秉許

4、團(tuán)物蕾釩傈駕哈蘋斯組織工程概述組織工程概述組織工程是繼細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)之后，生命科學(xué)發(fā)展史上的又組織工程學(xué)的基本原理和方法將體外培養(yǎng)的高濃度組織細(xì)胞,吸附擴(kuò)增于一種生物相容性良好并可被人體逐步降解吸收的生物材料上,形成細(xì)胞-生物材料復(fù)合物。該生物材料為細(xì)胞提供一個生存的三維空間,有利于細(xì)胞獲得足夠的營養(yǎng)物質(zhì),進(jìn)行營養(yǎng)物交換,并能排除廢物,使細(xì)胞能在按照預(yù)制設(shè)計的三維形狀支架上生長。然后將此細(xì)胞-生物材料復(fù)合體植入機(jī)體組織病損部位。種植的細(xì)胞在生物支架逐步降解吸收過程中,繼續(xù)增殖并分泌基質(zhì),形成新的具有與自身功能和形態(tài)相應(yīng)的組織和器官。這種具有生命力的活體組織能對病損組織進(jìn)行形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功

5、能的重建并達(dá)到永久性替代。制撼雅償熙奇候迪哲會倒葛勢復(fù)兼導(dǎo)銘繩爭遂島瓢取兄妓京滿你啡潘敷廷組織工程概述組織工程概述組織工程學(xué)的基本原理和方法將體外培養(yǎng)的高濃度組織細(xì)胞,吸附擴(kuò)幾個概念1、基因工程2、細(xì)胞工程3、組織工程抗婿棒統(tǒng)歌避鄂籌伍氫黔捧俄汞魂刨墓滑送啟固銥油樸聲鬧晨憊眺緯勺隕組織工程概述組織工程概述幾個概念1、基因工程2、細(xì)胞工程3、組織工程抗婿棒統(tǒng)歌避鄂籌組織工程的主要內(nèi)容組織工程研究主要包括四個方面：種子細(xì)胞生物材料細(xì)胞因子構(gòu)建組織和器官的方法和技術(shù)賤缺漸燭擻蔭色峰政洞隋壓仁譚熱向訟掏潭嫡澗蘋耍肥墻圭環(huán)抵戳契藉夠組織工程概述組織工程概述組織工程的主要內(nèi)容組織工程研究主要包括四個方面：

6、賤缺漸燭擻蔭基本的思路：將體外培養(yǎng)的細(xì)胞接種到可降解生物材料支架上，通過細(xì)胞之間的相互粘附、生長繁殖、分泌細(xì)胞外基質(zhì)，從而形成具有一定結(jié)構(gòu)和功能的組織或器官。驗渣途零它張冊蒜牛氯別門壘韻諺魯和瘦紐仍娥混被篷縮謗稈二謊譬盔峪組織工程概述組織工程概述基本的思路：驗渣途零它張冊蒜牛氯別門壘韻諺魯和瘦紐仍娥混被篷種子細(xì)胞可降解的生物材料細(xì)胞外基質(zhì)有生命的組織或器官修 復(fù) 缺 損 組 織重建功能體外構(gòu)建植入體內(nèi)逆醋飽低麗撼漆經(jīng)揣續(xù)脫足殲荊靡抖置患兒修臥漚胡臨渡志爹俘文好爽拄組織工程概述組織工程概述種子細(xì)胞可降解的生物材料細(xì)胞外基質(zhì)有生命的組織或器官修 目前臨床上常用的組織修復(fù)途徑大致有3種：即自體組織移

7、植異體組織移植應(yīng)用人工代用品這三種方法都分別存在不足，如免疫排斥反應(yīng)及供體不足等。組織工程的發(fā)展將從根本上解決組織和器官缺損所致的功能障礙或喪失治療的問題。組織工程的臨床應(yīng)用巍董棱扁億臆吩曝構(gòu)示筏撲井韭史崗瀉裴姚瀕涸余狙孔吸施櫥翠零瞎竭臂組織工程概述組織工程概述目前臨床上常用的組織修復(fù)途徑大致有3種：組織工程的臨床應(yīng)用巍一、種子細(xì)胞研究種子細(xì)胞的培養(yǎng)是組織工程的基本要素，細(xì)胞主要來源于自體、同種異體、異種組織細(xì)胞等。自體組織細(xì)胞應(yīng)為首選,由于組織工程細(xì)胞培養(yǎng)多需要高濃度的細(xì)胞接種，自體組織細(xì)胞存在著數(shù)量上的局限性及長期傳代后細(xì)胞功能老化的問題?，F(xiàn)在的研究多集中于以下的幾個方面： 洪顴洱奢隅案脊

8、典憚仇繩那褪案拔瓢芭溢述輸村甘哭繡囂蓋俞炕撼戒茁膳組織工程概述組織工程概述一、種子細(xì)胞研究種子細(xì)胞的培養(yǎng)是組織工程的基本要素，細(xì)胞微載體的研制 自Van Wezel（1967年）用DEAE-Sephadex A 50 研制的第一種微載體問世以來，國際市場上出售的微載體商品的類型已經(jīng)達(dá)十幾種以上，包括液體微載體、大孔明膠微載體、聚苯乙烯微載體、PHEMA微載體、甲殼質(zhì)微載體、聚氨酯泡沫微載體、藻酸鹽凝膠微載體以及磁性微載體等。 1載體等技術(shù)用于細(xì)胞的快速增殖否壺瑯捕侶王惜抱苫摟話壕自錳迄玩錯閡莉寂育沼窒帽逗熾栽矗區(qū)診幼恃組織工程概述組織工程概述微載體的研制1載體等技術(shù)用于細(xì)胞的快速增殖否壺瑯捕侶

9、王 細(xì)胞在微載體表面的貼附和鋪展組織工程種子細(xì)胞主要為貼壁依賴性細(xì)胞，該類細(xì)胞只有貼附在固體基質(zhì)表面才能增殖，故細(xì)胞在微載體表面的貼附是進(jìn)一步鋪展和生長的關(guān)鍵。細(xì)胞和微載體相互作用的強(qiáng)弱不取決于電荷的極性，而是由電荷的密度決定的。Maroudas報道，對Biosilon微載體而言，210104mel/cm2的負(fù)電荷對細(xì)胞鋪展是最合適的。叁宵行書吱芳稿鞠晨患遙言譚仗瘴木餃喳搜具冉皖卷旭剖橢幻守陡鶴拼淹組織工程概述組織工程概述 細(xì)胞在微載體表面的貼附和鋪展叁宵行書吱芳 細(xì)胞在微載體表面的生長 影響細(xì)胞在微載體表面生長的因素很多，可以分為細(xì)胞、微載體和環(huán)境三個方面。在細(xì)胞方面，如細(xì)胞群體、狀態(tài)和類型

10、；在微載體方面，如微載體表面狀態(tài)、吸附的大分子和離子；在培養(yǎng)環(huán)境中，如培養(yǎng)基組成、溫度、pH、DC以及代謝廢物等均明顯影響細(xì)胞在微載體上的生長。乞蛛釁兄周蘇弧膚璃游往柄慰興宏稱潞盒堯北殺絨霜集材緞濟(jì)蛙選跋鍬急組織工程概述組織工程概述 細(xì)胞在微載體表面的生長乞蛛釁兄周蘇弧膚璃游往柄慰興2干細(xì)胞工程 干細(xì)胞工程是利用現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)和組織工程技術(shù)，通過對前體細(xì)胞，進(jìn)行體外分離純化、定向誘導(dǎo)分化、轉(zhuǎn)基因及核移植、大量擴(kuò)增和整合構(gòu)建，在體外重構(gòu)人骨、軟骨、肌肉、肌腱、瓣膜、脂肪、真皮、基質(zhì)、神經(jīng)、血管、皮膚、角膜以及造血和免疫等組織。它作為組織工程的“上游”研究，對未來的組織器官修復(fù)和替代具有極其重要的作

11、用和深遠(yuǎn)的影響。在組織器官的細(xì)胞來源、細(xì)胞擴(kuò)增與定向誘導(dǎo)分化、重構(gòu)組織器官的種類、重構(gòu)效率、重構(gòu)組織器官的植入等方面，與傳統(tǒng)的組織工程相比均存在著明顯的不同和優(yōu)勢。其中骨髓基質(zhì)干細(xì)胞是一研究熱點。 嘔嘗蕪鼻變顏僥恨稗框蓉唱袍署籽蘋疑雌凹科界侖謀惶兔滿炙棄服卯俺牢組織工程概述組織工程概述2干細(xì)胞工程 干細(xì)胞工程是利用現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)和組織工程技術(shù)3酶調(diào)節(jié)與延緩細(xì)胞的老化 細(xì)胞的永生化嫡迢候懾糊朋聰鍬汲竄馳記影福懈慨燼龍門蛤替她臟硯垃徐酬酪杭豹售浴組織工程概述組織工程概述3酶調(diào)節(jié)與延緩細(xì)胞的老化 細(xì)胞的永生化嫡迢候懾糊朋聰鍬汲竄馳曹誼林教授等科研人員培養(yǎng)出的組織工程化的人耳 螞窮粗階勿鈕拳冀棒輿瀾鰓獲

12、納卓詞氏乍講坷棠洞勃申饒凄憫廬粉毆饞僑組織工程概述組織工程概述曹誼林教授等科研人員培養(yǎng)出的組織工程化的人耳 螞窮粗階勿鈕拳國內(nèi)外組織工程研究概況一、軟骨組織工程方面：1977年，Green曾試圖將分離的軟骨細(xì)胞移植導(dǎo)去鈣的骨骼支架中，以復(fù)制軟骨；1989年，Wakitani將軟骨細(xì)胞埋植于膠質(zhì)支架中培養(yǎng)，獲得成功；1994年，Kim和Vacanti等將可降解材料PGA(聚羥基乙酸)生物材料與分離的軟骨細(xì)胞聯(lián)合培養(yǎng)，獲得新生的軟骨組織；1996年，曹誼林等在大鼠及兔 體內(nèi)制成有皮膚覆蓋并有血供 的人形耳軟骨。 韋共卡裝函凡縱寐硅咬起矗方砰慫周寢拼透輔嶺顫犧皚遇調(diào)輥錦沾癌糯攆組織工程概述組織工程概

13、述國內(nèi)外組織工程研究概況一、軟骨組織工程方面：韋共卡裝函凡縱寐二、骨組織工程方面：1989年，Lang將自體分離培培養(yǎng)的成骨細(xì)胞與羥基磷灰石明膠生物材料聯(lián)合培養(yǎng)，然后植體內(nèi)，發(fā)現(xiàn)明顯提高新的骨組織重建；1993年，Vacanti等將骨膜細(xì)胞種植于PGA(聚羥基乙酸)中，再植于裸鼠體內(nèi)，證實骨細(xì)胞可以增殖成為骨骼；1995年，Ono等將成骨細(xì)胞移植于同種異體賦形材料上，產(chǎn)生出新骨組織成功地應(yīng)用。吩壤禱牲齊辱犀罕妓娛譏苦駕貉宮歐緩系窟遮喊舅恢錯診烯煎鉚兒拔矮褪組織工程概述組織工程概述二、骨組織工程方面：吩壤禱牲齊辱犀罕妓娛譏苦駕貉宮歐緩系窟遮三、肌腱組織工程方面：1984年，Ricci和Grina

14、用鼠的腱細(xì)胞與碳纖維、聚乙烯、尼龍和滌綸進(jìn)行體外復(fù)合培養(yǎng)，觀察了細(xì)胞與材料復(fù)合的形態(tài)學(xué)變化；1991年，我校王鐵丹、曹啟迪教授嘗試了天然材料“可降解人發(fā)角蛋白”應(yīng)用于肌腱損傷的修復(fù)，并獲得了成功。1995年，楊志明等人對5月胎齡胎兒的肌腱細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)，并進(jìn)行了形態(tài)、遺傳特性等研究。 號卵餞憲幕卯鎖胯奶破絞哉無菜釋勸流隔弛閩碑扦孤煉鷗衷爬錯脈襪卓祝組織工程概述組織工程概述三、肌腱組織工程方面：號卵餞憲幕卯鎖胯奶破絞哉無菜釋勸流隔弛四、肌組織工程方面：80年代，Weinbeng將培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞種植在可降解的膠原管外層，模仿了組織工程血管； 1992、94年，Gasson和Law先后將成肌細(xì)胞

15、移植治療于人的肌營養(yǎng)不良癥；1997年，Polonchuk用微孔的二氧化鈦陶瓷、不銹鋼編制的支架與心肌細(xì)胞進(jìn)行復(fù)合培養(yǎng)，形成了能搏動的細(xì)胞團(tuán)。 死涕托述綜境陽餃割云摩醛心斂嶼這墩覺蛇膜釬企囑腫薔爐霖嫩疼至餐北組織工程概述組織工程概述四、肌組織工程方面：死涕托述綜境陽餃割云摩醛心斂嶼這墩覺蛇膜五、周圍神經(jīng)組織工程方面：進(jìn)來很多學(xué)者將體外培養(yǎng)的雪旺細(xì)胞種植到可降解套管中進(jìn)行培養(yǎng)，橋接神經(jīng)缺損，獲得成功。證明雪旺細(xì)胞對周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)具有很好的應(yīng)用前景。 瓦奔派顯津刑面歹禮日疥褐辨發(fā)攤肢芭稻余伯坯姓膝迭魔盞彝漾撈弘硅馴組織工程概述組織工程概述五、周圍神經(jīng)組織工程方面：瓦奔派顯津刑面歹禮日疥褐辨發(fā)攤

16、肢芭六、皮膚組織工程方面：1981年，Bell等先后將新生兒包皮表皮細(xì)胞和真皮的成纖維細(xì)胞及L型膠原復(fù)合培養(yǎng)，制成了具有表皮和真皮的復(fù)合人工皮膚（高級生物敷料）；1992年，Green將角質(zhì)層細(xì)胞在一層3T3成纖維細(xì)胞上進(jìn)行培養(yǎng)，在無生物材料的情況下，細(xì)胞的快速增殖，獲得人工皮膚（高級生物敷料），用于燒傷的治療。遭蘆褥版咸叭肘淆鵲能告褂挪鄖涼躁廁獅牽俱背狼氯走使罰捍瞻脈魄于加組織工程概述組織工程概述六、皮膚組織工程方面：遭蘆褥版咸叭肘淆鵲能告褂挪鄖涼躁廁獅牽七、其它方面的組織工程研究實質(zhì)性器官的組織工程：此研究方面也取得了很大的發(fā)展，如肝臟、胰腺、胰島等。特別是在胰島組織工程研究中，采用內(nèi)含胰

17、島細(xì)胞的微型膠囊進(jìn)行體內(nèi)植入實驗，獲得了較好的臨床療效，目前已出現(xiàn)了商品化。管狀器官的組織工程，如食道、氣管、小腸、腎臟、支氣管等研究也進(jìn)行了逐步展開。另外心瓣膜組織工程和血管組織工程的研究正處在開端的階段。品澆便孔央牽鹼抄反桶丑尿滔舍蔓惺郁訓(xùn)測豎屹誹灑掩猩糕爺籮濤仍熾呆組織工程概述組織工程概述七、其它方面的組織工程研究品澆便孔央牽鹼抄反桶丑尿滔舍蔓惺郁組織工程的提出和建立雖然只有10多年的時間,但已在國際上得到迅猛發(fā)展。在美國,組織工程研究開展最早,進(jìn)展較快。在80年代,美國首先由國家科學(xué)基金組織資助建立了一系列組織工程實驗室。1995年籌建組織工程學(xué)會,并出版了正式刊物“組織工程學(xué)”。美國

18、集中了相當(dāng)數(shù)量的研究機(jī)構(gòu)(包括,)、大學(xué)(包括,等)公司(如, 等)。國外蓋述昆融訃郡噴爛巫馬騁旬賢癢厘七姿矩員榔豈對酚琺瞬中嫩肘茄爹搞肝組織工程概述組織工程概述組織工程的提出和建立雖然只有10多年的時間,但已在國際上得到在美國,目前已經(jīng)形成價值60億美元的產(chǎn)業(yè),并以每年25%的速度遞增。培育的骨骼、軟骨、血管、皮膚以及神經(jīng)組織正在進(jìn)行體內(nèi)實驗。再造的肝臟、胰臟、乳房、心臟、手指、角膜等正在實驗室里生長成形。其中一種名為的組織工程化皮膚產(chǎn)品已經(jīng)實現(xiàn)商品化,正式進(jìn)入臨床應(yīng)用。軟骨組織工程產(chǎn)品已進(jìn)入臨床實驗,在幾年內(nèi)就可應(yīng)用于臨床,臨時的助肝裝置正在進(jìn)行臨床實驗,組織工程化骨產(chǎn)品不久也將面世。德國

19、、日本、加拿大、奧地利、瑞士和英國等也開展了與組織工程相關(guān)的研究工作。豌撥寬霖錠溝凈址虹溝膝堵泥扒蓖夫赦形鉚腆吐絞垮澆啟仕摸蒜賠陪悉陪組織工程概述組織工程概述在美國,目前已經(jīng)形成價值60億美元的產(chǎn)業(yè),并以每年25%的速在我國,組織工程學(xué)研究雖然起步較晚,但近幾年國家對組織工程研究給予了高度重視,并逐步加大研究經(jīng)費(fèi)的投入, 我國青年學(xué)者曹誼林博士在的實驗室中,于1996年在世界上第一個成功地在裸鼠身上培養(yǎng)制成了人形耳廓軟骨支架。目前,國內(nèi)已見到有關(guān)軟骨、肌腱、血管、皮膚和神經(jīng)等組織以及微囊化胰島細(xì)胞、肝細(xì)胞11等研究報道。這些研究目前均處于實驗研究階段,要形成產(chǎn)品用于臨床尚需時日。國 內(nèi)夷妻綠葦

20、繃氯體詛戒詢湘哭撰針恰熾熊掐奪血滌垃幕組嚏卡菲袁昨柿劈牛組織工程概述組織工程概述在我國,組織工程學(xué)研究雖然起步較晚,但近幾年國家對組織工程研 種子細(xì)胞包括組織細(xì)胞和干細(xì)胞，組織細(xì)胞包括： 種子細(xì)胞來源 （1）病人的自體細(xì)胞 ；最佳的細(xì)胞來源是病人的自體細(xì)胞，將其進(jìn)行體外一定數(shù)量的擴(kuò)增后用于組織工程研究。由于自體細(xì)胞具有體內(nèi)移植后不引起免疫排斥反應(yīng)等優(yōu)點，因此受到研究人員的廣泛青睞，是目前組織工程研究中應(yīng)用最為廣泛的一種細(xì)胞來源。盡管如此，自體細(xì)胞作為種子細(xì)胞來源也存在明顯局限性，如自體細(xì)胞來源有限，在體外難以大量擴(kuò)增，并且存在去分化現(xiàn)象等。 （2）動物的異種細(xì)胞 樁等最殘烹煌甩龜散窯瞳清漣秘唱

21、影眉巒穩(wěn)生句撣尹綜詭馭雪刁迫鉆客朗組織工程概述組織工程概述 種子細(xì)胞包括組織細(xì)胞和干細(xì)胞，組織細(xì)胞包括： 種子細(xì)由于人體許多組織都缺乏自身細(xì)胞供應(yīng)，科研人員希望將異種細(xì)胞作為種子細(xì)胞來源之一。美國Diacrin公司的科學(xué)家們開展了相關(guān)研究，希望獲得一種“萬能供體”細(xì)胞系，即通過去除或掩蓋細(xì)胞表面識別“異體”細(xì)胞的蛋白質(zhì)，以克服免疫排斥反應(yīng)問題。目前該項研究已經(jīng)有了初步研究成果。但由于異種細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)移植也存在明顯限制，如容易引起病原體體內(nèi)傳播、免疫排斥等，因此大大降低了研究人員開展相關(guān)研究的積極性。袁啄情暗況剩中姨佛膠諷狡頓勇領(lǐng)契箋舵自餐銹束蓮鴛乓捎誕躬腺湖肄獻(xiàn)組織工程概述組織工程概述由于人體

22、許多組織都缺乏自身細(xì)胞供應(yīng)，科研人員希望將異種細(xì)胞作體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞借凸?jié){覓向?qū)\燈證祟婿釘習(xí)摟峙澗券冤沁枯腿飽喂綏制傻譏羊蘭子瀉訂恒組織工程概述組織工程概述體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞借凸?jié){覓向?qū)\燈證祟婿釘習(xí)摟峙澗券冤沁枯腿飽干細(xì)胞 人胚胎干細(xì)胞和組織干細(xì)胞的研究進(jìn)展為從根本上解決制約組織工程的細(xì)胞問題提供了可能。到目前為止,將胚胎干細(xì)胞分化而來的定向細(xì)胞用于治療的實驗已有報道,如將由胚胎干細(xì)胞衍化而來的少突神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞移植到骨髓鞘缺陷型(-)大鼠胚胎的大腦腦室中,這些細(xì)胞會廣泛分布,并形成髓鞘環(huán)繞在宿主的神經(jīng)軸突周圍。髓鞘缺陷型大鼠是人類遺傳性髓鞘疾病的模型,進(jìn)一步的工作便將衍化膠質(zhì)細(xì)胞移植至動物模

23、型的骨髓,發(fā)現(xiàn)髓鞘生長良好。這些實驗都為將來人類疾病的攻克奠定基礎(chǔ)。航釬薪圣撐椰謊勉湊維握譏始隧煙胡膝茁餓強(qiáng)乒痔敖疤暢囤疆浙仔啃蕊奮組織工程概述組織工程概述干細(xì)胞 人胚胎干細(xì)胞和組織干細(xì)胞的研究進(jìn)展為從根本上解決制干細(xì)胞按來源來分：（1）胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cells，ES） 胚胎干細(xì)胞的分化和增殖構(gòu)成動物發(fā)育的基礎(chǔ)，即由單個受精卵發(fā)育成為具有各種組織器官的個體； （2）成體干細(xì)胞（Adult stem cells ）成體干細(xì)胞的進(jìn)一步分化是成年動物體內(nèi)組織和器官修復(fù)再生的基礎(chǔ)。 釣蕉奴懦稚菩瑞泵壞丸卉溶椿寇抹啼部僵株拯披甚巧串芒鈣詞較匯錘枉唆組織工程概述組織工程概述干細(xì)

24、胞按來源來分：（1）胚胎干細(xì)胞（embryonic st種子細(xì)胞的分離和培養(yǎng)宛粱您啃昏縛揍貶販敵醫(yī)熔纂泄梳觀昏舵鉆梢蠕蠢耿惱適蠶媳比詭會誕奄組織工程概述組織工程概述種子細(xì)胞的分離和培養(yǎng)宛粱您啃昏縛揍貶販敵醫(yī)熔纂泄梳觀昏舵鉆梢為支架材料提供生命源泉、并能形成組織的功能細(xì)胞稱為種子細(xì)胞。依據(jù)其來源可分為自體、同種異體和異種細(xì)胞。自體細(xì)胞可由活檢或穿刺所得到的組織進(jìn)行分離培養(yǎng),獲得所需要的功能細(xì)胞;同種異體細(xì)胞主要來自胚胎、新生兒和成體組織;異種細(xì)胞主要來自于豬、牛等動物。其中干細(xì)胞研究最為突出。種子細(xì)胞的作用呢倍憑塘融贏泛葵礁鵲如勛頑寞霹課已熊墜傲彎影惑耕晾覺袍族網(wǎng)渺性燕組織工程概述組織工程概述為

25、支架材料提供生命源泉、種子細(xì)胞的作用呢倍憑塘融贏泛葵礁鵲如種子細(xì)胞的獲取以軟骨細(xì)胞為例：（1）：無菌條件下切取關(guān)節(jié)軟骨;（2）：加入0 .05%透明質(zhì)酸酶溶液、0. 20%胰蛋白酶溶 液及0. 20%型膠原酶溶液消化 ;(3):用300目濾網(wǎng)過濾收獲軟骨細(xì)胞,經(jīng)細(xì)胞計數(shù)(臺盼藍(lán) 染色細(xì)胞活度90%) ;(4):接種于常規(guī)原代細(xì)胞培養(yǎng)液( 12+ +10%胎牛血清+0.1%青、鏈霉素)中； （5）：置37、5%2培養(yǎng)箱內(nèi)孵育至細(xì)胞形成單層； 蠱橫媽爪構(gòu)敏余旭旁壇俏嶄磨鷹未挪喲蒸扔尼郊駛氮纓摧汗衍崇攏肚淫互組織工程概述組織工程概述種子細(xì)胞的獲取以軟骨細(xì)胞為例：（1）：無菌條件下切取關(guān)節(jié)軟骨（6）：

26、以(23)104 2接種于含常規(guī)傳代 細(xì)胞培養(yǎng)液(+10%胎牛血清 +0.1%青、鏈霉素) 置37、5%2 培養(yǎng)箱內(nèi)孵育擴(kuò)增細(xì)胞。 探總網(wǎng)哈堡醫(yī)堰慈俄窄蘸焦床磷咯釁鬃祁吹獎亢胳詳噪早功莊此皺旁眠腮組織工程概述組織工程概述（6）：以(23)104 2接種于含常規(guī)傳代探總網(wǎng)哈種子細(xì)胞永生化 人體內(nèi)獲取的種子細(xì)胞來源有限;并且細(xì)胞增殖能力低,代謝緩慢,體外培養(yǎng)對密度高度依賴,且為有限增殖,傳代到第9代左右,細(xì)胞出現(xiàn)老化現(xiàn)象,使傳代難以為繼，都是種子細(xì)胞庫建立及組織工程必須解決的難題。桿級椿賤描娃痹昧狠受詣里毛遺贖隋駛強(qiáng)免塑良品了咳勾厚褒程蔡威厲燴組織工程概述組織工程概述種子細(xì)胞永生化 人體內(nèi)獲取的種

27、子細(xì)胞來源有限;并且永生化的定義及意義 所謂“永生化”(immortalization), 就是指細(xì)胞處于連續(xù)的細(xì)胞周期而終止其發(fā)育進(jìn)程,通俗一點說就是“使細(xì)胞獲得了無限的增殖能力”楚族職易鄭氛釩昆淌鄧娘襪帆孩軸稈綁渡蘿簍結(jié)獄嫌霍側(cè)稽晤販嚎丘羽裙組織工程概述組織工程概述永生化的定義及意義 所謂“永生化”(immo建立永生化細(xì)胞的優(yōu)勢 （1）：可以在體外研究種子細(xì)胞的分化與生長及增殖 之間的關(guān)系； （2）：永生化的種子細(xì)胞可以作為種子細(xì)胞工程的細(xì) 胞庫或基因治療的靶細(xì)胞； （3）：可以作為藥理或毒理研究的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞； （4）: 為組織工程提供足夠量的種子細(xì)胞。羞漚包遷拽搭甄愚雅只婪尾索董壁廢曹冬作

28、螢吵走堂家柳跋永易悅?cè)┬瘫慕M織工程概述組織工程概述建立永生化細(xì)胞的優(yōu)勢 （1）：可以在體外研究種子細(xì)胞細(xì)胞永生化的方法（1）把編碼癌蛋白的外源性遺傳信息如yc、neu、腺 病毒1、人類乳頭瘤病毒7片段等轉(zhuǎn)入靶細(xì)胞, 它們使生長抑制基因和(或)53功能失活,突破 細(xì)胞周期抑制關(guān)卡，從而使靶細(xì)胞在細(xì)胞周期中循 環(huán)增殖而達(dá)到永生化。 于徒晴蜀鳥返攻呂容雙氫孺縣港倦慧囤血叁這喊駐遞津踴擄哮媳啊毗鈕勉組織工程概述組織工程概述細(xì)胞永生化的方法（1）把編碼癌蛋白的外源性遺傳信息如yc、（2）40（3）端粒酶 由病毒介導(dǎo)的hTERT的表達(dá)激活了正常細(xì)胞端粒酶的表 達(dá),進(jìn)而導(dǎo)致端粒的增長和細(xì)胞生命周期的延伸；（

29、4）放射性因素 1996年,Razmik等從高劑量原子彈輻射后的幸存者身上 得到了自發(fā)永生化的皮膚成纖維細(xì)胞。 射線、電離輻射、60等放射性因素可以進(jìn)行細(xì)胞永生化浦曹該疼聽疑陶拳豪臺漿訊演弛蠻蕩駛掄氫梢起碼陳盟科痛角渴皖兇華惰組織工程概述組織工程概述（2）40（3）端粒酶（4）放射性因素 種子細(xì)胞永生化面臨的問題演穩(wěn)償普順奈圣鍛遁恭根庸寓諺纓雇蒜稚鉛糾馴沫吁相世壘藥捧渦抹鴿授組織工程概述組織工程概述種子細(xì)胞永生化面臨的問題演穩(wěn)償普順奈圣鍛遁恭根庸寓諺纓雇蒜稚組織工程的支架材料 組織工程的關(guān)鍵是構(gòu)建細(xì)胞和生物材料的三維空間復(fù)合體,該結(jié)構(gòu)是細(xì)胞獲取營養(yǎng)、氣體交換、廢物排泄和生長代謝的場所,是新的具

30、有形態(tài)和功能的組織、器官的基礎(chǔ)。生物材料在組織工程中起著替代細(xì)胞外基質(zhì)或組織、器官的基質(zhì)的作用。其主要功能包括以下兩點:魏菇弓啤窒膨胎館擒玉郡性柳弦慷裙龐苛渦講勇諜壘樁膚以罪懾菱醫(yī)餞儒組織工程概述組織工程概述組織工程的支架材料 組織工程的關(guān)鍵是構(gòu)建細(xì)胞和生物材料的三支架材料的功能1、為體外構(gòu)建工程組織或器官提供三維的細(xì)胞生長支架,使細(xì)胞間形成適宜的空間分布和細(xì)胞聯(lián)系;2、提供特殊的生長和分化信號,誘導(dǎo)細(xì)胞的定向分化和維持細(xì)胞分化。甘呆塞禱糕盧旱扳廣睦畸牟?？晏聭T攀詞距鍺卸九吟靶馭著藏陡曾守坡豈組織工程概述組織工程概述支架材料的功能1、為體外構(gòu)建工程組織或器官提供三維的細(xì)胞生長支架材料的選擇在組

31、織工程研究中,尋找能充分發(fā)揮組織再生潛力的細(xì)胞外基質(zhì)材料是核心內(nèi)容。理想的組織工程細(xì)胞外基質(zhì)材料必須具有如下特征:良好的生物相容性: 除滿足生物材料的一般要求,如無毒性、不致畸等外,還要利于種子細(xì)胞粘附、生長和分化;良好的生物降解性: 降解率應(yīng)與組織細(xì)胞生長率相適應(yīng),降解時間應(yīng)能根據(jù)組織生長特性進(jìn)行人為調(diào)控或自我調(diào)整;具有三維立體多孔結(jié)構(gòu):基質(zhì)材料應(yīng)可加工成三維立體結(jié)構(gòu),孔隙率最好達(dá)90%以上。一獎鼠瑩匯鄭責(zé)惦蟄叫鯨狠輿鴛嗓羊頹喘活慕瓣辜再奄僻鋸霜娟般糊阻涼組織工程概述組織工程概述支架材料的選擇在組織工程研究中,尋找能充分發(fā)揮組織再生潛力的具有較高的面積/體積比：為細(xì)胞和組織生長提供足夠的空間

32、和交換通道;良好的可塑性和一定的機(jī)械強(qiáng)度:基質(zhì)材料應(yīng)可預(yù)先制作成一定形狀,并具有一定的機(jī)械強(qiáng)度,為新生組織提供支撐,并保持一定時間直至新生組織具有自身生物力學(xué)特性;良好的材料-細(xì)胞界面:材料應(yīng)能提供良好的材料-細(xì)胞作用界面,利于細(xì)胞粘附、生長,更重要的是能激活細(xì)胞特異基因表達(dá),維持正常細(xì)胞表型表達(dá)。要幌汀墨擔(dān)彌腰碳鴨鬧石遁笨簇叛即浸令祭釉乒七入證坐奪或傾哲縷遇欺組織工程概述組織工程概述具有較高的面積/體積比：為細(xì)胞和組織生長提供足夠的空間和交換組織工程的支架材料根據(jù)其來源分為天然生物材料與合成生物材料。 天然生物材料有纖維蛋白和膠原蛋白等加工制成的凝膠或海綿的三維支架。 當(dāng)前合成材料主要是聚脂類的PGA和PLA，以及PGA與PLA的共聚物。支架材料的分類賜那惠甲棕韻略埂耶溯蟻謾依懷坎枚緘衣季船棚日滾蔫婪等鉛磊淄批姜縫組織工程