正交試驗(yàn)法優(yōu)化淫黃顆粒的提取工藝

1、正交試驗(yàn)法優(yōu)化淫黃顆粒的提取工藝【摘要】目的優(yōu)化淫黃顆粒的提取工藝。方法采用正交試驗(yàn)法，以提取液中淫羊藿苷的含量為考察指標(biāo)，對影響水煎提取效果的加水量、浸泡時(shí)間、煎煮時(shí)間、次數(shù)等4個(gè)因素進(jìn)展研究。結(jié)果淫黃顆粒的最正確提取工藝為A2B23，即加水量為8倍，提取3次，每次1.5h。結(jié)論該實(shí)驗(yàn)所優(yōu)選的工藝穩(wěn)定，可行?！娟P(guān)鍵詞】淫黃顆粒總黃酮淫羊藿苷提取工藝正交試驗(yàn)Abstrat:bjetiveptiisetheextrattehnialfYinhuangGranules.ethdTakerthgnaltest,takearriinntentinextratasbservatinindex,study

2、the4fatrsfateraunt,sippingtie,detingtieandtiesinflueningthedetinextratresult.ResultThebestextrattehnialisA2B23,i.e.8tiesfrater,3tiesfextrat,1.5h/tie.nlusinTheexperientshsthetehnialisstableandavailable.Keyrds:YinhuangGranules；ttalflavnes；iariin；extrattehnial；rthgnaltest淫黃顆粒系以淫羊藿為君，配伍黃芪而制成的中藥復(fù)方制劑，具有補(bǔ)氣

3、健腎之成效，主要用于腎病綜合征的治療。為確保該制劑的臨床療效，本文采用正交設(shè)計(jì)方法，以干膏收率和總黃酮提取率為指標(biāo)，對淫黃顆粒水提取工藝進(jìn)展優(yōu)化研究。1儀器與材料2方法與結(jié)果2.1正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)選用L9(34)正交表，以干膏收率和總黃酮提取率為考核指標(biāo)，考察水提取中的加水量A、煎煮時(shí)間B和煎煮次數(shù)三個(gè)因素，每個(gè)因素設(shè)三程度。其因素程度見表1。表1正交試驗(yàn)因素程度表略2.2樣品提取液的制備按處方配比稱取藥材適量，按正交試驗(yàn)表進(jìn)展水提取，藥液經(jīng)濾紙濾過，濾液濃縮至12藥材藥液，備用。2.3干膏收率的測定精細(xì)量取上述提取液50l，濃縮至一定體積，移置于已枯燥恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105枯燥

4、至恒重，計(jì)算干浸膏收率。結(jié)果見表2。2.4總黃酮含量的測定2.4.1對照品溶液的制備精細(xì)稱取淫羊藿苷對照品10.0g，置25l容量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得每l含淫羊藿苷0.4g。2.4.2測定波長的選擇2.4.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備精細(xì)量取對照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4l，分別置10l容量瓶中，各加0.1l/L三氯化鋁溶液1.0l，混勻，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，于70恒溫水浴中放置10in，取出后室溫放冷，于412.0n的波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖1，得標(biāo)準(zhǔn)曲線：y=0.0125+0.0068(r=0.99

5、99)。淫羊藿苷在7.8454.88g/l濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.4.4重現(xiàn)性試驗(yàn)精細(xì)量取同一批提取液6份，按含量測定方法制備，并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定吸收度，RSD=0.94%，重現(xiàn)性良好。2.4.5加樣回收率試驗(yàn)取含量的提取液6份，參加不同量的淫羊藿苷對照品，按含量測定方法制備，并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法測定吸收度，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見表3。平均回收率為101.12%，RSD=0.85%表3回收率試驗(yàn)結(jié)果略2.4.6含量測定精細(xì)量取正交試驗(yàn)提取液1l，置蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干后，殘?jiān)蛹状既芙猓迫?0l容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。精細(xì)汲取樣品溶液2l，置10l容量瓶中，

6、照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下的方法，自“加0.1l/L三氯化鋁溶液1.0l起依法測定吸收度，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算黃酮含量和總黃酮提取總量，結(jié)果見表2。表2正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及干膏收率和總黃酮提取率略2.5結(jié)果分析正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)展方差分析，結(jié)果見表4和表5。以干浸膏得率為考察指標(biāo)，表32中極差R值大小顯示，各因素作用主次為BA；方差分析結(jié)果說明：因素的影響有極顯著性差異P0.05，A因素和B因素那么均無顯著性影響P0.05，以A3B23組合為佳。以總黃酮提取率為考察指標(biāo)，表32中極差R值大小顯示，各因素作用主次為AB；方差分析結(jié)果說明：A因素和B因素的影響無顯著性差異P0.05，而因素的影響有顯著性差異P0.05，

7、以A2B33組合為佳。表4浸膏得率方差分析表略表5總黃酮提取率方差分析表略2.6驗(yàn)證試驗(yàn)考慮到總黃酮提取率這一指標(biāo)較重要，同時(shí)兼顧省時(shí)節(jié)能，故擬確定水提取工藝為：A2B23。但從表3、5可見，提取次數(shù)對總黃酮提取率影響較大，故進(jìn)一步比擬A2B23和A2B24。取同一批藥材，根據(jù)處方比例稱取藥材，按A2B24和A2B23進(jìn)展比照驗(yàn)證試驗(yàn)，按上述方法測定浸膏得率及總黃酮含量，結(jié)果見表6。表6驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果略由表6可見，以浸膏得率及總黃酮提取率為指標(biāo)，按A2B23和A2B24進(jìn)展試驗(yàn)，結(jié)果顯示兩者幾無差異，故確定水提取工藝為A2B23，即加水量為8倍，提取3次，每次1.5h。3討論方中君藥淫羊藿具有補(bǔ)腎陽、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕成效，其主要有效成分是淫羊藿苷和淫羊藿次苷等黃酮類化合物。黃芪為方中輔藥，具有補(bǔ)氣升陽、益衛(wèi)固表、利水消腫、托毒排膿、斂瘡生肌之成效，含皂苷類、多糖類、黃酮類及氨基酸類等，其中皂苷和多糖類被認(rèn)為系主要有效成份。根據(jù)方中各藥的有效成分及其溶解性能，設(shè)計(jì)確定采用水提工藝。淫黃顆粒系復(fù)方制劑，成分復(fù)雜。因此，除以干膏收率為考核指標(biāo)外，同時(shí)選擇以淫羊藿苷為對照品，測定總黃酮的含量，以綜合評價(jià)工藝的合理性。結(jié)果顯示，本方法簡便、準(zhǔn)確、靈敏