飼料添加劑中 甘露寡糖 標準文本

1、PAGE PAGE 1 四川省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布202-實施202四川省市場監(jiān)督管理局 發(fā)布202-實施202-發(fā)布飼料添加劑中甘露寡糖的測定 Determination of mannanoligosaccharides in feeds additive（送審稿）DB51/T XXXX-202X DB51四川省地方標準ICS 65.120CCS B 46PAGE 6PAGE 5前 言本文件按照GB/T 1.12020標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本標準由四川省農業(yè)農村廳提出并歸口。

2、本標準起草單位：四川省飼料工作總站、。本標準主要起草人：。飼料添加劑中甘露寡糖的測定 范圍本文件描述了飼料添加劑中甘露寡糖的高效液相色譜測定方法。本文件適用于飼料添加劑中甘露寡糖（以甘露糖計）的測定。本文件檢出限為1 g/kg，定量限為2 g/kg。規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB/T 20195 動物飼料 試樣的制備術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。原理 試樣中的甘露寡

3、糖在酸性和高溫高壓條件下水解為甘露糖，用高效液相色譜儀測定，外標法定量。試劑或材料除非另有規(guī)定，僅使用分析純試劑。5.1 水：GB/T 6682，一級。5.2 鹽酸。 5.3 氫氧化鈉溶液（5 mol/L）：稱取氫氧化鈉20 g，加水溶解，稀釋、定容至100 mL，混勻。5.4 標準儲備溶液（2 mg/mL）：稱取甘露糖（CAS：3458-28-4，含量98.0%）200 mg（精確至0.1 mg），用水溶解，轉移至100 mL容量瓶中，用水定容，混勻。2 8 保存，有效期1個月。5.5 標準系列溶液：準確移取適量標準儲備溶液（5.4）于容量瓶中，用水稀釋、定容，混勻。配制成濃度分別為10 g

4、/mL、50 g/mL、200 g/mL、500 g/mL和1000 g/mL標準系列溶液。臨用現配。5.6 微孔濾膜：0.45 m，水系。儀器設備6.1 高效液相色譜儀：配示差折光檢測器。 分析天平：精度0. 1 mg。 渦旋混合器。 恒溫水浴鍋。 高壓滅菌器。樣品按GB/T 20195制備試樣，取樣品至少200 g，粉碎使其全部通過0.425 mm孔徑的分析篩，充分混勻，裝入密閉容器中，備用。試驗步驟8.1 試樣溶液制備平行做兩份試驗。稱取試樣1 g（精確至0.1 mg）于10 mL具塞離心管中，加入6.0 mL鹽酸（5.2），放置30 水浴中水解45 min，期間渦旋振蕩2次。全部轉入1

5、00 mL帶刻度的試劑瓶中，用60 mL水分3次洗滌離心管，洗滌液并入試劑瓶中，蓋上試劑瓶蓋。移至高壓滅菌器中，于121下水解60 min，取出冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液（5.3）調節(jié)溶液pH至67，轉入100 mL容量瓶中，加水定容，混勻，經0.45 m微孔濾膜（5.6）過濾，備用。8.2 液相色譜參考條件色譜柱：糖分析柱，基質：磺化聚苯乙烯二乙烯苯，柱長300 mm，內徑6.5 mm，或性能相當者。柱溫：60 。流動相：水。流速：0.5 mL/min。進樣量：20 L。8.3 測定8.3.1 標準系列溶液和試樣溶液測定分別取甘露糖標準系列溶液（5.5）和試樣溶液（8.1），在儀器的最佳條件

6、下上機測定。甘露糖標準溶液的色譜圖參見附錄A。8.3.2 定性以保留時間定性，試樣溶液中甘露糖保留時間應與標準系列溶液中濃度相當者的保留時間一致，其相對偏差在2.5之內。8.3.3 定量以標準系列溶液的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其相關系數應不小于0.99。多點校正法定量時，試樣溶液中甘露糖峰面積響應值應在標準系列溶液的線性范圍之內，若超出該范圍，需將試樣液用水稀釋后，重新進樣測定。單點法定量時，試樣溶液中甘露糖的峰面積應與標準溶液的響應相近，差異在30%之內。試驗數據處理試樣中甘露寡糖（以甘露糖計）的含量以質量分數w計，數值以克每千克（g/kg）表示，多點校正按公式（1）計算，單點校正按公式（2）計算：（1）式中： 從標準曲線查得的試樣溶液甘露糖的質量濃度，單位為微克每毫升（g/mL ）；V 試樣定容的體積，單位為毫升（mL）；m 試樣質量，單位為克（g）；n稀釋倍數。（2）式中：A 試樣溶液中甘露糖色譜峰面積；As 標準溶液中甘露糖的色譜峰面積；s 標準溶液中甘露糖的質量濃度，單位為微克每毫升（g/mL）；V 試樣定容的體積，單位為毫升（mL）；m 試樣質量，單位為克（g）；n稀釋倍數。測定結果以平行測定的算術平均值表示，保留3位有效數字。 QUOTE QUOTE QUOTE 精密度在重復