檢驗(yàn)員培訓(xùn)教程系列3（DOC 24）

1、PAGE PAGE 23第三部分 儀器分析法第一章 紫外分光光度法一、原理 可見光光、紫外線照照射某些物質(zhì)質(zhì)，主要是由由于物質(zhì)分子子中價(jià)電子能能級躍遷對輻輻射的吸收，而而產(chǎn)生化合物物的可見紫外外吸收光譜?；谖镔|(zhì)對光光的選擇性吸吸收的特性而而建立分光光光度法或稱吸吸收光譜法的的分析方法。它它是以朗伯比耳定律律為基礎(chǔ)。 1 朗伯比耳定律 A = lg- = EECL T式中 A為吸吸收度； TT為透光率； EE為吸收系數(shù)數(shù)，采用的表表示方法是（EE eq o(sup 5(),sdo 3()），其其物理意義為為當(dāng)溶液濃度度為1%（gg/ml），液液層厚度為11cm時(shí)的吸吸收度數(shù)值； CC為100

2、mml溶液中所所含被測物質(zhì)質(zhì)的重量（按按干燥品或無無水物計(jì)算），g； LL為液層厚度度，cm。二、使用范圍 凡具有有芳香環(huán)或共共軛雙鍵結(jié)構(gòu)構(gòu)的有機(jī)化合合物，根據(jù)在在特定吸收波波長處所測得得的吸收度，可可用于藥品的的鑒別、純度度檢查及含量量測定。三、儀器 可見-紫外分光光光度計(jì)。其應(yīng)應(yīng)用波長范圍圍為200400nm的紫外光光區(qū)、4000850nnm的可見光光區(qū)。主要由由輻射源（光光源）、色散散系統(tǒng)、檢測測系統(tǒng)、吸收收池、數(shù)據(jù)處處理機(jī)、自動(dòng)動(dòng)記錄器及顯顯示器等部件件組成。本儀器是根據(jù)相相對測量的原原理工作的，即即先選定某一一溶劑（或空空氣、試樣）作作為標(biāo)準(zhǔn)（空空白或稱參比比）溶液，并并認(rèn)為它的透透

3、光率為1000（或吸吸收度為0），而而被測的試樣樣透光率（或或吸收度）是是相對于標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)溶液而言，實(shí)實(shí)際上就是由由出射狹縫射射出的單色光光，分別通過過被測試樣和和標(biāo)準(zhǔn)溶液，這這兩個(gè)光能量量之比值，就就是在一定波波長下對于被被測試樣的透透光率（或吸吸收度）。本儀器可精密測測定具有芳香香環(huán)或共軛雙雙鍵結(jié)構(gòu)的有有機(jī)化合物、有有色物質(zhì)或在在適當(dāng)條件下下能與某些試試劑作用生成成有色物的物物質(zhì)。 使用前前應(yīng)校正測定定波長并按儀儀器說明書進(jìn)進(jìn)行操作。四、儀器的校正正 1.波波長的準(zhǔn)確度度試驗(yàn) 以儀器器顯示的波長長數(shù)值與單色色光的實(shí)際波波長值之間誤誤差表示，應(yīng)應(yīng)在1.0nmm范圍內(nèi)。 可用儀儀器中氘燈的的486

4、.002nm與656.110nm譜線線進(jìn)行校正。 2.吸吸收度的準(zhǔn)確確度試驗(yàn) 3.雜雜散光的試驗(yàn)驗(yàn) 4.波波長重現(xiàn)性試試驗(yàn) 5.分分辨率試驗(yàn)五、測定方法 1.對對照品比較法法 （1）按按各品種項(xiàng)下下的方法，分分別配制供試試品溶液和對對照品溶液，對對照品溶液中中所含被測成成分的量應(yīng)為為供試品溶液液中被測成分分標(biāo)示量的110010%，所所用溶劑也應(yīng)應(yīng)完全一致，在在規(guī)定的波長長測定供試品品溶液和對照照品溶液的吸吸收度后，按按下式計(jì)算含含量，即得。 （2）計(jì)計(jì)算式 A樣樣G對/稀釋倍數(shù)數(shù)1001 含量（%）= - 100% A對對G樣/稀釋倍數(shù)數(shù)1001 2.吸吸收系數(shù)法 （1）按按各品種項(xiàng)下下的方法

5、配制制供試品溶液液，在規(guī)定的的波長處測定定其吸收度，再再以該品種在在規(guī)定條件下下的吸收系數(shù)數(shù)計(jì)算含量。用用本法測定時(shí)時(shí)，應(yīng)注意儀儀器的校正和和檢定。 （2）計(jì)計(jì)算式 A樣 含量（%）= - 100% G樣樣/稀釋倍數(shù)數(shù)(E eq o(sup 5(),sdo 3()對1001 3.計(jì)計(jì)算分光光度度法 采用計(jì)計(jì)算分光光度度法應(yīng)慎重。本本法有多種，使使用時(shí)均應(yīng)按按各品種項(xiàng)下下規(guī)定的方法法進(jìn)行。當(dāng)吸吸收度處在吸吸收曲線的陡陡然上升或下下降的部位測測定時(shí)，波長長的微小變化化可能對測定定結(jié)果造成顯顯著影響，故故對照品和供供試品測試條條件應(yīng)盡可能能一致。若測測定時(shí)不用對對照品，如維維生素A測定定法，則應(yīng)在在

6、測定時(shí)對儀儀器作仔細(xì)的的校正和檢定定。六、注意事項(xiàng) 1.空空白溶液與供供試品溶液必必須澄清，不不得有渾濁。如如有渾濁，應(yīng)應(yīng)預(yù)先過濾，并并棄去初濾液液。 2.測測定時(shí)，除另另有規(guī)定外，應(yīng)應(yīng)以配制供試試品溶液的同同瓶溶劑為空空白對照，采采用1cm的石英英吸收池。 3.在在規(guī)定的吸收收峰波長2nm以內(nèi)測測試幾個(gè)點(diǎn)的的吸收度，以以核對供試品品的吸收峰波波長位置是否否正確，除另另有規(guī)定外，吸吸收峰波長應(yīng)應(yīng)在該品種項(xiàng)項(xiàng)下規(guī)定的波波長2nm以內(nèi)；否則應(yīng)考慮慮該試樣的真真?zhèn)巍⒓兌纫砸约皟x器波長長的準(zhǔn)確度，并并以吸收度最最大的波長作作為測定波長長。 4.一一般供試品溶溶液的吸收度度讀數(shù)，以在在0.300.7之間

7、的的誤差較小。 5.吸吸收池應(yīng)選擇擇配對，否則則要引入測定定誤差。在規(guī)規(guī)定波長下兩兩個(gè)吸收池的的透光率相差差小于0.55的吸收池池作配對，在在必要的情況況時(shí)，須在最最終測量扣除除吸收池間的的誤差修正值值。 6.由由于吸收池和和溶劑本身可可能有空白吸吸收，因此測測定供試品的的吸收度后應(yīng)應(yīng)減去空白讀讀數(shù)，再計(jì)算算含量。 7.儀儀器的接地必必須良好，一一切裸露的零零件對地電位位不得超過224伏（測電電筆的氖管不不得發(fā)亮）。 8.在在使用過程中中，如需開啟啟試樣室蓋時(shí)時(shí)或暫時(shí)停止止測試時(shí)，必必須及時(shí)推入入光門鈕桿（使使光電管前光光門關(guān)閉），保保護(hù)光電管，以以防止光電管管受強(qiáng)光或長長時(shí)間照射而而損壞。

8、9.在在測定時(shí)或改改測其它檢品品時(shí)，應(yīng)用待待測溶液沖洗洗吸收池34次，用干干凈綢布或擦擦鏡紙擦凈吸吸收池的透光光面至不留斑斑痕（切忌把把透光面磨損損）。 10.取吸收池時(shí)時(shí)，應(yīng)拿毛玻玻璃兩面，切切忌用手拿捏捏透光面，以以免粘上油污污。使用完后后及時(shí)用測定定溶劑沖凈，再再用純化水沖沖凈，用干凈凈綢布或擦鏡鏡紙擦干，晾晾干后，放入入吸收池盒中中，防塵保存存。 11.若吸收池內(nèi)內(nèi)外壁沾污，兩兩池差較大的的處理。 （1）可可用綢布纏在在扁竹條外或或用脫脂棉纏纏在細(xì)玻璃棒棒上蘸上乙醇醇，輕輕摩擦擦，再用純化化水沖凈。 （2）如如上述方法處處理不好，必必要時(shí)可用重重鉻酸鉀-硫硫酸洗液泡洗洗12分鐘鐘，用自

9、來水水沖凈，再用用純化水沖凈凈。 （3）不不得用毛刷刷刷洗或硬物拭拭擦，以防止止表面光潔度度受損影響正正常使用。 12.請務(wù)必注意意經(jīng)常保持硅硅膠的干燥，目目的是保護(hù)光光學(xué)元件和光光電放大器系系統(tǒng)不致受潮潮損壞而影響響儀器的正常常工作，如發(fā)發(fā)現(xiàn)有的硅膠膠由藍(lán)色變?yōu)闉榉奂t色，應(yīng)應(yīng)立即更換。該該儀器干燥劑劑筒有兩個(gè)：一個(gè)是裝在在放大器暗盒盒上，另一個(gè)個(gè)裝在單色光光器暗盒上。 13.在更換硅膠膠干燥劑時(shí)，應(yīng)應(yīng)關(guān)閉切斷電電源。 14.在停止工作作期間，主機(jī)機(jī)試樣室內(nèi)應(yīng)應(yīng)放入袋裝或或筒裝硅膠干干燥劑。用防防塵罩罩住整整個(gè)儀器，并并在防塵罩內(nèi)內(nèi)放數(shù)袋防潮潮硅膠。 15.儀器在操作作中，狹縫的的寬度應(yīng)從小小

10、逐漸開大。若若狹縫過大，由由于進(jìn)入光電電管的光能量量強(qiáng)度過大，將將會(huì)使放大器器輸出信號達(dá)達(dá)到飽和，以以至數(shù)字顯示示出溢出（即即數(shù)字閃爍或或示1不變）。這這不是儀器有有故障。 16.將波長旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)放在6255nm，鋏縫縫關(guān)閉在0.02nm附近，選選擇按鍵恢復(fù)復(fù)在停止工作作部位（即三三個(gè)鍵均彈出出）。 17.搬動(dòng)儀器時(shí)時(shí)應(yīng)搬在主體體端，不要搬搬在試樣室和和光電管盒端端以及光源燈燈室部位，以以防止儀器狹狹縫或光路部部件受力而發(fā)發(fā)生變形。并并在搬動(dòng)或運(yùn)運(yùn)輸時(shí)，應(yīng)將將可動(dòng)部分固固定，如各旋旋鈕可用膠布布貼住，狹縫縫位置開大些些，然后固定定，不要關(guān)小小狹縫，以免免運(yùn)輸時(shí)振動(dòng)動(dòng)使狹縫刀口口受損壞。 18.儀器

11、的光柵柵、反射鏡絕絕對不能擦拭拭，否則將損損壞儀器光學(xué)學(xué)表面，增加加雜散光。 19.儀器經(jīng)過搬搬動(dòng)請及時(shí)檢檢查并糾正波波長精度，為為保證測定的的準(zhǔn)確性請經(jīng)經(jīng)常校準(zhǔn)波長長精度。如有有異常，應(yīng)立立即報(bào)告質(zhì)量量保證部，但但不得擅自調(diào)調(diào)整，并及時(shí)時(shí)做好記錄。七、結(jié)果計(jì)算 A E eq o(sup 5(),ssdo 3()（供供試品） = CL E eq o(sup 5(),ssdo 3()（供供試品） 含量（%）= - 100% E eq o(sup 5(),sdo 3()（標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)值或?qū)φ照掌罚┌?、允許差 儀器分分析方法的誤誤差限度，除除另有規(guī)定外外，其相對偏偏差應(yīng)在(2.033.0)%。第二章 比色

12、色法一、原理及適用用范圍 在可見見光區(qū)，除某某些物質(zhì)有吸吸收外，很多多物質(zhì)本身并并沒有吸收，但但可在一定條條件下加入顯顯色試劑或經(jīng)經(jīng)過處理使其其顯色后，根根據(jù)顏色深淺淺與濃度成正正比關(guān)系，則則可用比色法法測定含量。二、儀器 可見分分光光度計(jì)（或或比色計(jì)）其其應(yīng)用波長范范圍為4000850nnm的可見光光區(qū)。主要由由輻射源（光光源）、色散散系統(tǒng)（或?yàn)V濾光片）、檢檢測器系統(tǒng)、顯顯示系統(tǒng)、記記錄器及吸收收池等部件組組成。使用前前應(yīng)校正測定定波長并按儀儀器說明書進(jìn)進(jìn)行操作。三、儀器的校正正 按照紫紫外分光光度度法項(xiàng)下的有有關(guān)規(guī)定及按按儀器說明書書要求進(jìn)行校校正。波長的的準(zhǔn)確度應(yīng)在在3nm范圍內(nèi)內(nèi)。四、

13、測定方法 1.用用比色法測定定時(shí)，應(yīng)取對對照品同時(shí)操操作。除另有有規(guī)定外，比比色法所用的的空白系指用用同體積的溶溶劑代替對照照品或供試品品溶液，然后后依次加入等等量的相應(yīng)試試劑，并用同同樣方法處理理。在規(guī)定的的波長處測定定對照品和供供試品溶液的的吸收度后，按按紫外分光光光度法項(xiàng)下“對照品比較較法”的計(jì)算式計(jì)計(jì)算含量。 2.當(dāng)當(dāng)吸收度和濃濃度關(guān)系不呈呈線性時(shí)，應(yīng)應(yīng)取數(shù)份梯度度量的對照品品溶液，用溶溶劑補(bǔ)充至同同一體積，顯顯色后測定各各份溶液的吸吸收度，然后后以吸收度與與相應(yīng)的濃度度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲曲線，再根據(jù)據(jù)供試品的吸吸收度在標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)曲線上求出出其含量。三、注意事項(xiàng) 測定時(shí)時(shí)，應(yīng)取對照照品平行操作作，

14、使所用試試劑用量、反反應(yīng)溫度、酸酸堿度、反應(yīng)應(yīng)時(shí)間等完全全一致，對隨隨時(shí)間變化影影響顯色的品品種應(yīng)準(zhǔn)確控控制讀數(shù)時(shí)間間，操作時(shí)應(yīng)應(yīng)注意避光。第三章 高效效液相色譜法法一、原理 高效液液相色譜法是是用高壓輸液液泵將具有不不同極性的單單一溶劑或不不同比例的混混合溶劑、緩緩沖液等流動(dòng)動(dòng)相，壓入裝裝有固定相的的色譜柱，經(jīng)經(jīng)進(jìn)樣閥注入入供試品，由由流動(dòng)相帶入入柱內(nèi)，在柱柱內(nèi)各成分被被分離后，依依次進(jìn)入檢測測器，色譜信信號由記錄儀儀或積分儀記記錄。二、適用范圍 高效液液相色譜法是是一種分離分分析方法，適適用于揮發(fā)性性低、熱穩(wěn)定定性差、分子子量大的高分分子化合物以以及離子型化化合物等的定定性、定量分分析。中

15、國藥藥典主要用于于藥品的含量量測定、有關(guān)關(guān)物質(zhì)檢查、雜雜質(zhì)限度檢查查和鑒別等。三、儀器 高效液液相色譜儀主主要由輸液泵泵系統(tǒng)、進(jìn)樣樣器系統(tǒng)、色色譜柱、檢測測器、記錄器器、顯示器及及數(shù)據(jù)處理機(jī)機(jī)（或兼有組組分收集系統(tǒng)統(tǒng)）等組成。使使用時(shí)應(yīng)按儀儀器的說明書書進(jìn)行操作。四、儀器的校正正 1.高高效液相色譜譜儀的柱箱控控溫精度、基基線噪聲、基基線漂移、靈靈敏度或檢測測限、線性范范圍的檢定均均按儀器說明明書的技術(shù)要要求進(jìn)行校驗(yàn)驗(yàn)，應(yīng)符合規(guī)規(guī)定。 2.以以紫外-可見見光檢測器、熒熒光檢測器、差差示折光檢測測器為檢測器器的實(shí)驗(yàn)室通通用液相色譜譜儀的檢定，所所用各種標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)使用用經(jīng)國家技術(shù)術(shù)監(jiān)督部門批批準(zhǔn)

16、頒發(fā)的標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。具具體校正方法法和主要技術(shù)術(shù)指標(biāo)見“高效液相色色譜儀檢測器器的校驗(yàn)”。 3.泵泵的耐壓試驗(yàn)驗(yàn) 4.泵泵流量設(shè)定值值誤差、流量量穩(wěn)定性誤差差的試驗(yàn) 5.柱柱恒溫箱溫度度設(shè)定值誤差差和控溫穩(wěn)定定性誤差的試試驗(yàn) 6.梯梯度準(zhǔn)確度的的試驗(yàn) 7.定定性定量重現(xiàn)現(xiàn)性的試驗(yàn)五、對儀器的一一般要求 1.色色譜柱的填充充劑和流動(dòng)相相的組分應(yīng)按按各品種項(xiàng)下下的規(guī)定。常常用的色譜柱柱填充劑有硅硅膠（正相色色譜）和化學(xué)學(xué)鍵合硅膠，后后者以十八烷烷基硅烷鍵合合硅膠（反相相色譜）最為為常用，辛基基硅烷鍵合硅硅膠次之，氰氰基或氨基鍵鍵合硅膠也有有使用。離子子交換填充劑劑用于離子交交換色譜；凝凝膠或玻璃微微

17、球等填充劑劑用于分子排排阻色譜等。除除另有規(guī)定外外，柱溫為室室溫，檢測器器為紫外吸收收檢測器。 2.藥藥典正文中各各品種項(xiàng)下規(guī)規(guī)定的條件除除固定相種類類、流動(dòng)相組組分、檢測器器類型不得任任意改變外，其其余如色譜柱柱內(nèi)徑、長度度、固定相牌牌號、載體粒粒度、流動(dòng)相相流速、混合合流動(dòng)相各組組分的比例、柱柱溫、進(jìn)樣量量、檢測器的的靈敏度等，均均可適當(dāng)改變變，以適應(yīng)具具體品種并達(dá)達(dá)到系統(tǒng)適用用性試驗(yàn)的要要求。 3.一一般色譜圖約約于20分鐘鐘內(nèi)記錄完畢畢。六、系統(tǒng)適用性性試驗(yàn) 按各品品種項(xiàng)下要求求對儀器進(jìn)行行適用性試驗(yàn)驗(yàn)，即用規(guī)定定的對照品對對儀器進(jìn)行試試驗(yàn)和調(diào)整，應(yīng)應(yīng)達(dá)到規(guī)定的的要求，或規(guī)規(guī)定分析狀態(tài)

18、態(tài)下色譜柱的的最小理論板板數(shù)、分離度度、重復(fù)性和和拖尾因子。 1.色色譜柱的理論論板數(shù)（n） n = 5.544(tR/Wh/2)2式中 tR為為保留時(shí)間（以以分鐘或長度度計(jì)，下同，但但應(yīng)取相同單單位）； WWh/2為半峰峰高寬。 2.分分離度（R） 除另有規(guī)規(guī)定外，分離離度應(yīng)大于11.5。 2(tR2tR1) R = - W1W2式中 tR22為相鄰兩峰峰中后一峰的的保留時(shí)間； ttR1為相鄰兩兩峰中前一峰峰的保留時(shí)間間； WW1及W2為此相鄰兩兩峰的峰寬。 3.重重復(fù)性 取各品品種項(xiàng)下的對對照溶液，連連續(xù)進(jìn)樣5次次，除另有規(guī)規(guī)定外，其峰峰面積測量值值的相對標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大大于2.0%。也可

19、按各各品種校正因因子測定項(xiàng)下下，配制相當(dāng)當(dāng)于80%、1100%和1120%的對對照品溶液，加加入規(guī)定量的的內(nèi)標(biāo)溶液，配配成3種不同同濃度的溶液液，分別進(jìn)樣樣3次，計(jì)算算平均校正因因子，其相對對標(biāo)準(zhǔn)偏差也也應(yīng)不大于22.0%。 4.拖拖尾因子（TT） 除另另有規(guī)定外，TT應(yīng)在0.9951.005之間。 W0.005h T = - 2d11式中 W0.05h為00.05峰高高處的峰寬； dd1為峰極大至至峰前沿之間間的距離。七、測定法 定量測測定時(shí)，可根根據(jù)供試品的的具體情況采采用峰面積法法或峰高法。測測定雜質(zhì)含量量時(shí)，須采用用峰面積法。（一）內(nèi)標(biāo)法 加校正因因子測定供試試品中某個(gè)雜雜質(zhì)或主成分分

20、含量 1.按按各品種項(xiàng)下下的規(guī)定，精精密稱（量）取取對照品和內(nèi)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分分別配成溶液液，精密量取取各溶液，配配成校正因子子測定用的對對照溶液。取取一定量注入入液相色譜儀儀，記錄色譜譜圖。測量對對照品和內(nèi)標(biāo)標(biāo)物質(zhì)的峰面面積或峰高，按按下式計(jì)算校校正因子： AS/CS 校正因因子（f）= - AR/CR式中 AS為為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的的峰面積或峰峰高； AAR為對照品的的峰面積或峰峰高； CCS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)質(zhì)的濃度； CCR為對照品的的濃度。 再取各各品種項(xiàng)下含含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)質(zhì)的供試品溶溶液，注入液液相色譜儀，記記錄色譜圖，測測量供試品中中待測成分（或或其雜質(zhì)）和和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的的峰面積或峰峰高，按下式式計(jì)算含

21、量： AX 含量（CCX）= f- AS/CS CX稀釋倍數(shù) 含量（%）= 100% GXX(1干燥失失重)式中 AX為為供試品（或或其雜質(zhì)）的的峰面積或峰峰高； CCX為供試品（或或其雜質(zhì)）的的濃度； GGX為供試品的的稱樣量。 當(dāng)配制制校正因子測測定用的對照照溶液和含有有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的的供試品溶液液使用同一份份內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶溶液時(shí)，則配配制內(nèi)標(biāo)物質(zhì)質(zhì)溶液不必精精密稱（量）取取。 2.內(nèi)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的選選擇 （1）內(nèi)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)應(yīng)是是樣品中不含含有的組分，否否則會(huì)使峰重重疊而無法準(zhǔn)準(zhǔn)確測量內(nèi)標(biāo)標(biāo)物質(zhì)的峰面面積。 （2）內(nèi)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的保保留時(shí)間應(yīng)與與待測成分相相近，并達(dá)到到完全分離，分分離度R1.5。 （3）內(nèi)

22、內(nèi)標(biāo)物質(zhì)必須須是純度符合合要求的化合合物，若非純純品無干擾峰峰也可采用。已已知含量的較較純物質(zhì)也可可用，但需扣扣除內(nèi)標(biāo)物質(zhì)質(zhì)的重量。（二）外標(biāo)法 測定供試試品中某個(gè)雜雜質(zhì)或主成分分含量 1.按按各品種項(xiàng)下下的規(guī)定，精精密稱（量）取取對照品和供供試品，配制制成溶液，分分別精密取一一定量，注入入液相色譜儀儀，記錄色譜譜圖，測量對對照品和供試試品待測成分分的峰面積（或或峰高），按按下式計(jì)算含含量： AX 含量（CCX）= CR- AR CX稀釋倍數(shù) 含量（%）= 100% GXX(1干燥失失重) 2.由由于微量注射射器不易精確確控制進(jìn)樣量量，當(dāng)采用外外標(biāo)法測定供供試品中某雜雜質(zhì)或主成分分含量時(shí)，以以

23、定量環(huán)進(jìn)樣樣為好。（三）加校正因因子的主成分分自身對照法法（四）不加校正正因子的主成成分自身對照照法（五）面積歸一一化法 由于峰峰面積歸一化化法測定誤差差大，因此，本本法通常只能能用于粗略考考察供試品中中的雜質(zhì)含量量。除另有規(guī)規(guī)定外，一般般不宜用于微微量雜質(zhì)的檢檢查。方法是是測量各雜質(zhì)質(zhì)峰的面積和和色譜圖上除除溶劑峰以外外的總色譜峰峰面積，計(jì)算算各峰面積占占總峰面積的的百分率，即即得。八、注意事項(xiàng) 1.雖雖然泵能耐壓壓6000PPSI的壓力力，但不要使使泵處于40000PSII以上的壓力力為宜。 2.安安裝及拆卸色色譜柱時(shí)應(yīng)注注意柱的連接接方向，千萬萬不能接反。否否則可能導(dǎo)致致柱效降低，甚甚至

24、損壞色譜譜柱。 3.嚴(yán)嚴(yán)禁開空泵。在在無流動(dòng)相通通過時(shí)不要扳扳動(dòng)進(jìn)樣閥的的操作桿，使使用時(shí)要注意意盡可能少扳扳動(dòng)，以免磨磨損內(nèi)部的密密封墊圈。 4.為為了延長檢測測器燈源的使使用壽命，在在色譜泵穩(wěn)定定后再打開檢檢測器電源開開關(guān)，分析結(jié)結(jié)束后立即關(guān)關(guān)閉檢測器。 5.應(yīng)應(yīng)使用高純度度、高質(zhì)量的的溶劑和試劑劑。 6.避避免pH值超超限，pH值值應(yīng)控制在22.27.5之間。ppH值偏低或或偏高都會(huì)腐腐蝕液相系統(tǒng)統(tǒng)的不銹鋼材材料；破壞色色譜柱填料的的結(jié)構(gòu)，使填填料失活。 7.色色譜柱溫不能能超過規(guī)定要要求，柱溫過過高會(huì)加速色色譜柱填料老老化，破壞其其結(jié)構(gòu)。 8.使使用所有溶劑劑必須是互溶溶的。這對于于緩

25、沖流動(dòng)相相來說是非常常重要的，鹽鹽類的析出會(huì)會(huì)很快損壞要要維護(hù)的部件件。 9.流流動(dòng)相首選甲甲醇-水系統(tǒng)統(tǒng)，如經(jīng)試用用不適合時(shí)，再再選用其他溶溶劑。為保護(hù)護(hù)儀器，應(yīng)盡盡可能少用含含有緩沖液的的流動(dòng)相。如如果流動(dòng)相中中含有緩沖劑劑，每日使用用后應(yīng)用不含含緩沖劑的流流動(dòng)相或新鮮鮮純化水將儀儀器管路、泵泵、進(jìn)樣閥、色色譜柱及檢測測池等充分沖沖洗干凈。 10.如果液相系系統(tǒng)使用未過過濾的洗脫液液、注入未過過濾的樣品、系系統(tǒng)中滯留緩緩沖洗脫液都都能堵塞系統(tǒng)統(tǒng)或劃傷泵柱柱塞。所以流流動(dòng)相、樣品品使用前必須須用0.455m微孔濾膜膜過濾；流動(dòng)動(dòng)相并先經(jīng)脫脫氣處理后使使用。停泵后后決不允許緩緩沖洗脫液滯滯留在

26、系統(tǒng)中中，須用經(jīng)過過濾后的新鮮鮮純化水進(jìn)行行清洗，并保保證將緩沖劑劑沖洗干凈。 11.如果泵閉置置在2天以上上，應(yīng)將甲醇醇注滿液相系系統(tǒng)，以避免免水溶劑系統(tǒng)統(tǒng)中可能存在在微生物的繁繁殖。 12.色譜柱保存存時(shí)應(yīng)使填充充劑處在潤濕濕狀態(tài)，兩端端密塞。反相相柱（如十八八烷基硅烷鍵鍵合硅膠柱）可可在甲醇中保保存；正相柱柱（如硅膠柱柱）可在正己己烷中保存等等。 13.決不能使用用鹽酸溶液。一一般來說，任任何濃度的鹵鹵化物都會(huì)腐腐蝕未經(jīng)鈍化化的不銹鋼材材料。 14.盡量避免使使用在電化學(xué)學(xué)過程中引起起腐蝕的金屬屬離子。應(yīng)避避免的典型金金屬離子有錳錳、鉻、鋅、銅銅、鎳、鉬、鐵鐵。九、允許差 含量測測定的精

27、度，除除另有規(guī)定外外，其相對標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不不大于2.00%。第四章 氣相相色譜法一、原理 氣相色色譜法的流動(dòng)動(dòng)相為氣體，稱稱為載氣；色色譜柱分為填填充柱和毛細(xì)細(xì)管柱兩種。填填充柱內(nèi)裝吸吸附劑、高分分子多孔小球球或涂漬固定定液的載體；毛細(xì)管柱內(nèi)內(nèi)壁涂漬或交交聯(lián)固定液。注注入進(jìn)樣口的的供試品被加加熱氣化，并并被載氣帶入入色譜柱，在在柱內(nèi)各成分分被分離后先先后進(jìn)入檢測測器，色譜信信號用記錄儀儀或數(shù)據(jù)處理理器記錄。二、適用范圍 氣相色色譜法是一種種分離分析方方法，適用于于含揮發(fā)性或或經(jīng)裂解、衍衍生化等能氣氣化的藥品及及多組分混合合物的定性、定定量分析。中中國藥典主要要用于原料藥藥中殘留溶劑劑、揮發(fā)性雜

28、雜質(zhì)的檢查，制制劑中含有乙乙醇量的測定定以及具有一一定揮發(fā)性原原料藥及其制制劑的含量測測定。三、儀器 氣相色色譜儀主要由由氣路系統(tǒng)、進(jìn)進(jìn)樣系統(tǒng)、色色譜柱、檢測測器、記錄器器、顯示器及及數(shù)據(jù)處理機(jī)機(jī)（或兼有組組分收集系統(tǒng)統(tǒng)）等組成。使使用時(shí)應(yīng)按儀儀器的說明書書進(jìn)行操作。四、對儀器的一一般要求 1.除除另有規(guī)定外外，載氣為氮氮?dú)?；色譜柱柱為填充柱或或毛細(xì)管柱，填填充柱的材質(zhì)質(zhì)為不銹鋼或或玻璃，載體體用直徑為00.2500.18mmm、0.1880.155mm或0.150.125mmm經(jīng)酸洗并硅硅烷化處理的的硅藻土或高高分子多孔小小球；常用玻玻璃或彈性石石英毛細(xì)管柱柱的內(nèi)徑為00.20mmm或0.3

29、2mmm。進(jìn)樣口口溫度應(yīng)高于于柱溫3050；進(jìn)樣量一一般不超過數(shù)數(shù)微升；柱徑徑越細(xì)進(jìn)樣量量應(yīng)越少。檢檢測器為氫火火焰離子化檢檢測器，檢測測溫度一般高高于柱溫，并并不得低于1100，以免水氣氣凝結(jié)，通常常為250350。 2.藥藥典正文中各各品種項(xiàng)下規(guī)規(guī)定的條件，除除檢測器種類類、固定液品品種及特殊指指定的色譜柱柱材料不得任任意改變外，其其余如色譜柱柱內(nèi)徑、長度度、載體牌號號、粒度、固固定液涂布濃濃度、載氣流流速、柱溫、進(jìn)進(jìn)樣量、檢測測器的靈敏度度等，均可適適當(dāng)改變，以以適應(yīng)具體品品種并符合系系統(tǒng)適用性試試驗(yàn)的要求。一一般色譜圖約約于30分鐘鐘內(nèi)記錄完畢畢。五、系統(tǒng)適用性性試驗(yàn) 同高效效液相色譜

30、法法項(xiàng)下規(guī)定。六、測定法 1. 同高效液相相色譜法項(xiàng)下下規(guī)定。用氣氣相色譜法進(jìn)進(jìn)行定量分析析時(shí)，應(yīng)盡量量采用內(nèi)標(biāo)法法為宜。同時(shí)時(shí)也要注意進(jìn)進(jìn)樣技術(shù)的熟熟練，因內(nèi)標(biāo)標(biāo)物質(zhì)與供試試品成分的蒸蒸氣壓不同，則則蒸氣壓高的的進(jìn)樣量也會(huì)會(huì)較多。故選選擇測定用內(nèi)內(nèi)標(biāo)物質(zhì)時(shí)，除除應(yīng)考慮內(nèi)標(biāo)標(biāo)峰的保留時(shí)時(shí)間應(yīng)與被測測成分相近，無無雜質(zhì)峰重疊疊，尚要考慮慮其蒸氣壓是是否近似。 2.氣氣相色譜法手手工進(jìn)樣量不不易精確控制制，特別應(yīng)注注意留針時(shí)間間和室溫的影影響。七、允許差 含量測測定的精度，除除另有規(guī)定外外，其相對標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不不大于2.00%。第五章 旋光光度測定法一、定義 偏振光光透過長1ddm并每1ml中含有

31、有旋光性物質(zhì)質(zhì)1g的溶液，在在一定波長與與溫度下測得得的旋光度稱稱為比旋度。測測定比旋度（或或旋光度）可可以區(qū)別或檢檢查某些藥品品的純雜程度度，亦可用以以測定含量。二、原理 當(dāng)一單單色光（鈉光光譜的D線即即589.33nm）通過過起偏鏡產(chǎn)生生直線偏振光光向前進(jìn)行，當(dāng)當(dāng)通過裝有含含有某些光學(xué)學(xué)活性（即旋旋光性）的化化合物液體的的測定管時(shí)，偏偏振光的平面面（偏振面）就就會(huì)向左或向向右旋轉(zhuǎn)一定定的角度，即即該旋光性物物質(zhì)的旋光度度。其值可以以從自動(dòng)示數(shù)數(shù)盤上直接讀讀出。 偏振光光透過長1ddm并每1mml中含有旋旋光性物質(zhì)11g的溶液，在在一定波長與與溫度下測得得的旋光度稱稱為比旋度。 對液體體供試

32、品 eq o(sup 5(),sdo 33()= - ld 100 對固體體供試品 eq o(sup 5(),sdo 33()= lc式中 eq o(sup 5(),sdo 33()為比旋度度； DD為鈉光譜的的D線； tt為測定時(shí)的的溫度； ll為測定管長長度，dm； 為測得的旋旋光度； dd為液體的相相對密度； cc為每1000ml溶液中中含有被測物物質(zhì)的重量，gg（按干燥品品或無水物計(jì)計(jì)算）。三、測定方法 1.打打開穩(wěn)壓電源源開關(guān)，稍等等片刻，俟電電壓表指針穩(wěn)穩(wěn)定地指示在在220V處處。 2.打打開旋光儀電電源開關(guān)，經(jīng)經(jīng)5分鐘鈉光光燈發(fā)光穩(wěn)定定后再工作。 3.扳扳上直流開關(guān)關(guān)，若直流開開

33、關(guān)扳上后，燈燈熄滅，則再再將直流開關(guān)關(guān)上下重復(fù)扳扳動(dòng)1到2次次，使鈉燈在在直流下點(diǎn)亮亮為正常。 4.將將測定管用供供試品所用的的溶劑沖洗334遍，緩緩緩注入適量量溶劑。 5.測測定管中若有有氣泡，應(yīng)先先將氣泡浮在在凸頸處，通通光面兩端的的霧狀液滴，應(yīng)應(yīng)用擦鏡紙揩揩干。 6.測測定管螺帽不不宜旋得過緊緊，以免產(chǎn)生生應(yīng)力，影響響讀數(shù)。 7.將將測定管放入入樣品室，測測定管安放時(shí)時(shí)，應(yīng)注意標(biāo)標(biāo)記的位置和和方向，蓋上上箱蓋。 8.打打開示數(shù)，調(diào)調(diào)節(jié)零位手輪輪，使旋光示示值為零。 9.取取出測定管，將將空白溶液倒倒出，用供試試品溶液沖洗洗34遍，將將供試品溶液液緩緩注入測測定管，用擦擦鏡紙擦凈測測定管，

34、特別別要擦凈兩端端的通光面，按按相同的位置置和方向正確確地放入樣品品室內(nèi)，蓋好好箱蓋。 10.示數(shù)盤將轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)出該樣品的的旋光度。示示數(shù)盤上紅色色示值為左旋旋（），黑黑色示值為右右旋（）。 11.逐次按下復(fù)復(fù)測按鈕，重重復(fù)讀取旋光光度3次，取取3次的平均均值作為測定定結(jié)果。 12.如果樣品超超過測量范圍圍，儀器在45處自動(dòng)動(dòng)停止，此時(shí)時(shí)取出測定管管，按一下復(fù)復(fù)測按鈕開關(guān)關(guān)，儀器即轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)回零位。 13.鈉燈在直流流供電系統(tǒng)出出現(xiàn)故障不能能使用時(shí)，儀儀器也可在鈉鈉燈交流供電電的情況下測測試。但儀器器的性能可能能略有降低。 14.測定完畢后后，取出測定定管，將測定定管用純化水水洗凈。應(yīng)晾晾干，防塵保保存。

35、 15.關(guān)閉“示數(shù)”開關(guān)，示數(shù)數(shù)盤復(fù)原。 16.關(guān)閉“直流”及“電源”開關(guān)。 17.關(guān)閉穩(wěn)壓電電源開關(guān)，關(guān)關(guān)閉總電源開開關(guān)。 18.罩好防塵罩罩，填寫操作作記錄。四、注意事項(xiàng) 1.中中國藥典20000年版二二部規(guī)定，用用鈉光譜的DD線（5899.3nm）測測定旋光度，除除另有規(guī)定外外，測定管長長度為1dmm（如使用其其他管長，應(yīng)應(yīng)進(jìn)行換算），測測定溫度為220。 2.配配制溶液及測測定時(shí),均應(yīng)應(yīng)調(diào)節(jié)溫度至至200.5（或各藥品品項(xiàng)下規(guī)定的的溫度）。 3.供供試的液體或或固體物質(zhì)的的溶液應(yīng)不顯顯渾濁或含有有混懸的小粒粒。如有上述述情況時(shí)，應(yīng)應(yīng)預(yù)先濾過，并并棄去初濾液液。 4.每每次測定前應(yīng)應(yīng)以溶

36、劑作空空白校正，測測定后，再校校正1次，以以確定在測定定時(shí)零點(diǎn)有無無變動(dòng)，如第第2次校正時(shí)時(shí)發(fā)現(xiàn)零點(diǎn)有有變動(dòng)，則應(yīng)應(yīng)重新測定旋旋光度。 5.測測定供試品與與空白校正，應(yīng)應(yīng)按相同的位位置和方向放放置測定管于于儀器樣品室室，并注意測測定管內(nèi)不應(yīng)應(yīng)有氣泡，否否則影響測定定的準(zhǔn)確度。 6.測測定管使用后后，尤其在盛盛放有機(jī)溶劑劑后,必須立立即洗凈，以以免橡皮圈受受損發(fā)粘。測測定管每次洗洗滌后，切不不可置烘箱中中干燥，以免免發(fā)生變形，橡橡皮圈發(fā)粘。 7.測測定管兩端的的通光面，使使用時(shí)須特別別小心，避免免碰撞和觸摸摸，只能以擦擦鏡紙揩試，以以防磨損。應(yīng)應(yīng)保護(hù)其光亮亮、清潔，否否則影響測定定結(jié)果。 8.測

37、測定管螺帽不不宜旋得過緊緊，以免產(chǎn)生生應(yīng)力，影響響讀數(shù)。 9.鈉鈉燈使用時(shí)間間一般勿連續(xù)續(xù)使用超過22小時(shí)，并不不宜經(jīng)常開關(guān)關(guān)。當(dāng)關(guān)熄鈉鈉燈后，如果果要繼續(xù)使用用，應(yīng)等鈉燈燈冷后再開。 10儀儀器應(yīng)放置干干燥通風(fēng)處，防防止潮氣侵蝕蝕，鎮(zhèn)流器應(yīng)應(yīng)注意散熱。搬搬動(dòng)儀器應(yīng)小小心輕放，避避免震動(dòng)。 11.光源積灰或或損壞，可打打開機(jī)殼擦凈凈或更換。 12.機(jī)械部分摩摩擦阻力增大大，可以打開開后門板，在在傘形齒輪、蝸蝸輪蝸桿處加加稍許鐘油。 13.如果儀器發(fā)發(fā)現(xiàn)停轉(zhuǎn)或其其它元件損壞壞的故障，應(yīng)應(yīng)按電原理圖圖詳細(xì)檢查。第六章 pHH值的測定法法一、原理 PHSS-2型酸度度計(jì)是用玻璃璃電極作為測測量電極，

38、甘甘汞電極作為為參考電極，當(dāng)當(dāng)氫離子濃度度發(fā)生變化時(shí)時(shí)，玻璃電極極和甘汞電極極之間的電動(dòng)動(dòng)勢也隨著引引起變化，而而電勢變化符符合能斯特方方程式： RT E=EEo-2.30026-pH F式中 E產(chǎn)產(chǎn)生的電極電電位 T絕對溫度 EEo零電位 F法拉第常數(shù)數(shù) RR-氣體常數(shù)數(shù) pH表示被測溶溶液pH值和內(nèi)溶溶液pH值的的差值 PHSS-2型酸度度計(jì)是利用玻玻璃電極和甘甘汞電極對被被測溶液中不不同酸度產(chǎn)生生的直流電勢勢，輸入到一一臺(tái)用參量振振蕩深度負(fù)反反饋的直流放放大器，以達(dá)達(dá)到pH值指示的的目的。二、注意事項(xiàng) 1.應(yīng)應(yīng)注意玻璃電電極裝到電極極夾中時(shí)應(yīng)略略高于甘汞電電極，以免球球膜與試杯相相碰。 2.新新使用或久放放未用的玻璃璃電極在使用用前應(yīng)放在純純化水內(nèi)浸泡泡活化48小小時(shí)，平時(shí)也也最好浸泡在在水中，以便便下次使用時(shí)時(shí)能迅速地工工作。 3.將將甘汞電極的的頸端橡皮塞塞取下，檢查查飽和氯化鉀鉀溶液情況，溶溶液中應(yīng)有氯氯化鉀結(jié)晶析析出，以確保保溶液飽和，太太少應(yīng)予以添添加。使用前前應(yīng)把電極彎彎管下端橡皮皮套除去。 4.按按下電源按鍵鍵，接通電源源，按下pH按鍵，指指示燈亮后，一一般短時(shí)間測測量，只需預(yù)預(yù)熱數(shù)分鐘即