鐵皮石斛組織培養(yǎng)

1、鐵皮石斛 組織培養(yǎng)B1小組準(zhǔn)備素材第一頁，共十五頁。鐵皮石斛的組織培養(yǎng)鐵皮石斛，為蘭科多年生附生草本植物。生于海拔達(dá)1600米的山地半陰濕的巖石上，喜溫暖濕潤氣候和半陰半陽的環(huán)境，不耐寒。一般均能耐5的低溫。石斛可分為黃草、金釵、馬鞭等數(shù)十種，鐵皮石斛為石斛之極品，它因表皮呈鐵綠色而得名。Company Logo第二頁，共十五頁。鐵皮石斛的組織培養(yǎng)技術(shù)路線外植體叢生芽培養(yǎng)基生根發(fā)育完整植株Company Logo第三頁，共十五頁。蔗糖：30g瓊脂：6.8g初代培養(yǎng)基的設(shè)計誘導(dǎo)培養(yǎng)基 MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂6.8%【pH值5.25.6】MS母液： I-V5

2、0ml,5ml,5ml,5ml 5ml。激素母液：BA10ml,NAA5mlCompany Logo第四頁，共十五頁。蔗糖：30g瓊脂：6.8g土豆汁150ml繼代培養(yǎng)基的設(shè)計增殖培養(yǎng)基 MS+BA0.5ml+NAA0.2+土豆汁10%20% 【pH值5.25.6】取MS母液： IV50ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：BA5ml,NAA2mlCompany Logo第五頁，共十五頁。NAABAIAA增殖培養(yǎng)將建立的無菌系中的小苗轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行增殖培養(yǎng)。增殖培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基，添加不同濃度的生長調(diào)節(jié)劑BA、NAA、IAA、IBA及土豆汁和香蕉汁等附加物。土豆汁香蕉汁I

3、BACompany Logo第六頁，共十五頁。蔗糖：30g瓊脂：6.8g香蕉汁：200ml活性炭：20g生根培養(yǎng)基的設(shè)計生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA0.20.5mg/L+香蕉汁20%+活性炭2.0%【pH值5.25.6】取MS母液： IV25ml,5ml,5ml,5ml,5ml;激素母液：NAA25mlCompany Logo第七頁，共十五頁。Your Text here生根培養(yǎng)將叢生芽無菌操作切下單株放在生根培養(yǎng)基中于適宜條件下培養(yǎng)，約12周后即生根，以長成完整植株。Company Logo第八頁，共十五頁。優(yōu)選1年生鐵皮石斛植株上生長健壯的莖段外植體的選擇接種小芽苗多易于在苗基部形成叢生芽

4、。苗的高度為12cm時,叢生芽增殖倍數(shù)最高數(shù)。生長發(fā)育健壯苗優(yōu)先123Company Logo第九頁，共十五頁。外植體的處理Text 1Text 2Text 3摘去葉片和膜質(zhì)葉鞘，剪成約2cm長帶節(jié)的小段。用洗潔劑清洗后置流水下沖2030 min。在超凈工作臺上用75%的酒精消30s0.1%HgCl2滅菌5min后，用無菌水沖洗56次，放入墊有干無菌濾紙的培養(yǎng)皿中，以吸去多余水分，莖段兩端各切0.20.3cm。Company Logo第十頁，共十五頁。接種實(shí)驗(yàn)一、接種準(zhǔn)備工作1、超凈工作臺開紫外燈照射10-20min送風(fēng)2、外植體消毒（繼代培養(yǎng)采用已建立的無菌培養(yǎng)物作為材料）3、工具消毒二、接

5、種操作1、用消毒工具、器皿，切取鐵皮石斛幼莖段2cm2、接種環(huán)燒紅，沾一下培養(yǎng)基3、鑷取莖段插于培養(yǎng)基中4、封口、標(biāo)記Company Logo第十一頁，共十五頁。各時期的培養(yǎng)條件莖段的誘導(dǎo)時間在511天之間培養(yǎng)溫度2325，光照強(qiáng)度2000lx，光照時間10h/dCompany Logo第十二頁，共十五頁。參考文獻(xiàn)1鄭寬瑜,鄧君浪,趙培快繁技術(shù)體系研究J.云南農(nóng)業(yè)科技,2009,(S2):57-59。2周根余,謝薇,程磊.影響鐵皮石斛原球莖生長的若干因素J.江西科學(xué),1999,17(4):231-235. 3葉紀(jì)溝.鐵皮石斛試管苗的人工栽培研究J.中國藥業(yè),2001,10(1):53。4李銘宗.鐵皮石斛的生物學(xué)特性和人工栽培J.福建熱作科技,1999,24(1):29-31。5張明,夏鴻西,朱利泉,等.石斛組織培養(yǎng)研究進(jìn)展J.中國中藥雜志,2000,25(6):323-326。Company Logo第十三頁，共十五頁。B1小組成員展示結(jié)束Thank You !第十四頁，共十五頁。內(nèi)容總結(jié)鐵皮石斛 組織培養(yǎng)。MS+BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖3%+瓊脂6.8%【pH值5.25.6】。MS+BA0.5ml+NAA0.2+土豆汁10%20% 【pH值5.25.6】。1/2MS+NAA0.20.5m