賽默飛液相色譜l2培訓教程-應用及配置二旁白字數(shù)

1、應用及配置（二）賽默飛液相色譜L2培訓教程主要內(nèi)容1 白酒中塑化劑液相色譜分析（食品）2 白酒中氨基甲酸乙酯液相色譜分析（食品）3 雙三元液相在線固相萃取測定果汁中的多菌靈（食品）4喹諾酮獸藥殘留測定（藥物分析）5黃曲霉毒素測定方案（農(nóng)業(yè)） 眾所周知，白酒過量飲用對身體必然有害。但日常適量飲用白酒，也不一定安全。應用1/2 白酒中塑化劑及氨基甲酸乙酯液相色譜分析 應用背景影響白酒品質(zhì)的安全隱患外源性隱患來自白酒儲運過程中的包材遷移物或非法添加物(如塑化劑) 內(nèi)源性隱患來自白酒釀造過程中的副產(chǎn)物(如氨基甲酸乙酯) 長期接觸塑化劑可能引起致癌；影響生殖系統(tǒng)功能，引起兒童性早熟 DEHP，DBP，B

2、BP (2類致癌物質(zhì)，4類有毒化學物質(zhì)）2011年5月，臺灣昱伸香料有限公司引發(fā)食品添加劑中塑化劑超標事件案例一 臺灣昱伸香料公司2012年11月19日，湖南質(zhì)檢總局稱酒鬼酒中檢測塑化劑（DEHP, DIBP, DBP）超標2.6倍。案例二 白酒塑化劑事件應用1 白酒中塑化劑液相色譜分析應用背景玩具GB/T 24613-2009（玩具用涂層中有害物質(zhì)限量）：DEHP，DBP，BBP總量不得超過0.1%，DIDP，DINP，DIOP總量不得超過0.1%。食品GB/T 21911-2008（食品中鄰苯二甲酸酯的測定）：食品中禁止添加16種增塑劑食品容器與包裝材料GB/T 21928-2008（食品

3、塑料包裝材料中鄰苯二甲酸酯測定）：管控16種增塑劑GB 9685-2008（食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標準）：限制DEHP，DBP，BBP等10種增塑劑的使用中國法規(guī)要求應用1 白酒中塑化劑液相色譜分析應用背景采用常規(guī)液相色譜+UV檢測器即可對白酒中塑化劑進行檢測。16種鄰苯二甲酸酯分析結(jié)果應用1 白酒中塑化劑液相色譜分析解決方案 2012年6月15日，香港媒體根據(jù)香港消費者委員會的檢測結(jié)果披露出，16款黃酒飲品中含有氨基甲酸乙酯(EC)。 氨基甲酸乙酯又名尿烷，是發(fā)酵食物和酒精飲品在發(fā)酵或貯存過程中天然產(chǎn)生的物質(zhì)，雖不是劇毒化合物，但具有致癌性。 調(diào)查顯示，如果飲用氨基甲酸乙酯含量

4、3010-6 g/L 的酒，人飲用后患癌的機率大大增加。氨基甲酸乙酯結(jié)構(gòu)式應用2 白酒中氨基甲酸乙酯液相色譜分析應用背景 通過柱前衍生，采用HPLC結(jié)合熒光檢測解決了樣品處理過程復雜、效率低等弊端，提供了HPLC-FLD 法在國內(nèi)實際應用的可能?，F(xiàn)有的出入境檢驗檢疫標準GC-MS法Thermo HPLC方案（HPLC-FLD檢測）9-羥基噸和EC在酸性條件下生成可產(chǎn)生熒光的Xanthylurethane物質(zhì)應用2 白酒中氨基甲酸乙酯液相色譜分析解決方案應用2 白酒中氨基甲酸乙酯液相色譜分析檢測結(jié)果樣品色譜圖 （黃酒，紅酒，白酒）黃酒白酒紅酒方法線性范圍方法檢出限方法回收率 2-1000 ng/

5、mL0.5 ng/mL95%-105%之間應用1/2 白酒中塑化劑及氨基甲酸乙酯液相色譜分析 儀器配置 UltiMate 3000液相色譜系統(tǒng)檢測器紫外檢測器（用戶塑化劑檢測）熒光檢測器（用于氨基甲酸乙酯檢測 ）色譜柱Accucore C18, 4.6150mm, 2.6m 應用1/2 白酒中塑化劑及氨基甲酸乙酯液相色譜分析 儀器配置P/NHardware5035.9200 SR-3000 Solvent Rack without degasser5040.0031 LPG-3400SD Pump5822.0020 WPS-3000TSL Analytical Autosampler5730.

6、0010 TCC-3000SD Column Thermostat 5074.0005VWD 3100Detector6074.0250 VWD-3x00 flow cell Analytical 11L, SST5078.0015 FLD-3100 Dual-PMT Detector6078.4330 FLD-3x00 flow cell micro 2L, SST17126-154630 Accucore C18, 4.6150mm, 2.6m 競爭優(yōu)勢在現(xiàn)有標準（GC-MS）基礎上提供了常規(guī)HPLC的檢測方案；與白酒發(fā)酵單位進行了長期合作，有一定市場基礎。賽默飛同時可提供白酒安全檢測的全

7、套解決方案。現(xiàn)有用戶北京工業(yè)技師學院 潛在客戶酒廠出入境檢驗檢疫局藥檢所應用1/2 白酒中塑化劑及氨基甲酸乙酯液相色譜分析 競爭優(yōu)勢 2014年6月合作舉辦第三屆白酒食品安全檢測標準化技術培訓會及3C 計劃氨基甲酸乙酯高級研修班（中國食品發(fā)酵工業(yè)研究院及北京工業(yè)技師學院）多菌靈是一種廣泛用于保護蔬菜和水果的抗真菌劑。2010年，由于多菌靈可對實驗室動物造成生育缺陷，并能導致母體不孕，澳大利亞禁止這種常見的殺菌劑使用于梨果類水果（蘋果和梨）、草坪及包括橘樹在內(nèi)的其他園藝作物。2012年初，在美國環(huán)保署（EPA）澄清并未批準多菌靈用于橘樹之后，橘汁市場受到更大的壓力。應用3 雙三元液相在線固相萃取

8、測定果汁中的多菌靈 應用背景現(xiàn)有解決方案美國FDA要求檢出限達到10ppb，采用液液萃取，液相色譜UV檢測和FLD檢測；近期的一些方法多采用離線SPE和LC-MS進行檢測，其中GB/T23380-2009采用液相色譜進行分析，處理10mL樣品，經(jīng)過MCX凈化，前處理過程繁瑣。賽默飛解決方案在線固相萃取方案，快速測定橙汁中多菌靈殘留量。應用3 雙三元液相在線固相萃取測定果汁中的多菌靈 解決方案應用3 雙三元液相在線固相萃取測定果汁中的多菌靈 儀器配置P/NHardware5035.9230SRD-3600 Solvent Rack, 6 Degass. Lines5040.0061DGP-360

9、0SD Pump5822.0010WPS-3000SL Analytical Autosampler5730.0010TCC-3000SD Column Thermostat5082.0010 DAD-3000DiodeArrayDetector,withoutflowcell6082.0100 AnalyticalflowcellforDAD-3000(RS)6822.2450Conversion kit semiprep for WPS-3000 SL Analytical063191Acclaim PA2 C18，4.6*150mm，3mCH-953456Turboflow HTLC C

10、yclone-MCX-2 (1.050mm)競爭優(yōu)勢采用公司獨有的雙三元液相色譜技術，在線SPE進行除雜富集。較液液萃取和離線SPE前處理更簡單?，F(xiàn)有用戶熙可食品潛在客戶食品飲料廠出入境檢驗檢疫局藥檢所應用3 雙三元液相在線固相萃取測定果汁中的多菌靈 競爭優(yōu)勢方法建立的主要難點在于樣品前處理。GB 29692-2013食品安全國家標準牛奶中喹諾酮類藥物多殘留的測定，前處理非常復雜。氟喹諾酮（Fluoroquinolone，F(xiàn)Qs）類藥物是近20年來哇諾酮類藥物迅速發(fā)展起來的一類十分重要的廣譜抗生素。氟哇諾酮類藥物在治療和預防動物疾病、促進動物生長、提高飼料轉(zhuǎn)化率上應用相當廣泛。這類藥物的原形及

11、其代謝產(chǎn)物可蓄積或貯存于動物的細胞、組織、器官或可食性產(chǎn)品(如蛋、奶)中，形成藥物殘留。喹諾酮應用4 喹諾酮獸藥殘留測定應用背景提取甲醇洗脫物HPLC-FLD分析加乙腈-0.2%三氯乙酸，渦旋振蕩，超聲提取5min；離心，取上清液N2氣吹干，濃縮，500微升流動相溶解，進樣20微升凈化采用聚合物基質(zhì)的SPE柱，甲醇活化，水平衡，上樣，10%甲醇除雜，甲醇洗脫提取加乙腈-0.2%三氯乙酸，渦旋振蕩，超聲提取5min；離心，取上清液HPLC-FLD分析500 L20 L5mL濃縮10bv稀釋25bv相當于稀釋25倍5mL2mL全部進樣稀釋2.5bv離線和在線前處理對比應用4 喹諾酮獸藥殘留測定解決

12、方案采用一個三通加一個六通閥的方式實現(xiàn)了在線稀釋功能，達到了“峰聚焦”（Peak Focusing）作用，改善了目標物峰形和分離度。采用Cyclone HTLC柱作為SPE柱，增加了方法耐用性Loop環(huán)預先填充80：20（甲醇：水相）作為洗脫溶劑，減少了系統(tǒng)延遲體積（GDV）的影響，可達到快速轉(zhuǎn)移目標分析物至分析柱中的目的應用4 喹諾酮獸藥殘留測定解決方案0.05.010.015.020.025.030.035.0Time min-1.0e60.0e02.0e64.0e66.0e67.0e6Response counts CIPRO DANO ENRO SARA DIFmincounts樣品加

13、標混合標準品空白樣品應用4 喹諾酮獸藥殘留測定測定結(jié)果物質(zhì)檢出限環(huán)丙沙星0.13g/L達氟沙星0.01g/L恩諾沙星0.04g/L沙拉沙星0.12g/L二氟沙星0.05g/L應用4 喹諾酮獸藥殘留測定儀器配置TurboFlow HTLC Cyclone , 0.550mm檢測器 FLD檢測器色譜柱分析柱Accucore C18, 2.6m 4.6150mm 富集柱TurboFlow HTLC Cyclone , 0.550mm（渦流技術，去除大部分基質(zhì)，有硅膠、聚合物材質(zhì)）應用4 喹諾酮獸藥殘留測定儀器配置P/NHardware5035.9230SRD-3600 Solvent Rack, 6

14、 Degass. Lines5040.0061DGP-3600SD Pump5822.0020WPS-3000TSL Analytical Autosampler5730.0010TCC-3000SD Column Thermostat5078.0015FLD-3100 Dual-PMT Detector6078.4330FLD-3x00 flow cell micro 2L, SST6822.2450Conversion kit semiprep for WPS-3000 SL Analytical6730.0001Valve actuation HT right side 125 MPa/

15、18130psi, TCC-RS/SD6730.0002Valve actuation HT left side 125 MPa/18130psi, TCC-RS/SD6730.0006Pod 2pos-6port HT valve SST 1034bar/15000psi TCC-RS（2套）100l Loop環(huán) 17126-154630Accucore C18, 4.6150mm, 2.6m CH-953288TurboFlow HTLC Cyclone ，0.550mm競爭優(yōu)勢采用公司獨有的雙三元液相色譜技術，簡化前處理操作，提高檢測靈敏度；SPE柱可連續(xù)進樣5001000次，降低樣品分

16、析成本約70-80%?，F(xiàn)有用戶上海獸藥所 潛在客戶疾病預防控制中心藥檢所省市區(qū)獸藥所乳制品廠應用4 喹諾酮獸藥殘留測定競爭優(yōu)勢黃曲霉毒素B1/B2/G1/G2 方法1柱后碘衍生方法2柱后光衍生方法3 TFA柱前衍生 濕熱地區(qū)的糧食最容易被黃曲霉污染的，其毒性遠遠高于氰化物、砷化物和有機農(nóng)藥的毒性，其中以B1毒性最大，是目前已知最強致癌物之一應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱后碘衍生法）應用背景應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱后碘衍生法）解決方案 雙三元液相+FLD+衍生管色譜柱Thermo Syncronis C18, 5m，4.6*150 mm ，P/N 97105-254630柱溫室溫衍生管Re

17、action Coil 750 L (PN:42631)+ Reaction Coil 375 L (PN:43700)配件024313 4mm三通1個039056兩通接頭1個042806兩通轉(zhuǎn)接頭3個052230Bolt接頭8個052231Ferrule8個052306 黑色Peek管 0.01in 5ft衍生化溫度（柱溫箱提供）70 淋洗條件左泵（衍生泵）：0.05%碘溶液右泵（分析泵）：22%乙腈+22%甲醇+56%水流速左泵：0.2 ml/min；右泵：0.8 ml/minFLD激發(fā)波長365nm 發(fā)射波長435nm柱后衍生：用第二個泵作柱后衍生泵應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱后碘衍生

18、法）解決方案LOD測定色譜圖應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱后碘衍生法）測定結(jié)果時間min相關系數(shù)C0(Offset)C1(Slope)線性范圍（g /L）LOD（S/N=3）（g/L)黃曲霉毒素M17.5890.99946.43975005.30580.5-150.075黃曲霉毒素G28.7090.99971345.690118171.89370.15-4.50.02黃曲霉毒素G110.2130.99971290.998913835.00400.15-4.50.025黃曲霉毒素B211.4180.999968.772546151.07300.15-4.50.013黃曲霉毒素B113.6260.

19、999995.762936853.76960.15-4.50.016物質(zhì)濃度M10.075 g /LG1、G2B1、B20.0225 g /L應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱后光衍生法）儀器配置常規(guī)液相+FLD+泰樂琪紫外光照衍生儀推薦配置依據(jù)GB/T 5009.22-2003 食品中黃曲霉毒素B1的測定檢測項目黃曲霉毒素M1、G1、G2、B1和B2儀器型號Dionex Ultimate 3000系列：泵：LPG-3400SD自動進樣器：WPS-3000TRS柱溫箱：TCC-3000RS檢測器：FLD-3100泰樂琪PriboFast 柱后光化學衍生反應器色譜柱Thermo Syncronis

20、C18, 5m, 4.6*150 mm , P/N 97105-254630淋洗條件22%乙腈+22%甲醇+56%水流速0.8 ml/min分析時間20 minFLD激發(fā)波長365nm 發(fā)射波長435nm進樣量100 L黃曲霉毒素的檢出限測定色譜圖應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱后光衍生法）測定結(jié)果Peak NameRet.TimeminCoeff.ofDeterminationC0(Offset)線性范圍g /LLOD(g /L)RSD%n=3M17.90.99995-131.5290.1258.30.050.5G29.180.99996-95.970.03-20.0123.0G110.80.99999-174.8530.075-50.033.5B212.10.99996-205.2370.0225-1.50.0093.8B114.41-132.7890.075-50.034.5物質(zhì)濃度M10.05g /LG20.012g /LG10.03g /LB20.009g /LB10.03g /L應用5 黃曲霉毒素測定方案（柱前TFA衍生法）儀器配置推薦配置：常規(guī)液相HPLC+FLD檢測項目黃曲霉毒素M1、G1、G2、B1和B2儀器型號Dionex Ultimate 3000系列：泵：LPG-3400SD自動進樣器：WPS-3000TRS柱溫箱：TCC-3000RS檢測