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文檔簡介
1、 布洛芬在小鼠體內(nèi)的分布1課前準備取小鼠2只,稱重,編號。2號用20布洛芬灌胃0.1ml/10g。3號用20布洛芬灌胃0.1ml/10g。計時2實驗目的掌握測定藥物分布的方法和臨床意義。了解藥物在體內(nèi)的分布動力學規(guī)律。3相關知識藥物分布藥物分布的概念:藥物從血液向組織、細胞間液和細胞內(nèi)液轉運的過程。藥物分布影響因素:血漿蛋白結合率器官血流量組織細胞結合體液pH和藥物解離度體內(nèi)屏障血腦屏障、胎盤屏障和血眼屏障4小鼠灌胃給予同等劑量的布洛芬溶液后,在不同時間點測量血液、腦、腎、肝中布洛芬的濃度,繪出不同時點的布洛芬的組織分布圖。測量血液、肝中布洛芬濃度采用比色法。實驗原理5實驗步驟1標準管的制備:
2、0.00125%布洛芬溶液6取小鼠3只(已禁食12h),稱重,編號。1號用生理鹽水灌胃0.1ml/10g,立即斷頭取血搖勻。2號用20布洛芬灌胃0.1ml/10g,30min斷頭取血搖勻。3號用20布洛芬灌胃0.1ml/10g,60min斷頭取血搖勻。取離心管3支編號,分別于1管(對照)、2管(給藥30min)和3管(給藥60min)內(nèi)加肝素0.1ml,斷頭取血,立即搖勻。分別從3支管中取抗凝血各0.5ml加入已預加無水乙醇4.5ml試管中,搖勻。稱取各小鼠300mg肝組織,分別置于研磨器中,加無水乙醇(0.4ml/100mg)研碎后再加入無水乙醇(0.5ml/100mg) 搖勻,制成勻漿后全
3、部傾入試管中。實驗步驟27實驗步驟38實驗步驟4將對照鼠和各給藥鼠的血及組織勻漿離心5min(3500轉/分),分別取上清液3.0ml放入比色杯中(稀釋)如果液體太濃,可用蒸餾水按比例稀釋,得到的光密度值乘以稀釋倍數(shù)即實際光密度值。9實驗步驟5用分光光度計在222nm波長下以對照鼠樣品管作空白管,測定各用藥樣品管的光密度值,代入到公式換算出血藥濃度(g/ml)和組織藥物濃度(g/g)。 血藥濃度(g/ml) = 樣品管濃度稀釋倍數(shù)(10)組織內(nèi)濃度(g/g) = 樣品管濃度稀釋倍數(shù)(10)10實驗后處理利用計算機繪制給藥后血液和肝臟組織中的藥物分布圖。 11注意事項取血:每次的取血量要準確 血樣加至無水乙醇試管應該立即搖勻勻漿:勻漿器上的數(shù)字應對應 組織勻漿后應立即離心 勻漿器應清洗干凈離心:離心前一定要用水配平, 離心管不要弄混 離心后將轉速和時間歸零吸管要干凈
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