TCR的研究分析報告

1、word 專業(yè)整理TCR 的研究進展一、 概述1、什么是腫瘤？腫瘤（Tumor）是機體在各種致癌因素作用下，局部組織的某一個細(xì)胞在基因水平上失去對其生長的正常調(diào)控，導(dǎo)致其克隆性異常增生而形成的新生物。一般認(rèn)為，腫瘤細(xì)胞是單克隆性的，即一個腫瘤中的所有瘤細(xì)胞均是一個突變的細(xì)胞的后代。一般將腫瘤分為良性和惡性兩大類。所有的惡性腫瘤總稱為癌癥（cancer）。2、治療腫瘤的常規(guī)方法縱觀傳統(tǒng)治療惡性腫瘤方法，腫瘤外科學(xué)、腫瘤放射學(xué)、腫瘤化學(xué)是現(xiàn)代腫瘤的三大支柱。三種手段各有千秋。外科手術(shù)和放射都為局部方法，因為以往外科學(xué)家和放射學(xué)家對腫瘤的概念及結(jié)構(gòu)的認(rèn)識極為相似，兩者都認(rèn)為惡性腫瘤發(fā)生在局部，侵犯周

2、圍組織，經(jīng)淋巴管、血管或通過自然腔隙轉(zhuǎn)移，它的重點是原發(fā)病灶、局部侵犯和區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。這兩種，對大多數(shù)早、中期腫瘤是最有效的手段。但對中、晚期惡性腫瘤而言，往往因局部不徹底，殘留病灶的復(fù)發(fā)及遠地轉(zhuǎn)移而斃命。當(dāng)然手術(shù)和放療在技術(shù)和措施上有較大差異，手術(shù)更能將相對靜止細(xì)胞及對放療不敏感的腫瘤，有根治的可能，但受細(xì)胞的缺氧程度、腫瘤類型與細(xì)胞修復(fù)等的因素的影響，對腫瘤局部的控制不如外科手術(shù)，但對因解剖部位腫瘤侵犯較為廣泛的，特別是臨近臨近中要結(jié)構(gòu)手術(shù)切除困難及亞臨床灶的存在，放療有更大的適應(yīng)癥及靈活性。雖然手術(shù)與放療控制局部腫瘤有效，但對大多數(shù)惡性腫瘤而言，一開始就應(yīng)看作是全身性疾病，大多數(shù)需要與

3、化療結(jié)合。腫瘤化療是一個發(fā)展迅速的領(lǐng)域。目前單用化療即可以至于某些腫瘤如小二急淋等外，許多惡性腫瘤幾乎必需有化療參與才能治愈；對中期惡性腫瘤的術(shù)前、術(shù)中化療、術(shù)后輔助化療；對化療有一定敏感性的腫瘤放療增敏；手術(shù)、放療后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移癌的姑息等應(yīng)用日漸廣泛。但盡管新藥不斷問世，化療方法不斷進步，但對大多數(shù)實體惡性腫瘤而言，因腫瘤對化療藥物的多藥耐藥、腫瘤的異質(zhì)性、缺氧細(xì)胞的不敏感性等，都很難達到根治的效果。3、現(xiàn)代治療腫瘤的新發(fā)現(xiàn)80 年代的開始的生物，不斷推出新療法，如過繼性免疫療法，細(xì)胞因子法，基因疫苗法等等。其中，過繼細(xì)胞免疫治療(ACT)在血液系統(tǒng)疾病的臨床應(yīng)用已獲得廣泛認(rèn)可，尤其在目前疫苗免

4、疫治療還存在著不能有效一直微小殘留腫瘤生長等多種因素而限制了其臨床應(yīng)用的前提下，ACT 在實體腫瘤治療中的應(yīng)用研究也引起了人們的普遍關(guān)注。ACT 可通過體外擴增篩選出高活性的免疫效應(yīng)細(xì)胞，將其轉(zhuǎn)入宿主體內(nèi)并建立長期的特異性抗腫瘤免疫效應(yīng)，具有良好的應(yīng)用前景，成為今年來腫瘤免疫治療中十分活躍的研究領(lǐng)域。圖表 1：腫瘤各種療法的對比圖學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理二、 過繼細(xì)胞免疫治療（ACT）圖表 2：腫瘤生物治療的發(fā)展史在發(fā)展的前期，腫瘤過繼免疫療法是將自身或異體的抗腫瘤效應(yīng)細(xì)胞的前體細(xì)胞，在體外采用 IL-2、抗 CD3 單抗，特異性多肽等激活劑進行誘導(dǎo)、激活和擴增，然后轉(zhuǎn)輸給腫瘤患者

5、，提高患者抗腫瘤免疫力，以達到治療和預(yù)防復(fù)發(fā)的目的。圖表 3：腫瘤過繼免疫療法的圖解說明學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理細(xì)胞免疫治療的技術(shù)已經(jīng)發(fā)展至第三代，第一代是 CIK 自(體細(xì)胞免疫療法)，第二代是 CA R -T嵌合(抗原受體 T 細(xì)胞免疫療法)，第三代是 T C R -T (特異性 T 細(xì)胞受體免疫療法)。1、CAR-TCAR-T 療法的核心機制是通過特異性地識別腫瘤相關(guān)抗原，使效應(yīng) T 細(xì)胞的靶向性、殺傷活性和持久性較常規(guī)應(yīng)用的免疫細(xì)胞大幅提高，從而打破宿主免疫耐受狀態(tài)，克服免疫逃逸，最終殺滅腫瘤細(xì)胞。CAR 結(jié)構(gòu)自 1989 年起，不斷改進，目前為止已發(fā)展到第 4 代。第 1

6、 代 CAR 信號肽只有 TCR/CD3鏈或免疫球蛋白 Fc 受體 FcRI鏈單一信號分子，雖能識別靶抗原并靶向激活 T 細(xì)胞，但由于缺乏協(xié)同刺激分子不能充分激活 T 細(xì)胞，而且活化的 T 細(xì)胞在體內(nèi)存在時間短。學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理2 代 CAR 信號肽添加了一個協(xié)同刺激分子，能夠更好的為 CAR-T 細(xì)胞提供活化信號，這樣 CAR 識別腫瘤細(xì)胞后能夠同時活化協(xié)同刺激分子和胞內(nèi)信號，實現(xiàn)雙重活化，能明顯提高 T 細(xì)胞增殖分泌能力和抗腫瘤效應(yīng)。3 代 CAR 信號肽區(qū)整合 2 個以上的協(xié)同刺激分子，可使 T 細(xì)胞持續(xù)活化增殖，細(xì)胞因子持續(xù)分泌，增強殺傷腫瘤細(xì)胞作用。4 代 CAR

7、 除了嵌合抗原受體基因外，增加了一個或多個可以編碼 CAR 及其啟動子的載體，該載體可通過某些細(xì)胞因子如 IL-2 成功激活 CAR 的信號通路。圖表 4：CAR-T 免疫療法的圖解說明2、TCR-T與 CAR-T 療法不同，TCR-T 的優(yōu)勢在于增強或重建患者的抗腫瘤免疫的同時副作用較少。TCR-T 的核心機制是篩選獲得了反應(yīng)性 T 細(xì)胞克隆，繼而見到了可特異性識別腫瘤抗原的 T 細(xì)胞受體基因，再將編碼腫瘤特異性 TCR 的基因?qū)氤墒?T 細(xì)胞，獲得的 TCR 基因修飾 T 細(xì)胞可在體外特異性識別抗原陽性腫瘤細(xì)胞，并在回輸患者體內(nèi)候建立抗腫瘤免疫。它也包含 3 大方向：a、通過腫瘤特異性

8、TCR 轉(zhuǎn)染 T 細(xì)胞賦予其腫瘤識別功能：通過對癌癥特異性的基因賦予 T 細(xì)胞抗原識別特異性，使其有效識別殺傷腫瘤細(xì)胞。b、腫瘤特異性 TCR 基因轉(zhuǎn)染 T 細(xì)胞活化誘導(dǎo)記憶性 T 細(xì)胞分化：研究腫瘤特異性 TCR 基因轉(zhuǎn)染 T 細(xì)胞被腫瘤抗原充分激活后，記憶性 T 細(xì)胞的分化情況，并明確其表型和腫瘤反應(yīng)性，為進一步獲得 TCR 基因轉(zhuǎn)染記憶性 T 細(xì)胞奠定基礎(chǔ)。c、腫瘤特異性 TCR 基因轉(zhuǎn)染純化候中樞型記憶 T 細(xì)胞（Tcm）：由于記憶性 T 細(xì)胞的抗腫瘤免疫能力和體內(nèi)生存能力都強于混合成分的 CD8+T 細(xì)胞。而 T 細(xì)胞的內(nèi)在性質(zhì)決定了其回輸體內(nèi)后的生存能力和長期免疫功能。學(xué)習(xí)資料 整

9、理分享word 專業(yè)整理3、源于 IPSc 的新“T 細(xì)胞”療法IPSc 細(xì)胞技術(shù)應(yīng)用于一類免疫殺傷 T 細(xì)胞的建立 T-IPSc 細(xì)胞。這些 T-IPSc 細(xì)胞使用的是患者自身產(chǎn)生的 T 細(xì)胞和 T 細(xì)胞由其衍生的功能靶向特定病毒。自殺基因iCaspase9（IC9）引入 T-IPSc 細(xì)胞，然后再分化成殺手 T 細(xì)胞能夠攻擊只有特定的病毒。三、現(xiàn)今國內(nèi)外主流藥企在免疫治療的布局近幾年，癌癥的免疫療法研究成為癌癥研究領(lǐng)域的熱點，吸引了眾多投資者的目光，也獲得了制藥企業(yè)的關(guān)注，全球著名的跨國制藥企業(yè)如阿斯利康、輝瑞、葛蘭素史克等紛紛涉足癌癥免疫療法，與生物技術(shù)合作是主要的途徑。學(xué)習(xí)資料 整理分

10、享word 專業(yè)整理圖表 5：主要跨國制藥企業(yè)投資免疫療法免疫療法預(yù)知的優(yōu)勢使其成為跨國制藥巨頭的追逐對象，另外，率先布局空白市場獲得競爭優(yōu)勢也是各大制藥巨頭投資“不差錢”的主要原因。雖然相較于其他的藥品市場，抗腫瘤藥的市場競爭相對緩和，但隨著專利到期、仿制藥市場快速發(fā)展等的情況下，各制藥企業(yè)還是感覺到了一定的競爭壓力，尤其是對動輒單個藥品銷售幾十億美元的抗腫瘤藥物行業(yè)來說，根據(jù)前瞻產(chǎn)業(yè)研究院發(fā)布的2015-2020 年中國抗腫瘤藥物行業(yè)市場前瞻與投資戰(zhàn)略規(guī)劃分析報告顯示，2013 年全球腫瘤藥物銷售 TOP20 中，有 3 個產(chǎn)品的銷售規(guī)模超過 60 億美元，7 個產(chǎn)品的銷售規(guī)模在 25 億

11、元以上，18 個產(chǎn)品的銷售規(guī)模超過 10 億元?？梢妼τ诳鼓[瘤藥物生產(chǎn)企業(yè)來說，時間即是金錢。學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理圖表 6：2013 年全球腫瘤藥 TOP20（單位：億美元）學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理圖表 7：國內(nèi)細(xì)胞治療布局對于未來企業(yè)的競爭趨勢，前瞻產(chǎn)業(yè)研究院認(rèn)為，未來全球抗腫瘤藥物行業(yè)市場競爭會加劇，但寡頭壟斷的競爭格局不會發(fā)生太大的變化。隨著腫瘤疾病越來越成為威脅全球健康的一大殺手，各主要的制藥企業(yè)均看好腫瘤藥物市場前景，在腫瘤藥物研發(fā)投入上也毫不吝惜，從腫瘤藥物研發(fā)投入占到新藥研發(fā) 40%-50%的比例即可看出。隨著越來越多的企業(yè)加入市場爭奪中，必將帶來市場

12、競爭的加劇，但是，按照目前各主要行業(yè)巨頭的投入和后備產(chǎn)品儲備等情況來看，短期內(nèi)，羅氏、諾華、賽諾菲、輝瑞等行業(yè)巨頭的壟斷地位不會受到大的動搖。國外腫瘤免疫治療產(chǎn)業(yè)以免疫治療藥物為主，而我國腫瘤免疫治療產(chǎn)業(yè)主要包括三個部分，免疫細(xì)胞存儲、腫瘤免疫治療藥物、細(xì)胞免疫療法，其中以細(xì)胞免疫療法為主。免疫系統(tǒng)是人體自身的醫(yī)生，而腫瘤免疫治療被認(rèn)為是唯一有可能徹底治愈癌癥的方法，目前腫瘤免疫治療多數(shù)被用于晚期癌癥患者，但將來可能會像化療一樣，成為癌癥治療的一線方法。預(yù)計到 2025 年有 100-150 億美元的市場只是個開始，未來 10 年 60%的癌癥病人將采用免疫治療，在美國達 350 億美元。就國

13、內(nèi)而言，專家估計三年內(nèi)將達到幾百億的市場規(guī)模。國內(nèi)能夠開展腫瘤免疫的醫(yī)療機構(gòu)及潛在對象包括：1）已經(jīng)開展業(yè)務(wù)的 500 多家三甲醫(yī)院，現(xiàn)有技術(shù)和管理不成熟，新技術(shù)代替可能性較大；2）尚未開展細(xì)胞治療的 500 多家三甲醫(yī)院，其中大部分可以推廣；3）有條件的三乙、二甲等醫(yī)療機構(gòu)；4）體檢中心及高端會所，不屬于醫(yī)療行為的亞健康人群保健，利潤空間更大。如按三甲醫(yī)院，一家醫(yī)院每月收 30 個病人、每個病人治療 3 個療程、3 萬/療程計算（目前市場的評價情況和常規(guī)收費），單三甲醫(yī)院近幾年保守估計就能達到 300 多億的市場規(guī)模。學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理四、TCR 修飾的 T 細(xì)胞療法傳統(tǒng)的

14、特異性過繼免疫治療主要通過手術(shù)獲得患者新鮮腫瘤組織，分離其中的腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞單克隆擴大培養(yǎng)而得到的，或者通過自體和異基因抗原體外誘導(dǎo)患者自身外周血、淋巴結(jié)或脾臟中的淋巴細(xì)胞生成。但由于目前手段獲取特異性 t 細(xì)胞的效率太低，操作過于復(fù)雜，擴增難、時間長且有限，因此往往達不到預(yù)期治療效果。T 細(xì)胞受體(T cell receptor，TCR)是 T 細(xì)胞表面特異性識別抗原和介導(dǎo)免疫應(yīng)答的效應(yīng)分子，是人類基因組中多態(tài)性最高的區(qū)域之一，決定著人的免疫系統(tǒng)如何適應(yīng)環(huán)境的變化。近十年來，有學(xué)者相繼分離到抗原特異 TCR 基因并將其轉(zhuǎn)導(dǎo)至初始 T 細(xì)胞中，使該 T 細(xì)胞表達外源 TCR 并獲得特異性識

15、別抗原的能力，能夠識別并殺傷攜帶相應(yīng)腫瘤抗原的惡性細(xì)胞，通過這一方法，可短期內(nèi)獲得大量抗原特異性 T 細(xì)胞，使得 T 細(xì)胞過繼性免疫治療有了新途徑。 T 細(xì)胞受體庫的多樣性(包括基因重組以及選擇性表達)直接反映了機體免疫應(yīng)答的狀態(tài)。TCR 可分為 TCR/和 TCR/兩種類型, 外周血 T 細(xì)胞主要為 TCR/的 T 細(xì)胞,是介導(dǎo)機體特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)的主要細(xì)胞。TCR基因由可變區(qū)(V)、多變區(qū)(D)、結(jié)合區(qū)(J)和恒定區(qū)(C)四部分基因片段組成，形成互補決定區(qū)(complementarities determiningregion,CDR)和間隔的 4 個骨架區(qū)(frameworkregio

16、n,FR)。3在 T 細(xì)胞發(fā)育過程中 CDR1，2 和 FR 區(qū)域相對保守，CDR3 區(qū)由 V、D 和 J 進行重排而形成具有功能的 TCR 編碼基因(T 細(xì)胞克隆)，由于 V (65-100種)、D (2種)、J (13種)基因片段本身具有多樣性，此外，由于在重排的過程中，在 VD 及 D-J 的連接區(qū)經(jīng)常有非模板的核苷酸的隨機插入或刪除，進一步增加了 CDR3 區(qū)的多樣性(連接形成的多樣性約為 2 1011)。這種基因片段連接的不準(zhǔn)確性使 TCR 的表達呈多樣性, 以識別各種不同的抗原。正常個體在無抗原刺激時，TCR 基因重排是隨機的，因此正常人外周 T 細(xì)胞呈多家族、多克隆性特點。不同抗

17、原(腫瘤、疫苗、病院微生物或者移植物等)刺激后，TCR V區(qū)基因可對該抗原產(chǎn)生特異性識別，并使帶有這類基因的T 細(xì)胞得到優(yōu)勢擴增，可用于分析不同TCR V亞家族T 細(xì)胞的表達和利用。4通過 TCR 技術(shù)來實現(xiàn) T 細(xì)胞的過繼免疫治療總的來說可以通過以下兩種方法：1.利用分離得出的抗原特異性 TCR 基因，通過構(gòu)建載體轉(zhuǎn)染一般的 T 細(xì)胞，再擴增回輸。2.利用分離得出的抗原特異性 TCR 基因，構(gòu)建一個小分子代替 TCR 鏈接腫瘤細(xì)胞與 T 細(xì)胞。而要實現(xiàn)這些技術(shù)就要注意以下幾點：1.T 抗原表位的選擇，T 細(xì)胞表位是指抗原經(jīng)過抗原提呈細(xì)胞加工后，由 MHC 分子提呈給 TCR 的短肽。選擇合適

18、的 T 細(xì)胞表位可以在增加轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞特異性識別腫瘤抗原能力的同時減少移植物抗宿主病。根據(jù)目前對腫瘤抗原的分類，C-T 抗原、基因突變所致的抗原由于在正常組織仲不表達被認(rèn)為是 T 細(xì)胞抗原表位的最佳選擇。目前被鑒定且應(yīng)用于 TCR 治療的腫瘤抗原主要有：MART-1、gp-100、CEA、NY-ESO1、MAGE-A3 等。體外實驗已經(jīng)證明，聯(lián)合兩個及兩個以上的 T 細(xì)胞表位進行 TCR 基因修飾的治療比單個表位會獲得更好的抗腫瘤能力，學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理且同時轉(zhuǎn)導(dǎo) MHC-1、MHC-2 限制性 TCR 分子可能提高臨床治療效果。2. TCR 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng) 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中，最關(guān)鍵

19、的問題是選擇合適的載體系統(tǒng)來攜帶目的基因，使其在靶細(xì)胞中得以穩(wěn)定高效地表達。目前常用的載體系統(tǒng)包括病毒載體系統(tǒng)和非病毒載體系統(tǒng)兩大類。理想的病毒載體系統(tǒng)應(yīng)有較高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，同時出于安全考慮，應(yīng)避免含有多個插入位點以防外源基因整合人宿主細(xì)胞染色體中。病毒載體系統(tǒng)目前常用的病毒載體包括逆轉(zhuǎn)錄病毒載體和慢病毒載體。逆轉(zhuǎn)錄病毒載體因其宿主細(xì)胞廣泛，能高效感染分裂期細(xì)胞，可同時感染大量細(xì)胞并整合到基因組中長期穩(wěn)定表達而在基因轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中經(jīng)常被采用，至今它的應(yīng)用已經(jīng)超過了 20 年。慢病毒載體主要感染非分裂相細(xì)胞(比如造血干細(xì)胞)、低分化 T 細(xì)胞或初始 T 細(xì)胞。與逆轉(zhuǎn)錄病毒相比，慢病毒載體有更大的基因容

20、量，轉(zhuǎn)導(dǎo)造血干細(xì)胞時插入突變率低，也不易導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄沉默。慢病毒載體本身攜帶有啟動子，而不需要修飾細(xì)胞上的長末端重復(fù)序列(10ng terminal repeat，LTR)，故提高了基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的安全性。非病毒載體系統(tǒng)轉(zhuǎn)座子是近幾年來新興的一種非病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，Sleeping Beauty與 PiggyBac 作為最早被用于基因轉(zhuǎn)導(dǎo)研究的兩個轉(zhuǎn)座子，因其具有一定的隨機整合特性與基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率，轉(zhuǎn)導(dǎo)技術(shù)要求低，轉(zhuǎn)座子的獲得方便快捷等，為后期應(yīng)用于臨床提供了潛在可能性歸。RNA 電穿孔可產(chǎn)生與病毒載體同等的轉(zhuǎn)染效率，但該方法技術(shù)要求高，RNA 的半衰期短，易被環(huán)境中的 RNA 酶降解等，限制了它在臨床上

21、的應(yīng)用。3. 提高外源性 TCR 基因表達的方法TCR 的功能取決于轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 的親和力及其在修飾 T 細(xì)胞表面的表達水平。高親和力 TCR 可識別低濃度的抗原并傳遞活化信號，增加抗原識別的敏感性與特異性。采用以下幾種方法可獲得高親和力的 TCR：(1)抗原肽刺激同種異體反應(yīng)性 T 細(xì)胞產(chǎn)生肽特異 TCR；(2)抗原肽免疫 HLA 轉(zhuǎn)基因鼠得到鼠源性 TCR；(3)體外針對互補決定區(qū) 3（CDR3)對 TCR 進行突變，使得突變后的 TCR 具有更高的抗原肽MHC 結(jié)合特性；(4)使用密碼子優(yōu)化 TCR；(5)清除 TCR 、鏈 c 區(qū)中的 N-糖基化位點。學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整

22、理另外文獻報道，T 細(xì)胞表面轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 的密度降低時，細(xì)胞被抗原刺激增殖的能力下降，IFN-、IL-2、IL-4 的分泌量均減少，故推測，轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 在細(xì)胞表面的表達水平?jīng)Q定了被修飾細(xì)胞的功能活性，足夠數(shù)量的轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 是 T 細(xì)胞發(fā)揮免疫效應(yīng)的前提。但是在 TCR 基因轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中，內(nèi)源性與外源性 TCR、鏈之間的配對形成的雜合 TCR 將會稀釋轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 在 T 細(xì)胞表面的表達，導(dǎo)致細(xì)胞表面轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 的表達量下降、細(xì)胞活性降低。且此雜合 TCR 因未經(jīng)歷過胸腺陰性選擇，可能存在增加自身免疫的風(fēng)險。為了減少內(nèi)外源性 TCR、鏈之間的錯配并提高轉(zhuǎn)導(dǎo) TCR 在細(xì)胞表面的表達水平，有研

23、究者嘗試：(1)用鼠 TCR、鏈 c 區(qū)替換人 c 區(qū)。有文獻報道鼠源化 c 區(qū)更易表達于人 T 細(xì)胞表面，使細(xì)胞表面 TCR 表達水平增多，進而介導(dǎo)細(xì)胞因子分泌功能與殺傷活性的增強，更重要的是，鼠源化 TCR 更傾向于自身配對從而減少與內(nèi)源性 TCR 配對的幾率。(2)在 TCR、鏈之間引入半胱氨酸，由此形成的第 2 個鏈內(nèi)二硫鍵可介導(dǎo)外源性 TCR、鏈配對，進而增強外源 TCR 表面表達水平與功能口。(3)將 TCR、鏈 C 區(qū)下游與 CD3分子融合，促進外源性 TCR 、鏈配對并利于 TCR 信號傳導(dǎo)。(4)將人 TCR、鏈 C 區(qū)上最關(guān)鍵的 9 個氨基酸替換為鼠源性氨基酸，不僅極大地降

24、低全鼠 C 區(qū)替換帶來的免疫原性，同時也可提高外源 TCR 的細(xì)胞表面表達水平和功能。(5)對 TCR、鏈 C 區(qū)關(guān)鍵位點的氨基酸進行突變，突變后的 TCR 可優(yōu)先配對。(6)將 TCR、鏈基因轉(zhuǎn)導(dǎo)至T 細(xì)胞中。(7)采用小干擾 RNA(siRNA)下凋內(nèi)源性 TCR 的表達。(8)使用小核糖核酸病毒核糖體跳過肽鏈接 TCR、鏈，以實現(xiàn)外源性、鏈的等量表達，減少因、鏈表達不平衡引起的錯配。學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理上圖為 immunocore 公司基于 TCR 重新設(shè)計的小分子；這也是想學(xué)團隊的李懿教授所設(shè)想的。五、T-IPSc 作為一種新的 T 細(xì)胞療法的優(yōu)勢誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（IPS

25、c）的發(fā)現(xiàn)，在再生醫(yī)學(xué)療法創(chuàng)造了充滿希望的新途徑。然而，未分化的 IPSc 的致瘤性是臨床轉(zhuǎn)化的一個主要的安全問題。為了解決這個問題，我們通過引入誘導(dǎo)胱天蛋白酶-9（IC9）插入的 iPSC 證實自殺基因療法的功效。IC9 的激活協(xié)同的二聚（CID）的特定化學(xué)誘導(dǎo)啟動胱天蛋白酶級聯(lián)消除的 iPSC 和腫瘤源于 iPS 細(xì)胞。我們介紹的這款 IC9 / CID 保障體系到 IPSC 衍生，重新煥發(fā)活力的細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞（rejCTL）的治療模式。實驗證實，我們可以生成 iPS 細(xì)胞表達高水平 IC9 而不干擾抗原特異性殺傷活性拒絕。 rejCTLs 表達 IC9 在體內(nèi)發(fā)揮的抗腫瘤作用。該系統(tǒng)高效，安全地誘導(dǎo)這些 rejCTLs 凋亡。這些結(jié)果聯(lián)合起來，表明 IC9 / CID保障體系是一個行之有效的手段為未來的 iPSC 介導(dǎo)的方法來指導(dǎo)臨床合理用藥。學(xué)習(xí)資料 整理分享word 專業(yè)整理圖表 8：rejT-IC9-CTL 產(chǎn)生的原理圖我們的研究突出 IC9 保障體系的潛在臨床意義。最近的研究引入自殺基為基礎(chǔ)的保障系統(tǒng)導(dǎo)入小鼠或恒河猴的 iPSCs 報告畸胎瘤形成被顯著延遲或僅抑制當(dāng)治療注射 iPSC 之前或之后不久。在我們的研