粗葉懸鉤子根部多糖含量測定

1、粗葉懸鉤子根部多糖含量測定 周建衡，李天驕，洪振豐，胡娟【摘要】目的建立粗葉懸鉤子根部多糖的含量測定方法。方法利用苯酚-硫酸法顯色，標(biāo)準(zhǔn)曲線在490n處分光光度法測定粗葉懸鉤子根部多糖含量。結(jié)果回歸方程：Y=0.8325X+0.0223，r=0.9998，測得粗葉懸鉤子根多糖含量9.473%，平均回收率為99.69%，RSD=0.56%n=6。結(jié)論該方法簡便，精細(xì)度及重現(xiàn)性均較好，可用于粗葉懸鉤子多糖的提取和含量測定?！娟P(guān)鍵詞】粗葉懸鉤子；多糖；苯酚-硫酸法;分光光度法Abstrat：bjetiveTstudytheptiuextratinpressfplysaharidesfrRubusal

2、eaefliusPir.ethdsThententfplysaharidsfrRubusaleaefliusPirasdeterinedbyspetrphtetryat490nResultsTheregressinequatinasY=0.8325+0.0223，r=0.9998TheperentfplysaharideinRubusaleaefliusPiras9.473%.Theaveragereveryrateas99.69%andRSDas0.56%(n=6)nlusinTheethdisprvedtbesiple，aurateandreliable，anditanbeusedtext

3、ratanddeterinetheplysaharidesfrRubusaleaefliusPir.Keyrds：RubusaleaefliusPir；Plysaharide；Deterinatin粗葉懸鉤子為雙子葉植物薔薇科植物，粗葉懸鉤子的根、葉均可入藥，具有活血化淤、清熱解毒之成效1，能清利濕熱，并且使?jié)駸醿?nèi)蘊(yùn)所致的淤毒去除。據(jù)廣州部隊(duì)編寫的?常用中草藥手冊?記載：“活血祛淤，清熱止血，治急慢性肝炎、肝脾腫大、行軍性血紅蛋白尿、乳腺炎、外傷出血、口腔炎。?廣西中草藥?中記載：“清熱，消腫，止血，散淤。在福建閩南安溪一帶廣泛應(yīng)用于各型肝炎的治療，有著良好的民間用藥基矗本文采用苯酚-硫酸法測

4、定粗葉懸鉤子根部多糖的含量，得到滿意的效果。1儀器與藥品2方法與結(jié)果2.1葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制精細(xì)稱取105枯燥至恒重的葡萄糖50.52g，用蒸餾水溶解并定容到100l即為0.5052g/l的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。2.4粗葉懸鉤子多糖的提取及精制2將粗葉懸鉤子根于ESP350型粉碎機(jī)中粉碎呈粉末，取粗葉懸鉤子粉50g置于1000l燒瓶中，加水固液比110微沸回流3次，1h/次，抽濾，合并提取液，蒸發(fā)至300l，參加無水乙醇使得醇濃度不低于70%,析出沉淀,過濾得析出物，加水溶解再次抽濾得液體，用Sevag法除去蛋白重復(fù)3次，加無水乙醇使醇濃度達(dá)80%以上,置冰箱中靜置過夜，傾去上清液得沉淀，加無水乙

5、醇攪拌后抽濾,得濾渣,濾渣用無水乙醇、丙酮洗滌屢次，沉淀枯燥得多糖純品。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.5換算因子測定準(zhǔn)確稱取65枯燥恒重的粗葉懸鉤子多糖20g，置100l容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，搖勻，作為多糖儲藏液。準(zhǔn)確量取多糖儲藏液0.10l，加水至1.00l，按測定標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測其吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。按下式計(jì)算換算因子：f=/D式中：為多糖重量(g)，為測試液中據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到的單糖濃度(gl-1)，D為多糖的稀釋因子，測得f=2.595(n=6)。2.6穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)取樣品溶液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液及精制多糖溶液各2.0l，照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法，自“加苯酚試劑6.0l起，依法測定

6、吸收度，并分別于0，5，10，15，20，25，30，35，40，50，60in測定，分析穩(wěn)定性。結(jié)果樣品溶液吸收度、標(biāo)準(zhǔn)品溶液吸收度、精制多糖溶液吸收度的RSD(%)分別為0.98，1.02，0.86，可知，樣品液至少在1h內(nèi)測定是穩(wěn)定可靠的。2.7精細(xì)度實(shí)驗(yàn)精細(xì)稱取粗葉懸鉤子多糖25g，按照樣品溶液制備和樣品含量測定項(xiàng)下方法操作，測定吸光度，連續(xù)測定6次，平均值0.634，RSD為0.37%，說明精細(xì)度良好。2.8重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)取粗葉懸鉤子多糖6份，按照樣品溶液制備方法，分別制備6份質(zhì)量濃度為0.1g/l的溶液，按照樣品溶液制備和樣品含量測定項(xiàng)下方法操作，測定吸光度值，平均值0.645，RSD

7、為1.66%，重現(xiàn)性良好。2.9樣品含量的測定精細(xì)稱取粗葉懸鉤子粉末25g，用80%乙醇浸泡過夜，再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h，抽濾，棄去濾液，殘?jiān)^續(xù)以蒸餾水回流提取2h，抽濾，濾液連同濾紙反復(fù)洗至250l容量瓶中，定容，搖勻即得樣品溶液。測定時(shí)，精細(xì)汲取樣品液0.20l，加水至1.00l，按測定標(biāo)準(zhǔn)曲線同樣方法測其吸光度值，按下式計(jì)算多糖含量(以粗多糖計(jì))：多糖含量=Df100/。式中：為樣品溶液的葡萄糖的濃度(gl-1)，D為樣品溶液的稀釋因子，f為換算因子，為樣品的重量(g)，測得結(jié)果為9.473%。結(jié)果見表1。表1樣品中多糖的含量略2.10回收率實(shí)驗(yàn)精細(xì)汲取樣品液0.2l(6份)再分別精細(xì)參加等量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，依樣品測定方法測定吸光度，計(jì)算回收率平均值為99.69%，RSD為0.56%。結(jié)果見表2。表2回收率實(shí)驗(yàn)略3討論本實(shí)驗(yàn)采用水提醇沉法提取粗葉懸鉤子多糖，運(yùn)用Sevage法除蛋白，純化后的多糖以苯酚-硫酸比色法測定糖含量，此方法所需儀器通用、藥品價(jià)格低廉，操作也方便，通過穩(wěn)定性、精細(xì)度、重現(xiàn)性、加樣