細(xì)菌學(xué)優(yōu)秀課件衣原體

1、第20章 衣原體chlamydia第一節(jié) 概述第二節(jié) 主要致病性衣原體重點(diǎn)難點(diǎn)熟悉了解掌握衣原體的概念、共同特征、形態(tài)染色與發(fā)育周期、培養(yǎng)特性和對(duì)抗生素的敏感性主要致病性衣原體所致的人類疾病及其致病機(jī)制衣原體感染的實(shí)驗(yàn)室檢查方法與防治原則概 述summary第一節(jié)衣原體（Chlamydiae）是一類嚴(yán)格真核細(xì)胞內(nèi)寄生，具有獨(dú)特發(fā)育周期，并能通過細(xì)菌濾器的原核細(xì)胞型微生物，歸屬于細(xì)菌范疇。醫(yī)學(xué)微生物（第9版）醫(yī)學(xué)微生物（第9版）有細(xì)胞壁，革蘭陰性，呈圓形或橢圓形具有獨(dú)特的發(fā)育周期，以二分裂方式繁殖有DNA和RNA兩種核酸（有原始的核質(zhì)，無核膜、核仁）含有核糖體嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生具有獨(dú)立的酶系統(tǒng)，但不

2、能產(chǎn)生代謝所需的能量，須利用 宿主細(xì)胞的三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量來源對(duì)多種抗生素敏感衣原體的共同特性醫(yī)學(xué)微生物（第9版）一、生物學(xué)特性基因組環(huán)狀閉合的雙鏈DNA，大小為1.01.24Mb含有約7.5kb大小的質(zhì)粒，為環(huán)狀閉合的雙鏈DNA，由8個(gè)開放閱讀框（ORF）組成并編碼8種蛋白醫(yī)學(xué)微生物（第9版）2.發(fā)育周期發(fā)育周期包括兩種形態(tài)：原體（elementary body, EB）小而致密，有核質(zhì)及細(xì)胞壁，位于胞外，為成熟的典型的衣原體，有感染性，無繁殖力。網(wǎng)狀體（reticulate body, RB）大而疏松，無核質(zhì)及細(xì)胞壁，位于胞內(nèi)，為衣原體的分裂象，無感染性，具有繁殖能力。醫(yī)學(xué)微生

3、物（第9版）衣原體的發(fā)育周期圖醫(yī)學(xué)微生物（第9版）EB和RB的性狀比較性狀EBRB大小（m） 0.20.4 0.51.0 細(xì)胞壁-代謝活性-胞外穩(wěn)定性強(qiáng)弱感染性強(qiáng)無繁殖能力無強(qiáng)RNA:DNA比 1:13:1醫(yī)學(xué)微生物（第9版）包涵體 （inclusion body）：衣原體在宿主細(xì)胞內(nèi)形成的由宿主細(xì)胞膜包裹EB和/或RB的空泡狀結(jié)構(gòu) 包涵體經(jīng)Giemsa染色后呈深藍(lán)色，碘染色呈褐色。 在發(fā)育周期的不同階段，包涵體形態(tài)大小都有差異。 成熟的包涵體中含有大量的EB。醫(yī)學(xué)微生物（第9版）Normal HeLa cells0 hour2 hour40 hour12 hour24 hourLegend:

4、F-actinNucleiInclusion body 衣原體在HeLa細(xì)胞中包涵體的變化3. 培養(yǎng)特性 醫(yī)學(xué)微生物（第9版）嚴(yán)格活細(xì)胞寄生可在HeLa、McCoy或HL等敏感細(xì)胞中培養(yǎng)可接種雞胚卵黃囊可在小鼠中傳代醫(yī)學(xué)微生物（第9版）4. 抗原結(jié)構(gòu)屬特異抗原：細(xì)胞壁的LPS，可區(qū)分衣原體不同的屬種特異抗原：位于主要外膜蛋白（MOMP）上 ，可鑒別不同種的衣原體型特異抗原：根據(jù)MOMP可變區(qū)氨基酸序列的不同，可分為不同的血清型或生物型醫(yī)學(xué)微生物（第9版）5. 抵抗力耐冷不耐熱；對(duì)常用消毒劑敏感；對(duì)紅霉素等大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和四環(huán)素類、強(qiáng)力霉素類抗生素敏感。醫(yī)學(xué)微生物（第9版）二、致病性和免疫性1

5、. 致病物質(zhì) 黏附素 肝硫素內(nèi)毒素樣物質(zhì) 抑制宿主細(xì)胞代謝，直接破壞宿主細(xì)胞。 MOMP與吸附、入侵及阻止吞噬體和溶酶體融合有關(guān)，有利于衣原體在吞噬體內(nèi)存活；易突變，可逃避機(jī)體的免疫應(yīng)答。型分泌系統(tǒng)（T3SS） 可分泌效應(yīng)蛋白與毒力蛋白，與致病有關(guān)。醫(yī)學(xué)微生物（第9版）2. 所致疾病衣原體血清型感染部位所致疾病沙眼衣原體A，B，Ba，C眼沙眼DK眼包涵體結(jié)膜炎、新生兒眼炎DK生殖道（男）尿道炎，附睪炎，前列腺炎DK生殖道（女）尿道炎，宮頸炎，子宮內(nèi)膜炎，輸卵管炎， 肝周炎，流產(chǎn)，早產(chǎn)兒L1L3生殖道性病淋巴肉芽腫DK呼吸道新生兒肺炎肺炎衣原體呼吸道咽炎，支氣管炎，肺炎鸚鵡熱衣原體（鳥株）呼吸道

6、鸚鵡熱，鳥疫人類致病性衣原體的感染部位與所致疾病醫(yī)學(xué)微生物（第9版）二、致病性和免疫性3. 免疫性可產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫，以細(xì)胞免疫為主免疫力不強(qiáng)且短暫 ，易持續(xù)感染、反復(fù)感染可出現(xiàn)免疫病理損傷，由遲發(fā)型超敏反應(yīng)引起主要致病性衣原體main pathogenic chlamydia第二節(jié)一、沙眼衣原體13-05醫(yī)學(xué)微生物（第9版）（一）生物學(xué)性狀根據(jù)侵襲力和引起人類疾病部位的不同，沙眼衣原體可分為3個(gè)生物型沙眼生物型（Biovar trachoma）生殖生物型（Biovar genital）性病淋巴肉芽腫生物型（Biovar LGV）根據(jù)三個(gè)生物型MOMP表位氨基酸序列的差異，將沙眼衣

7、原體分為19個(gè)血清型（二）致病性與免疫性醫(yī)學(xué)微生物（第9版）沙眼衣原體主要寄生于人類，無動(dòng)物儲(chǔ)存宿主，主要引起以下疾病： 1. 沙眼 由沙眼生物型A、B、Ba和C血清型引起主要通過眼眼或眼手眼傳播早期癥狀是流淚、有黏性或膿性分泌物、結(jié)膜充血及濾泡增生。晚期出現(xiàn)結(jié)膜瘢痕、眼瞼內(nèi)翻、倒睫等；也可引起角膜血管翳，導(dǎo)致角膜損害，影響視力或致盲醫(yī)學(xué)微生物（第9版） 2. 包涵體結(jié)膜炎 由沙眼生物型B、Ba和生殖生物型D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、Ja及K血清型引起包括嬰兒結(jié)膜炎經(jīng)產(chǎn)道感染，引起急性化膿性結(jié)膜炎（包涵體膿漏眼） 成人結(jié)膜炎經(jīng)兩性接觸、經(jīng)手至眼或污染的游泳池水感染，引起濾泡性結(jié)膜炎

8、， 又稱游泳池結(jié)膜炎醫(yī)學(xué)微生物（第9版） 3. 泌尿生殖道感染由生殖生物型DK血清型引起經(jīng)性接觸傳播男性多表現(xiàn)為尿道炎、附睪炎、前列腺炎、直腸炎等。 女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎、不孕不育等。醫(yī)學(xué)微生物（第9版） 4. 嬰幼兒肺炎生殖生物型DK血清型 5. 性病淋巴肉芽腫由沙眼衣原體LGV生物型L1、L2、L2a及L3引起人是LGV的自然宿主，主要通過性接觸傳播侵犯男性腹股溝淋巴結(jié)，引起化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會(huì)陰、肛門、直腸，引起會(huì)陰-肛門-直腸組織狹窄。LGV也可引起結(jié)膜炎并伴有耳前、頜下及頸部淋巴結(jié)腫大13-10（三） 微生物學(xué)檢查法醫(yī)學(xué)微生

9、物（第9版）標(biāo)本采集 眼結(jié)膜刮片，結(jié)膜分泌物 生殖道拭子、尿液 濃液或潰瘍組織直接涂片鏡檢：Giemsa、碘液染色或熒光抗體染色鏡檢，觀察有無衣原體或包涵體13-10醫(yī)學(xué)微生物（第9版）分離培養(yǎng)：接種雞胚卵黃囊或傳代細(xì)胞系， 35培養(yǎng)4872h。再用IFA或 ELISA檢測(cè)培養(yǎng)物中的衣原體衣原體抗原或核酸組分檢測(cè)： 應(yīng)用單克隆抗體通過ELISA檢測(cè)臨床標(biāo)本中沙眼衣原體LPS或MOMP抗原； 以特異性引物通過PCR或鏈接酶鏈反應(yīng)（LCR）等擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)沙眼衣原 體DNA。13-10（四)防治原則醫(yī)學(xué)微生物（第9版）注意個(gè)人衛(wèi)生，避免直接或間接的接觸感染廣泛開展性傳播疾病防治知識(shí)的宣傳，積極治愈病

10、人和帶菌者對(duì)高危人群開展普查和監(jiān)控，防止感染的擴(kuò)散尚無有效的沙眼衣原體疫苗治療藥物可選用多西環(huán)素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等二、肺炎衣原體13-0513-06醫(yī)學(xué)微生物（第9版）（一）生物學(xué)性狀衣原體的新種，只有一個(gè)菌株TWAR原體直徑為0.38m，呈梨形依據(jù)16S rRNA，23S rRNA，ompA基因序列和某些生物學(xué)特性比較分析將肺炎衣原體分為三個(gè)生物型：即人生物型、考拉生物型和馬生物型肺炎衣原體抗原主要有兩種，即脂多糖（LPS）抗原和蛋白質(zhì)抗原（二）致病性與免疫性醫(yī)學(xué)微生物（第9版）肺炎衣原體人生物型寄生于人類，在人與人之間經(jīng)飛沫或呼吸道分泌物傳播肺炎衣原體是呼吸道疾病的重要病原體

11、，易引起肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕肺炎衣原體與冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等慢性病的發(fā)生密切相關(guān)以細(xì)胞免疫為主，體液免疫為輔，但免疫力不持久，可重復(fù)感染13-10（三） 微生物學(xué)檢查法醫(yī)學(xué)微生物（第9版）1、病原體檢測(cè)標(biāo)本采集常取痰標(biāo)本、鼻咽拭子及支氣管肺泡灌洗液先直接涂片，觀察包涵體；再以熒光或酶標(biāo)記的種特異性單克隆抗體直接檢測(cè)標(biāo)本中肺炎衣原體抗原特異抗血清做GIT和MIT進(jìn)一步鑒定可采用組織培養(yǎng)或動(dòng)物接種進(jìn)行病原體分離，再通過Giemsa或Macchiavello染色觀察原體或網(wǎng)狀體。13-10醫(yī)學(xué)微生物（第9版）2、血清學(xué)檢測(cè)微量免疫熒光試驗(yàn)（M

12、IF）MIF可測(cè)定血清中的IgM和IgG抗體，有助于區(qū)別近期感染和既往感染，也有利于區(qū)別原發(fā)感染和繼發(fā)感染雙份血清抗體滴度增高4倍或以上，或單份血清IgM抗體滴度116，或IgG抗體滴度1512，可確定為急性感染，IgG116表示為既往感染。3、PCR檢測(cè)特異性核酸采用PCR技術(shù)檢測(cè)特異性16S rRNA基因或MOMP基因三、鸚鵡熱衣原體13-0513-06醫(yī)學(xué)微生物（第9版）（一）生物學(xué)性狀鸚鵡熱是由鸚鵡熱衣原體引起的一種人獸共患疾病，在鳥類及家禽中傳播，廣泛分布于世界各地，一般呈散發(fā)型，偶有小范圍的暴發(fā)或流行。原體直徑為0.20.5m，呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體直徑為0.61.5m，呈球形或不

13、規(guī)則形態(tài)，原體在細(xì)胞空泡中增殖后形成碘染色呈陰性的包涵體依據(jù)血清學(xué)分類法，鸚鵡熱衣原體至少可以分為9個(gè)血清型，分別為A、B、C、D、E、F、E/B、WC和M56型可用雞胚卵黃囊、敏感細(xì)胞培養(yǎng)以及小鼠接種（二）致病性與免疫性醫(yī)學(xué)微生物（第9版）主要經(jīng)呼吸道吸入病鳥糞便、分泌物或羽毛的氣霧或塵埃而感染，也可經(jīng)破損皮膚、黏膜或眼結(jié)膜感染臨床表現(xiàn)多為非典型性肺炎，以發(fā)熱、頭痛、干咳、間質(zhì)性肺炎為主要癥狀，偶爾可發(fā)生系統(tǒng)性并發(fā)癥，如心肌炎、腦炎、心內(nèi)膜炎與肝炎、肝脾腫大等以細(xì)胞免疫為主13-10（三） 微生物學(xué)檢查法醫(yī)學(xué)微生物（第9版）1、病原體檢測(cè)標(biāo)本采集常取患者血、痰標(biāo)本或咽拭子直接涂片，觀察包涵體

14、可采用組織培養(yǎng)或動(dòng)物接種進(jìn)行病原體分離，再通過Giemsa或Macchiavello染色觀察原體或網(wǎng)狀體。13-10醫(yī)學(xué)微生物（第9版）2、血清學(xué)檢測(cè)采用重組鸚鵡熱衣原體抗原進(jìn)行IFA或ELISA法檢測(cè)特異IgM抗體（滴度116）作為早期、特異診斷3、PCR檢測(cè)特異性核酸采用PCR技術(shù)檢測(cè)特異性16S rRNA基因或MOMP基因13-10（四)防治原則醫(yī)學(xué)微生物（第9版）嚴(yán)格控制傳染源，對(duì)飼養(yǎng)的鳥類與禽類加強(qiáng)管理，避免鸚鵡熱衣原體的傳播和流行加強(qiáng)易感人群的防護(hù)，對(duì)進(jìn)口的鳥類和禽類應(yīng)加強(qiáng)檢疫確診后及早使用四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類或喹諾酮類抗生素徹底治療 本章節(jié)概括了衣原體的基本概念及其共同特征。衣原體具有獨(dú)特的發(fā)育周期，可出現(xiàn)2種不同形態(tài)：原體和始體。原體具