動物細胞融合與單克隆抗體

1、動物細胞融合與單克隆抗體第1頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一植物體細胞雜交植物細胞A植物細胞B原生質(zhì)體A原生質(zhì)體B原生質(zhì)體融合雜種細胞組織培養(yǎng)雜種植株去細胞壁物理法篩選第2頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一動物細胞與植物細胞的差別：無細胞壁全能性受限制，不能發(fā)育成雜種動物動物細胞雜交與植物細胞雜交的不同：不需去除細胞壁不能發(fā)育成新的動物個體第3頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一一、動物細胞融合（細胞雜交）1、概念：指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。2、結(jié)果：形成單核的雜交細胞3、原理：細胞膜的流動性4、誘導(dǎo)方式

2、物理法：離心、振動、電激化學(xué)法：聚乙二醇（PEG)生物法：滅活的病毒第4頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一5、過程：動物細胞A動物細胞B誘導(dǎo)，融合2個完整的雜交細胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）注意：動物細胞的融合也需要把多個兩種細胞放在一起，讓它們隨機融合后，再從中篩選雜交細胞第5頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一6、意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交（種間、屬間、科間、動植物之間）成為可能。7、應(yīng)用：成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等的重要手段 特別是利用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體第6頁，共14頁，2022年，

3、5月20日，21點10分，星期一二、單克隆抗體傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)辦法及缺陷是什么？抗體由什么細胞產(chǎn)生？B淋巴細胞每個B細胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體要想獲得大量的單一抗體，必須克隆單一的B淋巴細胞，形成細胞群1975，米爾斯坦和柯勒 雜交瘤技術(shù)第7頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一1、原理：雜交瘤細胞具有兩個親本的特性，即能迅速大量增殖，又能足夠數(shù)量的單一抗體。2、過程B淋巴細胞骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合B-B細胞B-瘤細胞瘤-瘤細胞選擇培養(yǎng)雜交瘤細胞（ B-瘤細胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測雜交瘤細胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體第8頁，共14頁，2022年，5月20日，2

4、1點10分，星期一3.單克隆抗體的應(yīng)用：單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大 作為診斷試劑：準(zhǔn)確識別各種抗原物質(zhì)，并與特異性結(jié)合 優(yōu)點：準(zhǔn)確、高效、簡易、快速用于運載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”治療疾病：主要用于癌癥治療第9頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一總結(jié)一種誘導(dǎo)細胞融合的新方法一種新細胞滅活病毒雜交瘤細胞一個優(yōu)勢單克隆抗體特異性強、靈敏度高、產(chǎn)量大的優(yōu)勢第10頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學(xué)方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學(xué)（聚乙二醇）誘導(dǎo)方法使細胞分散后誘導(dǎo)細胞融合去

5、除細胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較第11頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一1、科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓疤細胞融合的是（ ） A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 B.沒經(jīng)過免疫的T淋巴細胞C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 D.沒經(jīng)過免疫的淋巴細胞A鞏固練習(xí)第12頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一2.動物細胞融合的目的中最重要的是-（ ）A.克服遠緣雜交不親和 B. 制備單克隆抗體 C.培育新品種 D.生產(chǎn)雜種細胞3.動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較中，正確的是（ ）誘導(dǎo)融合的方法完全相同 B.所用的技術(shù)手段基本相同 C. 所采用的原理完全相同 D. 都能形成雜種細胞 AD第13頁，共14頁，2022年，5月20日，21點10分，星期一4. 單克隆抗體制備過程中培育的雜交細胞是-（ ）A.由小鼠能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與肝細胞融合 B.由小鼠一個B淋巴細胞誘