脊椎動物適用及禁用之麻醉及安樂死方法

1、PAGE PAGE 13脊椎動物適用及禁用之麻醉及安樂死方法一、前言動物安樂死的目的是以人道的方式使動物死亡，它以最低程度的疼痛、最短的時間使動物失去知覺和痛覺。在2000 Report of the AVMA Panel on Euthanasia 中詳細介紹了動物安樂死的各種方法和優(yōu)缺點，本文僅對脊椎動物于科學(xué)、教學(xué)及試驗應(yīng)用范圍內(nèi)提供建議方法。（一）以安樂死作為解除疼痛的選擇如無法以其它方式解除動物的疼痛(pain)或窘迫(distress)時，建議施予安樂死。在科學(xué)研究中，如動物的死亡是可預(yù)期或必然的實驗結(jié)果，則研究者應(yīng)依據(jù)病理、生理或行為面詳加敘述動物實驗的終點(end points

2、)，除非安樂死確實影響實驗結(jié)果，否則應(yīng)在動物呈現(xiàn)垂死、死后組織自體溶解、或死后被籠內(nèi)其它同類相食前以人道的方式解決。安樂死不但可以解決動物遭受嚴重疼痛，并可透過完整的尸體解剖更近一步了解動物的狀態(tài)，有助于實驗之進行。（二）執(zhí)行安樂死的時機一般而言選擇安樂死的考慮因素有：動物體重下降、消瘦、成長期動物未增重、無法有效控制的疼痛、過度的腫瘤增長或腹水產(chǎn)生、持續(xù)性的自殘行為、疾病造成的全身性脫毛、因?qū)嶒炓蛩責(zé)o法治療的長期下痢、嚴重呼吸道感染、持續(xù)性的倦怠伴隨粗造的皮毛、拱背、腹圍擴大、四肢無法行走、嚴重貧血、黃疸、異常的中樞神經(jīng)反應(yīng)(抽蓄、顫抖、癱瘓、歪頭等)、無法控制的出血現(xiàn)象、排尿異常(無尿、多

3、尿等)、影響進食飲水的病癥、傳染性疾病末期、嚴重低溫、明顯的功能損傷、動物遭受長期窘迫時的行為及生理現(xiàn)象等。各機構(gòu)的動物實驗管理委員(IACUCs)、研究人員、獸醫(yī)師、研究部門主管應(yīng)對實驗動物的終點(end points)、以及何時執(zhí)行動物安樂死等方面共同擬定該機構(gòu)之政策。（三）安樂死：技術(shù)以及對執(zhí)行者的沖擊由于動物失去知覺與死亡的時間點不盡相同，且有些如靜脈注射或斷頭等方法需較高的技巧，難以由未接受訓(xùn)練的人員立刻操作、或者決定動物是否遭受疼痛或失去知覺。各機構(gòu)的動物實驗管理委員(IACUCs)與獸醫(yī)師應(yīng)建立人員訓(xùn)練計劃，使人員學(xué)習(xí)正確的安樂死技術(shù)、了解動物安樂死的目的，并安排人員間的相互討論

4、，以舒解可能的心理緊迫。（四）避免造成其它動物的恐懼感窘迫的叫聲、恐懼的行為、驚嚇動物的費洛蒙氣味等，皆引起其它動物的焦慮和不安，這些因素會影響存活動物的身心平衡與福祉，干擾實驗結(jié)果。因此，動物安樂死時，最好選擇遠離同種動物的非公開場所來執(zhí)行。（五）輔助執(zhí)行安樂死動物安樂死首要考慮為解除動物的疼痛與窘迫，因此面對神經(jīng)質(zhì)或難以駕御的動物，可先給予鎮(zhèn)定劑或止痛劑等藥物，以便降低動物的緊迫與恐懼。（六）確認死亡確認動物是否死亡是非常重要的事項。執(zhí)行安樂死后人員需檢查動物的心跳是否完全停止。停止呼吸不能作為判斷死亡的依據(jù)，動物往往先停止呼吸，數(shù)分鐘之后才停止心跳，尤其是使用二氧化碳進行安樂死時，需特別

5、注意。二、選擇安樂死的藥物與方法動物安樂死的方法取決于品種，大小，溫馴度，興奮度，對疼痛、窘迫、疾病的感受性，保定方法，實驗是否需組織采樣及其它因素。適當(dāng)?shù)奈锢硇员６ú粌H可減低動物的恐懼、焦慮及疼痛，并可保障操作人員的安全。另外，人員的技術(shù)、動物的數(shù)量亦為安樂死程序是否順利完成的重要因素。選擇安樂死藥物與方法的準則：使動物無疼痛、窘迫、焦慮、不安的失去知覺至死亡的能力失去知覺至死亡花費的時間可靠性對操作人員的安全性不可逆性對操作和觀察人員的情緒影響對其后的評估、檢驗、組織應(yīng)用的適合性對品種、年齡、健康狀況的適合性價格與可利用性效能與操作方便性對環(huán)境的沖擊人濫用藥物的潛在性安樂死的藥物與方法有三

6、類：吸入性藥劑、非吸入性(化學(xué)性)藥劑、物理性方法。安樂死時最好先抑制動物的中樞神經(jīng)而使其失去知覺，解除疼痛感。因此，首選為使用過量的化學(xué)性麻醉藥劑。動物一旦被施予深度麻醉，之后使用的安樂死方法選擇性較多，也較人道。如因科學(xué)研究所需無法使用麻醉劑，則使用物理性安樂死方法。（一）吸入性藥劑常見藥物如乙醚、halothane、methoxyflurane、isoflurane、enflurane、氮氣、一氧化碳、二氧化碳等麻醉藥劑。通常藉由氣麻機或可透視的密閉容器執(zhí)行體重低于7公斤的小型哺乳動物與鳥類安樂死，由于仔獸對缺氧狀態(tài)耐受性高，吸入藥劑的時間需延長3-5倍，亦可配合其它方法共同進行。大部分

7、的吸入性藥劑對人體有害，因此需在通風(fēng)良好場所執(zhí)行。乙醚具有易燃、易爆的性質(zhì)，通常不建議使用。如因特殊需求而使用乙醚進行動物安樂死，則全程需在抽氣柜內(nèi)操作，動物尸體需置于防爆冰柜內(nèi)。氯仿對人具有肝毒性和致癌性，一氧化碳對人員有害，因此不建議使用。二氧化碳是實驗動物常用的吸入性安樂死藥劑，吸入40二氧化碳時很快達到麻醉效果，而長時間持續(xù)吸入時可導(dǎo)致動物死亡。它容易使用、價格便宜、無易燃易爆性、無異味，在通風(fēng)良好的場所使用時較其它藥劑更安全。利用高壓桶裝的二氧化碳，使用時先將適量二氧化碳灌入安樂死箱底部，再放入動物，之后再緩慢持續(xù)加入二氧化碳，可減低動物死亡前的焦慮。動物停止呼吸后至少在箱內(nèi)停留5-

8、6分鐘，檢查動物確實死亡，之后再移除動物。每次操作時注意安樂死箱內(nèi)勿過度擁擠，并且使用透視性佳的箱子，以便易于確認動物死亡。（二）非吸入性藥劑多數(shù)為注射性藥物，此類藥劑有多種投與方法，但是靜脈注射是最佳選擇。如需給予心臟注射，需先學(xué)習(xí)相關(guān)技術(shù)，否則如因操作不當(dāng)而使藥物泄漏至胸腔或肺臟時，會導(dǎo)致動物痛苦、并延長死亡時間，因此只有在動物已呈現(xiàn)垂死、休克、或深度麻醉中才給予心臟注射。腹腔注射需使用較高劑量的藥物，而且可能使動物死亡時間延長及死前掙扎。巴比妥鹽及其衍生物是動物安樂死的首選藥物。它人道、安全、正確投藥時效果迅速，靜脈注射時可使動物安詳?shù)某了了?。巴比妥鹽及其衍生物中sodium pent

9、obarbital 的效果最佳，目前廣泛使用于大部分動物的安樂死。使用此類藥劑的缺點為必需每只動物個別保定后投予，且操作人員須具有動物靜脈注射技術(shù)，由于可能造成人類濫用，此類藥劑需經(jīng)管制藥品管理局申請核準后取得及使用。對于難以駕御或過度神經(jīng)質(zhì)的動物，須先給予適當(dāng)?shù)逆?zhèn)定后注射。經(jīng)藥物鎮(zhèn)定后的動物由于循環(huán)及心跳變慢，對于pentobarbital藥物注射后的反應(yīng)時間比直接投藥來的慢，需特別注意。深度麻醉中的動物可利用快速靜脈注射KCl（2mmol/ kg）來完成安樂死，但未麻醉動物禁止直接注射KCl。其它如KetamineHCl、xylazine、opiods等注射性藥物，雖然高劑量注射時亦可使動

10、物死亡，但由于死亡前動物常呈現(xiàn)疼痛及抽蓄現(xiàn)象，因此建議僅使用于動物的一般性保定、鎮(zhèn)定、止痛及麻醉，勿做為動物安樂死用藥劑。（三）物理性方法包括頸椎脫臼、斷頭、放血、槍擊、電擊等。物理性安樂死法在下列三種情形下評估使用：其解剖性狀適合使用此法的小型脊椎動物；大型農(nóng)場動物；其它安樂死方法會影響實驗結(jié)果時。有些人抗拒并排斥物理性方法，但是只要在良好的技巧與適當(dāng)?shù)墓ぞ吲浜舷?，它能迅速使動物解除疼痛并死亡。如未受過訓(xùn)練的人冒然實施物理性方法，不僅易造成人員受傷，更可能使動物未完全死亡而導(dǎo)致極大的痛苦。有些物理性方法，如電擊等，則需配合使用第二種方法(如放血)或重復(fù)電擊來完成安樂死。所有操作人員需接受完整

11、的技術(shù)訓(xùn)練，并以尸體多次練習(xí)后才正式執(zhí)行。頸椎脫臼法常使用于體重低于200公克的囓齒類動物、禽類、以及體重低于1公斤的仔兔。透過正確的訓(xùn)練技巧，人員可迅速將動物的頸椎與脊椎脫離，使動物死亡。除非有特殊實驗需求，執(zhí)行頸椎脫臼前動物應(yīng)先給予鎮(zhèn)定或吸入二氧化碳，以減低動物的窘迫。對于小型囓齒類動物，利用桿子或拇指食指壓住頭頸部，用另一只手抓住尾巴，迅速用力向后拉扯后驅(qū)，使頸椎脫離頭顱；對于禽類，雙手抓取脖子扭斷；對于仔兔，一手抓頭，另一手抓后肢，將身體迅速拉長，使頸椎脫離頭顱。因?qū)嶒炐枨鬅o法使用化學(xué)性藥劑或二氧化碳實施安樂死時，可利用斷頭臺（guillotine）砍斷小型囓齒類動物或仔兔的頭頸部。實

12、施此法易造成人員的不適，亦較具危險性，因此需接受完整的技術(shù)訓(xùn)練。人員需溫柔穩(wěn)固的保定動物，快速地利用斷頭臺將頭頸連接處砍斷。注意需隨時保持斷頭臺刀片的銳利度，并在每次使用后徹底清洗殘留的血跡和氣味。如因?qū)嶒炈璨杉瘎游锏娜硌夯蚍叛?，動物需先麻醉或失去知覺后執(zhí)行。三、適用之安樂死方法（一）一般常用脊椎動物安樂死法小于 125 g囓齒動物125 g 1 kg囓齒動物/兔1 kg 5 kg囓齒動物/兔狗貓非人類 靈長類反芻動物.馬.豬.二氧化碳Barbiturate注射液, 靜脈注射 （麻醉劑量的3倍劑量）Barbiturate注射液, 腹腔注射（麻醉劑量的3倍劑量）先麻醉，之后采血(放血)致死

13、先麻醉，之后靜脈注射KCl(1-2 meq/kg)先麻醉，之后斷頭先麻醉，之后頸椎脫臼動物清醒中直接斷頭動物清醒中直接頸椎脫臼乙醚電昏后放血致死說明：1. ：建議使用的方法； ：不得使用的方法； ：一般情況不推薦使用，除非實驗需要（需說明于動物實驗申請表，由IACUC審核通過后使用）。2. Barbiturate 巴比妥鹽類注射劑屬管制藥品，需事先洽行政院管制藥品管理局申請核可后購買使用。 Ketamine不得作為Barbiturate巴比妥鹽的替代品注射于動物安樂死。3. 出生仔鼠對二氧化碳（缺氧）耐受性高，建議安樂死方法為將仔鼠裝入塑料袋，灌滿二氧化碳，綁緊塑料袋，置入-15冰柜內(nèi)。（二）

14、其它脊椎動物：魚 類Barbiturate注射液，靜脈注射（麻醉劑量的3倍劑量）吸入性麻醉藥二氧化碳TMSMS222(肉用魚類不得使用TMS和MS222)Benzocaine HCl脊髓穿刺砍頭兩 棲 類Barbiturate注射液，靜脈注射（麻醉劑量的3倍劑量）Barbiturate注射液，腹腔注射（麻醉劑量的3倍劑量）吸入性麻醉藥(部分兩棲類會憋氣，須注意)二氧化碳TMSMS222(肉用兩棲類不得使用TMS和MS222)Benzocaine HCl脊髓穿刺砍頭爬 蟲 類Barbiturate注射液，靜脈注射（麻醉劑量的3倍劑量）Barbiturate注射液，腹腔注射（麻醉劑量的3倍劑量）

15、吸入性麻醉藥(部分爬蟲類會憋氣，須注意)二氧化碳腦部近距離射擊砍頭鳥 類Barbiturate注射液，靜脈注射（麻醉劑量的3倍劑量）Barbiturate注射液，腹腔注射（麻醉劑量的3倍劑量） 吸入性麻醉藥二氧化碳麻醉后頸椎脫臼腦部近距離射擊野生動物Barbiturate注射液，靜脈注射（麻醉劑量的3倍劑量）Barbiturate注射液，腹腔注射（麻醉劑量的3倍劑量） 吸入性麻醉藥二氧化碳麻醉后靜脈注射KCl腦部近距離射擊（三）巴比妥鹽類(Barbiturate)之安樂死劑量(mg/kg):Species 種別靜脈注射(mg/kg)腹腔注射(mg/kg)小鼠(Mouse) 150150大鼠(R

16、at)150150兔(Rabbit)100150天竺鼠(Guinea Pig)120150倉鼠(Hamster)150150綿羊(Sheep)90山羊(Goat)90家禽(Chicken)150150貓(Cat)8080狗(Dog)8080豬(Swine)90貂類(Ferret)120120小型袋鼠(Opossum)靈長類(Primate)80注1：一般動物以麻醉劑量的3倍劑量為安樂死劑量注2：數(shù)據(jù)取材自（1）2000 Report of the AVMV Panel on Euthanasia。（2） HYPERLINK 。（3）/animal/?get=euthanasia 附錄1 二氧化

17、碳動物安樂死法：（1）放入動物前，先灌注CO2 于壓克力箱（或PC盒）內(nèi)20-30秒.關(guān)閉CO2 .放入動物。（2）再灌注CO2 于箱內(nèi)約1-5 分鐘(兔子需較久時間)，確定動物不動、不呼吸、瞳孔放大.關(guān)閉CO2 .再觀察2分鐘，確定死亡。（3）動物尸體以不透明感染性物質(zhì)專用塑料袋包裝、儲藏至冷凍柜后依法焚燒處理。 附錄2 乙醚動物安樂死法:（1）乙醚為易揮發(fā),易燃,易爆炸,具致癌性,有眼鼻刺激性之危險物品, 其保存及使用皆應(yīng)有適當(dāng)之場所設(shè)備及標準操作程序或指示方法(如防燃之安全抽風(fēng)柜, 密閉容器等) 。（2）施行于少量,小型實驗動物 (如大鼠,小鼠等) 為可以接受之安樂死方法 。（3）動物尸

18、體之處理仍有安全顧慮,置放于冰箱冰柜焚化器中皆應(yīng)特別注意(動物尸體應(yīng)于安全抽風(fēng)柜中暴露至少30分鐘,確認死亡后再置于密封之塑料袋中;動物尸體應(yīng)盡快清除,不宜置放過久) 。（4）乙醚易溶于血中,其引發(fā)之安樂死較為耗時。四、脊椎動物禁止使用之死亡方法方 法說 明空氣注射此法導(dǎo)致動物痙攣、角弓反張和哀叫打爛頭部大多數(shù)動物皆不被接受燒死化學(xué)式或加熱燒死大多數(shù)動物皆不被接受Chloral hydrate狗、貓以及小型哺乳動物皆不得使用氯仿Chloroform具有肝毒性且可能有致癌性，有害于人氰化物Cyanide極有害于人減壓法Decompression(1) 導(dǎo)致動物痛苦、垂死時間拉長(2) 年幼動物耐缺氧狀態(tài)，因此需較長時間才能達呼吸停止(3) 偶發(fā)動物蘇醒的意外狀況(4) 會導(dǎo)致動物出血、嘔吐、痙攣、排尿或排便等現(xiàn)象溺斃溺斃不是安樂死的方法，亦不人道放血(采血)致死大量失血導(dǎo)致動物焦慮及暴躁，放血(采血)致死僅適用于動物已鎮(zhèn)靜、暈倒或麻醉福爾馬林直接將動物浸泡于福爾馬林，是非常不人道的方法家庭用產(chǎn)品或溶劑丙酮類(如去光水), 四級元素(如CCl4 )、瀉劑、丁香油、四級胺類產(chǎn)品、胃藥、等，皆不得使用低溫致死此法不適用于動物安樂死神經(jīng)肌肉阻斷劑如尼古丁、硫酸