江蘇省2021屆高三二輪復(fù)習(xí)生物：基因工程和細(xì)胞工程練習(xí)

1、MarkerR緩沖液菌處理染色體加負(fù)極bp1000800600MarkerR緩沖液菌處理染色體加負(fù)極bp1000800600400亠200專題十五：基因工程和細(xì)胞工程一、選擇題1下列關(guān)于“基因探針”的敘述，錯誤的是()基因探針既可以檢測某一特定的DNA，也可檢測RNA基因探針是一小段具有特定核苷酸序列的DNA基因探針既可以檢測核酸分子，又可以檢測特定的蛋白質(zhì)基因探針以單鏈形式發(fā)揮作用，其放射性和熒光標(biāo)記便于檢測2.在基因工程操作中，科研人員利用識別兩種不同序列的限制酶(R和R)處理基因載體，進(jìn)行瓊脂糖12凝膠電泳檢測，結(jié)果如圖所示。以下相關(guān)敘述中，不()該載體最可能為環(huán)狀DNA分子兩種限制酶在

2、載體上各有一個酶切位點C限制酶A】與A?的切點最短相距約20bPD.限制酶作用位點會導(dǎo)致氫鍵和肽鍵斷裂3下列有關(guān)植物組織培養(yǎng)的敘述，錯誤的是()對外植體需要消毒處理，對培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得倍的細(xì)胞愈傷組織是細(xì)胞脫分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控用莖尖等分生組織培養(yǎng)能得到脫毒植株花粉植株的過程示意圖，有關(guān)敘述正確的是()觀察處于分裂中期的四季柑橘花粉植株根尖細(xì)胞，可觀察到18條染色體過程是細(xì)胞再分化，誘導(dǎo)叢芽產(chǎn)生時應(yīng)適當(dāng)提高生長素/細(xì)胞分裂素的比例四種培養(yǎng)基均為固體培養(yǎng)基，過程除培養(yǎng)基成分與含量不同外，其他條件相同花粉植株培育的原理是花粉粒細(xì)胞具有全

3、能性，其技術(shù)是植物組織培養(yǎng)我國新疆地區(qū)由于光照時間長，晝夜溫差大，特別適合棉花的種植。新疆棉花以色澤好，品級高、纖維長、產(chǎn)量高而著稱，是世界上最好的棉花之一。我國科學(xué)家培育出一種具有自主知識產(chǎn)權(quán)的轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，利用幼胚離體培養(yǎng)、單倍體育種等技術(shù)獲得大量的植株，同時對其進(jìn)行轉(zhuǎn)基因效果評估。下列敘述錯誤的是()新疆的自然條件有利于植株光合產(chǎn)物的積累，有助于提升棉花品質(zhì)棉花幼胚組織脫分化和再分化培養(yǎng)基中植物激素的比例不同利用雜合的抗蟲棉進(jìn)行單倍體育種得到的后代性狀基本一致培育出的抗蟲棉需從分子水平以及個體生物學(xué)水平進(jìn)行效果評估PC-1基因表達(dá)能誘導(dǎo)正常鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。在PC-1分子N端(氨基

4、端)有46個氨基酸組成的特異序列，這是許多轉(zhuǎn)錄因子激活靶基因轉(zhuǎn)錄所具有的共同序列特征；在哺乳動物細(xì)胞中驗證了PC-1的轉(zhuǎn)錄激活作用，通過缺失突變的基因改造，發(fā)現(xiàn)該作用存在于該分子N端的46個氨基酸組成的特異序列區(qū)域，說明PC-1全長分子極大部分的特異功能均由N端的此區(qū)域表達(dá)，為制備特異性更高的抗PC-1-46單克隆抗體提供了依據(jù)。下列說法正確的是()PC-1分子通過激活靶基因轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)鼠成纖維細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化擴增PC-1基因只需用此特異性序列所對應(yīng)的核苷酸序列作引物用哺乳動物細(xì)胞轉(zhuǎn)基因的方法驗證PC-1的轉(zhuǎn)錄激活作用時，必須用受精卵做受體細(xì)胞可將PC-1基因?qū)牍撬枇黾?xì)胞制備抗PC-1-46單克隆

5、抗體7細(xì)胞毒素可有效殺傷腫瘤細(xì)胞，但沒有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成傷害。下圖是特異性殺死腫瘤細(xì)胞的過程，圖中抗體是利用單克隆抗體技術(shù)制備的。下列敘述正確的是（）單克隆抗體制備過程中需要使用Taq酶抗體與細(xì)胞毒素結(jié)合增加了細(xì)胞毒素的殺傷力細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的能力溶酶體破裂導(dǎo)致其中的蛋白酶及其它水解酶釋放，加速了腫瘤細(xì)胞凋亡（多選題）8.科學(xué)家將c-Mye、KIf4、Sox2和Oct-3/4這四個關(guān)鍵基因轉(zhuǎn)入高度分化的小鼠成纖維細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞在一定某件下轉(zhuǎn)變成iPS細(xì)胞，在適當(dāng)條件誘導(dǎo)下，iPS細(xì)胞可以定向分化成各種細(xì)胞。下列敘述錯誤的是（）丹細(xì)胞呻

6、冊川胞成纖維細(xì)胞肌細(xì)胞成骨自|胞e-MycKI弭丹細(xì)胞呻冊川胞成纖維細(xì)胞肌細(xì)胞成骨自|胞e-MycKI弭R7TffOct-3/4Sox2小鼠的成纖維細(xì)胞1圖示過程運用了轉(zhuǎn)基因技術(shù)和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)iPS細(xì)胞分化成各種組織細(xì)胞過程中DNA序列有不同的改變iPS細(xì)胞的分裂、分化能力比造血干細(xì)胞弱小鼠成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變成iPS細(xì)胞與植物組織培養(yǎng)的脫分化過程類似（多選題）9.某實驗小組為了探究四倍體馬鈴薯原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和再生能力，進(jìn)行了原生質(zhì)體的獲取和培養(yǎng)實驗，實驗過程如圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）懸浮原生質(zhì)體愈傷組織叢生芽u過程要在清水中用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞過程培育愈傷組織時須提供無菌

7、環(huán)境和適宜溫度等條件過程一般需要光照處理，過程則需要遮光處理過程與培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長素用量的比例不同二、非選擇題10為了準(zhǔn)確篩選沒有明顯表型特征的某種微生物，我國科研人員采用了如圖1所示的流程。獲得基因圖1衣達(dá)抗原膜蛋白）10為了準(zhǔn)確篩選沒有明顯表型特征的某種微生物，我國科研人員采用了如圖1所示的流程。獲得基因圖1衣達(dá)抗原膜蛋白）熒冊記注射占亙克隆抗休，亠（1）據(jù)圖分析，科研人員利用目標(biāo)微生物編碼膜蛋白的，構(gòu)建表達(dá)載體，并導(dǎo)入用處理的大腸桿菌細(xì)胞中，獲取大量膜蛋白。（2）用獲取的膜蛋白作為抗原，利用兔子制備單克隆抗體的具體流程是：。（3）將上述帶有熒光的單克隆抗體與待分離微生物群體混合，

8、目的是目標(biāo)微生物。用流式細(xì)胞儀分離不同熒光強度的細(xì)胞，結(jié)果如圖2所示。對結(jié)果進(jìn)行比較，應(yīng)從區(qū)域（選填圖中數(shù)字）的細(xì)胞中篩選目標(biāo)微生物。細(xì)胞大小相對值相對熒光強度相對熒光強Mfa細(xì)胞大小相對值相對熒光強度相對熒光強Mfai,3託LOo4ooom11111（4）為及時確診新冠病毒感染引起的呼吸道傳染病，科學(xué)家研制了基因檢測試劑盒，其機理為：分離待測個體細(xì)胞的總RNA，在酶的作用下得到相應(yīng)的DNA，再利用技術(shù)擴增將樣本中微量的病毒信息放大，最后以熒光的方式讀取信號。這種方法也會出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，請分析其中的原因（答出1點即可）。中國甜柿的自然脫澀與乙醛代謝關(guān)鍵酶基因（PDC）密切相關(guān)，推測澀味程度可能

9、與PDC基因的表達(dá)情況有關(guān)。（1）啟動子位于基因首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，同時啟動子區(qū)域還存在著許多調(diào)控蛋白的結(jié)合位點，RNA聚合酶和調(diào)控蛋白共同影響了基因的。（2）為篩選PDC基因的調(diào)控蛋白，科研人員進(jìn)行了下列實驗。PDC基因的啟動子序列未知,為獲得大量該基因啟動子所在片段，可利用限制酶將基因組DNA進(jìn)行酶切，然后在的作用下將已知序列信息的接頭片段連接在PDC基因的上游，根據(jù)和PDC基因編碼序列設(shè)計引物進(jìn)行PCR.利用質(zhì)粒A（圖1）構(gòu)建含有PDC基因啟動子片段的重組質(zhì)粒并導(dǎo)入代謝缺陷型酵母菌，用不含的培養(yǎng)基可篩選出成功轉(zhuǎn)化的酵母菌Y1H。質(zhì)粒G(圖2)上的AD基因表達(dá)出的AD蛋白

10、與啟動子足夠靠近時，能夠激活后續(xù)基因轉(zhuǎn)錄，因此需獲得待測蛋白與AD蛋白的融合蛋白用于后續(xù)篩選?？蒲腥藛T從中國甜柿中提取RNA，將逆轉(zhuǎn)錄形成的各種cDNA與質(zhì)粒G連接后導(dǎo)入酵母菌，此時應(yīng)選擇質(zhì)粒G中的位點(填序號15)作為cDNA的插入位點，最終獲得攜帶不同cDNA片段的酵母菌群Y187。重組酵母Y187與Y1H能夠進(jìn)行接合生殖，形成的接合子含有兩種酵母菌質(zhì)粒上的所有基因。若接合子能在含有金擔(dān)子素的培養(yǎng)基中生存，則推測待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，請結(jié)合圖示闡述作出該推測的理由。122020年世界性的新型冠狀病毒肺炎大流行，為了能更好地對病毒展開相關(guān)研究。I.科學(xué)家需要分離和培養(yǎng)病毒。如圖是其

11、流程示意圖。樣*接種加3弄怵系900pL用于后續(xù)研究V嚅胖蔽廠/樣*接種加3弄怵系900pL用于后續(xù)研究V嚅胖蔽廠/900口V陳障液(1卜爲(wèi)條桃岬叫LlOOuL10D|iLIOOjaLAAA純化將采集到的病毒樣本進(jìn)行稀釋，如圖1所示，用吸取1OOuL的病毒樣本，注入到中，使樣本與稀釋液充分混勻，依次操作后，號試管中病毒濃度是樣本的倍。根據(jù)病毒的特征，培養(yǎng)體系A(chǔ)中必須含有，病毒才能復(fù)制增殖。為鑒定B是目的病毒，需進(jìn)行檢測或抗原抗體檢測。實驗結(jié)束后，對所有廢棄物必須進(jìn)行嚴(yán)格的處理。II.2020年3月16日，中國科學(xué)家陳薇院士團(tuán)隊研制的重組新冠疫苗通過臨床研究注冊審評，獲批進(jìn)入臨床試驗。重組新冠疫

12、苗的制備流程如圖。人5型腺病Ad5)八新胞融狀橋滝17T7777重組新冠疫苗CSARS-CnV-?)RNAcDNAS魚白嘿因的栓測與鑒定步驟需要酶，作為原料。步驟需要酶。人s型腺病毒的作用是。其上具有識別和結(jié)合的部位，是s蛋白基因在受體細(xì)胞中啟動表達(dá)的關(guān)鍵。通過PCR技術(shù)可對s蛋白基因進(jìn)行專一性擴增，需要設(shè)計種引物，引物是一小段。為了便于擴增的s蛋白基因與表達(dá)載體連接，需在引物的端加上限制酶的酶切位點，且常在兩引物上設(shè)計加入不同的限制酶的酶切位點，主要目的是。在設(shè)計引物時應(yīng)滿足的要求有：引物只能與結(jié)合；引物自身不能存在，原因是避免引物自身通過折疊形成雙鏈區(qū)；兩種引物之間也不能堿基互補配對，原因

13、是防止引物之間結(jié)合形成雙鏈，避免降低了。PCR反應(yīng)一般分為94C變性、溫度降到55C復(fù)性(引物和模板配對)、溫度上升到72C三個步驟，經(jīng)過多次循環(huán)完成。第三階段選用72C是綜合考慮了兩個因素，這兩個因素是防止DNA變性和重組疫苗注入志愿者體內(nèi)后，S蛋白基因指導(dǎo)合成的S蛋白作為，刺激機體產(chǎn)生能與之相結(jié)合的抗體，抗體的分泌量可作為檢測疫苗對志愿者免疫效果的指標(biāo)。參加臨床試驗的志愿者需要滿足的條件之一是件之一是(填“有”或“無”)SARS-CoV-2感染史。參考答案1-5.CDBDC6-9.ADBCAC10.1)基因(序列)CaCl2(2)用膜蛋白作為抗原免疫兔子，取脾臟中的漿細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選得到單個分泌抗膜蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞，進(jìn)行克隆培養(yǎng)標(biāo)記逆轉(zhuǎn)錄PCR擴增后的DNA含量較低、試劑盒靈敏度不夠高11.(1)轉(zhuǎn)錄水平(2)DNA連接酶接頭片段尿嘧啶4接合子中待測蛋白與AD蛋白形成了融合蛋白，如果待測蛋白是PDC基因的調(diào)控蛋白，它就能與PDC基因啟動子