祖卡木顆粒劑的除雜工藝研究

1、祖卡木顆粒劑的除雜工藝研究【關(guān)鍵詞】祖卡木顆粒摘要：目的優(yōu)選出祖卡木顆粒劑的除雜工藝。方法以總黃酮、總蒽醌、甘草酸的保存率及固形物減少率為考察指標比擬不同除雜工藝超濾法、吸附澄清法、高速離心法、醇沉法及自然沉降法的效果。結(jié)果采用高速離心法進展除雜，有效成分保存最多。結(jié)論在比照的幾種除雜方法中，采用高速離心法有效成分保存最多，而且操作簡單，省時。關(guān)鍵詞：祖卡木顆粒劑；超濾法；吸附澄清法；高速離心法；醇沉法StudiesnthePurifiatinTehnlgyfZukauGranulesAbstrat:bjetiveTselettheptiupurifiedtehnlgyfZukaugranul

2、es.ethdsThepurifiatinnditinsereptiizedbyntentdeterinatinfttalflavnes，ttalanthraquinne，glyyrrhiziaidandtheyieldfdriedextratparingultrafiltratinethdithabsrbinglarifyingethd，ultraentrifugatinethdandalhlpreipitatinethd.ResultsAllfigurestreatedbyultraentrifugatinethderethehighestangthepurifiedtehnlgies.n

3、lusinTheultraentrifugatinethdisthebestbeausefhighntentpreserved，sipleperatinandsavingtie.Keyrds:ZukauGranules；Ultrafiltratinethd；Absrbinglarifyingethd；Ultraentrifugatinethd；Alhlpreipitatinethd祖卡木顆粒劑是由山萘、睡蓮花、大棗、大黃、甘草等藥材提取制成，具有調(diào)節(jié)異常氣質(zhì)、清熱、發(fā)汗、通竅之成效，用于感冒咳嗽、發(fā)熱無汗、咽喉腫痛、鼻塞流涕等病癥，療效顯著1。由于本品原工藝采用醇沉法除雜，需消耗大量乙醇和時間

4、，為降低本錢，需要尋找一個操作簡便、本錢孝省時的除雜方法，同時又能保證藥物療效。本研究比擬了超濾法、吸附澄清法、高速離心法、醇沉法、自然沉降法等幾種除雜方法的效果，優(yōu)選出了祖卡木顆粒劑最正確的除雜方法。1儀器與材料1.1儀器UF80實驗型膜別離(超濾)裝置，中空纖維膜組件(分子量截流值分別為1萬、3萬、5萬，膜材均為聚砜，天津膜天膜工程技術(shù))；GQ76高速管式別離機(上海市離心機械研究所)；島津L10ATvp高效液相色譜儀，SPD10Avp紫外可見檢測器，LASSvp6.0數(shù)據(jù)工作站(日本島津)；UV2501P紫外可見分光光度計(日本島津)；BS110S型電子天平(德國Sartrius)。1.

5、2材料藥材由新疆維吾爾藥業(yè)有限責任公司提供；蘆盯甘草酸單胺鹽、1，8二羥基蒽醌對照品均由中國藥品生物制品檢定所提供；殼聚糖由華東理工大學理學院華凱科技貿(mào)易公司提供；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1考察指標確實定2除雜目的是降低出膏率，即增加固形物減少率，并且最大程度地保存有效成分，所以將固形物減少率作為考察指標之一，權(quán)重系數(shù)定為0.1。因為本制劑為抗感冒制劑，處方中多數(shù)藥材都含有黃酮類成分，而黃酮類成分具有抗菌、抗病毒、抗炎等作用，故將其成分保存率作為考察指標，權(quán)重系數(shù)定為0.6；大黃為方中主藥之一，含蒽醌類衍生物，具有抗菌、抗病毒、抗炎作用，故將其成分保存率作為考察指標，

6、權(quán)重系數(shù)定為0.2；甘草中所含的甘草酸具有抗炎、鎮(zhèn)咳祛痰及免疫增強作用，故將其成分保存率作為考察指標，權(quán)重系數(shù)定為0.1。本研究用成分保存率來表示不同除雜工藝對總黃酮、總蒽醌、甘草酸含量的影響，計算公式如下：2.2考察指標的測定方法2.2.1總黃酮的測定方法3采用分光光度法測定總黃酮，即蘆丁對照品分別加5%亞硝酸鈉、10%硝酸鋁、4%氫氧化鈉溶液顯色，于510n波長處測定吸收值，得回歸方程為：(g)=0.01361+0.8936A，r=0.9998，在0.10451.0445g濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。精細量取一定量樣品溶液，同法操作，在510n處測定吸收值，代入回歸方程，計算含量。2.2.2

7、總蒽醌的測定方法4采用分光光度法測定總蒽醌，即1，8二羥基蒽醌對照品分別加0.5%醋酸鎂甲醇溶液顯色，于510n波長處測定吸收值，得回歸方程為：(g)=-5.8417+239.3144A，r=0.9981，在47.232283.392g濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。樣品溶液加0.5l濃鹽酸和30l氯仿，加熱回流1h，放冷，分取氯仿層，水層再用氯仿提取3次(20l/次)。合并氯仿層，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解，轉(zhuǎn)移至5l容量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度。取此樣品溶液同法操作，在510n處測定吸收值，代入回歸方程，計算含量。2.2.3甘草酸的測定方法5色譜條件：色譜柱為ShipakLDS柱4.6150，5；

8、流動相為乙腈2%乙酸溶液(4060)；流速1l/in；檢測波長254n；柱溫30。標準曲線制備：取甘草酸單胺鹽對照品約10g，精細稱定，置100l量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，精細量取一定體積用甲醇配成系列濃度溶液。精細汲取各溶液10l注入高效液相色譜儀，以甘草酸的峰面積A與甘草酸單胺鹽的濃度作直線回歸，得回歸方程為：(g/l)=-5.9524+1.397010-4A，r=0.9992，在13.52270.40g/l濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。供試品溶液制備及測定：精細量取一定量的樣品溶液置10l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置24h，離心，取上清液用0.45濾膜過濾。取續(xù)濾液10l注入高

9、效液相色譜儀，將測得的峰面積代入回歸方程，計算含量。陰性對照溶液的制備及測定：按處方比例，取除去甘草的其它藥味，制成模擬空白樣品。按前述方法操作，結(jié)果在甘草酸的出峰位置處無其它干擾。2.2.4出膏率及固形物減少率測定2精細量取一定體積的樣品溶液，置于已枯燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于真空枯燥箱中減壓枯燥至恒重，在枯燥器中冷卻30in，迅速稱重，計算出膏率及固形物減少率。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3除雜工藝條件挑選2.3.1提取液(原液)制備按處方比例稱取薄荷、洋甘菊、山奈，參加10倍量水，蒸餾法提取揮發(fā)油6h，蒸餾后的水溶液濾過，備用；其余甘草等七味，加14倍量水，煎煮3次，1h/次，合并煎

10、液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至一定體積，即得。2.3.2超濾法超濾是根據(jù)體系中分子大小和形狀，通過膜孔的篩分作用，在分子程度上進展別離，起到別離、純化、濃縮或脫鹽作用。影響超濾的主要因素有分子量截流值和超濾體積6，7，實驗采用單因素考察法對這兩個因素進展研究。分子量截流值考察：量取一定體積的提取液，倒入儲液罐中，連接超濾器進展超濾?？刂埔欢ǖ膲毫Γ脸瑸V液的體積是原體積的1.5倍時，停頓超濾。測定濾液中的各指標，計算綜合評分。結(jié)果見表1。表1分子量截流值考察分子量截流值略由表1可以看出，經(jīng)不同分子量截流值的膜超濾后的濾液，其固形物減少率差異不大，但是5萬分子量截流值的膜可以保存更多的有

11、效成分，故采用5萬分子量截流值的膜進展超濾體積倍數(shù)考察。超濾體積倍數(shù)考察：用5萬分子量截流值的膜進展超濾?？刂埔欢ǖ膲毫?，至規(guī)定的超濾體積倍數(shù)，停頓超濾。測定濾液中的各指標，計算綜合評分。結(jié)果見表2。由表2可以看出，雖然3倍超濾體積可以保存更多的有效成分，但是需處理的液體量太大，使后續(xù)的濃縮枯燥過程變得很困難，故在實際消費中不實用。表2超濾體積倍數(shù)考察超濾體積略2.3.3吸附澄清法近年來出現(xiàn)的吸附澄清工藝因其使用簡便、本錢低、有效成分損失少而越來越受到人們的重視。甲殼素類澄清劑資源豐富、制備簡單、本錢低、應用方便，而且對人體無毒，體內(nèi)可生物降解。選用殼聚糖對提取液進展吸附澄清處理，影響吸附澄清

12、效果的主要因素有殼聚糖的參加量和藥液濃度8，實驗采用單因素考察法對這兩個因素進展研究。殼聚糖用量考察：稱取一定量的殼聚糖，用1%醋酸溶液配成1%的殼聚糖溶液。量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至12(藥材重量:濃縮液體積，單位為g/l)，水浴加熱至80，參加規(guī)定量的殼聚糖溶液，快速攪拌10in，靜置24h，觀察澄清效果并測定各指標。結(jié)果澄清效果都不明顯，溶液均不澄清。詳細數(shù)據(jù)見表3。表3殼聚糖用量考察殼聚糖用量略由表3可以看出，不同殼聚糖用量對出膏率影響不大；在5%時可以保存更多的有效成分，應選擇5%的用量進展藥液濃度考察。藥液濃度考察：量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至規(guī)定量，水浴加熱至8

13、0，參加5%的殼聚糖溶液，快速攪拌10in，靜置24h，觀察澄清效果并測定各指標。結(jié)果澄清效果都不明顯，溶液均不澄清。詳細數(shù)據(jù)見表4。表4藥液濃度考察藥液濃度略表4可以看出，不同的藥液濃度出膏率變化不大，在16時可以保存更多的有效成分，此藥液濃度較合適殼聚糖的澄清處理。2.3.4沉降法自然沉降法：量取一定體積的提取液置500l量筒中，靜置48h，取上清液測定各指標。結(jié)果見表5。表5沉降法考察結(jié)果處理方法略高速離心法：量取一定體積的提取液，經(jīng)高速管式別離機進展高速離心，轉(zhuǎn)速為20000r/in?？疾煲蛩貫殡x心次數(shù)，結(jié)果見表5。由表5可以看出，自然沉降法和高速離心法的出膏率特別高，但是可以保存更多

14、的有效成分，尤其是高速離心法對于總黃酮、總蒽醌和甘草酸的損失量很校2.3.5醇沉法影響醇沉效果的主要因素有醇沉濃度和藥液濃度2，本實驗采用單因素考察法對這兩個因素進展研究。醇沉濃度的考察：量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至12(g/l)，參加規(guī)定量的乙醇，使醇沉濃度分別為40%，50%，60%，70%，80%，靜置24h，濾過，濾液濃縮至一定體積，測定各指標。結(jié)果見表6。表6醇沉濃度考察醇沉濃度略由表6可以看出，醇沉濃度在70%時可以保存較多的有效成分，應選擇70%的醇沉濃度進展藥液濃度考察。藥液濃度考察：量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至規(guī)定量，參加一定量乙醇，使醇沉濃度為70%，靜置2

15、4h，濾過，濾液濃縮至一定體積，測定各指標。結(jié)果見表7。表7藥液濃度考察藥液濃度略由表7可以看出，藥液濃度在12與13時都可以較大程度地降低出膏率，并且保存較多的有效成分。3結(jié)果分析與討論將各種除雜方法中優(yōu)選出的工藝條件對各指標的影響綜合列表。見表8。表8優(yōu)選出的各除雜工藝條件對各指標的影響略超濾法制備的溶液非常澄清，特別適用于制備注射液和口服液，由于本制劑為固體制劑，超濾出的藥液體積很大，使后續(xù)的濃縮枯燥過程變得很困難，在實際消費中不實用；而且出膏率也較高，有效成分損失較大，其綜合評分最低，這可能是由于本研究所用膜的材質(zhì)聚砜不適用于這幾類成分。吸附澄清法制備的溶液不澄清，有效成分損失較小，出

16、膏率也較高，綜合評分處于第二位，且操作不如高速離心法簡單。高速離心法制備的溶液不澄清，出膏率很高，有效成分損失很小，是保存有效成分的最好方法，綜合評分最高，而且操作簡單，省時。自然沉降法與高速離心法相比，出膏率一樣，但有效成分保存率稍差一些，消耗時間較長，假設工廠內(nèi)溫度較高，藥液容易長霉。醇沉法的出膏率低，可以有效降低劑量，但是有效成分的保存率比高速離心法、吸附澄清法低很多；與其它除雜方法相比，醇沉的本錢較高，需要用乙醇，還要回收乙醇，工序復雜。綜上所述，采用高速離心法進展除雜，有效成分保存最多，而且操作簡單，省時，所以本研究將除雜方法定為高速離心法。參考文獻：1帕麗，茹克婭.祖卡木顆粒治療上呼吸道感染50例的臨床觀察J.中國民族民間醫(yī)藥雜志，2000，45：205，248.2謝秀瓊.中藥新制劑開發(fā)與應用(第2版).北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：124.3韓瑩，張紅星.康壽降脂片的工藝研究J.中成藥，1998，20(7)：5.4巴根那，包寶柱，白玉霞，等.蒙藥方劑順氣湯配伍變化對總蒽醌含量的