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1、第三節(jié) 植物組織培養(yǎng)技術(shù)第三節(jié) 植物組織培養(yǎng)技術(shù)1.含義:在_和人工控制的條件下,將_的植物器官、組織或細(xì)胞,在適宜的培養(yǎng)條件下誘導(dǎo)其產(chǎn)生_、叢芽和完整植株的技術(shù)。2.原理:植物細(xì)胞的_,是指植物體的每個(gè)細(xì)胞都攜帶著一套來(lái)自受精卵的_,并具有發(fā)育成_的潛在能力。無(wú)菌離體愈傷組織全能性完整基因組完整植株1.含義:在_和人工控制的條件下,將_的植3.過(guò)程離體的植物器官、組織或細(xì)胞愈傷組織根、芽完整植株。(1)脫分化:由_的植物細(xì)胞或組織產(chǎn)生_的過(guò)程。(2)再分化:在一定條件下繼續(xù)培養(yǎng)脫分化的_,可以重新誘導(dǎo)根、芽等器官的分化。已經(jīng)分化愈傷組織愈傷組織3.過(guò)程已經(jīng)分化愈傷組織愈傷組織1為什么科學(xué)家利
2、用胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞就可以培育出完整的胡蘿卜植株?提示:原因是植物每個(gè)細(xì)胞都具有全能性。想一想1為什么科學(xué)家利用胡蘿卜的韌皮部細(xì)胞就可以培育出完整的胡蘿1.細(xì)胞的全能性(1)概念:生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的潛能。(2)基礎(chǔ):生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有本物種的全套遺傳物質(zhì),都有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全套基因。1.細(xì)胞的全能性(3)生物體內(nèi)細(xì)胞沒(méi)有表現(xiàn)出全能性,是由于基因在特定的時(shí)間和空間條件下選擇性表達(dá),形成不同的組織和器官的結(jié)果。(4)植物細(xì)胞全能性大小的比較: 受精卵生殖細(xì)胞體細(xì)胞。 體細(xì)胞中:幼嫩組織細(xì)胞(芽尖)成熟組織細(xì)胞。(3)生物體內(nèi)細(xì)胞沒(méi)有表現(xiàn)出全能性,是由于基因在特定
3、的時(shí)間和2.植物細(xì)胞全能性實(shí)現(xiàn)的條件(1)離體狀態(tài);(2)提供種類齊全、比例適合的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);(3)提供激素(細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素);(4)無(wú)菌操作(防止雜菌污染);(5)提供其他適宜條件(如溫度、酸堿度、光照等)。2.植物細(xì)胞全能性實(shí)現(xiàn)的條件植物組織培養(yǎng)中脫分化和再分化的比較:比較內(nèi)容脫分化再分化過(guò)程細(xì)胞愈傷組織愈傷組織幼苗特點(diǎn)排列疏松、高度液泡化的薄壁細(xì)胞有根、芽需要條件無(wú)菌、離體;適宜的營(yíng)養(yǎng);生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素?zé)o菌、離體;適宜的營(yíng)養(yǎng);生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素、光照特別提醒植物組織培養(yǎng)中脫分化和再分化的比較:比較內(nèi)容脫分化再分化過(guò)程例一:植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是()A導(dǎo)入其他植物細(xì)胞的基因B
4、將成熟的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中C用適當(dāng)濃度的秋水仙素處理D脫離母體后,給予適宜的營(yíng)養(yǎng)和適宜的溫度等外界條件例一:植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是【思路點(diǎn)撥】本題最關(guān)鍵的是掌握植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的前提條件是離體。【解析】植物細(xì)胞只有脫離了植物體,在一定的外部因素作用下,經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂形成愈傷組織,才能表現(xiàn)出全能性,由愈傷組織發(fā)育、分化出新的植物體?!敬鸢浮?D【思路點(diǎn)撥】本題最關(guān)鍵的是掌握植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的前提條件1.準(zhǔn)備:實(shí)驗(yàn)器材和藥品。2.配制:配制MS基本培養(yǎng)基。分別向MS基本培養(yǎng)基中添加所需的激素,配制誘導(dǎo)愈傷組織形成的培養(yǎng)基、分化芽的培養(yǎng)基、_的培養(yǎng)基,攪拌均勻,并調(diào)節(jié)pH。生
5、根1.準(zhǔn)備:實(shí)驗(yàn)器材和藥品。生根3.滅菌4.取材與接種(1)取天竺葵幼嫩的葉,流水沖凈后,吸去表面水分,浸沒(méi)在質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的_或質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的NaClO溶液中515 min,用無(wú)菌水沖洗46次,消毒并切成約0.5 cm2的小塊。漂白粉3.滅菌漂白粉(2)接種于已經(jīng)配制好的誘導(dǎo)_形成的培養(yǎng)基上,做好標(biāo)記放在適宜條件下培養(yǎng)。5.觀察與記錄每天觀察_生長(zhǎng)情況并記錄變化情況。6.轉(zhuǎn)接幼苗:愈傷組織分化芽的培養(yǎng)基幼芽_的培養(yǎng)基煉苗移栽。愈傷組織外植體生根(2)接種于已經(jīng)配制好的誘導(dǎo)_形成的培養(yǎng)基2在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,并且要求無(wú)菌操作?提示:避免雜菌在上面迅速生長(zhǎng)消
6、耗營(yíng)養(yǎng),且有些雜菌會(huì)危害培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。想一想2在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,為什么要進(jìn)行一系列的消毒、滅菌,并影響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果植物激素的濃度根據(jù)生長(zhǎng)素作用的兩重性:低濃度促進(jìn)生長(zhǎng),高濃度抑制生長(zhǎng),甚至殺死植物影響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果植物激素的濃度根據(jù)生長(zhǎng)素作用的兩重性:低濃度影響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果植物激素用量生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素有利于根的分化、抑制芽的形成生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素有利于芽的分化、抑制根的形成生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素促進(jìn)愈傷組織形成影響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果植物激素用量生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素有利于根的分化影響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用順序先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化先細(xì)胞分裂素,后生長(zhǎng)素細(xì)胞既分裂也分化同時(shí)使用分化頻率提高影
7、響因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果使用順序先生長(zhǎng)素,后細(xì)胞分裂素有利于細(xì)胞分裂例二:下列關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素,說(shuō)法正確的是()A不同植物組織培養(yǎng)的難易程度不同,同一種植物材料培養(yǎng)的難易程度相同B在植物組織培養(yǎng)中,培養(yǎng)基中須添加植物激素C生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用是互相獨(dú)立的DpH、溫度、光照等對(duì)植物組織培養(yǎng)也特別重要例二:下列關(guān)于影響植物組織培養(yǎng)的因素,說(shuō)法正確的是()【解析】同一種植物材料隨年齡、保存時(shí)間的不同,培養(yǎng)的難易程度不同;有些植物組織培養(yǎng)不需要添加植物激素;植物激素中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的作用是互相影響的?!敬鸢浮緿【解析】同一種植物材料隨年齡、保存時(shí)間的不同,培養(yǎng)的難易程度_是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化
8、、再分化的關(guān)鍵激素。1.生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量多時(shí),有利于_而對(duì)芽的形成有抑制作用。2.生長(zhǎng)素用量比細(xì)胞分裂素用量少時(shí),有利于_而抑制根的形成。3.生長(zhǎng)素用量與細(xì)胞分裂素用量相當(dāng)時(shí),則促進(jìn)_的生長(zhǎng)。生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素根的分化芽的分化愈傷組織_是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、1(1)在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,一般要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素等激素。( )(2)當(dāng)生長(zhǎng)素的用量比細(xì)胞分裂素用量的比值高時(shí)有利于愈傷組織組織的形成。( )(3)植物能夠進(jìn)行光合作用,故光照是植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的必要條件。( )判一判1(1)在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中,一般要添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)無(wú)土栽培含義在無(wú)菌條件下,將離
9、體的植物體器官或組織接種在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),最終發(fā)育成完整植物體在無(wú)菌條件下,在適宜的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件下對(duì)微生物培養(yǎng)將植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中所需各種礦質(zhì)元素按一定比例配成營(yíng)養(yǎng)液,并利用這種營(yíng)養(yǎng)液栽培植物植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)無(wú)土栽培含義在無(wú)菌條件下,將離體的植物植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)無(wú)土栽培培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、有機(jī)添加物和植物激素水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源水、必需礦質(zhì)元素特殊操作要求嚴(yán)格控制無(wú)菌操作,在培養(yǎng)過(guò)程中要更換培養(yǎng)基,調(diào)節(jié)細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例嚴(yán)格控制無(wú)菌操作,整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程無(wú)需更換培養(yǎng)基適宜的環(huán)境條件,基質(zhì)墊底并固定幼苗,不需要保證無(wú)菌條件植物組織培養(yǎng)微生物培養(yǎng)無(wú)土栽培培養(yǎng)基成分水、礦質(zhì)元素、蔗糖、例三:用于植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)液和用于無(wú)土栽培的營(yíng)養(yǎng)液相比,以下說(shuō)法不正確的是()A都必須含植物必需的礦質(zhì)元素B都必須含有少量的有機(jī)物C不都需要含有植物激素D濃度都必須小于細(xì)胞液的濃度例三:用于植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)液和用于無(wú)土栽培的營(yíng)養(yǎng)液相比,以下【解析】無(wú)土栽培幼苗一開(kāi)始就能進(jìn)行光合
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