病毒感染的檢查方法與防治原則課件-2

1、病毒感染的檢查方法與防治原則1編輯版ppt病毒感染的檢查方法與防治原則1編輯版ppt目的與要求了解病毒的診斷，抗病毒治療，病毒感染的預(yù)防。2編輯版ppt目的與要求2編輯版ppt 第一節(jié) 病毒感染的檢查方法3編輯版ppt 第一節(jié) 3編輯版ppt病毒感染的檢查檢測(cè)內(nèi)容查病毒查特異性抗體 病毒顆粒 病毒抗原 病毒核酸 病毒酶類(lèi)：如逆轉(zhuǎn)錄酶 電鏡直接觀察 光鏡檢查包涵體 分離培養(yǎng)4編輯版ppt病毒感染的檢查檢測(cè)內(nèi)容查病毒查特異性抗體 病毒顆粒 電鏡一、標(biāo)本的采集與送檢原則基本與細(xì)菌相似，但應(yīng)注意： 1.標(biāo)本用“雙抗”或兩性霉素B處理 2.低溫保存，盡快送檢 3.血清學(xué)診斷采雙份血清5編輯版ppt一、標(biāo)

2、本的采集與送檢原則基本與細(xì)菌相似，但應(yīng)注意：5編輯版p二、病毒的分離與鑒定（一）病毒的分離培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng)（cell culture） 雞胚接種（egg inoculation） 動(dòng)物接種（animal inoculation）6編輯版ppt二、病毒的分離與鑒定（一）病毒的分離培養(yǎng)6編輯版ppt1.雞胚培養(yǎng) 采用孵化914天的雞胚 絨毛尿囊膜 痘苗病毒、人類(lèi)皰疹病毒 尿囊腔接種部位 流感病毒、腮腺炎病毒 羊膜腔 流感病毒的初次分離 卵黃囊 嗜神經(jīng)病毒 7編輯版ppt1.雞胚培養(yǎng) 7編輯版ppt8編輯版ppt8編輯版ppt1、雞胚培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)：易管理，不帶微生物，成本較低缺點(diǎn)：操作程序復(fù)雜9編輯版pp

3、t1、雞胚培養(yǎng)優(yōu)點(diǎn)：易管理，不帶微生物，成本較低9編輯版ppt10編輯版ppt10編輯版ppt2.動(dòng)物接種 應(yīng)用：尚無(wú)敏感細(xì)胞的病毒培養(yǎng) 動(dòng)物：兔、鼠、黑猩猩、猴等 優(yōu)點(diǎn)：結(jié)果易觀察，可建立動(dòng)物模型 缺點(diǎn)：有飼養(yǎng)條件要求，費(fèi)用高，動(dòng)物 體內(nèi)常帶有潛伏病毒11編輯版ppt2.動(dòng)物接種11編輯版ppt病毒的分離培養(yǎng) 3.細(xì)胞培養(yǎng) 單層細(xì)胞培養(yǎng)（monolayer cell culture） 分類(lèi) 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)（suspended cell culture） 原代細(xì)胞（primary cell）細(xì)胞種類(lèi) 二倍體細(xì)胞（diploid cell） 傳代細(xì)胞系（continuous cell line）1

4、2編輯版ppt病毒的分離培養(yǎng)12編輯版ppt病毒的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶單層細(xì)胞13編輯版ppt病毒的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)瓶單層細(xì)胞13編輯版ppt1病毒增殖鑒定 (1)細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathic effect, CPE ） 細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落等（多數(shù)病毒）； 形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞（麻疹病毒、巨細(xì)胞病毒、呼吸道合胞病毒等）； 在培養(yǎng)細(xì)胞中形成包涵體（狂犬病病毒、麻疹病毒等）。 （二）病毒的鑒定 14編輯版ppt1病毒增殖鑒定（二）病毒的鑒定 14編輯版ppt細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落15編輯版ppt細(xì)胞變圓、聚集、壞死、溶解或脫落15編輯版ppt麻疹病毒感染細(xì)胞呼吸道

5、合胞病毒感染細(xì)胞形成多核巨細(xì)胞或稱融合細(xì)胞(1)細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect, CPE)16編輯版ppt麻疹病毒感染細(xì)胞呼吸道合胞病毒感染細(xì)胞形成多核巨細(xì)胞或稱融形成包涵體(inclusion body)(1)細(xì)胞病變效應(yīng)(cytopathic effect, CPE)17編輯版ppt形成包涵體(inclusion body)(1)細(xì)胞病變效腮腺炎病毒感染細(xì)胞(2)紅細(xì)胞吸附（hemadsorption）病毒囊膜表面血凝素(HA)紅細(xì)胞表面HA受體18編輯版ppt腮腺炎病毒感染細(xì)胞(2)紅細(xì)胞吸附（hemadsorptio(3)干擾現(xiàn)象（interference）風(fēng)疹病毒人

6、胚腎細(xì)胞 病毒增殖，CPE()?？刹《救伺吣I細(xì)胞 病毒增殖，CPE()人胚腎細(xì)胞風(fēng)疹病毒？?？刹《綜PE(-)風(fēng)疹病毒(+) ?？刹《?-)CPE(+)風(fēng)疹病毒(-) ?？刹《?+)19編輯版ppt(3)干擾現(xiàn)象（interference）風(fēng)疹病毒人胚腎細(xì)2. 病毒數(shù)量與感染性測(cè)定1.蝕斑形成試驗(yàn) （plaque formation test） 2.50組織細(xì)胞感染量 （50 tissue culture infectious dose, TCID50）感染性病毒量20編輯版ppt2. 病毒數(shù)量與感染性測(cè)定1.蝕斑形成試驗(yàn)感染性病毒量20編2.病毒形態(tài)學(xué)鑒定電子顯微鏡：設(shè)備、操作復(fù)雜，應(yīng)用受限

7、光學(xué)顯微鏡：可見(jiàn)大病毒（痘類(lèi)病毒）， 對(duì)一般病毒檢測(cè)意義不大21編輯版ppt2.病毒形態(tài)學(xué)鑒定電子顯微鏡：設(shè)備、操作復(fù)雜，應(yīng)用受限21編3.病毒血清學(xué)鑒定 用已知的抗體，鑒定病毒種、型、亞型 (1)血凝抑制試驗(yàn)-正粘病毒型與亞型鑒定 病毒雞紅細(xì)胞凝集（血凝試驗(yàn)） 病毒特異性抗體雞紅細(xì)胞不凝集 （血凝抑制試驗(yàn)） (2)免疫標(biāo)記法（FIA、EIA、RIA） 多種病毒鑒定22編輯版ppt3.病毒血清學(xué)鑒定 用已知的抗體，鑒定病毒種、型、亞型(2三、病毒分子生物學(xué)鑒定抗原變異病毒基因的鑒定 核酸擴(kuò)增 核酸雜交 基因芯片 基因測(cè)序23編輯版ppt三、病毒分子生物學(xué)鑒定抗原變異病毒基因的鑒定23編輯版pp

8、t四、病毒感染的血清學(xué)診斷應(yīng)用：采取標(biāo)本分離病毒為時(shí)已晚目前尚無(wú)分離此病毒的方法或難以分離的病毒為證實(shí)所分離的病毒的臨床意義進(jìn)行血清流行病學(xué)調(diào)查等24編輯版ppt四、病毒感染的血清學(xué)診斷應(yīng)用：24編輯版ppt1.中和試驗(yàn)（neutralizing test）病毒中和抗體 病毒失去感染性 特點(diǎn)：特異性高，抗體維持時(shí)間長(zhǎng)應(yīng)用：人群免疫情況的調(diào)查 臨床診斷少用25編輯版ppt1.中和試驗(yàn)（neutralizing test）病毒中和五、病毒感染的快速診斷數(shù)小時(shí)內(nèi)出結(jié)果病毒顆粒病毒成分（抗原或核酸） 早期抗體檢測(cè)（IgM）26編輯版ppt五、病毒感染的快速診斷數(shù)小時(shí)內(nèi)出結(jié)果26編輯版ppt病毒的快速診

9、斷光鏡-包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子生物學(xué)技術(shù)雜交Southern blotPCRNorthern blot27編輯版ppt病毒的快速診斷光鏡-包涵體電鏡免疫熒光ELISA分子第二節(jié) 病毒感染的防治原則28編輯版ppt第二節(jié) 病毒感染的防治原則28編輯版ppt滅活疫苗（inactivated vaccine）活疫苗（living vaccine）重組載體疫苗（recombinant carrier vaccine）亞單位疫苗（subunit vaccine） 化學(xué)提取或人工合成疫苗 重組疫苗（recombinant vaccine）核酸疫苗（nucleic acid vaccine）一、人工主動(dòng)免疫常用生物制品29編輯版ppt滅活疫苗（inactivated vaccine）一、人工主二、人工被動(dòng)免疫常用生物制品 免疫球蛋白 血清丙種球蛋白 細(xì)胞免疫制劑 IFN-、 細(xì)胞因子 IL-2、IL-6、IL-12 TNF 、CSF 淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞 LAK細(xì)胞 30編輯版ppt二、人工被動(dòng)免疫常用生物制品 免疫球蛋白30編輯版ppt三、病毒感染的治療 核苷類(lèi)藥物 非核苷類(lèi)反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑 蛋白酶抑制劑2.干擾素和干擾素誘生劑3.中草藥 4.基因治療劑 5.治療性疫苗 1.抗病