臨床科研選題及申請書的撰寫技巧培訓(xùn)課件

1、臨床科研選題及申請書的撰寫技巧臨床科研選題及申請書的撰寫技巧報告提綱臨床醫(yī)生科研選題課題申請的技巧撰寫項目申請書及注意事項臨床科研選題及申請書的撰寫技巧2報告提綱臨床醫(yī)生科研選題課題申請的技巧撰寫項目申請書及注意事醫(yī)學(xué)的發(fā)展無時無刻不體現(xiàn)著科技的進步：原始的壓迫法、刮刺法、按摩法解剖、生理、病理、診斷免疫、生物合成基因診斷人類基因組計劃-對細菌、病毒感染的束手無策抗生素干擾素疫苗出現(xiàn)（天花的消滅）被動免疫轉(zhuǎn)為主動免疫HIV疫苗的出現(xiàn)？-原始的望聞問切的診斷物理檢查生化檢查影像學(xué)檢查基因探針-超聲對人體軟組織有較高的靈敏度和分辨率-CT能分辨各種密度相近的軟組織-核磁共振不但能獲得解剖圖像，還可

2、顯示組織器官的化學(xué)結(jié)構(gòu)及其變化PET不僅可顯示解剖還可測得功能代謝-疾病的治療從普通化學(xué)藥物生物藥物（胰島素、白細胞介素等）基因藥物一些疾病有單純的手術(shù)治療-手術(shù)、放射線綜合治療一、臨床醫(yī)生科研選題臨床科研選題及申請書的撰寫技巧3醫(yī)學(xué)的發(fā)展無時無刻不體現(xiàn)著科技的進步：一、臨床醫(yī)生科研選題臨科技進步是臨床發(fā)展的永遠動力愛因斯坦指出：“提出一個問題往往比解決一個問題更重要，因為解決一個問題也許僅僅是一個數(shù)學(xué)上或?qū)嶒炆系募寄芏?。而提出新的問題，新的可能性，以新的角度去看舊的問題，卻需要創(chuàng)造性的想象力，而且標(biāo)志著科學(xué)的真正進步?！边x擇課題、確定主攻方向是科學(xué)研究中具有戰(zhàn)略意義的首要問題。臨床科研選題

3、及申請書的撰寫技巧4科技進步是臨床發(fā)展的永遠動力愛因斯坦指出：“提出一個問題往往應(yīng)主動申請而非被動申請（個人晉升、重點學(xué)科和實驗室評定等壓力）臨床工作者的優(yōu)勢：從臨床上發(fā)現(xiàn)問題困難: 臨床工作繁忙、難以保證查文獻、選準(zhǔn)科學(xué)問題及寫好申請書，缺乏與基礎(chǔ)學(xué)科等溝通、交叉合作，較難中標(biāo)為什么申請？臨床科研選題及申請書的撰寫技巧5應(yīng)主動申請而非被動申請為什么申請？臨床科研選題及申請書科研選題的原則1、需要性原則：選擇有重大意義或急需解決的問題。2、目的性原則：目標(biāo)集中，不含糊，不籠統(tǒng)。3、創(chuàng)新性原則：針對科學(xué)而言，沒有地域性。4、先進性原則：針對技術(shù)而言，有地域性。5、科學(xué)性原則：有依據(jù)；符合客觀規(guī)律

4、；設(shè)計科學(xué)。6、可行性原則：主要技術(shù)指標(biāo)實現(xiàn)的可能性。7、效能性原則：社會效益、經(jīng)濟效益、應(yīng)用價值等。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧6科研選題的原則1、需要性原則：選擇有重大意義或急需解決的問題臨床醫(yī)生如何選題課題的概念：為探索醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的某個具體的理 論、方法或技術(shù)問題，根據(jù)假說隨機設(shè)計的旨在說明 三要素（受試對象、施加因素、效應(yīng)結(jié)果）及其相互 關(guān)系并在一定時間內(nèi)實現(xiàn)設(shè)計目標(biāo)的最基本的單元。課題最基本的特征是的探索，其指向是具體的理論、方法或技術(shù)問題；課題要根據(jù)假說、經(jīng)過設(shè)計； 課題的核心是要說明三要素及其相互關(guān)系課題是有時空觀念的，即有邊界、有期限的。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧7臨床醫(yī)

5、生如何選題課題的概念：為探索醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的某個具體的理臨選題的基本程序提出問題： A、問題通常產(chǎn)生于觀察與理論之間的矛盾；B、問題產(chǎn)生于懷疑精神與科學(xué)的創(chuàng)造性思維的結(jié)論；C、根據(jù)生產(chǎn)和實際需要提出問題。醫(yī)學(xué)課題屬此類。查閱文獻，提出假說：建立假說是科研工作的前提和靈魂；假說要以科學(xué)的實驗為依據(jù)，在此基礎(chǔ)上要敢于大膽設(shè)想。確定題目：體現(xiàn)三要素；體現(xiàn)假說內(nèi)容；留有余地；言簡意賅，用詞具體；25個漢字，不用縮寫。提出科研設(shè)計：專業(yè)設(shè)計；統(tǒng)計學(xué)設(shè)計。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧8選題的基本程序提出問題： A、問題通常產(chǎn)生于觀察與理論之間的選題的基本方法A、同步選擇法：與科技發(fā)展前沿、主流同步；B、階段

6、分析選擇法：根據(jù)學(xué)科發(fā)展不同階段；C、交叉點選擇法：不同學(xué)科的交叉點；D、移植選擇法：將某學(xué)科方法移植到另一學(xué)科；E、機遇線索捕捉法：偶然發(fā)現(xiàn)、思想火花等；F、經(jīng)驗轉(zhuǎn)移選擇法：用解決某問題的經(jīng)驗去解決另一問題；G、適應(yīng)需要選擇法：H、缺點列舉選擇法：臨床科研選題及申請書的撰寫技巧9選題的基本方法A、同步選擇法：與科技發(fā)展前沿、主流同步；臨床選題的注意事項以往存在的選題問題： 缺乏創(chuàng)新、選題過大或意義不大 選題缺乏創(chuàng)新性問題占未獲立項或資助的70左右選題后需要檢驗： 選題是否有創(chuàng)新性 研究的基本價值 能否在3年的時間內(nèi)完成這些工作。 查新是較好的驗題選擇 也可以與同行或相關(guān)領(lǐng)域的科學(xué)家討論 選題

7、是一個過程，是一個經(jīng)過較長時間思考的過程，需要經(jīng)歷較長時閱讀文獻、聽報告、討論 臨床科研選題及申請書的撰寫技巧10選題的注意事項以往存在的選題問題：臨床科研選題及申請書的撰寫選題后要仔細確定題目題目應(yīng)準(zhǔn)確恰當(dāng)、簡明具體、醒目規(guī)范、主題明了。題目是申請者對評議專家說的第一句話：題目的兩個作用: 一是要給評議專家一個簡明、準(zhǔn)確的信息 二是有助于文獻追蹤或檢索。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧11選題后要仔細確定題目題目應(yīng)準(zhǔn)確恰當(dāng)、簡明具體、醒目規(guī)范、主題撰寫課題申請書及注意事項一、簡表的填寫（1）項目名稱 英文名稱應(yīng)與中文名稱一致。（2）研究類型 是指研究課題的性質(zhì)，包括基礎(chǔ)研究、應(yīng)用基礎(chǔ)研究?；A(chǔ)

8、研究： 指以認(rèn)識自然現(xiàn)象、探索自然規(guī)律為目的，不直接考慮應(yīng)用目標(biāo) 的研究活動。應(yīng)用基礎(chǔ)研究：指有廣泛應(yīng)用前景，但以獲取新原 理、新技術(shù)、新立法為主要目的的研究。（3）申報學(xué)科 應(yīng)填寫申請項目所屬的最基礎(chǔ)學(xué)科，即申請指南中所列學(xué)科的 末級學(xué)科。如涉及多學(xué)科可填寫兩個，以名稱1為主，名稱2為輔。（4）申請金額 以萬元為單位,用阿拉伯?dāng)?shù)字表示,注意小數(shù)點。（5）起止年月 研究年限一般為3-5年。 起始時間從申請的次年1月算起，終止時間為完成年度的12月。（6）基地類別 指研究項目將利用的實驗室，國家、省、市部門批準(zhǔn)的實驗室。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧12一、簡表的填寫（1）項目名稱 英文名稱應(yīng)與

9、中文名稱一致。臨一、簡表的填寫（7）摘 要 應(yīng)該包括該研究目的、重要性、內(nèi)容及其方法，預(yù)期結(jié)果、理論意義及應(yīng)用前景等，重點突出申請者的新見解。對字?jǐn)?shù)要求400字內(nèi)。 主題詞用分號隔開，不超過5個。中英文主題詞應(yīng)一致。 （摘要：針對-現(xiàn)狀，提出-假說，用-方法 進行研究，探索-問題，對闡明-機制/揭示-規(guī)律具有意義。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧13一、簡表的填寫（7）摘 要 應(yīng)該包括該研究目的、重摘要示例基金題目：基于livin介導(dǎo)的膠質(zhì)瘤干細胞抗凋亡通路與化療耐藥機制 摘要：申請者在既往研究中，發(fā)現(xiàn)livin 基因介導(dǎo)的抗凋亡通路與膠質(zhì)瘤化療耐藥之間關(guān)系密切，但查閱大量國內(nèi)外相關(guān)文獻，尚未見

10、到對此機制的系統(tǒng)研究報道。課題組依據(jù)先前的試驗結(jié)果和國內(nèi)外同行專家研究腫瘤干細胞化療耐藥的理論推斷，膠質(zhì)瘤干細胞通過Livin基因過表達關(guān)閉抗凋亡誘導(dǎo)通路，阻斷死亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致膠質(zhì)瘤的化療耐藥。為了驗證上述推論，課題組擬建立膠質(zhì)瘤干細胞轉(zhuǎn)化模型和膠質(zhì)瘤干細胞動物轉(zhuǎn)化模型，采用慢病毒過表達、RNA 干擾、實時熒光定量RT-PCR 和化療藥物干預(yù)等技術(shù)和手段，對膠質(zhì)瘤干細胞和膠質(zhì)瘤細胞U251進行干預(yù)，探明Livin介導(dǎo)的抗凋亡誘導(dǎo)通路，分析化療藥物干預(yù)對livin抗凋亡通路相關(guān)基因和化療耐藥基因的影響及其機制，進而從腫瘤干細胞理論角度揭示腫瘤耐藥的根源，豐富和發(fā)展腫瘤干細胞理論，為膠質(zhì)瘤的治療

11、提供新的思路和方法，并為攻克膠質(zhì)瘤的化療耐藥治療難關(guān)奠定堅實的理論和實驗基礎(chǔ)。 臨床科研選題及申請書的撰寫技巧14摘要示例基金題目：基于livin介導(dǎo)的膠質(zhì)瘤干細胞抗凋亡通路撰寫課題申請書及注意事項二、項目主要成員（1）項目組主要成員 指在項目組內(nèi)對學(xué)術(shù)思想、技術(shù)路 線的制訂與理論分析及對項目的完成起重要作用的人 員（不包括項目申請者）。重點重大項目組成員可根 據(jù)具體研究內(nèi)容多少配備，而一般項目組成員宜在 38人左右。（2）項目中的分工 指項目組成員具體承擔(dān)的工作和時間。（3）簽章 項目組成員本人應(yīng)在申請書上親筆簽名。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧15二、項目主要成員（1）項目組主要成員 指在

12、項目組內(nèi)對學(xué)術(shù)思撰寫課題申請書及注意事項成員填寫注意以下幾點1、項目組成員必須形成合理梯隊，既有設(shè)計指導(dǎo)者，又有 工作的主要操作者，還應(yīng)有必要的輔助人員，分工必須 明確，工作不互相重復(fù)。2、項目分工中應(yīng)寫明承擔(dān)工作的名稱，如“動物飼養(yǎng)”、 “膜片鉗技術(shù)”等，而不要只填“負責(zé)”或 “參加”、 “參與”。3、高中初級職稱人員搭配合理。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧16成員填寫注意以下幾點1、項目組成員必須形成合理梯隊，既有設(shè)計撰寫課題申請書及注意事項三、經(jīng)費預(yù)算（一）研究經(jīng)費1、科研業(yè)務(wù)費 主要指測試、計算、分析費；國內(nèi)調(diào)研和參加學(xué)術(shù)會議費；論 文印刷、出版費；儀器有償使用費；水、電、氣費。2、實

13、驗材料費 指原材料、試劑、藥品等消耗品購置費；實驗用動植物購置和 種植、飼養(yǎng)費。標(biāo)本、樣品、模型采集加工、包裝運輸費等。3、儀器設(shè)備費 項目中專用儀器設(shè)備的購置、運輸、安裝費；自制專用儀器設(shè) 備的材料、配件購置和加工費。大型儀器、較昂貴的儀器和行政辦公設(shè)備不 屬其列。4、實驗室改裝費 為改善資助項目研究的實驗條件而對實驗室進行的簡易改裝 所需費用。不得將實驗室擴建、土建、維修等費用列入其中。5、協(xié)作費 指外單位協(xié)作承擔(dān)項目的研究在實驗工作中開支的實驗經(jīng)費。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧17三、經(jīng)費預(yù)算（一）研究經(jīng)費臨床科研選題及申請書的撰寫技巧17撰寫課題申請書及注意事項三、經(jīng)費預(yù)算（二）國際

14、合作與交流費1、項目組成員出國合作交流 按國家標(biāo)準(zhǔn)計算花費2、境外專家來華合作交流 負責(zé)往返機票及吃住補助（三）勞務(wù)費 不超過總經(jīng)費的10%。（四）管理費 按總經(jīng)費的5%計算。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧18三、經(jīng)費預(yù)算（二）國際合作與交流費臨床科研選題及申請書的撰寫報告正文（4000-8000字）四、立項依據(jù) 你的研究工作將會在理論或?qū)嶋H應(yīng)用中解決什么問題，將會給本領(lǐng)域貢獻什么，增加哪些新的認(rèn)識，對學(xué)術(shù)理論或國民經(jīng)濟和社會發(fā)展起到什么樣的作用及具有多大價值。 基礎(chǔ)研究項目重在結(jié)合國際上本學(xué)科領(lǐng)域的發(fā)展動態(tài)，論述項目的科學(xué)意義及創(chuàng)新的學(xué)術(shù)思想；應(yīng)用基礎(chǔ)研究項目重在結(jié)合學(xué)科發(fā)展的同時，圍繞我國

15、國民經(jīng)濟和社會發(fā)展中重要科技問題，論述其潛在的應(yīng)用前景。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧19四、立項依據(jù) 臨床科研選題及申請書的撰寫技巧19報告正文（4000-8000字）四、立項依據(jù) 重點突出有根有據(jù)、段落分明論點清楚、參考文獻選擇得當(dāng)。要介紹國外動態(tài)及國內(nèi)研究情況包括自己的工作，填補空白不是立項依據(jù)，也不能簡單羅列文獻。 因立項依據(jù)不足而未獲立項或資助者占總項目的60左右臨床科研選題及申請書的撰寫技巧20四、立項依據(jù) 重點突出有根有據(jù)、段落分明論點清楚、參考文獻選報告正文四、立項依據(jù) 列出引用的主要文獻，文獻數(shù)量不要過多，一般控制在1020條左右為宜。引用文獻一定要按正式發(fā)表論文的要求，正確

16、標(biāo)明引用作者順序、年、卷、期、頁，以免評審專家核查不到此文獻時，會對申請者產(chǎn)生“弄虛作假”的誤會。引用文獻應(yīng)涵蓋國內(nèi)外文獻，也可引用自己的文章，但不宜過多。引用文獻應(yīng)是近10年內(nèi)的文獻，特別是35年的文獻。 臨床科研選題及申請書的撰寫技巧21報告正文四、立項依據(jù) 列出引用的主要文獻，文獻數(shù)量不要過多，報告正文立項依據(jù)注意事項1、格式清晰、邏輯合理。能讓評議專家對你要闡明的項目研究意義、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和研究目標(biāo)一目了然。對研究意義的敘述要簡明扼要，敘述恰當(dāng)，是“填補空白”、“國內(nèi)首創(chuàng)”，還是“國際領(lǐng)先”，用語一定要謹(jǐn)慎，實事求是。2、對國內(nèi)外研究現(xiàn)狀的分析要全面、透徹；對提出的研究目標(biāo)要合理、適

17、當(dāng)，避免太分散。3、對理論依據(jù)的推測和假設(shè)必須嚴(yán)謹(jǐn)、科學(xué)，特別是對創(chuàng)新性內(nèi)容的提出和分析，必須考慮到其理由的充分和合理。4、語言要科學(xué)、準(zhǔn)確，切忌含糊。5、設(shè)立小標(biāo)題，分段漸進，環(huán)環(huán)相扣，可讀性要強。6、注意是否有當(dāng)年發(fā)表的相關(guān)進展的文章。7、文字要充分校對，包括參考文獻的格式。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧22報告正文立項依據(jù)注意事項1、格式清晰、邏輯合理。能讓評議專家報告正文項目研究意義撰寫方法1、存在問題：對科學(xué)意義闡述不足或夸大。2、撰寫方法： 從疾病入手，簡述其特點、危害，目前主要的治療方法及其存在的問題。簡要分析該病發(fā)病機理和主要研究熱點，引出目前存在的主要問題，也就是本項目要解決

18、的問題，以此為切入點提出假設(shè)，闡述如果實現(xiàn)預(yù)期目標(biāo)，對該病甚至相關(guān)疾病的預(yù)防、治療具有的理論意義和臨床價值。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧23報告正文項目研究意義撰寫方法1、存在問題：對科學(xué)意義闡述不足報告正文 老年性白內(nèi)障是與年齡相關(guān)的疾病，隨著年齡的增加，其發(fā)病比率也不斷升高。特別是人類趨向老齡化，白內(nèi)障的患病人數(shù)還將持續(xù)增加。目前，它已是人類第一位的致盲疾病。迄今為止,治療白內(nèi)障唯一有效的方法是通過手術(shù)摘除混濁的晶狀體并植入人工晶狀體。雖然手術(shù)后患者可以恢復(fù)良好的視力，但是不可避免的術(shù)后并發(fā)癥以及手術(shù)設(shè)備、材料耗資巨大，治療白內(nèi)障所花費的資金已成為世界各國包括富裕的發(fā)達國家嚴(yán)重的醫(yī)療負擔(dān)

19、。最近的調(diào)查表明，如果把老年性白內(nèi)障的發(fā)病時間延緩10年，白內(nèi)障手術(shù)的數(shù)量就會減少45%1。所以，一些學(xué)者認(rèn)為通過預(yù)防白內(nèi)障發(fā)生或延緩其發(fā)展的途徑征服白內(nèi)障已成為一項全球性的社會和社會經(jīng)濟問題2。項目研究意義撰寫方法臨床科研選題及申請書的撰寫技巧24報告正文 老年性白內(nèi)障是與年齡相關(guān)的疾病，隨著年報告正文 但是目前我們對老年性白內(nèi)障發(fā)病機理的認(rèn)識還不十分清楚。多年以來許多學(xué)者的研究結(jié)果證實晶狀體上皮細胞在老年性白內(nèi)障發(fā)生中起重要的作用，但對其中進一步的基因調(diào)控知之甚少。如果從參與老年性白內(nèi)障晶狀體上皮細胞變化的相關(guān)基因入手，研究基因的生物學(xué)功能，有可能抓住引起白內(nèi)障發(fā)生、發(fā)展的主要環(huán)節(jié)。據(jù)此，

20、本研究擬利用改良的消減雜交技術(shù)和基因芯片技術(shù)準(zhǔn)確、全面、快速的特點，以晶狀體上皮細胞為研究對象，一次性篩選出老年性白內(nèi)障全部有差異表達的基因，從中再篩選出與白內(nèi)障相關(guān)基因，并著重對其功能進行研究，從基因水平闡明白內(nèi)障的發(fā)病機制，為防治白內(nèi)障提供新思路和理論依據(jù)。項目研究意義撰寫方法臨床科研選題及申請書的撰寫技巧25報告正文 但是目前我們對老年性白內(nèi)障發(fā)存在問題： 文獻復(fù)習(xí)不夠，對國內(nèi)外現(xiàn)狀缺乏真正了解，提出的問題別人已解決-低水平重復(fù)。 對研究方法不熟悉，簡單移植或夸大其作用，缺乏實際應(yīng)用的可行性-無法實現(xiàn)預(yù)期目標(biāo)。 -已有方法與掌握方法的人的結(jié)合； -方法理論上可行與現(xiàn)實可行性的結(jié)合。 對國

21、內(nèi)外現(xiàn)狀只是簡單羅列，缺乏歸納分析，缺乏邏輯性和針對性-總結(jié)與表達不夠。綜述撰寫方法國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧26存在問題：綜述撰寫方法國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申要緊緊圍繞本次申請項目的主題。 1、從疾病切入，簡要論述國內(nèi)外研究成果，并引出當(dāng)前的熱點研究方向。 2、從研究方向展開，較詳細地分析國內(nèi)外在本方向的研究進展，引出闡明疾病發(fā)病機理或發(fā)明新的治療方法的關(guān)鍵問題所在。 3、圍繞關(guān)鍵問題，詳細論述國內(nèi)外以往的研究結(jié)果、當(dāng)前的現(xiàn)狀及今后的發(fā)展趨勢。綜合分析后提出目前尚未解決的問題。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）綜述撰寫方法臨床科研選題及申請書的撰寫技巧27要緊緊圍

22、繞本次申請項目的主題。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）綜述撰寫4、對擬采用的技術(shù)方法進行介紹和分析。 成熟的方法要簡要介紹，重點闡明可以應(yīng)用于本研究的依據(jù)。 新方法要詳細介紹其原理，并闡明可以應(yīng)用于本研究的理論依據(jù)和實驗依據(jù)。 要特別注意的問題：必須對項目中所運用的技術(shù)方法的原理、流程及在實際應(yīng)用中可能出現(xiàn)的問題要十分清楚，絕不能是一種簡單的移植。 例如：單鏈抗體+功能基團，理論上可以實現(xiàn)融合，但存在“活性、表達載體選擇、純化”等問題。5、提出本項目的研究設(shè)想。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧284、對擬采用的技術(shù)方法進行介紹和分析。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）多年以來，國內(nèi)外學(xué)者從不同的

23、角度探討白內(nèi)障的發(fā)生機理。就致病的環(huán)境因素講，氧化因子、紫外線輻射、晶狀體周圍環(huán)境中離子濃度改變及一些生長因子、細胞因子的改變均與老年性白內(nèi)障的發(fā)生有關(guān)。就研究的部位分，晶狀體中皮質(zhì)與核的蛋白質(zhì)改變及晶狀體纖維的改變與白內(nèi)障的形成有關(guān)，而位于晶狀體前囊膜下單層的晶狀體上皮細胞在白內(nèi)障的形成中的變化更引人關(guān)注。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧29多年以來，國內(nèi)外學(xué)者從不同的角度探討白內(nèi)障的發(fā)生機理。就致病因為晶狀體上皮細胞是晶狀體中唯一有分裂活性、數(shù)量相對穩(wěn)定的細胞，它們分裂、分化出晶狀體纖維細胞、產(chǎn)生晶體蛋白，終生不停息，形成了晶狀體均一、對稱的結(jié)構(gòu)，對維持晶狀體的透明起重

24、要作用。不僅如此，晶狀體上皮細胞還是晶狀體中受外來刺激影響較早的部位，已有研究證實老年性白內(nèi)障的晶狀體上皮細胞還發(fā)生退行性變、細胞膜通透性增加、細胞內(nèi)酶活性改變、細胞數(shù)量減少、凋亡細胞增多等改變，與單純老化的晶狀體之間存在差異3-5 。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧30因為晶狀體上皮細胞是晶狀體中唯一有分裂活性、數(shù)量相對穩(wěn)定的細體外實驗也證實多種因素(H2O2、UV-B、晶狀體蛋白的自身抗體)誘發(fā)的白內(nèi)障模型中晶狀體上皮的損傷是晶狀體混濁的主要環(huán)節(jié)6-8。因此，從晶狀體上皮細胞的變化入手探討白內(nèi)障的成因，有可能抓住揭示白內(nèi)障發(fā)病機理的主要環(huán)節(jié)。而晶狀體上皮細胞變化的基因調(diào)

25、控機制是問題的關(guān)鍵所在，也是有待我們深入研究的問題。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧31體外實驗也證實多種因素(H2O2、UV-B、晶國內(nèi)外現(xiàn)狀分析白內(nèi)障的形成與晶狀體的老化密不可分，是晶狀體老化的極端表現(xiàn)。晶狀體的老化是多種因素相互作用的結(jié)果，包括基因的和非基因的隨機變化的不斷積累，也有程序性的、非隨機性的組織特異性多種基因表達的改變。目前，國內(nèi)外對白內(nèi)障相關(guān)基因的研究主要以下三方面：國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧32白內(nèi)障的形成與晶狀體的老化密不可分，是晶狀體老化的極端表現(xiàn)。一是對體外培養(yǎng)的晶狀體白內(nèi)障模型及上皮細胞的研究。UV-B輻射作用誘導(dǎo)的白

26、內(nèi)障中晶狀體上皮細胞是主要的靶細胞，其Na-K-ATP酶的活性增加，蛋白質(zhì)的合成和分泌增加；上皮細胞的凋亡增加，其中有c-fos基因的表達增加；還有組蛋白H4、H3 的低表達和蛋白酶C、-肌動蛋白、-肌動蛋白基因的高表達9-12。Carper等13利用RT-PCR-DD(reverse transcription-polymerase chain reaction differential display)技術(shù)研究H2O2誘導(dǎo)的晶體上皮細胞的基因差異性表達結(jié)果顯示NADH脫氫酶4亞基、細胞色素b、谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶基因表達減少以及細胞因子的核蛋白、替代拼接因子2 （alternative spli

27、cing factor）、-三羥基異丁酰輔酶A水解酶基因表達的增加。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧33一是對體外培養(yǎng)的晶狀體白內(nèi)障模型及上皮細胞的研究。UV-B輻二是利用轉(zhuǎn)基因動物的研究。波形纖維蛋白基因（vimentin）、雜交的型中間纖維蛋白基因的轉(zhuǎn)基因小鼠表現(xiàn)出白內(nèi)障，而且有隨小鼠年齡增加白內(nèi)障加重的趨勢。晶狀體改變的共同特點是晶狀體纖維細胞分化受抑制14,15。Gong等16報告晶狀體的細胞膜蛋白連接蛋白3（3 Connexin）基因敲除小鼠（knockout mouse）在晶狀體形成的早期及纖維細胞分化早期不受影響，其后出現(xiàn)與晶狀體蛋白溶解有關(guān)的核性白內(nèi)障。雖然

28、體外實驗和白內(nèi)障轉(zhuǎn)基因小鼠都提示我們一些基因的變化與白內(nèi)障有關(guān)，但是，這些變化的基因是否與老年性白內(nèi)障形成有關(guān)，目前尚缺乏進一步的報告。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧34二是利用轉(zhuǎn)基因動物的研究。波形纖維蛋白基因（vimentin三是對人老年性白內(nèi)障晶體上皮的研究。Lee17利用RT-PCR技術(shù)研究顯示前極性白內(nèi)障與核性白內(nèi)障上皮細胞中纖維連接蛋白、I型膠原纖維、-平滑肌蛋白、TGF-1、TGF-2、TGF-型受體、結(jié)締組織生長因子的基因表達有差異。Kantorow等18利用RT-PCR-DD研究老年性白內(nèi)障與正常晶狀體上皮的基因差異性表達的初步結(jié)果是老年性白內(nèi)障有三個高

29、表達基因和12個低表達的基因。但就DD-PCR技術(shù)來講，在實驗中難以解決假陰性、假陽性以及克隆全長cDNA的問題。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧35三是對人老年性白內(nèi)障晶體上皮的研究。Lee17利用RT- 上述三方面的研究均取得了不同程度的研究結(jié)果，但由于當(dāng)時技術(shù)條件的限制都未能全面闡明與白內(nèi)障相關(guān)的基因及其功能。 尋找白內(nèi)障時晶狀體上皮細胞與正常晶狀體上皮細胞間差異表達的基因有可能揭示白內(nèi)障的發(fā)病機理。 國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧36 上述三方面的研究均取得了不同程度的研究結(jié)果，但由于當(dāng)時技 尋找差異表達基因的經(jīng)典方法是消減雜交技術(shù)（subtr

30、active hybridization, SH），它是，但是實驗操作復(fù)雜。 經(jīng)過改進后的抑制性消減雜交（suppression subtractive hybridization ,SSH是Diatchenko等1996年建立的方法）簡化了實驗操作，但仍然問題很多。 我校生化教研室建立了改良消減雜交技術(shù)19，20，其特點是：簡便易行，能夠獲得目的細胞特異表達的全長基因，對低豐度基因也能有效分離。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧37 尋找差異表達基因的經(jīng)典方法是消減雜交技術(shù)（subtract 該方法的建立者已利用這一技術(shù)從脂多糖刺激前后的人牙髓細胞的差異表達的基因中克隆到脂

31、多糖刺激后特異表達的基因，其中5個為新基因。同理，利用此方法也能快速、有效地獲得白內(nèi)障晶狀體上皮細胞與正常晶狀體上皮細胞間差異表達的基因，并克隆到全長cDNA，為進一步的結(jié)構(gòu)和功能研究打下基礎(chǔ)。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧38 該方法的建立者已利用這一技術(shù)從脂多糖刺激前后的人牙髓細胞基因芯片技術(shù)的出現(xiàn)，使檢測差異表達基因和未知DNA分子變得更快捷、準(zhǔn)確、高效?；蛐酒窃?996年被提出并開始研制的，該技術(shù)是將成千上萬的DNA探針集中到1厘米見方的基片上，利用堿基互補原理，DNA探針中的已知堿基序列與被測定的未知DNA分子雜交后由標(biāo)記分子標(biāo)記雜交體，經(jīng)自動閱讀設(shè)備分析雜

32、交結(jié)果，從而對檢測基因進行定性、定量和結(jié)構(gòu)分析，確定未知DNA分子。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧39基因芯片技術(shù)的出現(xiàn)，使檢測差異表達基因和未知DNA分子變得更 由于目前尚沒有針對白內(nèi)障研究的現(xiàn)成基因芯片，根據(jù)本研究的需要，我們將篩選到的差異表達的所有基因建立cDNA文庫，再利用基因芯片技術(shù)制備成基因芯片，以此檢測多個樣本中白內(nèi)障晶狀體上皮細胞與正常晶狀體上皮細胞間差異表達的基因，從中進一步篩選出白內(nèi)障特異的基因，它們中可能有已知基因，也可能有未知基因。通過以上兩種技術(shù)的有機結(jié)合，我們能更快捷、有效、準(zhǔn)確地得到白內(nèi)障相關(guān)基因國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰

33、寫技巧40 由于目前尚沒有針對白內(nèi)障研究的現(xiàn)成基因芯片，根據(jù)本研究的綜上所述，分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展為研究白內(nèi)障發(fā)生過程中的功能基因及特異調(diào)控基因提供了有利武器。本項目從晶狀體上皮細胞入手，利用改良的消減雜交技術(shù)和基因芯片技術(shù)系統(tǒng)研究與白內(nèi)障相關(guān)的基因，并采用對體外培養(yǎng)細胞和在體晶狀體上皮細胞的基因轉(zhuǎn)染，探討它們在晶狀體上皮細胞變化和白內(nèi)障形成中的作用，可望闡明白內(nèi)障晶狀體上皮細胞變化的分子生物學(xué)機制，為防治白內(nèi)障提供新的思路和理論依據(jù)。國內(nèi)外現(xiàn)狀分析（綜述）臨床科研選題及申請書的撰寫技巧41綜上所述，分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展為研究白內(nèi)障發(fā)生過程中的功能基報告正文五、項目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬

34、解決的關(guān)鍵科學(xué)問題1、研究目標(biāo) 即通過研究要達到的具體目的，是項目申請的精髓。這段內(nèi)容主要是闡述通過本課題研究將達到什么目標(biāo)，其理論意義，學(xué)術(shù)價值，直接或潛在的應(yīng)價值以及可能產(chǎn)生的社會和經(jīng)濟效益。注意事項： 目標(biāo)要具體，不要太大、太空。 有些與成果混淆，如獲什么獎，發(fā)多少論文等。 目標(biāo)不宜太多，24個足矣。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧42報告正文五、項目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問報告正文五、項目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問題 2、研究內(nèi)容 包括課題研究的范圍、內(nèi)容和可供考核的指標(biāo)等。要求內(nèi)容具體、完整、緊扣主題，使評審者了解擬做哪些工作，是否值得做，這樣做是

35、否能達到申請者提出的目標(biāo)。 注意事項： 你準(zhǔn)備從哪幾個方面的研究來論證你提出的問題，即本課題由哪些分題深入擴展。 明確從哪個角度、哪些范圍、哪個水平進行研究。 每個方面或分題計劃選擇什么樣的可供考核的技術(shù)或經(jīng)濟指標(biāo)。 不要寫成方法。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧43報告正文五、項目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問報告正文3、擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問題 即整個研究要解決的主要科學(xué)問題，而這個問題是值得研究解決的。注意事項：要提煉出科學(xué)問題來。關(guān)鍵科學(xué)問題和關(guān)鍵技術(shù)不能等同起來。列出的關(guān)鍵科學(xué)問題要能通過本研究得以解決。五、項目的研究內(nèi)容、研究目標(biāo),以及擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問題臨床科研選題及申請

36、書的撰寫技巧44報告正文3、擬解決的關(guān)鍵科學(xué)問題 即整個研究要解決的主要科學(xué)報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 1、實驗方法 根據(jù)實驗內(nèi)容分段說明：實驗名稱、所用儀器名稱，具體實驗方法的依據(jù)、制劑名稱、劑量，明確處理因素的數(shù)目、水平和強度，并探討因素“相互關(guān)系”，實驗條件、操作程序和步驟、中間質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)、實驗數(shù)據(jù)的處理。注意事項：要適度的詳細，尤其不是通用方法。要與技術(shù)路線一致，分步進行。盡可能地應(yīng)用先進技術(shù)手段和方法。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧45報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 1、實驗方法 根據(jù)報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 2、技術(shù)路線 指具體實驗中的技術(shù)路線

37、及進行實驗的程序和操作步驟。按實驗過程依次摘要敘述，每一步驟關(guān)鍵點要講清楚，要具有可操作性。醫(yī)藥制劑和藥物的合成等要注明主要工藝流程路線和框圖。對于步驟明確、連貫，相互關(guān)系緊密的技術(shù)路線的書寫也可采用流程圖或示意圖，其中要說明可能遇到的問題和解決辦法。注意事項：技術(shù)路線要清晰，簡練。要與研究內(nèi)容一致，把內(nèi)容串起來。 “按一般人的了解，此技術(shù)路線是行不通的”或“前人曾經(jīng)使用并遇到挫折而放棄的”部分，卻是申請者的獨到之處時，申請者必須表明自己的學(xué)術(shù)思想，提出處理和解決的措施。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧46報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 2、技術(shù)路線 指膠質(zhì)瘤U251細胞及其干細胞培養(yǎng)

38、過表達細胞模型自然表達細胞模型不表達細胞模型livin慢病毒載體感染化療藥物干預(yù)化療藥物不干預(yù)基因水平測定細胞毒性測定細胞周期變化過表達動物模型自然表達動物模型不表達動物模型化療藥物干預(yù)化療藥物不干預(yù)神經(jīng)病理學(xué)神經(jīng)影像學(xué)生長與行為學(xué)變化細胞周期變化基因水平測定技術(shù)路線臨床科研選題及申請書的撰寫技巧47膠質(zhì)瘤U251細胞及其干細胞培養(yǎng)過表達細胞模型自然表達細胞模報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 3、實驗手段 是指研究中說采用的技術(shù)手段和方法。要表明通過那些實驗手段達到試驗?zāi)康?，獲取試驗結(jié)果。注意事項：實驗手段要有先進性。所采用的技術(shù)手段要能得到預(yù)期實驗結(jié)果。 所采用的技術(shù)手段一般盡可能地

39、使用成熟的或已有證實可行的。如是自己發(fā)明，要有說明。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧48報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 3、實驗手段 報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 4、關(guān)鍵技術(shù) 即在整個研究過程中的主要技術(shù)環(huán)節(jié)，關(guān)系著整個實驗成敗的核心技術(shù)等問題。要說明技術(shù)關(guān)鍵的主要技術(shù)特征和指標(biāo)、控制條件和掌握程度、可能出現(xiàn)的問題及處理措施。注意事項：技術(shù)關(guān)鍵不能太多，只能一兩條。 主要關(guān)鍵技術(shù)和技術(shù)訣竅不能等同起來，后者不宜說明。如果技術(shù)關(guān)鍵與技術(shù)保密有關(guān)，對于保密部分可簡明概述，必要時可附函向主管單位說明。中醫(yī)藥臨床和新藥開發(fā)研究中，中醫(yī)藥處方一般不能列為關(guān)鍵技術(shù)，提取制劑工藝若有必

40、要可列為關(guān)鍵技術(shù)。 關(guān)鍵技術(shù)要準(zhǔn)確、具體，緊緊圍繞研究內(nèi)容和方法。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧49報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 4、關(guān)鍵技術(shù) 即報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 5、可行性分析 對技術(shù)路線的關(guān)鍵步驟、新的或關(guān)鍵的技術(shù)方法、實驗中涉及的實驗動物模型的建立等技術(shù)問題以及對可能出現(xiàn)問題的解決措施及實施方案，做一可行性的分析或自我評價。注意事項：闡明理論上可行。說明所采用的技術(shù)、方法可行。 表明基礎(chǔ)（前期工作、人員技術(shù)等）與條件可行。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧50報告正文六、擬采取的研究方案及可行性分析 5、可行性分析 報告正文七、項目的特色與創(chuàng)新之處 1、項

41、目特色 即項目的獨到之處和與眾不同?？赡苁前哑渌I(lǐng)域的技術(shù)或方法引入到本項目中而獨具匠心；或項目本身就具有特色，解決前人沒有解決或沒有很好解決的問題。 注意事項：項目特色不要與創(chuàng)新混同起來。不要過分渲染，實事求是。 特色不宜太多，12點就可以了。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧51報告正文七、項目的特色與創(chuàng)新之處 1、項目特色 即項目的獨報告正文七、項目的特色與創(chuàng)新之處 2、項目的創(chuàng)新之處 項目的創(chuàng)新之處即本課題在選題、設(shè)計、方法、技術(shù)、路線、成果、應(yīng)用等方面與眾不同之處。在書寫時應(yīng)著重于與他人研究的主要不同之處和本項目的自身特點。注意事項：創(chuàng)新點應(yīng)在充分查閱資料的基礎(chǔ)上提出，切忌弄虛作假，或想

42、當(dāng)然提出。創(chuàng)新點應(yīng)具有必要性和可行性，不可為創(chuàng)新而創(chuàng)新。創(chuàng)新不可過多，一般為24條，創(chuàng)新點過多會失去真實性或被認(rèn)為實施困難。 臨床科研選題及申請書的撰寫技巧52報告正文七、項目的特色與創(chuàng)新之處 2、項目的創(chuàng)新之處 項目的臨床科研選題及申請書的撰寫技巧培訓(xùn)課件報告正文八、年度研究計劃及預(yù)期研究結(jié)果 2、預(yù)期研究結(jié)果 不同類型的課題，預(yù)期結(jié)果的側(cè)重也不同?；A(chǔ)研究或應(yīng)用基礎(chǔ)研究可以是擬發(fā)表何種水平的文章若干篇或獲什么專利、成果等，但更重要的是學(xué)術(shù)上預(yù)期解決什么問題，得到什么技術(shù)成果或?qū)W術(shù)論點等。應(yīng)用基礎(chǔ)研究課題，除上述外還應(yīng)則說明潛在的應(yīng)用前景。注意事項：不要籠統(tǒng)地說發(fā)表高水平論文，要寫明SCI或

43、國內(nèi)核心期刊。可以將研究生培養(yǎng)若干寫在此處。 不宜說獲什么獎，可說擬申報專利幾項。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧54報告正文八、年度研究計劃及預(yù)期研究結(jié)果 2、預(yù)期研究結(jié)果 撰寫課題申請書及注意事項九、研究基礎(chǔ)與工作條件 1、研究工作基礎(chǔ) 與本項目相關(guān)的研究工作積累和已取得的研究工作成績。特別是與本項目立項、順利進行而做的前期工作，包括必要的預(yù)實驗、實驗方法的建立、動物模型的建立等工作和成績，以及開展本課題研究以來已做的工作及取得的初步成績。必要時附上相關(guān)文章或材料。注意事項：將工作積累和成績分開來寫。工作積累從相關(guān)研究工作、人員技術(shù)情況及相關(guān)前期工作方面入手。 工作成績指獲獎、專利、發(fā)表的論

44、文等。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧55撰寫課題申請書及注意事項九、研究基礎(chǔ)與工作條件 1、研究工作撰寫課題申請書及注意事項2、實驗條件 包括已具備的實驗條件，尚缺少的實驗條件和擬解決的途徑，包括利用國家實驗室、國家重點實驗室和部門重點實驗室等研究基地的計劃與落實情況。九、研究基礎(chǔ)與工作條件 注意事項：儀器設(shè)備、關(guān)鍵性的試劑藥品、合格的實驗動物（來源、品系和等級）。已有的協(xié)作條件，原材料及加工條件。相關(guān)資源，如單位其他實驗室條件。臨床科研選題及申請書的撰寫技巧56撰寫課題申請書及注意事項2、實驗條件 包括已具備的實驗條件，撰寫課題申請書及注意事項3、申請人簡介 包括申請人和項目組主要成員的學(xué)歷和研究工作簡歷，近期已發(fā)表與本項目有關(guān)的主要論著目錄和獲得學(xué)術(shù)獎勵情況及在本項目中承擔(dān)的任務(wù)。論著目錄要求詳細列出所有作者、論著題目、期刊名或出版社名、年、卷（期）、起止頁碼等；獎勵情況也須詳細列出全部受獎人員、獎勵名稱等級