川芎嗪對嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷收縮的影響

1、川芎嗪對嗎啡依賴離體豚鼠回腸戒斷收縮的影響【摘要】目的觀察中藥川芎的主要成分川芎嗪對嗎啡依賴離體豚鼠回腸催促戒斷反響的影響，評價川芎嗪對嗎啡依賴豚鼠回腸的作用。方法采用豚鼠回腸體外孵育方法。催促戒斷收縮由1l/L納絡(luò)酮參加已在含3l/L嗎啡的37.5Krebs液中孵育4h的離體豚鼠回腸引起。分別在給予納絡(luò)酮前、后1in參加不同濃度的鹽酸川芎嗪，觀察豚鼠回腸的收縮反響。結(jié)果川芎嗪100，200，300l/L對正?；啬c收縮未見明顯影響。當(dāng)川芎嗪100，200，300l/L在參加納洛酮前1in給藥，納洛酮催促的回腸戒斷性收縮被明顯抑制，與嗎啡依賴對照組相比擬有顯著性差異P0.05或P0.01。川芎嗪

2、200，300l/L在參加納洛酮后1in給藥，對戒斷性收縮也有明顯抑制作用。結(jié)論川芎嗪對納洛酮催促的嗎啡依賴豚鼠離體回腸戒斷性收縮的形成有抑制作用，對已出現(xiàn)的戒斷收縮也有明顯阻斷作用。提示川芎嗪具有抑制嗎啡戒斷病癥的作用。【關(guān)鍵詞】川芎嗪；嗎啡；納絡(luò)酮；豚鼠離體回腸Keyrds：Ligustrazine;rphine;Nalxne;Islatedguineapigileu川芎嗪(Iigustrazine)是中藥傘形科植物川芎LigustiuhuanxingHrt.的根莖中所含的生物堿,化學(xué)構(gòu)造為四甲基吡嗪(tetraethylpyrazine)。川芎嗪具有明顯的強(qiáng)心、擴(kuò)張血管、改善微循環(huán)、抑制

3、平滑肌收縮等多種藥理作用，自身毒副作用小,已廣泛應(yīng)用于臨床，治療多種心腦血管性疾玻中藥川芎既是中醫(yī)臨床的常用藥物，也是中醫(yī)治療阿片類戒斷病癥的常用中藥之一1。據(jù)報道，川芎嗪對嗎啡依賴大、小鼠的戒斷綜合征具有較明顯的治療作用2，3。為深化討論川芎嗪在抗阿片類戒斷方面的作用及機(jī)理，本研究通過建立嗎啡依賴的豚鼠離體回腸模型，觀察川芎嗪對納絡(luò)酮催促的嗎啡依賴豚鼠回腸戒斷性收縮以及川芎嗪對正常豚鼠回腸收縮的影響,深化討論中藥有效成分川芎嗪的戒毒機(jī)理。1器材與方法1.1藥品鹽酸川芎嗪注射液(無錫市第七制藥廠提供，批號：20009131)，鹽酸嗎啡注射液(沈陽第一制藥廠消費(fèi),批號：980302),鹽酸納絡(luò)酮

4、注射液(北京四環(huán)藥廠產(chǎn)品，批號：991006),尼莫地平(山東新華制藥股份消費(fèi)，批號：0008036)。1.2動物清潔級豚鼠,，體重200280g,由本校實驗動物研究中心提供。1.3儀器Perlab生物信號采集處理系統(tǒng)ADInstruentsPtyLtd.提供。1.4方法1.4.1豚鼠回腸標(biāo)本的制備豚鼠禁食12h,飲水不限。擊頭處死后,立即翻開腹腔,在離盲腸5處剪斷回腸,取出回腸一段長約1520,置于預(yù)冷的Krebs液中,剪除回腸周圍脂肪組織,用Krebs液將腸內(nèi)容物沖洗干凈,剪成長約2.03.0的標(biāo)本。將標(biāo)本浸入含30lKrebs液的恒溫浴槽中,持續(xù)通入950l/L2和50l/L2混合氣體，

5、pH7.4,T37.00.5。標(biāo)本的一端固定于標(biāo)本板鉤上,另一端連接于張力換能器,調(diào)標(biāo)本負(fù)荷1g,平衡30in后開場實驗，采用Perlab生物信號采集分析系統(tǒng)記錄回腸張力變化。1.4.2嗎啡依賴回腸標(biāo)本的制備將上述回腸標(biāo)本懸掛于30l含3l/L嗎啡的Krebs液中，通入950l/L2和50l/L2混合氣體，37孵育4h，每15in更換1次Krebs液，形成嗎啡依賴回腸標(biāo)本。1.4.3藥物對正常豚鼠離體回腸節(jié)律收縮的影響采用正常豚鼠回腸標(biāo)本，實驗分5組n=8,取自不同豚鼠的回腸，即空白對照組,川芎嗪3個劑量組100，200，300l/L,終濃度,下同，尼莫地平對照組(0.3l/L)?？瞻讓φ战M給

6、予同容量生理鹽水取代藥物。實驗開場時先描記10in正常腸平滑肌收縮曲線,然后在浴槽中參加不同濃度的受試藥物0.1l,再描記10in回腸收縮曲線。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.1.4.4藥物對嗎啡依賴回腸催促戒斷收縮的影響采用嗎啡依賴豚鼠回腸標(biāo)本，實驗分6組n=8，即正?；啬c組,嗎啡依賴回腸組,川芎嗪3個劑量組100，200，300l/L,尼莫地平對照組(0.3l/L)。正?；啬c組和嗎啡依賴回腸組給予同容量生理鹽水取代藥物。將嗎啡依賴回腸標(biāo)本置于30l含3l/L嗎啡的Krebs液的浴管中，參加納絡(luò)酮1l/L，引起回腸催促收縮反響。實驗分別在參加納絡(luò)酮前、后1in參加川芎嗪系列劑量或尼莫地平，以回腸收縮曲

7、線張力的峰值為指標(biāo)，分別觀察藥物在催促前后給藥對回腸戒斷收縮的影響。正?；啬c組采用未經(jīng)嗎啡作用的豚鼠回腸標(biāo)本,置于30l不含嗎啡的Krebs液的浴管中，參加納絡(luò)酮1l/L，觀察回腸收縮張力的變化。1.5統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù)以s表示，應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)展完全隨機(jī)設(shè)計資料的單因素方差分析。P0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1藥物對正常豚鼠離體回腸的影響正常豚鼠回腸呈現(xiàn)節(jié)律性收縮。不同濃度川芎嗪100，200，300l/L作用于正常豚鼠回腸后，對回腸平滑肌收縮張力未見明顯影響P0.05。0.3l/L尼莫地平對豚鼠回腸收縮張力亦未見明顯影響P0.05。結(jié)果見表1。表1藥物對正常豚鼠回

8、腸收縮的影響(略)2.2藥物對嗎啡依賴豚鼠回腸催促戒斷收縮的影響嗎啡依賴回腸參加納絡(luò)酮催促后，20s內(nèi)，即引起收縮，腸管張力明顯增加，該戒斷性收縮可維持5in以上。未經(jīng)嗎啡處理的正?；啬c參加納絡(luò)酮后不引起明顯變化，正?；啬c組收縮張力與嗎啡依賴回腸組比擬，有顯著性差異P0.01，說明嗎啡依賴回腸模型制作成功。3個劑量的川芎嗪在納洛酮催促前給藥及中、高兩劑量在納洛酮后給藥均可明顯抑制嗎啡依賴回腸的催促戒斷性收縮，使收縮張力降低，與嗎啡回腸組比擬有顯著性差異P0.05或P0.01。川芎嗪的作用呈劑量依賴趨勢。低劑量川芎嗪在納洛酮后給藥對回腸的戒斷收縮未見顯著影響P0.05。陽性對照藥尼莫地平組對嗎啡

9、依賴豚鼠回腸的戒斷收縮也有明顯的抑制作用，與嗎啡依賴回腸組相比擬有顯著性意義P0.01。結(jié)果見表2。表2藥物對嗎啡依賴回腸催促戒斷收縮的影響(略)3討論豚鼠回腸富含阿片受體4，它所表現(xiàn)的依賴后戒斷反響具有類似于整體動物催促戒斷病癥的藥理學(xué)特性，反映了藥物在器官程度上的作用。本研究采用豚鼠回腸體外孵育方法測定藥物對嗎啡依賴后戒斷反響的影響。實驗結(jié)果說明，嗎啡依賴離體豚鼠回腸經(jīng)納洛酮催促后呈現(xiàn)明顯的戒斷性收縮效應(yīng)。川芎嗪對正?；啬c的節(jié)律性收縮未見顯著影響，但同樣濃度的川芎嗪可以明顯阻斷和抑制納絡(luò)酮引起的回腸戒斷性收縮，其作用呈劑量依賴現(xiàn)象。從實驗結(jié)果看，中、高劑量川芎嗪在納洛酮催促前后給藥雖無明顯

10、差異，但低劑量川芎嗪預(yù)先給藥的效果較納洛酮后給藥作用顯著。目前國內(nèi)外對阿片依賴的治療還沒有較理想的藥物。a2+在阿片類依賴中的作用受到日益廣泛的注意。大量的實驗研究已證明,鈣通道阻滯劑通過中樞和外周兩種機(jī)制調(diào)節(jié)外a2+內(nèi)流，能明顯緩解阿片類依賴戒斷病癥。因此，近年來應(yīng)用鈣拮抗劑治療阿片類依賴的報道日益增多5，6。國內(nèi)外許多學(xué)者在離體豚鼠回腸標(biāo)本上已證實尼莫地平、異博定等鈣通道阻滯劑可以阻斷嗎啡戒斷所引起的戒斷性收縮7，8。本研究以尼莫地平為陽性對照藥也獲得了同樣的結(jié)果。本實驗說明了川芎嗪對嗎啡依賴回腸戒斷收縮具有抑制作用。據(jù)報道，川芎嗪能阻斷鈣通道，被認(rèn)為是一種新型鈣拮抗劑9，10。盡管目前對

11、于川芎嗪作為鈣通道阻滯劑尚存在爭議11，但該藥抑制鈣內(nèi)流的作用是明確的。川芎嗪對嗎啡依賴回腸戒斷收縮的抑制作用可能與阻滯a2+內(nèi)流有關(guān)。本文從離體器官程度驗證中藥有效成分川芎嗪對嗎啡依賴的戒斷病癥具有拮抗作用，為川芎及川芎嗪用于防治阿片類藥物依賴的臨床應(yīng)用提供了實驗根據(jù)，但藥物的作用機(jī)理仍有待深化研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1高學(xué)敏，宋樹立，白曉菊.淺析中醫(yī)藥戒毒的科學(xué)性J.中國藥物濫用防治雜志,2001,7(1)：3.2胡祁生,湯劍清,魏勁波,等.川芎嗪對嗎啡依賴大鼠戒斷綜合征的抑制作用J.中國藥物依賴性雜志,1999,8(4)：270.3劉忠華,張樹平,李娜,等.川芎嗪對小鼠嗎啡戒斷病癥的抑制作用J

12、.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志,2000,17(2):97.4henJQ,JinQ,hinZQ.piiddependeneandtleraneintheguinea-pigileuinvitrJ.AtaPharalSin,1990,11(6):488.5DgrulA,Yesilyurt.Effetsfa2+hannelblkersnaprphine,brriptineandrphine-induedltrativityinieJ.EurJPharal.1999;364(2-3)：175.6EizanR,GetslevV,PankvaIA,ShrieberS,PikGPharalgialinteratinfthealiuhannelblkersverapailandflunarizineiththepiidsysteJ.BrainRes.1999，8182：187.7AlfarJ,ladI.LpezF,etal.Effetflrnidine,nidipineanddiltiazentheinvirtpiidithdravalrespnseintheguineapigsileuJ.BrJPharal,1990,101:958.8LiuZH,LiN,LiJL，etal.EffetftetrandrinenrphinedependeneinislatedguineapigileuJ.AtaPh