高效液相色譜法測定甘草苷和甘草酸含量的研究

1、高效液相色譜法測定甘草苷和甘草酸含量的研究【摘要】目的創(chuàng)立甘草苷和甘草酸的HPL含量測定要領(lǐng)。要領(lǐng)利用KrasiL-184.6200，5柱，甘草苷接納乙腈-0.5%醋酸(20:80)為活動相，檢測波長276n，柱溫為室溫；甘草酸活動相為甲醇-0.2lL-1乙酸銨溶液-冰乙酸(67321)，檢測波長252n，柱溫為室溫。二者流速均為1.0lin-1，接納外標(biāo)法定量測定。結(jié)果甘草苷在2.727gl-1范疇內(nèi)呈精良線性干系r=0.9997；甘草酸在636gl-1范疇內(nèi)呈精良線性干系r=0.9998；甘草苷和甘草酸的均勻接納率別離為101.4%和101.3%，其RSD值別離為1.18%和1.22%。結(jié)

2、論該要領(lǐng)操縱輕便、正確，線性相干系數(shù)精良，且不變性和重復(fù)性好，實(shí)用于甘草黃酮粗提物及純化物中甘草苷和甘草酸的含量測定?！娟P(guān)鍵詞】高效液相色譜；甘草苷；甘草酸Keyrds：HPL；Liquiritin；Glyyrrhiziaid甘草是新疆蘊(yùn)藏量大、藥用代價高的一種荒原草原藥用植物，其重要有用身分為甘草酸和黃酮類化合物。甘草黃酮具有顯著的抗腫瘤、抗?jié)?、抗菌、抗失常反響、落血脂和?zhèn)痛的作用，并對愛滋病病毒有很強(qiáng)的按捺增殖作用1，2，是甘草有用身分開拓的熱門。經(jīng)典的黃酮含量測定要領(lǐng)，是以蘆丁為比較品，接納紫外分光光度法測定35，但此要領(lǐng)用于甘草黃酮的測定尚有諸多不敷之處。甘草黃酮的重要身分甘草苷，是

3、反響甘草黃酮內(nèi)涵質(zhì)量的一個緊張指標(biāo)6。本研究以甘草苷為比較品，接納HPL法測定甘草黃酮含量的要領(lǐng)，同時研究優(yōu)化以HPL測定甘草酸含量的要領(lǐng)，以期為甘草有用身分的綜合開拓利用和質(zhì)量監(jiān)控提供新的要領(lǐng)和思緒。1儀器與質(zhì)料1.1儀器L-10A高效液相色譜儀(日本島津)；SPD-10A可變紫外檢測器(日本島津)；萬分之一天平Sartrius；KQ-250B型超聲波洗濯器(上海之信儀器)。1.2質(zhì)料甘草(石河子天德中藥廠)。甘草苷比較品、甘草酸單銨鹽比較品(均購自中國藥品生物成品檢定所)；95%乙醇(A.R)、冰醋酸(A.R)、乙酸胺(A.R)、甲醇色譜純、乙腈色譜純。2要領(lǐng)與結(jié)果2.1色譜闡發(fā)條件2.2

4、比較品及供試品溶液的配制細(xì)密稱取甘草黃酮提取物適量，用相應(yīng)的活動相溶解，定溶于10l量瓶中，作為甘草酸供試品溶液。2.3檢測波長的選擇以活動相為參比溶液，在200400n波長范疇內(nèi)別離對甘草苷和甘草酸比較品溶液舉行掃描，結(jié)果表白，甘草苷在276n處有一最大汲取峰，甘草酸在252n處有一最大汲取峰，以是選定276n為甘草苷的檢測波長，252n為甘草酸的檢測波長。甘草酸在636gl-1范疇內(nèi)線性精良，回歸方程為：A=23653+23125，r=0.9998。2.5細(xì)密度實(shí)行取同一供試品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，求得甘草苷的RSD為0.74%，甘草酸的RSD為0.92%，說明本要領(lǐng)細(xì)密度精良。2.7不變性

5、實(shí)行配制同一供試品溶液，別離在0，2，4，6，8，10，12，24，36，48h后進(jìn)樣，求得甘草苷的RSD為1.44%，甘草酸的RSD為0.89%，表白樣品溶液在48h內(nèi)不變。2.8接納率實(shí)行取含量的同一供試品溶液各5份，別離細(xì)密參加同一濃度同一體積的甘草苷比較品溶液，甘草酸單銨鹽比較品溶液，混勻，進(jìn)樣，按上述要領(lǐng)測定甘草酸和甘草苷的含量，測得甘草苷和甘草酸的均勻接納率別離為101.4%，101.3%；RSD值別離為1.18%，1.22%。表白本實(shí)行所確定的HPL法舉行甘草苷和甘草酸的含量闡發(fā)，正確度較高。結(jié)果見表1。表1甘草酸和甘草苷的接納率實(shí)行結(jié)果“-為未檢測到3討論3.1甘草苷活動相的選

6、擇觀察了選用差異比例的乙腈-0.5%醋酸為活動相時對甘草苷的保存時間及分散度的影響。實(shí)行結(jié)果表白，以乙腈-0.5%醋酸1090為活動相時，保存時間短，但峰形較差，乙腈比例增大后峰形變得較鋒利對稱，相應(yīng)值明顯增大，分散度漸漸改進(jìn)，保存時間先增大后收縮，當(dāng)乙腈比例大于20%后，未檢測到甘草苷，綜合思量，選用乙腈-0.5%醋酸2080為活動相，甘草苷的保存時間適中，分散結(jié)果好。3.2甘草酸活動相的選擇本實(shí)行別離選用差異比例的甲醇-2%乙酸，甲醇-0.2lL-1乙酸銨溶液-冰醋酸(67321)為活動相，實(shí)行結(jié)果表白，甲醇-2%乙酸7327和甲醇-0.2lL-1乙酸銨溶液-冰乙酸(67321)為活動相時

7、，分散結(jié)果均較好，但在活動相的不變性和闡發(fā)時間的公正性方面，后者更良好，因此選用甲醇-0.2lL-1乙酸銨溶液-冰醋酸(67321)為活動相。按本法別離對甘草苷和甘草酸舉行高效液相色譜闡發(fā)，具有接納率和線性相干系數(shù)精良，操縱輕便，快速，樣品用量少，細(xì)密度和重復(fù)性好，主動化程度高等長處，實(shí)用于甘草黃酮粗提物及純化物中甘草苷和甘草酸的質(zhì)量操縱，具有普及的應(yīng)用遠(yuǎn)景。【參考文獻(xiàn)】1邢國秀，李楠，王童，等.甘草中黃酮類化學(xué)身分的研究希望J.中國中藥雜志，2022，28(7)：593.2從景香，高麗娟，林炳昌，等.甘草黃酮類化合物研究希望J.精致化工，2022，21(10)：121.3徐劍，袁如彩，秦延年.銀杏葉黃酮口服液的質(zhì)量操縱要領(lǐng)J.徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報，1998，183：256.4盧元芳，宮霞.銀杏葉黃酮類化合物的提取和藥理作用J