微生物實驗-細菌的染色技術(shù)及大小的測定課件

1、實 驗 三細菌的染色技術(shù)及微生物大小的測定第一部分 細菌的染色技術(shù)目的要求染色劑和染色的原理實驗材料實驗程序目的要求掌握微生物的染色原理掌握染色的基本操作技術(shù)掌握微生物的一般染色法和革蘭氏染色法染色劑和染色原理微生物染色的基本原理：細菌機體無色透明，與背景反差小，可將細菌染色，增加其反差；細菌在通常培養(yǎng)狀態(tài)下總帶負(fù)電荷，故可用帶正電荷的堿性染料染色。染色劑 染料按其電離后所帶電荷的性質(zhì)可分為以下類型：1. 酸性染料：如酸性復(fù)紅、剛果紅、伊紅、藻紅、苯胺黑等。2. 堿性染料：一般有堿性復(fù)紅、中性紅、孔雀綠、番紅、結(jié)晶紫、美蘭、甲基紫等，細菌易被堿性染料染色。3. 中性（復(fù)合）染料：如伊紅、美蘭等

2、，Wright染料和Gimsa染料等（常用于細胞核染色）。4. 單純?nèi)玖希哼@類染料的化學(xué)親和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶劑中，如蘇丹類的染料。染色劑和染色原理微生物染色常用染料如下表：實驗程序 （細菌染色的方法和步驟）細菌染色的方法: 1. 簡單染色法：用一種染色液染菌體后，就可以觀察微生物的大小、形狀和細胞排列狀況，但不能鑒別微生物以及它的特殊構(gòu)造等。2. 復(fù)染色法：用兩種或兩種以上染色液進行染色，有協(xié)助鑒別微生物的作用，故也稱鑒別染色法。常用的有：革蘭氏染色法、抗酸染色法、芽孢染色法、鞭毛染色法、細胞染色法等。染色技術(shù)的一般過程 涂片干燥固定染色媒染脫色復(fù)染水洗干燥鏡檢實

3、驗程序 （簡單染色的方法和步驟）簡單染色法(一般染色法)1.涂片2.干燥：自然晾干或酒精燈高處微微加熱。3.固定4.染色：在整個涂面上滴加染色液，染色min。 5.水洗：傾去染液，用自來水細流沖洗至流下的水中無染料顏色為止。6.吸干7.鏡檢第二部分 細菌大小的測定目的要求學(xué)習(xí)使用目測微尺和物測微尺在顯微鏡下測定微生物大小的方法。測定的工具：目測微尺和物測微尺目測微尺是一圓形玻片，其中央刻有5mm長、等分為50格的標(biāo)尺，每格的長度隨使用目鏡和物鏡的放大倍數(shù)及鏡筒長度而定。使用前用物鏡測微尺標(biāo)定，用時放在目鏡內(nèi)。物測微尺是一厚玻片，中央有一圓形蓋玻片，中央刻有1mm長的標(biāo)尺，等分為100格，每格為10m用以標(biāo)定目測微尺在不同放大倍數(shù)下每格的實際長度。目測微尺的標(biāo)定：將目測微尺裝入目鏡的隔板上，刻度朝下；把物測微尺放在載物臺上，刻度朝上。用低倍鏡找到物測微尺的刻度，移動物測微尺和目測微尺使兩者的第一條刻度線重合，順著刻度找出第二條完全重合的刻度線