2021年動物檢疫學(xué)-高致病性禽流感實用資料

1、2021年動物檢疫學(xué)高致病性禽流感實用資料2021年動物檢疫學(xué)高致病性禽流感實用資料 非致病性禽流感 不會引起明顯癥狀，僅使染病的禽鳥體內(nèi)產(chǎn)生病毒抗體。 低致病性禽流感 可使禽類出現(xiàn)輕度呼吸道癥狀,食量減少、產(chǎn)蛋量下降，出現(xiàn)零星死亡。 高致病性禽流感 最為嚴(yán)重，發(fā)病率和死亡率高。感染的雞群常?！叭姼矝]”。 按病原體的致病性，禽流感可分為:2 非致病性禽流感 按病原體的致病性，禽流感可分為:4高致病性禽流感因其在禽類中傳播快、危害大、病死率高等特點，被國際獸疫局定為A類傳染病，又稱真性雞瘟或歐洲雞瘟?，F(xiàn)為通報性疫病，我國將其列為一類動物疫病。35近年來出現(xiàn)了禽流感病毒感染人的事例：1997年中

2、國香港禽流感爆發(fā)，有12人感染H5N1型禽流感病毒，6人死亡，這是世界上首次證實禽流感感染人類；2003年4月荷蘭發(fā)生H7N7型禽流感，人類感染者達89人，并出現(xiàn)了死亡病例；2003年11月27日，香港一男童感染禽流感；4近年來出現(xiàn)了禽流感病毒感染人的事例：62003年12月至2004年2月，韓國、中國臺灣、日本、越南、印尼、巴基斯坦、老撾、泰國、中國大陸、美國和加拿大等國家和地區(qū)相繼爆發(fā)禽流感，其中在越南和泰國又出現(xiàn)了禽流感（H5N1）感染人類的病例，并出現(xiàn)了死亡。2004年禽流感的大爆發(fā)，給世界人民帶來極大的恐慌。52003年12月至2004年2月，韓國、中國臺灣、日本、越南2005年4月

3、，我國青海湖自然保護區(qū)候鳥感染H5N1毒株，約6000多只候鳥死亡。2006年亞洲、歐洲、亞洲均有H5N1亞型HPAI爆發(fā)。最近國內(nèi)外有H5N1血清型引起的禽流感發(fā)病率和死亡率都很高，危害巨大。62005年4月，我國青海湖自然保護區(qū)候鳥感染H5N1毒株，約病原禽流感病毒屬于正粘病毒科流感病毒屬的A型流感病毒。病毒的基因組屬于單股負(fù)鏈RNA。典型的A型流感病毒粒子呈圓球形，有囊膜，對乙醚、氯仿、丙酮等脂溶劑敏感。7病原禽流感病毒屬于正粘病毒科流感病毒屬的A型流感病毒。病毒的雞瘟病毒8雞瘟病毒10根據(jù)流感病毒的血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)的抗原性差異，可將其分為不同的亞型。迄今為止，A型禽流

4、感病毒的HA已發(fā)現(xiàn)16種，NA有9種，分別以H1-H16、N1N9命名。 所有的禽流感病毒均屬A型，不同毒株的致病性有差異。9根據(jù)流感病毒的血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)的抗原性差異禽流感病毒能在雞胚上生長繁殖。以尿囊腔、羊膜腔或絨毛囊膜上感染時，強毒株病毒初代感染雞胚后26-36h死亡。禽流感病毒通過雞胚繼代后增強毒力。除雞胚外，本病毒也能感染鴨胚和鴿胚。犬腎細(xì)胞（MDCK）廣泛用于流感病毒的分離培養(yǎng)。非洲綠猴腎細(xì)胞（Vero）也適用于A型流感病毒的分離培養(yǎng)。10禽流感病毒能在雞胚上生長繁殖。以尿囊腔、羊膜腔或絨毛囊膜上感流感病毒能凝集雞、豚鼠、貓、小白鼠、馬、綿羊、人和其他動物紅細(xì)胞。

5、對干燥和低溫的抵抗力強。低溫和凍干狀態(tài)下可保存病毒。不耐熱，病毒經(jīng)55、1h滅活，60經(jīng)20min滅活，100 2分鐘即被滅活。11流感病毒能凝集雞、豚鼠、貓、小白鼠、馬、綿羊、人和其他動物紅常用消毒劑容易將其滅活，如氧化劑、稀酸、漂白粉和碘劑等都能迅速破壞其活性。 12常用消毒劑容易將其滅活，如氧化劑、稀酸、漂白粉和碘劑等都能迅流行病學(xué)各種家禽（火雞、雞、珠雞、石雞、鶴鶉、雉、鵝及鴨）和野禽（包括鴨、鵝、磯鷸、燕鷗、鷺、海鷗、天鵝等）均易感。從遷徙水禽，尤其是鴨中分離的病毒最多；流感在家禽中對火雞和雞的危害最嚴(yán)重。 13流行病學(xué)各種家禽（火雞、雞、珠雞、石雞、鶴鶉、雉、鵝及鴨）和現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，禽

6、流感病毒能直接感染人，并可引起發(fā)病甚至死亡。在實驗室人工試驗中，豬、水貂、猴、貓等均可被禽流感病毒感染。14現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)，禽流感病毒能直接感染人，并可引起發(fā)病甚至死亡。16禽流感病毒可通過消化道和呼吸道進入人體傳染給人，也可經(jīng)過眼結(jié)膜和破損皮膚引起感染。人類直接接觸受禽流感病毒感染的家禽及其糞便或直接接觸禽流感病毒也可以被感染，并可引起發(fā)病甚至死亡。15禽流感病毒可通過消化道和呼吸道進入人體傳染給人，也可經(jīng)過眼結(jié)流行特點：發(fā)病急、傳播快、流行范圍廣，常呈地方性或大面積流行，其中高致病性禽流感的發(fā)病率與死亡率均可高達100%。 該病一年四季均可流行，但以冬季和氣溫驟冷驟熱的季節(jié)更易暴發(fā)。16流行特點

7、：發(fā)病急、傳播快、流行范圍廣，常呈地方性或大面積流行臨床檢疫 1、臨床癥狀禽流感的癥狀依感染禽類的品種、年齡、性別、并發(fā)感染程度、病毒毒力和環(huán)境因素等而有所不同，主要表現(xiàn)為呼吸道、消化道、生殖系統(tǒng)或神經(jīng)系統(tǒng)的異常。17臨床檢疫 1、臨床癥狀19病雞頭部腫脹，冠和肉髯發(fā)黑，眼分泌物增多，眼結(jié)膜潮紅、水腫，羽毛蓬松無光澤，體溫升高；下痢，糞便黃綠色并帶多量的黏液或血液；呼吸困難，歪頭；產(chǎn)蛋率急劇下降或幾乎完全停止，蛋殼變薄、褪色、無殼蛋、畸形蛋增多；雞腳鱗片下呈紫紅色或紫黑色。在發(fā)病后的5d7d內(nèi)死亡率幾乎達到100%。少數(shù)病程較長或耐過未死的病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，包括轉(zhuǎn)圈、前沖、后退、頸部扭歪或后仰

8、望天等。 18病雞頭部腫脹，冠和肉髯發(fā)黑，眼分泌物增多，眼結(jié)膜潮紅、水腫，1921肉髯發(fā)紺20肉髯發(fā)紺22雞冠和肉垂腫脹發(fā)紺21雞冠和肉垂腫脹發(fā)紺2322242325 腳磷片下出血24 腳磷片下出血2625272628神經(jīng)癥狀 呼吸癥狀27神經(jīng)癥狀 呼吸癥狀29禽流感病鴨具有神經(jīng)癥狀28禽流感病鴨具有神經(jīng)癥狀3029312、病理變化 最急性型病雞常無眼觀變化。急性者可見頭部和顏面浮腫，雞冠、肉髯腫大達三倍以上；皮下有黃色膠樣浸潤、出血，胸、腹部脂肪有紫紅色出血斑；心包積水，心外膜有點狀或條紋狀壞死，心肌軟化；病雞胸部肌肉有出血點或出血斑。消化道變化表現(xiàn)為腺胃乳頭水腫、出血，肌胃角質(zhì)層下出血，肌

9、胃與腺胃交界處呈帶狀或環(huán)狀出血；肝、脾、腎瘀血腫大，有灰黃色小壞死灶；302、病理變化 最急性型病雞常無眼觀變化。32呼吸道有大量炎性分泌物或灰黃色干酪樣壞死；胸腺萎縮，有不同程度的點、斑狀出血；法氏囊萎縮或呈黃色水腫，有充血、出血；母雞卵泡充血、出血，卵黃液變稀?。粐?yán)重者卵泡破裂，卵黃散落到腹腔中，形成卵黃性腹膜炎，腹腔中充滿稀薄的卵黃。輸卵管水腫、充血，內(nèi)有漿液性、黏液性或干酪樣物質(zhì)。31呼吸道有大量炎性分泌物或灰黃色干酪樣壞死；3332343335343635373638373938403941腳鱗出血（嚴(yán)重病例）40腳鱗出血（嚴(yán)重病例）42發(fā)病雞胸肌出血產(chǎn)蛋雞輸卵管中的粘液滲出物流感病

10、雞心冠脂肪出血41發(fā)病雞胸肌出血產(chǎn)蛋雞輸卵管中的粘液滲出物流感病雞心冠脂肪出血42444345禽流感病鴨胰腺白壞死點44禽流感病鴨胰腺白壞死點46鵝流感胰45鵝流感胰47實驗室檢疫診斷技術(shù)：我國已建立瓊脂擴散（AGP）技術(shù)、亞型分型技術(shù)、病毒分子診斷與檢測技術(shù)。國家監(jiān)測標(biāo)準(zhǔn)：流行性感冒診斷標(biāo)準(zhǔn)及處理原則 46實驗室檢疫診斷技術(shù)：我國已建立瓊脂擴散（AGP）技術(shù)、亞型分1、樣品采集：（1）病料樣品：至少從5只病禽和病死禽中采集病料樣品。樣品應(yīng)包括：泄殖腔（新鮮糞尿樣）棉拭子和氣管棉拭子（置于緩沖液體中）；氣管和肺的混樣；腸管及內(nèi)容物的混樣；肝、脾、腎、腦等其他組織樣品（不能混樣）。471、樣品采

11、集：49組織和氣管拭子懸液中加入青霉素（2000IU/ml）、鏈霉素（2mg/ml）或慶大霉素（50g/ml）。腸管及內(nèi)容物、糞便樣品和泄殖腔棉拭子所用的抗生素濃度應(yīng)提高5倍。48組織和氣管拭子懸液中加入青霉素（2000IU/ml）、鏈霉素（2）血樣：分別采集至少10只病禽的，并單獨存放，不能混合。49（2）血樣：分別采集至少10只病禽的，并單獨存放，不能混合。2 、電鏡觀察禽流感病毒一般為球形，直徑為80120nm，但也常有同樣直徑的絲狀形態(tài)，長短不一。病毒表面有1012nm的密集釘狀物或纖突覆蓋，病毒囊膜內(nèi)有螺旋形核衣殼。兩種不同形狀的表面釘狀物是HA（棒狀三聚體）和NA（蘑菇形四聚體）。

12、 502 、電鏡觀察523、病毒分離鑒定將感染雞胚或病禽氣管、脾、肺、腎和腦等可用磷酸緩沖液或肉湯培養(yǎng)基制成10倍乳劑，加抗菌素抑菌；如系泄殖腔拭子，可將拭子在溶液中浸漬后去掉拭子，然后用2500-3000r/min離心30min，除殘渣，濾過液接種9-11d的SPF雞胚尿囊腔分離病毒。513、病毒分離鑒定53在35-37孵化箱內(nèi)孵育，18h后每8h觀察雞胚死亡情況。病毒收獲：無菌收取18h以后的死胚及96h仍存活的雞胚尿囊液，作血凝試驗，以鑒定病毒。陽性反應(yīng)說明可能有正粘病毒科的流感病毒；若無血凝活性或血凝價很低，則用尿囊液繼續(xù)傳2-3代，并重復(fù)以上血凝試驗，若仍陰性，則認(rèn)為病毒分離陰性。

13、52在35-37孵化箱內(nèi)孵育，18h后每8h觀察雞胚死亡情況。4、血清學(xué)檢查瓊脂擴散試驗（AGP）：用于流感病毒型的鑒定，是用病毒的核蛋白抗原檢查血清中的抗體。既可以定性(如免疫雙擴散及免疫電泳中以沉淀線判定)，又可以定量(如單輻射擴散)。比較簡便、快捷 。534、血清學(xué)檢查55血凝試驗（HA）與血凝抑制試驗 （HI）：證實流感病毒的血疑活性及排除NDV，也可用病毒抗原鑒定流感病毒的亞型。簡單的方法是：取1滴1：10稀釋的正常雞血清(最好是SPF雞)和1滴ND抗血清，分別滴于瓷板上，再各加1滴有血凝活性的雞胚尿囊液，混勻后各加1滴5的雞紅細(xì)胞懸液，若兩份血清均出現(xiàn)血凝現(xiàn)象，則表明尿囊液中不含有

14、新城疫病毒(NDV)；如果ND抗血清出現(xiàn)HI現(xiàn)象，表明尿囊液中含NDV。54血凝試驗（HA）與血凝抑制試驗 （HI）：證實流感病毒的血疑神經(jīng)氨酸酶抑制試驗（NIT）：利用流感病毒的糖蛋白神經(jīng)氨酸酶與底物的反應(yīng)來檢測病毒的存在與否。用于鑒定AIV另一種表面抗原神經(jīng)氨酸酶（NA）的亞型。55神經(jīng)氨酸酶抑制試驗（NIT）：57具體方法是：在96孔聚苯乙烯平板反應(yīng)孔中分別加入已稀釋好的羊膜尿囊液25l，然后分別加入1-9型已處理的NA抗血清25l，振蕩混勻，室溫靜置1h，每孔加入25l胎球蛋白，37孵育3h，每孔加入25l砷試劑至最先出現(xiàn)棕色的孔褪色，最后每孔加入100l 1.6%硫酸巴比妥，將反應(yīng)板

15、用56水漂洗30-60min后判定結(jié)果，呈粉紅色為抗血清NI陰性，無粉紅色為抗血清NI陽性。根據(jù)結(jié)果判定AIV亞型。NIT實驗一般需在AI中心實驗室方可進行。56具體方法是：在96孔聚苯乙烯平板反應(yīng)孔中分別加入已稀釋好的羊ELISA：具有較高的敏感性，既可以檢測抗體，又可以檢測抗原。尤其適合于大批樣品的血清學(xué)調(diào)查，可以標(biāo)準(zhǔn)化而且結(jié)果易于分析。在流感的控制、撲滅、檢疫中很有用途。57ELISA：具有較高的敏感性，既可以檢測抗體，又可以檢測抗原中和試驗以中和試驗(NT)來鑒定或滴定流感病毒時，常用雞胚或組織培養(yǎng)細(xì)胞，操作方法與其他病毒(如NDV)的中和試驗相同。取9-10日齡雞胚接種后37 孵育3

16、-4d，雞胚死亡出現(xiàn)HA活性，表示雞胚感染流感病毒。但由于中和試驗的操作相當(dāng)繁瑣，費時間也較長，試驗材料耗費也多，沒有條件和不必要時可不進行。 58中和試驗60免疫熒光技術(shù) 常用直接熒光抗體法，即在組織觸(印)片上直接染色，以熒光顯微鏡檢查熒光。一種AIV的熒光抗體可以用來檢測同亞型的其他病毒。熒光抗體技術(shù)用于診斷，具有快速、簡便、敏感等特點，而且費用較低。需要有熒光顯微鏡才能觀察。59免疫熒光技術(shù) 615、分子生物學(xué)技術(shù)（RT-PCR）檢測禽流感病毒核酸。 605、分子生物學(xué)技術(shù)（RT-PCR）62檢疫后處理確檢禽流感時，立即上報疫情并封鎖現(xiàn)場，對病禽和同群者以及方圓3km的家禽以不放血方式

17、撲殺，銷毀尸體；對所有被污染的環(huán)境和器具物品進行徹底消毒；對疫區(qū)進行封鎖，嚴(yán)禁家禽及其產(chǎn)品進出。禽場要全面清掃、消毒，空舍至三個月。 61檢疫后處理確檢禽流感時，立即上報疫情并封鎖現(xiàn)場，對病禽和同群免疫預(yù)防注射禽流感疫苗。 62免疫預(yù)防注射禽流感疫苗。 6438.人生總是很累，你現(xiàn)在不累，以后會更累。不要在該奮斗的年紀(jì)，一味地選擇休閑。讓十年后的你，感謝現(xiàn)在努力不放棄的你！42.心若向陽，無謂悲傷。83.意志是一個強壯的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。叔本華89.沒人扶你的時候，自己站直，路還長，背影要美。123.你跌跌撞撞，落得這一身傷，就當(dāng)是為青春，畫下的殘妝。60.心若改變，你的態(tài)度跟著改變

18、；態(tài)度改變，你的習(xí)慣跟著改變；習(xí)慣改變，你的性格跟著改變；性格改變，你的人生跟著改變。97.情緒的顏色是活潑熱烈的紅色，是生機盎然的綠色，是尊貴華麗的黃色，好好地，用這種種顏色做情緒，來書寫生活，不好讓它變得灰暗45.山澗的泉水經(jīng)過一路曲折，才唱出一支美妙的歌。76.我努力賺錢的目的，就是想讓我爸媽在給自己買東西的時候能像給我買東西的時候一樣干脆。52.說金錢是罪惡，都在撈；說美女是禍水，都想要；說高處不勝寒，都在爬；說天堂最美好，都不去。70.天下沒有不勞而獲的東西，不勞而獲只能是個夢。54.成功與失敗都是暫時的，在成功處跌到便是失敗，在失敗處勇敢站起就是成功。48.行走紅塵，別被欲望左右迷失了方向，別被物質(zhì)打敗做了生活的奴隸，給心靈騰出一方空間，讓那些夠得著的幸福安全抵達，攥在自