清潔工藝驗證檢查綜合手冊

1、36/36HYPERLINK / Validation of Cleaning Processes (7/93) 清潔工藝驗證清潔工藝驗證檢查指南注：此指南是 FDA 檢查官和其工作人員的參考資料。此文件不約束 FDA，也不給予任何人任何權(quán)利，特權(quán)，利益或豁免權(quán)。介紹自從 FDA 的各文件，包括化學原料藥檢查指南和生物技術(shù)檢查指南簡單地提出了清潔驗證那個話題之后，關(guān)于清潔工藝的驗證差不多引發(fā)了相當多的討論。這些官方的文件，都清晰地確定了關(guān)于清潔工藝需要被驗證的期望。通過討論那些已被認為可同意的（或者不可同意的）實際情況，此指南是為了建立檢查的連貫一致性。同時，必須意識到，與其他工藝驗證一樣，清

2、潔驗證的方法也不止一種。最后，所有過程驗證的檢查標準是，檢查其科學數(shù)據(jù)能否證明該系統(tǒng)始終如一地達到預(yù)期目的，結(jié)果穩(wěn)定地符合預(yù)先制定的標準。 本指南僅適用于設(shè)備的化學殘留物的清潔驗證。 背景1963 年 GMP 法規(guī)（133.4 節(jié)）要求如下“設(shè)備需要被維持在一個清潔、有序的狀態(tài)”。還有一個專門相似的關(guān)于設(shè)備清潔的章節(jié)是在 1978 年 GMP 法規(guī)（211.67 節(jié)）。同這些法規(guī)相比，F(xiàn)DA關(guān)于設(shè)備在使用前應(yīng)被清潔的要求并不是什么新要求。因此，關(guān)于設(shè)備清潔的總的原則是為了防止產(chǎn)品污染或摻雜其它物質(zhì)。從歷史事件看來，F(xiàn)DA檢查官發(fā)現(xiàn)了一些明顯的不衛(wèi)生是由于設(shè)備的清潔和維護不到位，或防塵操縱系統(tǒng)不

3、當。過去FDA 更多的關(guān)注于非青霉素類產(chǎn)品和青霉素類產(chǎn)品，或藥品與甾類產(chǎn)品和激素類產(chǎn)品之間的交叉污染問題。在過去的十年中，有大量的產(chǎn)品召回事件差不多上由于實際的或潛在的青霉素交叉污染。1988 年的召回消膽胺樹脂事件，使 FDA 關(guān)于潛在交叉污染的問題日益重視。那次召回的緣故是用于生產(chǎn)制劑的原料藥被農(nóng)業(yè)殺蟲劑生產(chǎn)中低劑量的中間體和降解物給污染了。造成這次交叉污染的緣故是由于重復(fù)使用了回收溶劑引起的。而回收溶劑被污染的緣故是由于對重復(fù)使用的溶劑桶缺乏操縱。這些桶之前是用于貯存殺蟲劑生產(chǎn)線產(chǎn)生的回收溶劑，之后又被重復(fù)地用于樹脂生產(chǎn)線使用的回收溶劑貯存。該公司關(guān)于這些溶劑桶缺乏有效的操縱，關(guān)于貯存的

4、溶劑缺少適當?shù)臋z測，關(guān)于溶劑桶的清潔過程也沒有進行驗證。一部分被殺蟲劑污染的原料藥被供給了在另一地址的廠進行最后的制劑生產(chǎn)，這就導(dǎo)致2翻譯：Cuckoo (cuckoo801002); 校對并解讀：Chank (chank2006) 注：個人學習、交流使用，不得用于商業(yè)目的。 了該廠的流化床干燥機的袋子被殺蟲劑污染了。轉(zhuǎn)而導(dǎo)致此廠生產(chǎn)的眾多批次產(chǎn)品被污染，盡管該廠并不生產(chǎn)殺蟲劑。1992 年，F(xiàn)DA對一家海外原料藥生產(chǎn)商發(fā)出了進口警告。該廠使用相同設(shè)備生產(chǎn)強效甾類產(chǎn)品和非甾類產(chǎn)品。因此公司是多品種原料藥生產(chǎn)廠家，F(xiàn)DA 認為潛在交叉污染的可能性專門大，對公眾健康造成了嚴峻的威脅。該公司只是在

5、FDA 檢查的近期才開展了清潔驗證工作，而 FDA 認為該清潔驗證工作是不當?shù)?。理由之一是，工廠僅查找沒有前一種物質(zhì)存在的證據(jù)。然而用薄層法檢測洗滌水后，找到了設(shè)備中還殘留了前一產(chǎn)品生產(chǎn)過程中反應(yīng)副產(chǎn)物和降解產(chǎn)物的殘留物。差不多要求FDA 期望公司建立書面的程序（SOPs）用于詳細描述設(shè)備各部件的清潔的過程。假如公司用同一程序進行相同產(chǎn)品不同批次之間的清洗，而使用不同程序進行轉(zhuǎn)產(chǎn)之間的清洗，公司的書面程序應(yīng)明確講明這些不同的情況。同樣，若水溶性殘留物與非水溶性殘留物的清洗方法不同，則公司的書面程序也應(yīng)講明兩種情況，并清晰地規(guī)定在何種情況下執(zhí)行哪個程序。關(guān)于化學原料藥生產(chǎn)中會產(chǎn)生柏油狀或粘膠狀殘

6、留物的生產(chǎn)工序，因為這些物質(zhì)不容易被清除，公司能夠決定使用專用設(shè)備。流化床干燥機的袋子，作為一種不容易被清洗的設(shè)備，也通常只被專用于某一特定產(chǎn)品的生產(chǎn)。關(guān)于清潔過程本身留下的殘留物（清潔劑，溶劑等），也必須被去除。FDA 期望公司建立書面的清潔工藝驗證通則。FDA 期望那個清潔工藝驗證通則規(guī)定，驗證執(zhí)行的負責人，批準驗證工作的負責人，接受標準，再驗證時刻。FDA 期望關(guān)于每一個生產(chǎn)系統(tǒng)或每一個設(shè)備，公司應(yīng)預(yù)先制訂具體的書面驗證方案，其中應(yīng)明確規(guī)定如取樣方法、分析方法（包括方法靈敏度）等方面的問題。FDA 期望公司依照方案進行驗證工作，并記錄歸檔驗證的結(jié)果。FDA 期望形成一個最終的驗證報告，報

7、告應(yīng)通過治理層的批準，并講明該清洗方法是否有效。數(shù)據(jù)應(yīng)該能夠支持如下結(jié)論，殘留物質(zhì)差不多被降低到一個“可同意的水平”。 清潔驗證的評估第一步是明確驗證目的。我們曾發(fā)覺有一些公司沒有建立驗證目的。如常見一些生產(chǎn)商，在清潔之后進行了大量的取樣和檢測程序，而沒有真正去評估各步清洗操作的有效性。在評估清潔工序時，有一系列的問題需要被關(guān)注。比如，到達哪個點/程度，一個設(shè)備或者系統(tǒng)確實是清潔了？是不是一定要用手擦洗？用手擦洗達到了什么效果，而只用一種溶劑清洗是達不到的？批和批之間或者產(chǎn)品和產(chǎn)品之間，人工清洗的差異有多大？這些問題的答案，關(guān)于檢查和評估清潔過程來講是特不重要的，因為檢查官必須要全面評估該過程

8、的有效性。而且這些問題的答案也有助于省去多余的步驟，能更有效地工作，從而為公司節(jié)約資源。 檢查每個設(shè)備有幾種清洗方法。理想的情況是一個設(shè)備或系統(tǒng)擁有一套清洗工藝。然而，這也取決于生產(chǎn)的品種，以及同一產(chǎn)品的不同批次之間（如大量生產(chǎn)）或者不同產(chǎn)品的轉(zhuǎn)產(chǎn)之間是否需要清洗。當清洗方法只用于同一產(chǎn)品的不同批次之間（或同一中間體的不同批次之間），公司僅需要建立“目視清潔”的標準。諸如此類的批與批之間的清潔工藝，不需要被驗證。 設(shè)備的設(shè)計檢查設(shè)備的設(shè)計，尤其是使用了半自動或全自動在場清洗系統(tǒng)的大型生產(chǎn)系統(tǒng)，需要重點關(guān)注。比如，應(yīng)使用沒有球閥的衛(wèi)生型管道系統(tǒng)。當使用了那些非衛(wèi)生型的球閥（這在原料藥工業(yè)中是普遍

9、的），清潔工序就變的更困難。若在現(xiàn)場檢查中發(fā)覺使用了上述類型的設(shè)備系統(tǒng)，執(zhí)行清潔程序的操作人員必須了解問題的所在，并已進行了關(guān)于系統(tǒng)和閥門清潔的專門培訓。檢查該操作人員是否了解系統(tǒng)，培訓的水平和清潔操作的經(jīng)驗。并檢查書面的已驗證過的清潔程序，判定系統(tǒng)是否差不多被適當?shù)拇_認和驗證過。關(guān)于大型系統(tǒng)，比如使用了專門長的轉(zhuǎn)移/輸送管道的，要檢查流程圖和管道圖紙從而確認需要清洗的閥門，和是否有書面清潔規(guī)程。 管道和閥門應(yīng)標記，以便操作人員識不。有時，閥門標識不當，不管在打印圖紙上和實物上，都會導(dǎo)致不正確的清潔操作。在清潔工序的相關(guān)文件中，必須檢查是否包含了關(guān)鍵因素；確認并操縱每次生產(chǎn)結(jié)束后至清潔開始的時

10、刻間隔。這關(guān)于局部用藥物，懸浮劑和原料藥的生產(chǎn)尤其重要的。因為殘留物干燥后，會直接阻礙清潔的效果。不管是否使用了在線清潔系統(tǒng)，都應(yīng)考慮設(shè)備清潔的微生物情況。這包括大量的預(yù)防性的措施，而不只是在染菌之后再除菌。應(yīng)有證明，常規(guī)清潔和設(shè)備保存可不能有微生物的生殖。比如，設(shè)備在保存之前應(yīng)該干燥，清潔后不同意有任何積水殘留其中。關(guān)于無菌工藝的設(shè)備，或者非無菌的但有助于微生物增長的產(chǎn)品，清潔之后還可能需滅菌或消毒。盡管滅菌或消毒程序已超出了本指南的范圍，但要注意的是，通過適當?shù)那鍧嵑驮O(shè)備保存來操縱微生物，是對接下來的滅菌/消毒工序能夠達到無菌水平的保證。從6無菌工藝應(yīng)操縱熱原的觀點來講，這一點也特不重要。

11、因為設(shè)備滅菌工藝不一定能夠取得顯著的滅活或去除熱原的效果。書面清洗程序程序和文件要檢查驗證后的清洗方法是否具體、詳細，檢查需要記錄的項目。我們曾見過許多通用性的 SOP，同時也見過其它使用批生產(chǎn)記錄或者記錄表格系統(tǒng)的，其要求對每一步操作做出專門的文件記錄。依照系統(tǒng)的復(fù)雜程度、清洗方法以及操作人員培訓程度和能力的不同，各種清洗工作或規(guī)程所需的文件數(shù)量也會有所不同。當需要進行更為復(fù)雜的清洗過程時，必須對關(guān)鍵的清洗工序做出記錄（如某些原料藥合成工序）。在這點上，應(yīng)有專門的設(shè)備記錄，包括清洗人員姓名、評估時刻。然而，對于相對簡單的清洗工作，僅記錄“全部清洗工作差不多被執(zhí)行”就足夠了。其他因素，諸如清洗

12、歷史、清洗后測出的殘留物水平、檢驗結(jié)果的可變性等有時也要記錄。例如，清洗之后的殘留物水平具可變性，而又認定該清洗方法是可同意的，則必須證明清洗過程和工人操作的有效性。必須對清洗方法做出適當?shù)脑u價，尤其是當認為工人操作有問題時，就要求有更為廣泛的文件（指導(dǎo)）和記錄，并進行更多的培訓。分析方法應(yīng)確定用于殘留物或污染物檢測的分析方法的專屬性和靈敏度。借助于先進的分析技術(shù)，清洗和生產(chǎn)過程中極少的殘留物或污染物也能夠被檢測出來。即使檢測不出污染物或殘留物水平，也并不能講明清洗之后不存在殘留污染物，而只講明樣品中沒有超過該分析方法靈敏度或檢驗限之外的污染物。公司應(yīng)對分析方法進行挑戰(zhàn)性實驗，即證明取樣方法能

13、夠從設(shè)備表面取回污染物，其收率是多少，如 50%, 90%等。依照取樣結(jié)果再做出結(jié)論是必須的。取樣技術(shù)不當也可能得出相反的結(jié)論（見下文）。 取樣可同意的通用取樣方法有兩種。最好是直接從設(shè)備表面取樣，另一種方法是取漂洗水樣。a. 表面直接取樣法檢查取樣器材的類型，以及其對檢測數(shù)據(jù)的阻礙，因為取樣器材可能會干擾檢測。例如，取樣拭子上的粘膠會干擾樣品的分析。因此，在驗證初期，必須確保使用適當?shù)娜咏橘|(zhì)和溶媒（用于從取樣介質(zhì)中提取樣品），同時方便使用。 直接取樣法的優(yōu)點在于：能夠?qū)ψ铍y清洗、能夠到達的表面清潔程度進行評價，從而建立單位面積上殘留物/污染物的同意水平。此外，還能夠取到“干的”或不溶性殘留

14、物樣品。 b. 漂洗液樣品漂洗液取樣法具有兩點優(yōu)勢：能夠?qū)^大表面進行取樣；能夠?qū)Φ竭_不到的系統(tǒng)或日常無法拆卸的部位進行取樣并做出評價。 其缺陷是：殘留物或污染物可能是不溶性或吸藏在設(shè)備中的。現(xiàn)在，可使用“臟點”類推法進行評價。關(guān)于“臟點”清洗的評估，特不是有干的殘留物的，不能只檢測漂洗水樣，而要檢查“臟點”，從而確定清洗是否潔凈。 當直接檢測漂洗水樣用于清洗方法驗證時，應(yīng)檢查是否直接檢測了漂洗水樣中的殘留物或污染物。如若僅檢測漂洗水樣的水質(zhì)情況（即使符合藥典檢測方法），而不測定其可能存在的污染物，這種做法是不能同意的。 常規(guī)生產(chǎn)的中控c. 日常生產(chǎn)的中間操縱監(jiān)測：一旦某清潔方法得到驗證之后，

15、日常監(jiān)測可使用間接檢測法，如電導(dǎo)率檢測。對于原料藥生產(chǎn)商來講，使用的反應(yīng)罐和離心機，大型設(shè)備之間的管道連接，只能對其漂洗液取樣。這種情況下，必須講明間接檢測法與設(shè)備狀況的相關(guān)性。驗證過程中，也應(yīng)有書面證明：用間接法檢測未清洗設(shè)備時，檢驗結(jié)果能夠證明該設(shè)備不能使用以及未清洗。即該檢測結(jié)果能夠得出不能夠同意當前設(shè)備狀況的結(jié)論。（反證法） 限度的建立關(guān)于清潔方法是否得到了驗證，F(xiàn)DA不打算建立統(tǒng)一的同意標準和方法。這也不切實際，因為在醫(yī)藥工業(yè)中，原料藥、制劑產(chǎn)品以及設(shè)備種類太多。公司應(yīng)依照自身對該藥品的了解建立合理的、實際可測的殘留限度。為了建立合理的限度，確定分析方法的靈敏度十分重要。已有工業(yè)界代

16、表在文獻或公開演講上提出一些檢測限標準，如 10ppm；生物活性檢測限標準，如正常治療劑量的 1/1000；或感官標準，如“無可視殘留物”等。要檢查建立殘留限量標準的方式。不同于制劑產(chǎn)品是已知殘留物的化學成分（如來自于活性成份、非活性成份、洗滌劑等），原料藥可能會有部份反應(yīng)物和其他副產(chǎn)物不能得知。在建立殘留限度時，僅關(guān)注要緊反應(yīng)物的殘留限是不夠的，因為其它化學變量可能更難以除去?，F(xiàn)在，除化學分析之外，可能還需要薄層等其它方法。在原料藥生產(chǎn)中，尤其是強效化學物質(zhì)，如某些甾類物質(zhì)，若不使用專用設(shè)備，就必須考慮副產(chǎn)物殘留的問題。檢查的目的是確保建立任何限度的依據(jù)差不多上科學合理的。 其它問題安慰劑為

17、了評估和驗證清潔方法，有些工廠在相同設(shè)備、相同操作參數(shù)下生產(chǎn)安慰劑（無效對照劑）。然后檢測分析該批安慰劑是否受到了殘留物的污染。然而，我們已記錄了使用安慰劑進行清潔驗證的幾個問題。首先，無法確信污染物是否均勻分布于生產(chǎn)系統(tǒng)內(nèi)。如出料閥或混料機泄槽受到了污染，分布于安慰劑中的污染物可能不均勻，通常會集中在出料最初時期的安慰劑中。此外，假如污染物或殘留物的粒度較大，在安慰劑中的分布也可能不均勻。有些工廠假定殘留物會均勻地損耗于設(shè)備表面，這也是無效的結(jié)論。最終，任何分析手段的能力都會因污染物的稀釋而受到削弱。由于這些問題的存在，安慰劑驗證法應(yīng)與漂洗液檢測或直接取樣檢測結(jié)合使用。清潔劑re only

18、added to facilitate cleaning during the cleaningprocess. Thus, they should be easily removable. Otherwise, a different detergent should be selected. 若使用清潔劑或肥皂清潔，應(yīng)考慮檢測殘留物質(zhì)時可能會遇到的困難。一個常見問題是清潔劑的組成成分。許多清潔劑供應(yīng)商可不能提供詳細的配方，使用戶無法評估其殘留物。與藥品殘留物一樣，工廠也應(yīng)評估該清潔過程關(guān)于去除殘留清潔劑的有效性，這十分重要。然而，與藥品殘留物要求不同的是，清洗之后不得有任何濃度的清潔劑殘留

19、（或?qū)τ诟哽`敏度的分析方法而言，其殘留濃度必須極低）。清潔劑不是生產(chǎn)工序中的物質(zhì)，而僅僅是用于關(guān)心清洗而加入的物質(zhì)。因此，清潔劑應(yīng)易于清除。否則，應(yīng)選擇另一種類型的清潔劑。檢測直到清潔有些工廠的做法是，自清洗開始就一直重復(fù)地檢測和評估多次檢測結(jié)果，直到潔凈為止。他們對設(shè)備和系統(tǒng)進行取樣、檢測，再取樣、復(fù)測，直至得到一個“可同意”的殘留水平。關(guān)于采納通過驗證的清潔方法對設(shè)備或系統(tǒng)進行清洗時，不應(yīng)采取這種重復(fù)取樣的做法。這種做法只有在極少數(shù)情況下能夠同意。不斷地檢測和取樣只能講明，所采納的清潔方法沒有得到驗證。因為不斷的復(fù)測實際上反映并記錄了如此一個事實，即進行低效的清洗之后，仍有超量的殘留物/污

20、染物存在。Chank 實例解讀：作為清洗驗證（事實上是任何研究活動），事實上最核心的依舊回答以下的問題：Why? 什么緣故要做清洗操作？How to clean? 如何清洗？清洗的方法是什么? What is the criteria? 清洗到什么程度？如何推斷差不多清洗潔凈？What is the analysis method? 清洗的檢測方法是什么？用什么方法推斷差不多清洗好？When and where to sample? 取樣的位置是什么？什么時刻去取樣？頻率和方法？圍繞這幾個核心的問題，就能夠把握清洗確認或是清洗驗證的關(guān)鍵了。為了講明那個問題，我們先舉一個最簡單的例子。假設(shè)一個化

21、學反應(yīng)是 A+B 生成 C，其中的 A+B 的反應(yīng)介質(zhì)是乙醇，A，B,都在乙醇中易溶 （溶解度為一毫升乙醇能夠溶解 10 克以上的 A,.B）。然而 C 不能溶于乙醇在乙醇中不溶，一毫升乙醇只能溶解 0.01 克 C。然而 C 在丙酮中能夠溶解，一毫升丙酮能夠溶解 10 克以上的 C）反應(yīng)還有一個已知的雜質(zhì) D（在乙醇中不溶，一毫升乙醇只能溶解 0.01 克 D，然而 D 在丙酮中能夠微溶，一毫升丙酮能夠溶解 0.1 克的 D）。反應(yīng)中使用 300 公斤的 A，加上 240 公斤的 B，反應(yīng)用的溶劑乙醇大約 1000 升。得到 530 公斤的 C，和大約 10 公斤的 D。一般來講每批反應(yīng)會投

22、入過量的 A，大概 330 公斤，因此最后混合物中還有殘留的 A 大約 30 公斤。這是那個反應(yīng)的簡單描述和背景介紹。我們先假設(shè)那個反應(yīng)罐（2000 升的塘玻璃罐，假設(shè)表面積達到 10.5 平方米）是專用于這一步反應(yīng)的，那么我們來看看如何回答之前的那些問題：Why? 什么緣故要做清洗操作？我們什么緣故要進行清洗呢？假如我們不對那個罐進行清洗，反應(yīng)后，殘留在系統(tǒng)中的物質(zhì)就有：A,B,C,D,和乙醇，這些物質(zhì)關(guān)于后續(xù)批號的反應(yīng)（因為是專用，就做這一步反應(yīng)）來講，差不多上潛在的污染物。考慮到反應(yīng)中使用的溶媒介質(zhì)是有機溶媒（乙醇）。因此首先能夠排除考慮微生物的污染可能（因為微生物可不能再那個系統(tǒng)中生存

23、。一般只有存在水的系統(tǒng)才考慮微生物的污染可能性）。你看看，A可能殘留的是最大量為 330-300=30 公斤，C,D由于在乙醇中的溶解度專門低，差不多上都會析出固體，而被轉(zhuǎn)移出去。如此會有在容器壁上殘留的可能。B由于用量低，且極易溶解于反應(yīng)液中，而且不是過量的物質(zhì)，即便有少量殘留，確信也就在反應(yīng)后殘留的母液中去了，能夠不考慮了。關(guān)于下一個批號（02批）的生產(chǎn)來講，這些殘留的 A，C，D確實是要緊的污染物。考慮到母液 1000 升，能夠溶解至少 10000 公斤的 A 或 B，殘留的 30 公斤 A，差不多上也都會溶解在母液系統(tǒng)中去了，因此能夠排除 A 的殘留可能性。就只需要考慮 C 和 D 了

24、。由于 C 是易溶解于丙酮的，因此即便 530 公斤的 C 都殘留下來，最多需要 53 升的丙酮就能夠完全溶解了。D假如全部殘留，10公斤的 D 需要的丙酮大概是 100 升。比較這 兩個物質(zhì)在丙酮的溶解性質(zhì)，我們明白至少需要 153 升丙酮才能夠全部溶解 530 公斤的C 和 10 公斤的 D。然而邏輯上分析，不可能有這么多的 C 和 D 殘留（否則就不要生產(chǎn)了,都被殘留下來污染下一批的生產(chǎn)了）。我們假設(shè)由于轉(zhuǎn)運和操作的不方便，殘留的物質(zhì)占全部物質(zhì)的 10%，那么實際上就殘留了 53 公斤的 C 和 1 公斤 D，那么只需要 15.3升的丙酮就能夠完全清洗設(shè)備了。然而常識也告訴我們，關(guān)于一個

25、表面積 10。5平米的設(shè)備來講，一個 2000L 的大罐，15.3 升的溶劑量連反應(yīng)罐的底部才牽強能夠覆蓋如何可能去洗滌呢？因此，我們依舊會選擇反應(yīng)罐 1/5-1/3 的量的溶劑去洗滌,也確實是最少 400升的丙酮。我們能夠發(fā)覺如此的話。400升的丙酮差不多能夠完全洗滌潔凈殘留的東西了。到現(xiàn)在我們事實上還沒有回答什么緣故要清洗。事實上你想假如我們不清洗，最直接的后果就是殘留的 53 公斤的 C 和 1 公斤的 D 會留到下個批號 530 公斤的 C（02批）中去。我們?yōu)榱私档腿绱说母哌_ 10%的上個批號的殘留，因此我們必須去清洗。假如那個確實確實是一個專用設(shè)備，你想，假如我們選用了 400 升

26、的丙酮清洗了。53公斤那么可能殘留下去的 C（01批號）確實是 0 了，而 01 批號 C 中的雜質(zhì) D，按照之前的計算，也是可不能存在的了。如此的一個專用設(shè)備你還需要驗證嗎？顯然是不需要了。你最多要做的確實是，用 400 升的丙酮清洗后，在用點丙酮沖洗一下設(shè)備表面，分析以下沖洗液來確認那個沖洗液中不含 D 就能夠了（那個地點由于 D 和 C 在丙酮中的溶解度差 100 被，而他們的殘留量就差 53 倍，因此雜質(zhì) D 變成了最差的考慮對象，只要 D 沒有了，C自然就沒有了。大多數(shù)的情況下，C，D的溶解度可不能差距這么大，假如有盡量考慮 C,D都易溶的溶劑來清洗，如此 C 就能夠作為考慮的對象了

27、）。你完成那個部分的討論和有一個如此的沖洗液的檢測數(shù)據(jù)，就能夠結(jié)束清洗確認的活了，沒有 FDA 會要求你再去做更加驗證的活了。假如你覺得風險差不多收到操縱了，關(guān)于專用設(shè)備，清洗方面要干的活就結(jié)束了，下面的文字你能夠不看了。好了，假如你實在是沒有信心，一定要驗證，我們就接著回答下面的問題。How to clean? 如何清洗？清洗的方法是什么? 上面的討論也能夠看出來了，400升的丙酮自然就能夠清洗潔凈系統(tǒng)了。然而一次就夠了的情況是否，能夠再多做幾次？那因此了。你喜愛自然能夠接著。最差的情況確實是你做一次 400 升的丙酮，把罐子關(guān)閉后，攪拌丙酮，盡可能的讓丙酮接觸到那個罐子的所有面積，如此只要

28、殘留的物料一接觸那個溶劑就會溶解到里面去了。你是否需要做其他的呢？因此了。假如你情愿，你能夠分幾次操作（比如每次少點，每次用 200 升，洗 2-3 次？按照之前的計算差不多上能夠的也是足夠的），也能夠采納加熱和回流的方法來增加溶解度和清洗的覆蓋面（溫度越高，溶解度越大）。這些差不多上你愛怎么做就如何做的了。然而不管如何，那個地點你需要定一個方法出來，一個固定的清洗方法出來，那個方法會在后續(xù)的驗證取樣，以及最好的操作 SOP 中變成一個固定的操作規(guī)程。比如我們選擇的清洗方法是，第一次采納 300 升的丙酮攪拌均勻 30 分鐘后放料，然后第二次采納 100 升的丙酮沖洗罐表面。然后我們回答下一個

29、問題What is the criteria? 清洗到什么程度？如何推斷差不多清洗潔凈？你既然洗了，你如何明白洗到什么程度確實是潔凈了？是能夠同意的呢？我們那個地點有幾個行業(yè)的標準能夠用來參考。一個確實是有名的 0.10%,確實是講洗到殘留的 01 批物料占 02批物料不超過 02 批物料總量的 0.10%, 那個是從 ICH Q3 的未知雜質(zhì)標準來的。那么如果 02 批物料的批量是 530 公斤，0.10%確實是 0.53 公斤。殘留的 01 批的 C 不能超過 0.54公斤，當 01 批的 C 只有 0.53 公斤的時候，其中的 01 批的 D 就只有 0.01 公斤了。那么請問那個時候你

30、需要考慮那個 01 批的D嗎？它是遠遠低于主成分 02 批 C 的 0.10%的含量的，因此顯然能夠不考慮（這也是我一直講的，主成分的雜質(zhì) D 在后續(xù)批號的標準計算的時候能夠忽略不考慮的本質(zhì)緣故）。好了，0.54 公斤的 01 批的 C 是我們同意的最大的殘留量，那么在 10.5 平米的表面上如果 這 些 物 料 時 均 勻 分 布 的 ， 他 們 每 25 平 方 厘 米 會 殘 留 多 少 量 呢 ？ 那 就 是(0.54*1000g*25)/(10.5*10000)=0.128g=128 mg. 好，我們先到那個地點，休息一下?？纯戳硪粋€行業(yè)的標準。一般來講關(guān)于那些活性物質(zhì)的，潛在毒性又

31、大的物質(zhì)，我們可能會用 10ppm 作為清洗差不多潔凈的標準，也確實是講01批的C殘留在02批的C中不能超過02批C的量的 10ppm，那確實是最多只能殘留 530kg*10ppm=5.4 克，一樣每 25 平方厘米會殘留多少量呢？那就是(5.4*1g*25)/(10.5*10000)=1.28 mg. 也確實是和前面的數(shù)據(jù)差了 100 倍 （事實上專門好理解，0.1%和 10ppm 確實是相差 100 倍）假如你不幸生產(chǎn)的物料是高活性的物料，比如抗腫瘤的東西，比如激素的東西，你明白即便是 2ppm 它的毒性、活性就有了，那么你的標準就要比 10ppm 好要低了，確實是那個數(shù)字的 1/5,也確

32、實是變成了 0.256 mg. 這確實是第三個標準，依照你的物質(zhì)生物活性標準來確認。那么我們一般用的 目測標準有多么精細呢？老外專門較真，事實上有那個數(shù)據(jù)的，據(jù)講是4mg/cm2（參考以下文獻 G.L. Fourman and M.V. Mullen, Determining Cleaning Validation Acceptance Limits for Pharmaceutical Manufacturing Operations, Pharm.Technol. 17 (4), 54-60 (1993)， 那么也確實是 100mg， 你發(fā)覺沒有那個和那個例子中的之前 0.1%的標準專門接

33、近。關(guān)于微生物呢？你的標準如何定呢？等下再講。因為那個地點沒有還涉及！總的來講也確實是回答那個問題的時候你需要建立的標準確實是以上的四個標準了。這是計算的標準，實際上最好你使用的方法足夠敏感能夠到這些限度，否則你的標準定了也白定。因此就有了下面的一個問題需要回答了：What is the analysis method? 清洗的檢測方法是什么？用什么方法推斷差不多清洗好？明白了吧，你要選的是能夠敏感到檢測到那么低濃度的 C 的方法才能夠。HPLC? 滴定？依舊 TLC？這些都不重要，只要你的方法足夠敏感能夠分析檢測到你之前回答上個問題的限度的方法就能夠。什么指標和方法的敏感度相關(guān)？LOD！因此

34、你那個方法一定要驗證 LOD 的指標。你如何確認這點？這是分析方法驗證的環(huán)節(jié)了，你配一個濃度的 C，1mg/ml，然后等比例 稀 釋 下 去 ， 知 道 某 個 濃 度 比 如 0.5, 25.0.0625. 0.03125. 0.016mg, 0.008, 0.004mg/ml, 你發(fā)覺到 0.004mg/ml 的時候，信噪比到了 3，那么那個濃度確實是你的 LOD了。（因此可能更低?。┪覀?nèi)绾伟涯莻€分析方法的 LOD 限度和之前假設(shè)的殘留標準聯(lián)系起來呢？發(fā)覺沒有其實這是一個問題從兩個方向拓展出來的，我們需要把他們聯(lián)系起來了。就要看下面的問題回答了。When and where to sam

35、ple? 取樣的位置是什么？什么時刻去取樣？頻率和方法？因為是驗證，因此你需要再次描述你下你設(shè)定的清洗方法：第一次采納 300 升的丙酮攪拌均勻 30 分鐘后放料，然后第二次采納 100 升的丙酮沖洗罐表面。用什么方法取樣？目測？OK，然而不能作為唯一的方法。什么緣故？緣故專門簡單，有些人是近視（不是每個人都能夠看到 4mg/cm2），有些地點專門暗，看不清晰，有些材質(zhì)表面反光，看不清晰。什么緣故不能不用那個方法？也專門簡單，有些時候，你就洗不到，有些時候物料可能結(jié)塊在某個地點了。目測的覆蓋面會大。有許多檢查官會要求你們有照明設(shè)施來看，并要求證明那些邊角能夠看到，確實是那個緣故。就剩下兩個方法

36、了，一個確實是擦拭，一個確實是漂洗液直接取樣。關(guān)于我們設(shè)定的方法，你喜愛什么取樣方法呢？事實上隨便你用。好吧，我們先簡單的，就用漂洗液直接取樣吧（具體來講，那個漂洗的方法也需要詳細描述，比如是否需要把罐體關(guān)閉狀態(tài)漂洗？還是放開式的沖洗？取樣的時候取的樣品是漂洗后，依舊沖洗期間，這些都涉及到你具體的取樣操作，需要在驗證記錄中詳細的交代）。我們洗了兩次，那就取樣兩次吧。為了操作的方便，我們每次就取 100 毫升漂洗液好了。因為是漂洗的方法，因此我們殘留的量就不需要折算容器的面積了。第一次清洗，我們可能殘留的量在這 100 毫升溶劑中的濃度時多少呢？53公斤/300 升=0.177g/ml，假如確實

37、這么高的濃度，我們之前設(shè)定的方法檢測得到嗎？那因此！不忘了我們的 LOD 是 0.004mg/ml。第二次漂洗呢？因為 C 的溶解度專門大（1毫升丙酮溶解10 克 C， 53公斤相當于只需要 5.3 升丙酮就能夠搞定了），因此理論上 53 公斤在第一次洗滌后，差不多沒有殘留了，然而要明白可能之前 300 升的丙酮可不能全部流出罐外，不小心留了 1 升丙酮溶液在罐內(nèi)，那確實是殘留了 177 克的物料【0.177/530=0.033%】，因此第二次 100 升的丙酮溶解完這些殘留的物質(zhì)后，我們的取樣濃度會是多少?。康扔?.77mg/ml 吧, 用我們之前的方法也是檢測得出來的吧？是的，能夠。那么假

38、設(shè)那個東西是這么多，確實是洗潔凈了嗎？第一次清洗后事實上就潔凈了！【0.177/530=0.033%】,第二次假設(shè)不小心又留下來 1 升丙酮，那么確實是殘留了 1000*1.77mg/ml=1.77g，確實是【0.00177/530=3.3ppm】. 除非你那個的清洗標準是低于 3.3ppm，否則顯然你不需要在清洗了。關(guān)于原料藥來講，那個差不多專門潔凈了。假如我們采納的是擦拭的方法取樣的，那那個地點又有了關(guān)于擦拭的方法的有效性和代表性能高的問題了。討論代表性的時候，你就要詳細交代，你打算在那個設(shè)備的什么位置進行取樣？什么緣故在這些位置？什么緣故你認為這些位置能夠代表整個設(shè)備的全部，并綜合考慮到

39、了那些最難清洗到的部分？你需要把那個設(shè)備的結(jié)構(gòu)圖畫出來，并在你打算取樣的位置做好圖示。有效性就涉及到你需要做個模擬的擦拭確認了。你要找一塊和你要洗的設(shè)備材質(zhì)一樣的物料來（一般能夠找設(shè)備制造商提供相同的物料），然后做成 25cm2如此的一個方塊，然后依照認為的加入已知數(shù)量的 C 物質(zhì)到那個 25cm2 中去（一般就是溶劑溶解后噴灑在表面，然后晾干），然后用一個棉簽來回進行擦拭( 具體的擦拭路線，擦拭次數(shù)，甚至是用的力量大小，都需要詳細的描述)。然后將那個棉簽溶解到指定體積的指定溶劑中去，然后去分析那個溶劑中的 C 的濃度，算出 C 被擦下來了多少數(shù)量，那個數(shù)量和你之前噴撒的 C 的數(shù)量的比值確實

40、是所謂的擦拭實驗回收率（一般能夠同意的范圍是 50%-130%）。當你確認了你的擦拭方法有能夠同意的回收率的時候。你就能夠在你選定的那幾個指定的位置進行擦拭取樣了。因此也一樣，在第一次清洗后，你就下去取樣，選取一個一樣大小面積 25cm2 的區(qū)域，按照之前回收率方法一樣的擦拭方法（方向，來回次數(shù)，力道大?。缓笥靡欢w積的溶劑來溶解，然后進行 HPLC 的分析。因此你就有了一系列的數(shù)據(jù)出來了。你就明白，每個你選擇的具體位置的殘留量大小了。假如你的棉簽差不多上溶解在 100 毫升的丙酮中的，平均回收率為 67% (建議你做至少三個濃度的回收率,涵蓋你設(shè)定標準的濃度。那個回收率講明，假如你在設(shè)備

41、表面假如實際殘留了 100 克的東西，擦拭回來的東西只有 67g) 那么按照之前的計算，假如你的標準設(shè)定是 0.10%, 確實是清洗干 凈 的 標 準 就 是 128mg*67%/100ml =0.86mg/ml. 如 果 是 10ppm, 那 這 個 濃 度 就 是0.0086mg/ml. 按照之前假設(shè)的 LOD 是 0.004mg/ml 的標準，這些差不多上在 LOD 之上的，因此你就不需要擔心那個分析方法不能有效的分析出來了。至此，你就完成了你的驗證，證明用你選擇的那個方法，能夠?qū)ｉT靈敏的檢查出你的殘留的 C，也能夠有效的推斷實際樣品中是否有 C 殘留了。你就能夠按照設(shè)定的清洗方法去，清

42、洗三次，每次按照取樣的位置和要求去取樣，然后進行制定方法的分析，就會得到三組數(shù)據(jù)，來支持你推斷如此的清洗是否有效的結(jié)論了。你的清洗驗證就結(jié)束了。到那個地點可能你講，我都看明白了，也專門簡單，因為你設(shè)想的情況專門簡單，是專用設(shè)備，又是化合物的合成反應(yīng)，又不需要考慮微生物的污染。產(chǎn)品又可不能降解，多么理想的狀態(tài)啊，因此簡單了。我的清洗驗證顧問講，我們的問題專門復(fù)雜的，我們是非專用的設(shè)備，我們的輔料會降解，還會粘結(jié)成塊，還會滋生微生物，用的洗滌劑還必須有效去除才可以。我們的情況用你的方法全然沒有方法做的。你是簡化的情況，講起來簡單，我們做起來專門難的。確實如此嗎？假如你確實認為如此，那么你確實是全然

43、沒有學會清洗驗證的思路，我之前教你的你都忘記了。好，我們來看看什么緣故這么講吧。我們把問題開始復(fù)雜化，在那個罐里我們還進行了另一個反應(yīng) X+Y=W（V是雜質(zhì)）， X,Y在丙酮中溶解，在乙醇，水中不溶解，反應(yīng)的介質(zhì)是丙酮（一樣是 1000 升）。生產(chǎn)的 W是溶解于水，微溶于丙酮的，V雜質(zhì)是不溶解于丙酮的，易溶于水的。好了，那個設(shè)備不是專用的了。280公斤 X 和 220 公斤 Y 會生產(chǎn)出 490 公斤 W 和 10 公斤的 V 雜質(zhì)。批量也不一樣了。這兩個系列的生產(chǎn)依舊交叉的。你如何清洗好？好苦惱啊，A,B,C.D 和 X,Y.W.V 有了八個物質(zhì)，溶劑系統(tǒng)也復(fù)雜了，這么多丙酮，乙醇，水。選哪

44、個好？不急，你依舊先回答我的第一個問題吧：Why? 什么緣故要做清洗操作？因為生產(chǎn) C 的時候我們不希望有殘留的 A,B.D 和之前生產(chǎn)的 X,Y.W,V 阻礙。（那個回答和之前的就多了四個物質(zhì)罷了），考慮的時候原則依舊一樣的啊。你就去找另一個溶劑出來，正好能夠溶解或是正好對這些所有的東西都有一定的溶解性能。比如你最后發(fā)覺，甲醇正好都能夠溶解或是就 V 最難溶于甲醇（1毫升甲醇只能溶解 0.1 克 V，1毫升甲醇能夠溶解 1 克 W），其他的差不多上易溶以上的。你就只需要考慮 V 了。10公斤的 V 會全部留下來？最差的情況確實是全部留下來了，那么就需要 100 升的甲醇來洗。而假設(shè) 490公斤的 W 都留下來，你就要用 490 升的甲醇來洗。顯然還和往常一樣，你就考慮你的W 就能夠了。依舊定位啥？就用 500 升的甲醇來洗確信能夠洗好了。有人講，你如此的情況是正