氨茶堿的血藥濃度測(cè)定及藥動(dòng)學(xué)研究

1、2021/9/131實(shí)驗(yàn)7.7氨茶堿的血藥濃度測(cè)定及藥動(dòng)學(xué)研究2021/9/132【目的】 學(xué)習(xí)氨茶堿血藥濃度的紫外測(cè)定方法，驗(yàn)證其藥動(dòng)學(xué)模型?！驹怼?1.氨茶堿為臨床常用平喘藥，由茶堿與乙二胺縮合而成。在酸性條件下,可用有機(jī)溶劑從血清中提取出茶堿,再用堿液將茶堿從有機(jī)溶劑中提出。測(cè)量274和298處的吸光度（A274為茶堿和本底，即溶劑、血清的吸光度，A298為本底的吸光度），A= A274-A298。2021/9/133茶堿吸收度曲線茶堿本底274298A2021/9/1342.氨茶堿經(jīng)靜脈進(jìn)入血液，隨血液循環(huán)進(jìn)行組織分布，達(dá)到平衡后轉(zhuǎn)入消除相。時(shí)量曲線呈二房室動(dòng)力學(xué)模型。3.房室模型是

2、抽象的數(shù)學(xué)模型，它的劃分與解剖學(xué)部位或生理學(xué)功能無關(guān)。藥物轉(zhuǎn)運(yùn)速率相同或相近的部位可劃分為同一房室。房室模型可以分為一室模型、二室模型、多室模型。大多數(shù)藥物在體內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)和分布符合二室模型。即藥物靜脈注射入血后，首先快速進(jìn)入血流量大的組織，如心、肝、腎、肺、腦等，然后緩慢地向血流量小的組織，如脂肪組織、靜止的肌肉組織等轉(zhuǎn)移。2021/9/135【器材與藥品】 754型紫外分光光度計(jì)，液體渦旋混和器，數(shù)學(xué)坐標(biāo)紙、半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙各一張。氨茶堿標(biāo)準(zhǔn)液，0.1mol/L HCl,0.1mol/L NaOH,異丙醇：氯仿抽提液（5:95）?！緦?shí)驗(yàn)動(dòng)物】 家兔2021/9/136【實(shí)驗(yàn)步驟】 1取體重2.5-

3、3kg健康家兔1只，一耳緣靜脈注射氨茶堿15mg/kg，另一耳用銳利刀片切割取血。分別在給氨茶堿后5、10、20、30、60、120、180、300、420min取血。 2分離血清，各管均取血清0.5ml于15ml試管中，加0.1mol/L鹽酸0.2ml、抽提液5ml，振搖混合，2500r/min離心10min。2021/9/1373吸取下層氯仿液4ml置另一試管中，加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，振搖混勻，2500r/min離心10min。4吸取上層堿液，以0.1mol/L NaOH溶液作參比，測(cè)定其在274和298處的吸收度（A274和A298），計(jì)算A。5. 制作茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線：

4、取5支試管，依次加入茶堿標(biāo)準(zhǔn)液20、40、60、80、100l，各加入0.1mol/L NaOH溶液4ml，終濃度依次為0.5、1.0、1.5、2.0、2.5g/ml，測(cè)定各管的A274和A298，計(jì)算A。以茶堿濃度為橫坐標(biāo)，A為縱坐標(biāo)描點(diǎn)繪圖，用Excel軟件求直線回歸方程，即為茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線方程（圖示）。2021/9/138 將茶堿濃度和吸光度的數(shù)據(jù)錄入Excel的工作表中。茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作2021/9/139茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 選取Excel表上任一格，點(diǎn)擊菜單“插入/圖表”，出現(xiàn)“圖表指南”，選取“XY散點(diǎn)圖”，進(jìn)行下一步。2021/9/1310茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作“數(shù)據(jù)區(qū)域”選取

5、茶堿濃度和吸光度相關(guān)數(shù)據(jù)，“系列產(chǎn)生在列”，直至完成。2021/9/1311茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 選取所得圖形，用右鍵點(diǎn)擊5個(gè)散點(diǎn)中任一點(diǎn)，出現(xiàn)對(duì)話框，點(diǎn)選“添加趨勢(shì)線”選項(xiàng)。2021/9/1312茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 在“添加趨勢(shì)線”對(duì)話框的“選項(xiàng)”一欄，選中“顯示公式”和“顯示R平方值”，然后“確定”。2021/9/1313茶堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線方程和R2值自動(dòng)出現(xiàn)。R（相關(guān)系數(shù)）表示曲線方程對(duì)原始數(shù)據(jù)擬合的程度。2021/9/13146. 將測(cè)得血清樣品的A代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的方程，求得相應(yīng)的C，C10即為茶堿的血藥濃度。以時(shí)間為橫坐標(biāo)，濃度對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo)，用CAPP軟件描點(diǎn)做圖，判斷氨

6、茶堿在體內(nèi)代謝的房室模型。時(shí)間（min） A C（g/ml） 血藥濃度（g/ml） 5 10 20 30 60 120 180 300 4202021/9/1315 將取血時(shí)間和茶堿血藥濃度輸入CAPP軟件。2021/9/1316 添加消除相的數(shù)據(jù)點(diǎn)，點(diǎn)擊“更新曲線”。2021/9/1317 添加分布相的數(shù)據(jù)點(diǎn)，點(diǎn)擊“更新曲線”。2021/9/1318 氨茶堿體內(nèi)代謝的時(shí)量曲線即繪制完成，曲線方程和相關(guān)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)值亦同時(shí)列出。2021/9/1319【注意事項(xiàng)】 1.紫外分光光度計(jì)使用前需預(yù)熱30min并激發(fā)氫燈。 2.振搖混勻藥液時(shí)防止濺出并準(zhǔn)確加樣。 3.樣品離心前需配平。 4.測(cè)量時(shí)若更換波長，必須重新調(diào)節(jié)0和100?！居?論