天然藥物化學(xué)研究的經(jīng)典方法課件

1、 天然藥物化學(xué)研究的經(jīng)典方法有效成分研究的一般途徑確定研究對(duì)象調(diào) 查 研 究成 分 預(yù) 試成分提取分離活性成分篩選結(jié) 構(gòu) 測 定臨床試驗(yàn)（期） 類 新 藥臨床調(diào)查藥材調(diào)查文獻(xiàn)查閱活性部位活性成分結(jié)構(gòu)改造人工合成期臨床藥效學(xué)研究毒理學(xué)研究藥代動(dòng)力學(xué)研究類新藥提取方法 1 溶劑提取法2水蒸汽蒸餾法3其他方法：升華法，壓榨法，吸收法，酶提取法分離方法一、溶劑法1固-液溶劑分離法：部位分離2. 兩相溶劑萃取法（1）簡單萃取法被萃取液的準(zhǔn)備：水懸濁液密度為1.1-1.2之間萃取劑的選擇及其用量，次數(shù)乳化及其破壞方法（2）逆流連續(xù)萃取法萃取效率高，溶劑用量少，不乳化，可工業(yè)化。（3）液滴逆流分配法適用于分

2、離同分異構(gòu)體或同系物及多肽，蛋白質(zhì)等高分子化合物，熱不穩(wěn)定化合物。三、分餾法 利用液體混合物中各成分的沸點(diǎn)的不同而分離的方法。四、結(jié)晶與重結(jié)晶法 （1）結(jié)晶的條件（2）重結(jié)晶溶劑的選擇 （3）重結(jié)晶過程和析晶方法 （4）微量重結(jié)晶（5）結(jié)晶純度的判斷六、色譜分離法一、分類按分離過程原理不同可分為：吸附色譜法分配色譜法凝膠滲透色譜法離子交換色譜法親和色譜法按流動(dòng)相類型來分: 氣相色譜(GC); 流相色譜(LC)按操作方式來分:1、薄層色譜（TLC）薄層色譜：操作、展開方式及注意事項(xiàng)制備型薄層色譜（PTLC）：特點(diǎn)、操作過程離心薄層色譜法（CTLC）高效薄層色譜（HPTLC）：吸附劑粒度范圍更窄（

3、57微米）。并采用特殊的粘合劑，分離能力較普通TLC高，展矩短，斑點(diǎn)集中，分離效果好，高效微量快速。2、柱色譜高效液相色譜（HPLC）制備型中壓柱色譜（MPLC）制備型低壓柱色譜（LPLC）制備型快速柱色譜（閃柱色譜 FC）常壓柱色譜（LC）柱色譜操作：梯度洗脫及溶劑解混、等度洗脫干柱色譜的操作減壓柱色譜（VLC）干柱色譜3.紙色譜(PC)4.毛細(xì)管色譜(CTC)檢識(shí)方法和結(jié)構(gòu)研究 1理化檢識(shí)初步確定化合物類型和簡單的取代情況2色譜檢識(shí)TLC，PC，GC或 HPLC標(biāo)品對(duì)照法，文獻(xiàn)對(duì)照法，多譜聯(lián)用法3波譜分析UV，IR，NMR，MS，CD，X-ray本節(jié)結(jié)束吸附色譜法（Adsorption C

4、hromatography）分類：物理吸附：（物理）吸附色譜法化學(xué)吸附半化學(xué)吸附：聚酰胺色譜法（氫鍵吸附） 大孔吸附或小孔樹脂色譜法（吸附性和分子篩原理相結(jié)合）過程三要素：吸附劑（固定相） 洗脫劑/展開劑（流動(dòng)相） 化學(xué)成分吸附劑 1、極性吸附劑 2、非極性吸附劑 洗脫劑或展開劑的選擇洗脫規(guī)律操作方式和操作技術(shù)適用范圍ABCD洗脫劑或展開劑的選擇分類：正相色譜：固定相為強(qiáng)極性溶劑如水、甲酰胺（HPLC中常用氰基與氨基鍵合相），流動(dòng)相為弱極性溶劑如氯仿、正丁醇等。分離極性較大的成分。洗脫時(shí)極性小的成分先下。 反相色譜：固定相為弱極性溶劑如石蠟油（HPLC中常用ODS與C8鍵合相） ，流動(dòng)相為強(qiáng)極性溶劑如水、甲醇。分離脂溶性成分，洗脫時(shí)極性大的成分先下。操作方式：分配柱色譜(特點(diǎn))、TLC、紙色譜（PC）高速逆流色譜法（HSCCC）：依靠聚四氟乙烯的蛇形分離管的方向性和高速行星式旋轉(zhuǎn)所產(chǎn)生的離心場作用，使無載體支持的固定相（液體）穩(wěn)定地保留在分離管中，并使樣品和流動(dòng)相單向低速通過固定相，實(shí)現(xiàn)混合，分配和分離。優(yōu)點(diǎn)：無需載體，克服不可逆吸附消耗，樣品變性污染吸收峰拖尾等缺點(diǎn)，可定量回收樣品，重現(xiàn)性好，分離純度高，速度快。離子交換色譜法（Ion Exchange Chromatography）原理：利用各種離子性成分對(duì)離子交